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环化酶相关蛋白1在卵巢癌中的表达及其意义发表时间：2016-12-28T09:48:50.360Z 来源：《航空军医》2016年第24期作者：易宇凌[导读] 研究研究环化酶相关蛋白1（Cyclase-associated Protein 1，CAP1）在卵巢癌中的表达及其意义。
湖南省妇幼保健院湖南长沙 410008【摘要】目的：研究研究环化酶相关蛋白1（Cyclase-associated Protein 1，CAP1）在卵巢癌中的表达及其意义。
方法：收集卵巢癌的病理标本，对其进行CAP1免疫组化染色，在此基础上分析CAP1的表达变化及其与患者临床因素及预后的相关性。
结果：CAP1主要表达卵巢癌的细胞膜中，其平均表达比例为43.2%。
CAP1的表达与卵巢癌患者肿瘤FIGO 临床分期、组织分级、淋巴结转移及是否出现腹水间差异有统计学意义。
CAP1高表达患者的5年生存率低于CAP1低表达患者。
结论：CAP1在卵巢癌表达增加，其可与卵巢癌患者的不良预后相关。
【关键词】卵巢癌；环化酶相关蛋白1；预后；人[Abstract]Objective：To study the cyclase associated protein 1（Cyclase-associated Protein 1，CAP1）expression and its significance in ovarian cancer.Methods：the pathological specimen collection of ovarian cancer，staining for the CAP1 immune group，and its correlation with clinical factors and prognosis analysis of patients with the expression of CAP1 on the basis of.Results：CAP1 mainly expressed in the cell membrane of ovarian cancer，the mean expression ratio of 43.2%.The expression of CAP1 in patients with tumor and whether there is lymph node metastasis，and the patient's age，gender and case level，tumor size and the depth of tumor invasion related.High expression of CAP1 in patients with 5 year survival rate is lower than the patients with low CAP1 expression.Conclusion：The expression of CAP1 in ovarian cancer were increased，which may be associated with tumor metastasis and poor prognosis in patients.【Key word】Ovarian cancer；Cyclase-associated Protein 1；Prognosis；Human卵巢恶性肿瘤是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，对妇女生命造成严重威胁。
COX-2和CEA在大肠肿瘤中表达的研究的开题报告
一、研究背景
大肠癌是世界范围内主要的癌症之一，它常常以容易扩散和复发的特征而闻名。
因此，对大肠癌的早期发现和治疗至关重要。
COX-2和CEA是大肠癌的两个主要表达标记。
COX-2是一个修饰的环氧化酶，参与炎症反应和癌症的发生。
戊二酸（CEA）是一种肿瘤标记物，可在癌症患者的血液中检测到。
近年来，有关COX-2和CEA在大肠肿瘤中表达的研究越来越多，但目前对COX-2和CEA在大肠肿瘤中的相互关系还不是很清楚。
因此，本研究旨在探讨COX-2和CEA在大肠癌中的表达及其关系。
二、研究目的
本研究旨在探讨：
1、COX-2和CEA在大肠癌组织中的表达。
2、COX-2和CEA在大肠癌患者中的表达水平是否有相关性。
三、研究内容和方法
本研究拟选取50例大肠癌患者和50例非大肠癌患者的组织标本，在组织中检测COX-2和CEA的表达情况。
研究内容包括：
1、COX-2和CEA在大肠癌组织中的表达水平。
2、COX-2和CEA在非大肠癌组织中的表达水平。
3、COX-2和CEA在大肠癌患者中的表达水平是否有相关性。
