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紫外分光光度法测定水体中石油类污染物的方法
紫外分光光度法是一种测定水体中石油类污染物的重要方法。
它基于石油类污
染物在非溶剂的环境中，具有特定的紫外光谱。
此外，紫外分光光度法具有可以操作简单，检测成本低廉、精确度高等优越性质。
紫外分光光度法测定水体中石油类污染物，需要先对样品进行预处理。
一般先
将水样通过萃取，使得石油类污染物产生溶剂环境，同时也需要进行去除水的蒸发处理，实现对紫外光谱测定更具有分辨力的空间环境。
接着，经过采用紫外分光光度记录仪将样品信号输入，并将其与未被污染的参照物质比较，从而分析污染水体中所含的特定石油类污染物。
紫外分光光度法检测过程相对简单、便于实现，相当精确且效率高。
总而言之，它是测定水体中石油类污染物比较有效的分析手段。
WFHJ/ZY—B—077受控状态：石油类的测定作业指导书（海水）石油类的测定作业指导书(海水)1 适用范围本作业指导书适用于近海、河口水中油类的测定。
2方法依据GB/T17378.4-19983内容3.1 方法紫外分光光度法3.2 原理水体中油类的芳烃组分，在紫外光区有特征吸收，其吸收强度与芳烃含量成正比。
水样经正己烷萃取后，以油标准为参比，进行紫外分光光度测定。
3.3 试剂除非另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为自来水加高锰酸钾蒸馏或等效纯水。
3.3.1 正己烷[CH3(CH2)4CH3]适用前于波长225nm处，以水作参比，透光率大于90%方可使用，否则需脱芳处理。
脱芳处理：取约900ml正己烷于1000ml小口试剂瓶中，加10ml硫酸，在康氏振荡器上振荡1h,弃去硫酸相。
重复上述操作，直至硫酸相近无色，再用蒸馏法提纯或用活性炭层吸柱进行脱芳处理，纯化后的正己烷需再检查透光率，合格后方可使用。
3.3.2 层吸活性炭3.3.3 硫酸（H2SO4）:ρ=1.84g/ml3.3.4 硫酸溶液：1+33.3.5 油标准贮备溶液：5.00g/L称取 0.500g 指定油品于10ml烧杯中，加入少量正己烷,溶解，全量移入100ml量瓶中，加入正己烷至标线 ,混匀。
此溶液每毫升含油 5.00mg。
置于冰箱中可保存3个月。
3.3.6 油标准使用溶液：200mg/L移取2.00ml油标准贮备溶液于盛有少量正己烷的50ml量瓶中，用正己烷稀释至标线，混匀。
此液每毫升含油200ug。
置于冰箱中可保存一个月。
3.4 仪器和装置3.4.1 紫外分光光度计3.4.2 石英测定池:1cm3.4.3 康氏振荡器3.4.4 锥形分液漏斗：1000mL3.4.5 具塞比色管：25ml3.4.6 移液吸管：2ml、5ml。
3.4.7 刻度吸管：2ml、5ml。
3.4.8 量瓶：10 ml、50 ml、100 ml。
3.4.9 一般实验室常备仪器和设备3.5 分析步骤3.5.1绘制校准曲线分别移取0，0.25，.050，0.75，1.00，1.25ml油标准使用液于盛有少量正己烷的10ml量瓶中，加正己烷稀释至标线，混匀。
天然发布时间：2008-12-04生物网文章标签：生物论坛研究发现恐龙家族1850种有71%未被发现（蝎铁蛋白ferritin天然水中油类的紫外分光光度法测定一、实验目的加深对环境中油类污染的认识，掌握油类的分析方法和技术，学会使用紫外分光光度计。
二、实验原理水中的油类来自较高级生物或浮游生物的分解，也有来自工业废水和生活污水的污染。
