骨髓间充质干细胞移植治疗老年性痴呆模型大鼠的行为学检测

格式：doc
大小：1018.00 KB
文档页数：7

下载文档原格式

/ 7

Wnt／β—Catenin在骨髓基质干细胞

Wnt／β—Catenin在骨髓基质干细胞目的探讨BMSCs移植对AD模型大鼠的治疗作用。

方法将大鼠随机分成5组，正常组、模型组、模型对照组、治疗组、治疗对照组，每组10只。

双侧海马区注射Aβ建立AD大鼠模型后，治疗组进行BMSCs的移植治疗。

治疗对照组用氢溴酸加兰他敏进行灌胃治疗。

结果行为学实验检测各组大鼠平均逃避潜伏期及首次跨越原平台时间，模型组与正常组比较（P＜0.01），治疗组与治疗对照组与模型组比较（P＜0.01），与正常组比较（P＜0.05），均有显著性差异；形态学实验HE染色显示模型组颗粒细胞及锥体细胞有破坏现象，治疗组和治疗对照组明显恢复。

免疫组化检测显示正常组和模型对照组可见海马区阳性蛋白表达较多而模型组阳性表达明显减少，治疗组和治疗对照组阳性表达较模型组明显增多。

结论BMSCs移植治疗AD的作用机制可能与通过调节Wnt信号转导通路，影响了学习记忆相关酶及蛋白在海马区的表达而发挥作用有关。

标签：Wnt/β-Catenin；骨髓基质干细胞；阿尔茨海默病阿尔茨海默病（alzheimer’s disease，AD）是一种中枢神经系统退行性疾病，其神经组织无法自然恢复。

因此，体外诱导多能干细胞分化进行细胞移植来修复受损的神经组织已经成为研究的热点之一。

近年来发现，Wnt信号通路控制着体内多种程序，例如细胞的增殖、自我更新、细胞分化、细胞极性、细胞死亡等过程。

Wnt信号通路与AD的病理过程存在着十分密切的关系，同时在神经干细胞的增殖、分化以及迁移等方面也起着重要的作用。

骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchvmalstem cells，BMSCs）在中枢神经组织移植中有明显优势，是一种良好的细胞替代治疗的靶细胞。

因此本研究希望通过观察Wnt通路相关蛋白β-Catenin的变化，探讨BMSCs移植对AD模型大鼠的治疗作用。

1材料与方法1.1材料清洁级健康Wistar雄性大鼠50只，体重180～220g，由吉林大学医学院提供；Moriss水迷宫；大鼠脑立体定位仪；Aβ美国Biosource公司；氢溴酸加兰他敏，陕西森弗生物技术有限公司；β-Catenin测试盒购自武汉众一生物试剂经营部。