实验方法：从选择的肠癌和对照标本中，提取RNA，并通过反转录PCR进行PCR扩增，然后分离，检测COX-2和CEA的表达水平。
将数据进行统计分析。
四、研究意义
通过本研究，可以深入了解COX-2和CEA在大肠癌中的表达情况，以及两者之间是否具有相关性。
这有助于提高对大肠癌早期发现和治疗的认识，为临床治疗提供更有效的依据。
大肠癌患者外周血癌细胞检测的临床意义孙建伟;华映坤;贾玲;林人龙;杨昆宪;陈居敏【期刊名称】《云南医药》【年(卷),期】2003(024)002【摘要】目的探讨大肠癌患者外周血癌细胞的检测及临床意义.方法以CK20mRNA为靶基因,运用逆转录一聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测20例正常人和42例大肠癌患者术前、术后外周血中CK20mRNA表达.结果20例正常人外周血中均无CK20mRNA表达.20例大肠癌组织标本中均有CK20mRNA表达.CK20mRNA阳性检出率与Dukes分期、淋巴结转移、肝转移存在差异有显著性.结论RT-PCR方法检测大肠癌外周血癌细胞具有高度特异性和敏感性.外周血中CK20mRNA检测可邦助综合判断疾病恶性程度和预后,以及术后早期化疗对控制大肠癌微转移具有一定作用.【总页数】4页(P84-87)【作者】孙建伟;华映坤;贾玲;林人龙;杨昆宪;陈居敏【作者单位】南省第一人民医院肿瘤科,云南,昆明,650032;南省第一人民医院基础研究室,云南,昆明,650032;南省第一人民医院肿瘤科,云南,昆明,650032;南省第一人民医院肿瘤科,云南,昆明,650032;南省第一人民医院肿瘤科,云南,昆明,650032;南省第一人民医院肿瘤科,云南,昆明,650032【正文语种】中文【中图分类】R735.3+4【相关文献】1.大肠癌患者外周血CEAmRNA、HNP1-3的检测及临床意义 [J], 王妍华;肖菊香;侯银银;王乐;魏晓晖;邢雯2.大肠癌患者外周血癌细胞CK20检测及其意义 [J], 袁正强;曹建林;陈微微;刘道生;张历;温建立;郑小华;李良庆;邓飞3.大肠癌患者外周血循环癌细胞端粒酶活性的表达及其临床意义 [J], 何晓松;周晓明;戴美红;俞军;周建农4.大肠癌患者外周血中癌细胞角蛋白20的检测 [J], 刘新郑;师玉海;李遂柱5.大肠癌患者外周血循环癌细胞检测的临床意义 [J], 杨家辉;饶本强;王瑶;涂小煌;张连阳;陈少华;欧阳学农;戴西湖因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
环二鸟苷酸 (c-di-GMP) 在微生物体内的作用及其类似物的研究那路新, 杨振军*(北京大学药学院, 天然药物及仿生药物国家重点实验室, 北京 100191)摘要: 环二鸟苷酸 (cyclic diguanylate, c-di-GMP) 是在细菌中普遍存在的第二信使分子, 参与调节多种生理功能, 包括细胞分化、生物被膜形成、致病因子产生等。
细菌细胞内c-di-GMP合成与降解代谢分别受二鸟苷酸环化酶(diguanylate cyclase, DGC) 和磷酸二酯酶 (phosphodiesterase, PDE) 调控, DGC和PDE共处于同一个蛋白中, 是一个双功能蛋白酶的两个区域, 分别负责菌体内c-di-GMP的合成和降解。
c-di-GMP作用菌体内下游靶点包括PilZ结构域和GEMM核开关两种类型。
目前发现c-di-GMP核开关是唯一不参与代谢活动而参与信号传导的一类核开关。
本文综述了c-di-GMP的代谢途径、调控机制、生物学功能, 以及c-di-GMP结构类似物合成及生物学评价等方面的最新研究进展。
关键词: 环二鸟苷酸; c-di-GMP; 细菌信号传导; 代谢酶; GEMM核开关中图分类号: R916 文献标识码:A 文章编号: 0513-4870 (2012) 03-0307-06Activity of cyclic diguanylate (c-di-GMP) in bacteria andthe study of its derivativesNA Lu-xin, YANG Zhen-jun*(State Key Laboratory of Natural and Biomimetic Drugs, School of Pharmaceutical Sciences,Peking University, Beijing 100191, China)Abstract: Cyclic diguanylate (c-di-GMP) is a ubiquitous second messenger present in a wide variety of bacteria, which is