漂浮于水体表面的油，影响空气－水体界面中氧的交换。
分散于水中的油，部分吸附于悬浮微粒上，或以乳化状态存在于水体中，部分溶于水中。
水中油可被微生物氧化分解，从而消耗水中溶解氧，使水质恶化。
重量法是常用的分析方法，它不受油的品种限制，所测定的油不能区分矿物油和动、植物油。
重量法方法准确，但操作繁杂，灵敏度差，只适于测定5mg/L以上的油品。
紫外分光光度法比重量法简单。
石油类含有的具有共轭体系的物质在紫外光区有特征吸收峰。
带有苯环的芳香族化合物主要吸收波长微250～260nm，带有共轭双键的化合物主要吸收波长为215～230nm。
一般原油的两个吸收峰波长为225及256nm，其他油品如燃料油、润滑油等的吸收峰也与原油相近。
本方法测定波长选为256nm，最低检出浓度为0.05mg/L，测定上限为10mg/L。
三、仪器和试剂1．紫外分光光度计（具有1cm石英比色皿）。
2．1L分液漏斗。
3．25mL容量瓶。
4．石油醚（60～90℃）或正己烷：纯化后使用，透光率大于80％。
如不纯，可用下法纯化。
纯化：将0.30～0.15mm（60～100目）粗孔微球硅胶和0.246～0.125mm（70～120目）中性层析氧化铝在150～160℃活化4h，趁温热装入直径2.5cm、长75cm的玻璃柱中，使硅胶柱高60cm，上面覆盖5cm厚的氧化铝层。
将石油醚通过此柱后收集于试剂瓶中。
以水为参比，在256nm处透光率应大于80％。
5．油标准贮备液：用20号重柴油、15号机油或其他认定的标准油品配制。
153ECOLOGY生 态区域治理分析水环境中石油类紫外分光光度法方法福建省厦门环境监测中心站 贺琦一、引言随着对石油资源使用需求的增加，水环境中的石油类含量对人类健康、渔业和生态系统构成了严重威胁。
而新制定的环境标准对于水环境中石油类含量提出了更高的要求。
在对地表水、地下水、黑臭水体和海水样品的常规监测过程中我国各个监测站都采用《水质石油类的测定紫外分光光度法》HJ970-2018（试行）[1]法测定。
由于水质石油类采样分析时必须全样分析且油在水体中分布不均匀的特殊性，平时采样过程通常没有留存备用水样。
因此一旦分析结果超标就要重新采样复测，相当浪费人力物力，对于海水监测几乎不能实现。
但是实际分析过程中由于水样成分复杂容易发生乳化现象，由于破乳不完全引入误差或者脱水不完全造成数据异常不可避免。
所以本实验想要通过硅酸镁吸附的时长不同，和吸附次数不同对待测样品的影响，证明利用硅酸镁小柱或者硅酸镁对石油类分析过程中乳化、脱水不完全的待测液进行二次吸附，能够使检测结果有效降低且不会低于真实数值，避免石油类分析一遇到数据超标就需要重新采样的现象发生。
二、材料和方法（一）仪器与药品盐酸（国药集团GR）；硫酸（国药集团GR）；正己烷（Merck）；无水乙醇（国药集团AR）；无水硫酸钠（国药集团AR）；硅酸镁（国药集团AR）；石油类标准物质（国家海洋环境监测中心）。
紫外可见分光光度计(美普达UV6100）；全自动紫外测油仪(上海昂林OL1040)。
（二）紫外可见光分光光度法1.工作曲线的测定按照《水质石油类的测定紫外分光光度法》HJ970-2018（试行）绘制标准工作曲线。
2.硅酸镁震荡吸附对石油类分析的影响实验取50ml 浓度为0.050mg/l 和0.500mg/l 的油标样各4份加入6g 无水硫酸钠和6g 硅摘要：目的：探索一种紫外分光光度法检测水中石油类含量异常的补充方法。
方法通过探究硅酸镁吸附的时长不同和吸附次数不同，对水样中石油类检测结果的影响。