人骨髓间充质干细胞移植促进脑梗死大鼠神经细胞再生和神经功能恢复

人骨髓间充质干细胞移植促进脑梗死大鼠神经细胞再生和神经功能恢复柳太云;熊符;林军;王传森;张成【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2012(016)001【摘要】背景:有研究表明,骨髓间充质干细胞或神经干细胞同种移植可改善脑梗死模型鼠神经功能.目的:观察人骨髓间充质干细胞在移植大鼠脑神经功能梗死局部的内存活、迁移情况及神经细胞再生.方法:将人骨髓间充质干细胞经静脉注入免疫抑制的大脑中动脉闭塞模型大鼠,每周观察、记录移植大鼠的行为和神经功能状况(NSS评分、转棒实验);于移植后1~8周处死大鼠,采用免疫组织化学染色,免疫荧光染色和RT-PCR检测检测移植大鼠大脑人细胞核抗原、神经干细胞标志物(巢蛋白)及神经细胞标志物(神经元核心抗原、脑型微管蛋白、胶质纤维酸性蛋白)的表达.结果与结论:骨髓间充质干细胞移植后2周,脑梗死模型鼠NSS评分明显降低(P< 0.05)、转棒实验停留时间明显延长(P < 0.01),神经功能得到改善(P < 0.05).人骨髓间充质干细胞移植后1~8周,在移植大鼠病变侧室管膜下区、海马齿状回、梗死灶周围均可检测到人细胞核抗原阳性细胞.移植后一二周,在移植大鼠病变侧室管膜下区、海马齿状回(CA1,CA3区)、梗死灶周围可见部分巢蛋白阳性细胞和mRNA表达,存续至8周.移植后2周,在移植大鼠病变侧室管膜下区、海马齿状回、梗死灶周围可见部分神经元核心抗原、脑型微管蛋白阳性细胞和mRNA的表达.移植后4~8周,在海马、梗死灶周围可见少量胶质纤维酸性蛋白阳性细胞和少量mRNA的表达.结果证实,静脉移植人骨髓间充质干细胞能在脑梗死模型大鼠脑内存活、并迁移至病变部位,继而分化为神经细胞,促进新生神经细胞的形成,改善移植大鼠的神经功能.%BACKGROUND: Studies have shown that allograft of bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) or neural stem cells (NSCs)can improve the nerve function of rat stroke model.OBJECTIVE: To investigate survival and migration of BMSCs in part of the infarction region of transplanted rat and the neuralregeneration.METHODS: Human BMSCs were transplanted into an immunosuppressed rat model of focal cerebral ischemia by vein. Behavioralrecovery (neurological severity scores, NSS; rotarod test) and nerve function were also observed once a week. The rat wereeuthanized at 1-8 weeks after transplantation, and the expression of human nuclear antigen (HNA), marker of neural stem cells(Nestin) and nerve cell markers (Neuronal nuclei, cerebral tubulin, glial fibrillary acidic protein) were analyzed byimmunohistochemistry staining, immunofluorescence staining and RT-PCR.RESULTS AND CONCLUSION: At 2 weeks after BMSCs transplantation, the NSS score of rat stroke model was decreasedsignificantly (P < 0.05), and the residence time of the rotarod test was significantly prolonged. At 1-8 weeks after BMSCstransplantation, HNA+ cells were identified in subependymal region, hippocampus dentate gyrus and the site around the infarction.At 1 and 2 weeks after BMSCs transplantation, Nestin positive cells and mRNA expression could be seen in subependymal region,hippocampus dentate gyrus (CA1, CA3) and the site around the infarction, and lasted for 8 weeks. Two weeks later, HNA, cerebraltubulin positive cells and mRNA expression could be seen in subependymal region, hippocampus dentate gyrus and the sitearound the infarction. At 4-8 weeks after BMSCs transplantation, asmall amount of glial fibrillary acidic protein positive cells andmRNA expression could be seen in subependymal region, hippocampus dentate gyrus and the site around the infarction. The dataindicate that human BMSCs can survive and migrate to focal cerebral ischemia of a rat stroke model by intravenous delivery, thendifferentiate into nerve cells, promote the formation of nerve cells and improve the recovery of neurological function.【总页数】6页(P70-75)【作者】柳太云;熊符;林军;王传森;张成【作者单位】贵州省人民医院神经内科,贵州省贵阳市550002;南方医科大学生理教研室,广东省广州市,510515;贵州省人民医院神经内科,贵州省贵阳市550002;贵州省人民医院神经内科,贵州省贵阳市550002;中山大学第一附属医院神经内科,广东省广州市,510080【正文语种】中文【中图分类】R394.2【相关文献】1.神经干细胞移植促进大鼠脊髓损伤后前角运动神经元存活及后肢运动功能恢复的实验研究 [J], 孔令胜;聂冬丽;张军臣;张浩;许华2.灯盏花素联合骨髓间充质干细胞移植促进脑梗死大鼠神经功能恢复 [J], 赵巍;刘学政;杨廷双3.灯盏花素联合骨髓间充质干细胞移植促进脑梗死大鼠神经功能恢复 [J], 赵巍;刘学政;杨廷双;4.CT灌注成像评价神经干细胞移植脑梗死模型大鼠的神经功能恢复 [J], 李映雪;高雪雷;5.CT灌注成像评价神经干细胞移植脑梗死模型大鼠的神经功能恢复 [J], 李映雪;高雪雷因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠学习和记忆能力的影响