responsible for cell differentiation, biofilm formation, pathogenic factor generation, and so on. The level of c-di-GMP in bacteria is regulated by two opposing active domains, diguanylate cyclase (DGC) and phosphodiesterase (PDE), which are present in the same bifunctional protein, and in charge of the synthesis and the degradation of c-di-GMP, respectively. The target of c-di-GMP in the bacterial cell consists of PilZ domain and GEMM riboswitch, the only riboswitch that involved in signal transduction. This article gives an overview of c-di-GMP, focusing on its metabolic pathway, regulatory mechanism, biological function of c-di-GMP, and the synthesis of c-di-GMP analogues and their biological activity.Key words: cyclic diguanylate; c-di-GMP; bacteria signaling; metabolism enzyme; GEMM riboswitch环二鸟苷酸 [cyclic bis(3'−5') diguanylic acid, c-di-GMP]是细菌体内普遍存在的第二信使分子[1−5], 参与调节细菌的多种生理功能, 包括细菌通讯、细胞分化、生物被膜形成、细胞形态变化等。
外周血干细胞样记忆性T细胞和调节性T细胞在卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义袁帅;朱元媛;周雅娟;龚咪【期刊名称】《贵州医科大学学报》【年(卷),期】2022(47)12【摘要】目的探讨外周血干细胞样记忆性T细胞(Tscm)和调节性T细胞(Treg)在卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义。
方法选取行腹腔镜切除根治术治疗的卵巢癌患者83例作为研究组,以60例同期体检的健康志愿者作为对照组,采集研究组术后24 h内、对照组体检当日的外周血,检测Tscm及Treg比率,分析卵巢癌患者外周血Tscm、Treg比率与临床病理特征的关系;术后随访3年,统计卵巢癌患者生存情况,并比较死亡组和生存组患者的Tscm、Treg比率;采用Cox回归分析影响卵巢癌患者预后的因素,绘制受试者工作特征曲线(ROC),以曲线下面积(AUC)评价外周血Tscm、Treg对卵巢癌患者预后的预测效能。
结果研究组Tscm比率明显低于对照组、Treg比率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);不同肿瘤大小、临床分期、分化程度、有无淋巴结转移、有无腹水卵巢癌患者外周血Tscm、Treg 比率比较,差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者Tscm比率低于生存组、Treg比率高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05);Cox回归分析显示临床分期、分化程度、淋巴结转移、外周血Tscm、Treg比率均为影响卵巢癌患者预后的独立影响因素(P<0.05);ROC分析显示,外周血Tscm、Treg比率单独及两者联合预测卵巢癌患者预后的灵敏度分别为82.61%、69.57%、69.57%,特异度分别为70.69%、75.86%、92.28%,AUC分别为0.756、0.743、0.892,。
结论卵巢癌患者外周血Tscm比率偏低、Treg比率偏高,两者联合预测卵巢癌患者预后的效能较高。