1检验方法依据HJ 970—2018水质石油类的测定紫外分光光度法。
2主要仪器和设备UV1800 紫外可见分光光度计3分析步骤参考HJ 970—2018水质石油类的测定紫外分光光度法。
4试验结果报告4.1校准曲线及线性范围按HJ 970—2018方法操作，数据见表1表1校准曲线数据浓度(mg/L) 0.00 1.00 2.00 4.00 8.00 16.0吸光度As 0.003 0.051 0.098 0.198 0.382 0.766吸光度(As-Ao) 0.000 0.048 0.095 0.195 0.379 0.763回归方程：y=0.0476x+0.0006，r=0.9999。
4.2检出限向空白样品中加入100mg/L的石油类标准使用液0.25ml（即5倍检出限浓度），进行测定，按HJ 168-2010规定MDL =S n t ⨯-)99.0,1(进行计算，结果见表2：表221v v c oil ⨯=ρ c ：正己烷萃取液中油的浓度，（mg/L ）； v 1：正己烷萃取液体积，25ml ； v 2：水样体积，500ml 。
4.3精密度准备两份不同浓度的样品，按照步骤3，分别做6次平行实验，计算出石油类的浓度、平均值，标准偏差并求出相对标准偏差，结果见表3。
表3 精密度实验结果4.4 准确度取两个有证标准样品，按照步骤3，平行测定6次，计算平均值，结果如表4。
表4 准确度实验结果5.结论5.1 试验测得水中石油类检出限为0.01 mg/L，标准检出限为0.01 mg/L，验证结果符合要求；5.2测定两个浓度水平样品，分别做6次平行测定，相对标准偏差分别为6%、3%，精密度符合要求；5.3对两个有证标准样品进行测定，测得结果均在其不确定度范围内，准确度符合要求。
水质石油类的测定紫外分光光度法
一、原理：
在pH≤2的条件下，样品中的油类物质被正己烷萃取，萃取液经无水硫酸钠脱水，再经硅酸镁吸附除去动植物油类等极性物质后，于225nm波长处测定吸光度，石油类含量与吸光度值符合朗伯-比尔定律。
二、测试流程：
三、注意事项：
1.水样采集和保存：
采集约500mL水样于玻璃瓶，加入盐酸溶液酸化至pH≤2；样品不能在24h内测定，应在0°C～4°C冷藏保存，3d内测定。
2.试验条件：
①萃取和脱水：将上层萃取液转移到有3g无水硫酸钠的锥形瓶，振荡、静置。
（加无水硫酸钠直至不再结块时，完成脱水）。
②净化（吸附柱法）：取适量的脱水后萃取液过硅酸镁吸附柱，弃去前2-3mL滤液（前面几毫升馏出液高于萃取液浓度），剩余收集在25mL比色管中。
③空白水样测试：纯水代替水样进行萃取、净化和测试，计算得到空白值。
④水样体积测量：以萃取后水样体积为准。
⑤空白控制：试剂纯度（正己烷、无水硫酸钠）；实验器皿清洗。
3.方法对比：
参考标准：HJ 970-2018 水质石油类的测定紫外分光光度法。
JOURNAL OF INSPECTION AND QUARANTINE 检验检疫学刊Vol.30No.22020年第2期1前言环境中石油类主要成分为烃类物质的混合物,在水中一般呈现溶解态(分散态或乳浊态),我国生态环境部主要采用重量法、红外法和紫外法来测定不同浓度的石油类,并于2018年10月10日发布了HJ 637—2018《水质石油类和动植物油类的测定红外分光光度法》[1]和HJ 970—2018《水质石油类的测定紫外分光光度法》试行[2]2项标准方法。
红外法用四氯乙烯萃取液替换了四氯化碳萃取液,更换后测定下限较高,无法满足GB 3838—2002《地表水环境质量标准》[3]中Ⅰ~Ⅲ类水质限值的监测要求,因此,国家规定用红外法测定工业废水和生活污水中石油类和动植物油;用紫外分光光度法测定地表水、地下水和海水中浓度较低的石油类,正己烷做萃取剂。