【总页数】6页(P1434-1439)【作者】袁帅;朱元媛;周雅娟;龚咪【作者单位】南京医科大学附属淮安第一医院妇科【正文语种】中文【中图分类】R737.31【相关文献】1.系统性红斑狼疮患者自体外周血造血干细胞移植前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化2.慢性乙型肝炎患者外周血中调节性T淋巴细胞、Ⅰ型调节性T 淋巴细胞和辅助性T淋巴细胞17的表达特点及临床意义3.重症肌无力患者外周血中CD4~+记忆性干细胞样T细胞水平的表达及临床意义4.外周血干细胞样记忆性T细胞在肾癌患者中的表达水平及临床意义5.CD4^+ CD25^+调节性T细胞在上皮性卵巢癌患者外周血中的表达及临床意义因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
应用生物信息学筛选大肠癌转移相关小分子化合物齐鲁;丁彦青【摘要】目的筛选并分析与大肠癌转移相关的小分子化合物.方法首先通过大肠癌早期转移组织表达谱数据与正常大肠组织数据进行统计学比较,筛选出差异表达基因,再通过差异表达基因与小分子的对应模式筛选出与大肠癌早期转移相关的小分子化合物,最后通过分析小分子化合物的靶蛋白在大肠癌疾病类中的富集情况,筛选靶蛋白中与大肠癌相关的部分靶蛋白,结合大肠癌表达谱的表达情况以及小分子化合物与靶蛋白的结合情况筛选最相关的靶蛋白并进行网络调控情况分析.结果通过小分子化合物的富集分析,tanespimycin得分最高,并且其靶蛋白在大肠癌疾病类中富集程度最高,说明tanespimycin与大肠癌关系密切;综合表达情况以及分子结合强度,明确与大肠癌相关的靶蛋白CHEK1、AURKA、GSTP1、NQO1可能为tanespimycin对大肠癌转移治疗作用中的关键蛋白,并且这4个靶蛋白构成的网络参与了与药物代谢相关的生物进程,进一步说明其与tanespimycin的关系.结论tanespimycin可能是能够抑制大肠癌早期转移的小分子化合物,其主要通过与其相互作用的靶蛋白CHEK1、AURKA、GSTP1、NQO1调控大肠癌转移相关的信号网络.【期刊名称】《西安交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2013(034)006【总页数】6页(P797-802)【关键词】差异表达;大肠癌;转移;tanespimycin;生物信息学;基因;靶蛋白【作者】齐鲁;丁彦青【作者单位】南方医科大学,基础医学院病理学系,广东广州,510515;南方医科大学,基础医学院病理学系,广东广州,510515;南方医科大学,南方医院病理科,广东广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R735.3+5大肠癌是常见的恶性肿瘤之一，其发病率仅次于胃癌和食管癌。
大肠癌现阶段的主要治疗方法为手术治疗，因此早期诊断以及早期手术切除是大肠癌唯一根治的有效方法。
20233755结直肠癌(col or ect al cancer ,CR C )是目前全球发病率及死亡率较高的恶性肿瘤[1],国内发病率呈逐年升高趋势[2],约20%CR C 患者在发现时已有转移,预后较差[3],早发现、早诊断、早治疗可显著提高患者生存率。
已证实鸟氨酸脱羧酶抗酶(or ni t hi ne decar -boxyl as e ant i z ym e ,O A Z )作为肿瘤抑制因子抑制肿瘤的发生及发展进程[4-5],是肿瘤治疗的潜在靶点。
O A Z 通过多胺过度积累诱导的核糖体移码机制对多胺的生物合成起负调控作用,减缓肿瘤细胞的增殖和转化速度[6]。
已知的O A Z 基因家族主要包括O A Z1、O A Z2、O A Z3和机制不明的O A Z4。
O A Z1在体内外均可抑制鸟氨酸脱羧酶(or ni t hi ne decar boxyl as e ,O D C )活性[7],对许多肿瘤具有抑制作用。
O A Z2与O A Z1作用相似,但有研究表明其仅在体内抑制O D C 活性[8]。
O A Z2通过调节多胺代谢,在胃癌[9]、神经母细胞瘤[10]中起肿瘤抑制作用,在一定程度上可以增强甚至替[文章编号]1006-2440(2023)05-0445-03[引文格式]朱俊,曹维.鸟氨酸脱羧酶抗酶2在结直肠癌中的表达及临床意义[J ].交通医学,2023,37(5):445-447.*[作者简介]朱俊,男,汉族,江苏如皋人,生于1977年11月,本科,学士,副主任医师。
研究方向:消化系统疾病诊治。
通信作者:曹维,E-m ai l :110414992@鸟氨酸脱羧酶抗酶2在结直肠癌中的表达及临床意义朱俊1*,曹维2(1如皋博爱医院消化内科,江苏226500;2南通大学附属医院消化内科)[摘要]目的:研究鸟氨酸脱羧酶抗酶2(or ni t hi ne decar boxyl as e ant i z ym e 2,O A Z2)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。