2方法原理在酸性pH≤2的条件下,样品中的油类物质被正己烷萃取,萃取液经无水硫酸钠脱水,再经硅酸镁吸附后除去动植物油等极性物质后,于225nm 波长处测定吸光度,石油类含量与吸光度值符合朗伯比尔定律[4,5]。
3仪器设备和试剂3.1仪器设备500mL 棕色硬质玻璃采样瓶;波长200~400nm 紫外分光光度计,并配备2cm 石英比色皿(带盖);自动萃取器;50mL 具塞磨口锥形瓶;玻璃漏斗;转速300r/min 回旋式振荡器;实验室常用器皿。
3.2试剂分析时使用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂,所用水为蒸馏水或去离子水。
盐酸:密度(ρ)=1.19g/mL;正己烷(色谱纯,高效液相色谱淋洗液);无水硫酸钠(550℃下灼烧4h,冷却后装入磨口玻璃瓶中,置于干燥器内贮存);硅镁型吸附剂(60~100目,550℃下灼烧4h 冷却后根据硅酸镁的重量,按6%m /m 的比例加入蒸馏水或去离子水,密塞并充分振摇20min,放置12h 备用);石油类标准贮备液:ρ=1000mg/L(国家海洋环境监测中心);石油类标准使用液:ρ=100mg/L(以正己烷为溶剂,取5mL 稀释到50mL 配制成的石油类标准使用液);玻璃棉(用正己烷浸洗15min,晾干后置于干燥玻璃瓶中)。
水质中油的紫外测定操作规程
∙范围
1.本方法规定了水质中石油类油的紫外测定方法。
2.本方法适用于水质中石油类油的测定。
3.测定范围为0.2－10mg/L。
∙原理
石油类含有的具有共轭体系的物质在紫外光区有特征吸收峰。
带有苯环的芳香族化合物主要
吸收波长为250～260nm，带有共轭双键的化合物主要吸收波长为215～230nm。
一般原油的
两个吸收峰波长为225及256nm，其他油品如燃料油、润滑油等的吸收峰也与原油相近。
循
环冷却的设备所用的油主要为机油和润滑油等重油，其在256μm波长处有最大吸收波长，在
一定浓度范围内其吸收值与油含量成正比。
以石油醚萃取水样中油，然后用紫外光度法进行
定量测定。
∙流程图
无
∙仪器和设备
除非另有说明，分析中仅使用通常用实验室仪器和设备。
1.紫外分光光度计 0.001
∙试剂和材料
除非另有说明，分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或与其纯度相当的水。
1.标准油:用20号重柴油、15号机油或其他认定的标准油品（如冷却水所用于的设备
所用的油，最好是从同类含油水质中萃取制成的油）所配制。
2.标准油贮备液：准确称取标准油品0.20g溶于石油醚中，移至200ml容量瓶中，并
用石油醚稀释至标线，此溶液含油1mg/ml，贮于冰箱备用。
3.标准油标准液：使用时取标准油贮备液稀释至0.1mg/ml。
4.石油醚（60－90）:将石油醚混匀在一个大玻璃瓶内静置1天后使用，检查其透光率，
透光率大于80%可以使用，结果不影响。
如果透光率小于80%，应进行脱芳处理。
标准曲线和样品测定应使用同批石油醚混合液。
∙分析步骤
1.校准曲线的绘制
准确移取油标准液0ml，2ml，4ml，6 ml，10 ml，用石油醚稀释至50ml。
在波长256nm处，用1cm石英比色皿，以石油醚为参比液，测定吸光度。
绘制标准曲线。
1.测定
取待测水样100ml（根据油含量决定水样量，也可分多次提取）于250ml容量瓶中，加入