实时荧光定量PCR检测大肠癌患者外周血鸟苷酰环化酶C基因及其临床意义毛振彪;王唯一;张冬雷;黄介飞;鞠少卿【期刊名称】《第二军医大学学报》【年(卷),期】2005(26)11【摘要】目的:建立人鸟苷酰环化酶C(GC-C)含量实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测的新方法,观察大肠癌患者外周血单个核细胞(PBMC)GC-C mRNA表达水平并探讨其临床意义.方法:在GC-C基因高保守区设计了特异性的引物和探针,RT-PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本(30例健康献血员、11例大肠良性病变和37 例大肠癌)中GC-C mRNA准确含量,并以GC-C mRNA和β2微球蛋白 mRNA含量的比值作为评价GC-C表达水平的指标.结果:本法检测GC-C mRNA含量的线性范围为101 ～109 pg/ml,样本批内和批间变异系数(CV)值分别为6.87%～11.12%和8.86%～15.19%.30例健康献血员和11例大肠良性病变样本的PBMC中均未检出GC-C mRNA表达,大肠癌患者外周血GC-C mRNA的检出率为83.8%(31/37).大肠癌患者外周血PBMC GC-C mRNA表达水平为0.88±0.06,与Duke分期、淋巴结转移和肝转移密切相关,与年龄、性别、肿瘤大小等无关.结论:GC-C mRNA RFQ-PCR 检测外周血大肠癌细胞具有较好的检测灵敏度、特异性和重复性,GC-C mRNA表达水平可能对指导大肠癌Duke分期、判断淋巴结转移和肝转移、指导术后综合治疗均有一定价值.【总页数】4页(P1252-1255)【关键词】鸟苷酰环化酶C;结直肠肿瘤;外周血单个核细胞;实时荧光定量;逆转录聚合酶链反应【作者】毛振彪;王唯一;张冬雷;黄介飞;鞠少卿【作者单位】南通大学附属医院消化内科;南通大学附属医院检验医学中心【正文语种】中文【中图分类】R735.34【相关文献】1.鸟苷酸环化酶C在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义 [J], 戴庆福;姜添荣;林玉梅;曹春芳2.实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌患者外周血中uPA基因表达水平及其临床意义 [J], 刘俊泽;张青云;王雅明;徐建军3.大肠癌患者外周血鸟苷酰环化酶C基因表达的检测及临床意义 [J], 邓燕;胡伟4.鸟苷酸环化酶C在大肠癌患者外周血中的表达和临床意义 [J], 刘勇;李德川;钱俊;冯海洋;冯建国;马志敏5.实时荧光定量PCR检测鸟苷酰环化酶C基因表达方法的建立 [J], 毛振彪;张冬雷;黄介飞;王唯一;鞠少卿因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
环氧化酶-2在大肠癌的表达及相关性研究高伟敏;檀艳丽;张颖;薛娟;刘书哲【期刊名称】《医学研究与教育》【年(卷),期】2009(26)4【摘要】环氧化酶（cyclooxygenase,COX）是催化花生四烯酸代谢产生前列腺素（Prostaglandins,PGs）的限速酶。
近年来大量研究表明诱导型COX-2的过度表达导致的PGs水平升高在人类多种类型肿瘤的发生过程中起重要作用。
COX-2其促进肿瘤发生的作用目前已得到公认。
近年国内外大量研究表明COX-2不仅通过促进细胞增殖、抑制凋亡参与多种肿瘤的发生过程,而且还可利用不同的途径来促进肿瘤的侵袭与转移。
【总页数】4页(P89-92)【作者】高伟敏;檀艳丽;张颖;薛娟;刘书哲【作者单位】河北大学基础医学院,病理教研室,河北,保定,071000;河北大学基础医学院,病理教研室,河北,保定,071000;河北大学基础医学院,病理教研室,河北,保定,071000;河北大学基础医学院,病理教研室,河北,保定,071000;河北大学基础医学院,病理教研室,河北,保定,071000【正文语种】中文【中图分类】R735.3+4【相关文献】1.Src同源2结构域转化蛋白和环氧化酶-2在大肠癌组织中的表达及意义 [J], 宫健;刘石;张博;李雪松;张慧宇;陈尔东;王明涛;李晓红;张晓明2.环氧化酶-2、血管内皮生长因子在大肠癌中的表达及意义 [J], 张明华;冯一中3.环氧化酶-2在大肠癌中的表达及其与Bcl-2的相关性研究 [J], 耿云瑶4.大肠癌组织中存活素、环氧化酶-2、T细胞因子4的表达及三者相关性 [J], 肖忠盛;龙泓;丁成明;肖友忠5.环氧化酶-2在大肠癌中的表达及其与Bcl-2的相关性研究 [J], 耿云瑶因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大肠癌组织中HGF、c-Met、MVD的表达变化及意义郭运生【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2010(50)34【摘要】目的观察大肠癌组织中肝细胞生长因子(HGF)及其受体c-Met和微血管密度(MVD)的表达变化,并探讨其意义.方法采用免疫组化法检测48例大肠癌和9例正常大肠组织中的HGF、c-Met蛋白,并应用CD34标记微血管计算MVD.结果大肠癌组织中HGF蛋白阳性35例,c-Met蛋白阳性30例,MVD为(28.63±7.98)条/HP;正常大肠组织中分别为2、1例及(5.37±0.85)条/HP,两组比较,P均<0.05.HGF、c-Met、MVD表达与大肠癌Dukes分期和淋巴结转移有关(P均<0.05).大肠癌组织中HGF、c-Met蛋白的表达呈正相关(r=0.303,P<0.05),HGF、c-Met蛋白阳性者MVD均显著高于HGF、c-Met蛋白阴性者(P均<0.01).结论大肠癌组织中HGF、c-Met、MVD表达增加,三者在大肠癌的浸润、转移中具有一定作用.【总页数】2页(P54-55)【作者】郭运生【作者单位】秦皇岛市第一医院,河北秦皇岛,066000【正文语种】中文【中图分类】R735.3【相关文献】1.HGF c-Met MVD在子宫腺肌病异位及在位内膜中的表达及意义 [J], 岳艳;孔丽娜;孙青2.食管鳞癌组织中HGF、c-met表达变化及意义 [J], 赵杨;李嘉;徐树雷;申兴斌3.大肠癌组织中VEGF-C、HGF、MVD的表达变化及意义 [J], 郭运生4.大肠癌组织中PI3K、Akt和HGF的表达变化及意义 [J], 郭运生5.HGF/c-Met及MVD在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义 [J], 范本祎;齐范;申鹏飞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大肠癌酶细胞化学及电镜观察陈柯;螘国铮;胡闻;涂景林【期刊名称】《肿瘤防治研究》【年(卷),期】1995(22)4【摘要】对７５例大肠癌组织中的碱性磷酸酶（ＡＫＰａｓｅ）、酸性磷酸酶（ＡＣＰａｓｅ）、琥珀酸脱氢酶（ＳＤＨａｓｅ）、葡萄糖－６－磷酸酶（Ｇ－６－Ｐａｓｅ）、焦磷酸硫胺素酶（ＴＰＰａｓｅ）活性进行了细胞化学检测及电镜观察，结果表明；ＡＫＰａｓｅ活性多呈阴性反应，ＡＣＰａｓｅ、ＳＤＨａｓｅ、Ｇ－６－Ｐａｓｅ、ＴＰＰａｓｅ四种酶活性在大肠癌明显低于大肠正常粘膜及腺瘤（Ｐ＜０．０１），在高分化癌组明显高于低分化癌组（Ｐ＜０．０５），在淋巴结无转移组明显高于有转移组（Ｐ＜０．０５），提示：对大肠癌组织同时测定ＡＣＰａｓｅ、ＳＤＨａｓｅ、Ｇ－６－Ｐａｓｅ、ＴＰＰａｓｅ活性，并在超微结构上对酶反应颗粒定位观察，能在一定程度上反映大肠癌细胞的功能状态，可以作为判断大肠癌生物学行为及预后的重要指标之一。
【总页数】4页(P218-221)【关键词】大肠肿瘤;酶细胞化学;电子显微镜【作者】陈柯;螘国铮;胡闻;涂景林【作者单位】安徽省立医院病理科,安徽省立医院电镜室【正文语种】中文【中图分类】R735.340.4【相关文献】1.胃癌超微结构酶细胞化学研究——五种细胞器标志酶的电镜观察 [J], 杜卫东2.胃癌印戒细胞超微结构酶细胞化学研究——五种细胞器标志酶的电镜观察 [J], 董聿明3.大鼠缺氧预处理心肌酶活性及其ATP酶的电镜细胞化学观察 [J], 董峰;马春艳;邱小杉;袁玉林;冯晓祥;雷岳山4.肝癌癌周淋巴结淋巴细胞酶活性研究电镜酶细胞化学观察 [J], 蔡玉文5.兔角膜内皮细胞Na^+-K^+-ATP酶的电镜酶细胞化学观察 [J], 祝素文;刘冬娟;刘宁宇;崔俊宏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
鸟苷酸环化酶C在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义摘要目的探讨鸟甘酸环化酶C（GCC）在大肠癌患者外周血中的表达及其临床意义。
方法采用RT-PCR法对32例大肠癌患者、25例大肠良性病变患者、30例健康体检者外周血中GCC表达情况进行检测，并对大肠癌病理指标与GCCmRNA表达阳性率之间关系进行研究。
结果32例大肠癌患者中，GCCmRNA的阳性检出率为65.63%(21/32)，良性组中GCCmRNA的阳性检出率为20.00%（5/25），而对照组中未见GCC mRNA表达；三组外周血中表达阳性率差异具有统计学意义(P＜0.05)。
大肠癌患者GCC mRNA表达水平与Duke分期、淋巴结转移和肝转移密切相关（P＜0.05），与年龄、性别、肿瘤大小等无关（P＞0.05）。
结论GCCmRNA在大肠癌患者外周血中阳性表达率较高，特别是复发或转移病例，可作为大肠癌术后复发、转移的早期检测指标之一。