1ml（1+1）硫酸（若样取样时已酸化，可不加）及5g氯化钠（水样中油没有乳化可不加），加塞摇匀，加入20.0ml石油醚，以120r/min机械振荡2min或手动充分振荡5min（注意放气），静置15min，使之分层后缓慢加入一定量的蒸馏水，使整个石油醚层位于容量瓶的瓶
颈处，再静置5min。
吸取上层石油醚通过装有无水硫酸钠的滤纸过滤，滤液用石油醚定容至50ml，同法测定其吸光度。
∙结果计算
以样品吸光度从工作曲线查出油的质量或按线性回归方程计算出油的质量，按下式计算：
X（mg/L）＝（m×1000）/ V
式中： X--------样品中油的含量，mg/L；
m------从工作曲线中查出的油的质量或按线性回归方程计算出油的质量，mg；
V-------移取的试样体积，ml；
∙注意事项
1.使用的石油醚应在一个较大的容器中混匀，标准曲线及样品测定使用同一次
混合的透光率相同的石油醚，否则会由于空白值不同而产生误差。
2.混合的石油醚注意检查均匀性，特别是近底部的油层，吸光度差值不应大于
0.02，否则使用吸取时注意不要吸取差值大于0.02的油层使用。
3.混合醚吸取上层使用后，底部的石油醚吸光值不稳定（注意使用到近底部时
一定要检查透光率）这是由于石油醚中一些比重较大的芳烃或其它有机物杂
质沉留在底部所致。
如要使用可进行脱芳处理后使用。
4.石油醚脱芳处理：将60－100筛目的硅胶和70－120筛目的中性层析氧化铝在
150度活化4h，未冷前装入直径为2.5cm、长为75cm的层析管中，保持硅胶
60cm，上面加5cm三氧化铝，石油醚通过此柱收集于试剂瓶中以水作空白检
查透光率大于80%后方可使用。
5.实验证明，将加有石油醚的水样以110－120r/min的速度振摇2min萃取率即
达98%以上。
一般手摇振荡5min一次萃取率达95%以上，满足要求。
6.氯化钠用量对测定结果无明显影响。
可视水样的乳化程度加入适量氯化钠。
对于乳化情况不严重的含油污水可不加。
7.所用石油醚的沸程为60－90 但在室温下还是有较强挥发性在操作中动作应尽
量快捷萃取后的石油醚尽快测其吸光值。
8.如果测定的水样中的油如以轻油为主，则检测波长改为225μm。
9.采集的样品必须有代表性。
当只测定水中乳化状态的石油时，要避开漂浮在
水面的油。
一般在水表面以下20～50cm处取水样。
若要连同油膜一起采样，
要注意水的深度、油膜厚度及覆盖面积。
10.采样瓶应为清洁玻璃瓶，用溶剂清洗干净，勿用肥皂洗。
11.如不能及时测定，为了保存水样，采集样品之前，可向瓶里加入硫酸，每升
水样加5ml（1+1）硫酸，使水样pH＜2抑制微生物活动，于低温下（＜4℃）
保存。
在常温下可保存24h。
12.萃取分离也可以按下面方法进行：将水样100ml全部倾入250ml分液漏斗中，
加入1ml（1+1）硫酸（若取样时已酸化，可不加）及5g氯化钠，加塞摇匀，
准确加入15ml石油醚，充分振摇5min（注意放气），静置分层。
取上层石油
醚通过有无水硫酸钠层的砂芯漏斗（也可用滤纸代替）滤入50ml容量瓶中，
下层水样再加入10ml石油醚重复提取一次，提取液同样处理滤入容量瓶中。
加石油醚至标线，摇匀。
13.如果采用分液漏斗萃取分离，使用的分液漏斗，活塞处最好不涂凡士林，因
为凡士林本来含矿物油物质，对测定会产生干扰。
14.如果采用砂芯漏斗过滤，进行脱水处理的无水硫酸钠与水结合后成块状会堵
塞砂芯漏斗。
为了防止堵塞每次用完后将砂芯漏斗在酸溶液中浸泡4h－5h然后用蒸馏水冲洗放入烘箱中烘干，以备下次使用。