关键词鸟甘酸环化酶C；大肠癌；临床意义Expression and significance of Guanylyl Cyclase C in colorectal carcinoma [Abstract] Objective Explore the expression and its clinical significance of GCC in colorectal carcinoma , and provide a theoretical reference for the clinical prevention and treatment. Methods In 32 cases of colorectal cancer, 25 patients with benign colorectal lesions, 30 cases of healthy donors were detected in GCC expression by RT-PCR method, and to study the relationship between pathological indexes and the positive expression rate of GCCmRNA in colorectal carcinoma. Results In 32 cases of colorectal cancer patients, the positive rate of GCCmRNA was 65.63%(21/32), GCCmRNA in benign group, the positive rate was 20% (5/25), while the control group did not find in the GCC mRNA expression, negative; three groups of the peripheral blood expression rate difference has statistics significance (P<0.05). Patients with colorectal cancer GCC expression and Duke stage, lymph node metastasis and liver metastasis is closely related to mRNA (P < 0.05), independent of age, gender, tumor size (P>0.05). Conclusion GCCmRNA in peripheral blood of patients with colorectal cancer the positive expression rate is higher, especially in recurrent or metastatic cases, which can be used as one of indexes of early detection of recurrence, metastasis after operation.[Key words] GCC; Colorectal carcinoma; The positive expression rate; Clinical significance大肠癌是临床上常见的恶性肿瘤，其发病率及死亡率逐渐上升。
根治手术被认为是治疗大肠癌最有效的手段之一，但是仍然有约35%的患者在5年内复发或远处转移[1]。
研究发现[2]，在分期较早的大肠癌患者中往往存在未被临床检查或常规病理所检查到的微量转移，特别是肿瘤病灶局部的淋巴结转移。
这种微转移存在发展成为显性转移灶的可能，因此早期发现微转移并及时采取预防治疗措施，对防止大肠癌转移、复发有重要临床意义。
鸟甘酸环化酶C（GCC）是存在于多种肿瘤中的一种糖蛋白受体，它通过调节第二信使促进癌细胞的增殖和分化。
本文采用RT-PCR法检测大肠癌患者外周血中GCCmRNA的表达水平，希望为临床早期检测大肠癌微转移提供理论依据，现报道如下。
1 对象与方法1.1 对象选择2011年3月至2012年3月在我院住院治疗的32例大肠癌患者作为癌变组，男18例，女14例，年龄18～85岁，平均年龄（54.3±13.2）岁；所有患者中，有28例（87.5%）为原发性大肠癌，且未检测到转移，2例（6.25%）为原发性大肠癌合并肺、肝转移，2例（6.25%）为术后复发病例。
选取同期住院治疗的25例大肠良性病变患者作为良性组，男16例，女9例，年龄21～78岁，平均年龄（55.2±11.7）岁。
另选取来我院健康体检者30例作为对照组，三组患者在年龄、性别等资料差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。
1.2 样本采集处理取三组人群外周血5ml，置于灭菌离心管中，并加入0.1mlEDTA抗凝，3000r/min 离心15min，弃去上清液，加入红细胞裂解液12ml，静置25min后3000r/min离心10min，再弃去上清液，保留底部沉淀。
1.3 实验试剂与仪器氯仿、异丙醇、变形液、MMLV逆转录酶、Taq 酶均购至上海生物工程有限公司；PCR扩增仪ABI 7500为美国ABI公司生产，电泳装置及凝胶分析系统购于北京六一仪器厂。
1.4实验方法[3-4]1.4.1 血清标本RNA的提取向上述样本采集处理管的沉淀物中加入1 ml Trizol ，混匀后，室温放置1～3小时；将混合液吸取转入2 ml Eppendorf管中，加入300μl氯仿充分混匀，4℃12000r/min离心10分钟，吸取上清液转入2 ml消毒Eppendorf管中；向Eppendorf管中加入等体积异丙醇，-15℃放置20 分钟后4℃12000 r /min离心15分钟，弃去上清液；在沉淀中加75 % 冻乙醇1 ml ，于5000 r /min清洗10分钟，重复两次，弃去上清液，室温下干燥约1小时；干燥后底部薄膜状沉淀即为总RNA，用100 μl DEPC水充分溶解，采用分光光度计测量浓度后于- 20℃保存。
1.4.2 逆转录采用MMLV 逆转录酶、随机引物购至Promega公司。
按照1μg RNA加入0.5μg随机引物，DEPC水至13μl混匀，75℃水浴10分钟后冰浴；加入200u逆转录酶、5 μl dNTP及25 u RNase 抑制剂，37℃水浴1.5小时后置90℃水浴10分钟，产物于-20℃下保存。
1.4.3 PCR引物GCC引物由中山大学达安基因股份有限公司合成，上游5ˊ-TGTCCTACGTCGTGTTGGAC-3ˊ,下游5ˊ-GTCTGAGA TTTACGGCACGA-3ˊ；内参照物为β2M，上游5ˊ-GCGGTCGATGACCATGA TACG-3ˊ;下游5ˊ-CAGACGATGCACCGCACGAAC-3ˊ；DNA 片段分别为245bp和540bp。
1.4.4聚合酶链反应PCR引物由中山大学达安基因股份有限公司合成。
2μl cDNA，1.5u Taq 酶，每种引物0.4 mmol/L，dNTP 200μmol/L,，MgCl22 mmol/L,反应总体积25μl 。
扩增条件为95℃预变性10分钟，94℃变性30秒，60℃退火30秒，70℃延伸30秒，共45个循环，最后72℃延伸10分钟。
采用2%琼脂糖凝胶对PCR产物电泳，溴乙锭染色。
1.5 统计学方法采用χ2检验及Fisher精确概率检验法，用SPSS16.0软件包处理全部数据。
2 结果2.1 对照结肠癌及微转移阳性在扩增条带上显示大小为245bp的表达，阴性对照在扩增条带上显示大小为545bp的表达，见图1。
图1 RT-PCR扩增产物凝胶电泳图谱M：marker；1：阳性对照；2～5：GCC阳性外周血，大小245bp；6：内参条带，大小545bp 2.2 检测结果32例大肠癌患者中，GCCmRNA的阳性检出率为65.63%(21/32)，良性组中GCCmRNA 的阳性检出率为20.00%（5/25），而对照组中未见GCC mRNA表达，均为阴性；三组外周血中表达率差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。
表1 三组外周血GCCmRNA检测结果组别例数/nGCC mRNA表达P 阳性例数（n）阳性率（%）癌变组32 21 65.63＜0.05 良性组25 5 20.00对照组30 0 02.2 大肠癌病理指标与GCCmRNA表达水平之间关系由表2可见，大肠癌患者GCC mRNA表达水平与Duke分期、淋巴结转移和肝转移密切相关（P＜0.05），与年龄、性别、肿瘤大小等无关（P＞0.05）。
表2 大肠癌病理指标与GCCmRNA表达水平之间关系项目GCCmRNA（+）GCCmRNA（-）χ2P性别男8 102.036 0.154女9 5年龄（岁）＞55 8 90.327 0.567≤558 7淋巴转移有 3 05.010 0.025无16 13肝转移有10 45.563 0.018无7 11肿瘤大小（cm）＞5 7 8 0.074 0.786≤59 8Duke分期 A 3 2B 8 55.367 0.021C 5 3D 4 23 讨论与结论大肠癌是临床上常见的恶性肿瘤，手术根治是最有效的方法，但是仍然有部分患者出现术后复发和转移。
大量研究证实[5-6]，大肠癌的转移和复发与微转移密切相关。
所谓微转移，是指肿瘤发展过程中，将癌细胞扩散于血液系统、淋巴系统以及各重要脏器中，一般无明显临床表现。