ａｄｍｍｏｉＡｚｅｍｒＳｄｅｓＡ）ａｓ【ｔｏｓＴｅｎｔｒｌｅｉＤｒｔｄｌａｈｓｎｆｍｔｅｈａｈｌｓｒｎｅ￣ｎｌｉｅ’ ｉａｅ（ＤｒｔＭｅｈｄ】ｈａｕａｓｎｌＡｅｗｓｏｅｏｅｌｙｍａＷｉａｈｓ．ｅａｍｏｃｒｈｔｅｔ
ａｄｍｅｏｙｏａｄｌｆｚｅｍｅｒＳｄｓａｅｎｍｒｆｒｔａｍｏｅｈｉｏＡｌ ’ ｉｅｓ
ＭＵＸｎｈｎ，ＨＮＧＬｎ，ＨＮＹｕ，ＨＮｎｃｅｇＬａ－ｈｎＥｐｒｎｅｔｒｆｎｌｉ，ｏｉｉｉ－ｏｇＺＡｉＺＡＧｅＺＡＧＷｅ－ｈｎ，Ｉｉｓｅｇ（ｘｅｉｔｎｅａｙｓＬｇｔｓｇＨｍｅＣｏＡｓｓｃＵｉｒｉｆｉｅｅＰｏｌ’ ｒｄＰｌｅＦｒｅＴａｊ０１２ＣｉａｎｖｓｔｏｎｓｅｐｅＳＡｍｅｏｉｏｃ，ｉｎｉ３０，ｈｎ）ｅｙＣｈｃｎ６
Ａｓｒｔ【ｂｃｖ］ｏｖｌｔｔｅｔｆｏｅａｏｅｎｈｍｅｌ（ＭＣｔｎｐｎｔｎｎｈｉｙｆｅｒｎｂｔｃ：ＯｊｔｅＴａａｅｆｃｏｂｎｒｗｍｓｃｙａｓｍｃｌＢＳ）ｒｓｌｔｉｅｂｉａｉａｅｉｅｕｅｈｅｍｒｅｌｔｅａａａｏｏｔａｌｏｌｎｇｔ
能力；采用免疫荧光组织化学染色法观察大鼠海马区胆碱乙酰化酶性细胞。结果】ｉａｙｎｅｓ【对照组大
鼠学习和记忆成绩均下降，与术前相比，差异无显著性意义（Ｐ＞Ｏ０）干细胞组大鼠学习和记忆成绩均提高，．５；与移植前相比差

Brn-4基因修饰骨髓间质干细胞移植对老年痴呆鼠学习记忆的影响

Brn-4 基因修饰骨宣爱国1 方继荣（广州医学院荔湾医院，广东广州 510170）
〔摘要〕目的探讨 Brn-4 基因修饰大鼠骨髓间质干细胞（ MSC）移植后对老年痴呆鼠学习记忆的影响。方法实验分为 3 组：正常组、模型组和移植组。以单侧切断穹隆海马伞（ FF）建立老年性痴呆模型鼠；应用脂质体将表达载体转染到 MSC 中，荧光显微镜观察该 Brn-4 基因在 MSC 中的表达；将成功转染 Brn-4 基因修饰的 MSC 植入模型鼠尾静脉，4 w 后行 Y 迷宫测试，并行免疫组化结合图像分析技术观察各组大鼠基底前脑 p75 阳性神经元数，同时采用电生理技术检测离体海马 CA1 区长时程增长效应（ LTP）的诱导变化。结果 Brn-4 基因在 MSC 中获得成功表达；免疫组化表明模型组大鼠 p75 阳性神经元数在内侧隔阂和斜角带较正常组明显下降（ P ＜ 0. 01）；移植组 p75 阳性神经元数较模型组有改善（ P ＜ 0. 05）。离体海马 CA1 区移植组 LTP 在移植后 6 d，12 d，30 d 均较模型组有显著增强（ P ＜ 0. 05）。Y 迷宫测试结果显示，大鼠的学习记忆能力与基底前脑 p75 阳性神经元数呈正相关。结论 Brn-4 基因修饰 MSC 移植后提高了老年痴呆鼠学习记忆能力。
基金项目：广州市医药卫生科技项目（ No. 2009-YB-174） 1 广州医学院人体解剖学教研室第一作者：陈艳（ 1977-），女，主治医师，硕士，主要从事神经退行性疾
病的防治。
具有多向分化潜能，可分化成外胚层神经细胞，且可从自体获取，避免发生免疫排斥反应，可作为基因治疗神经退行性疾病的理想载体〔3〕。基于上述 AD 患者基底前脑神经元丢失和 Brn-4 基因能够促进 NPC 向神经元方向分化，本研究将 Brn-4 基因修饰的 MSC 移植入模型鼠体内，观察疗效，从而为转基因体内治疗 AD 模型鼠提供重要的理论基础。

骨髓间充质干细胞移植对血管性痴呆大鼠海马胆碱能系统的影响

组降低（＜００）且Ａ组较Ｂ组显著增强（＜Ｏ０）Ｐ．５，Ｐ．５。结论静脉移植ＢＣＭＳｓ可增强Ｖａ大鼠海马胆碱能Ｄ
系统活性。
关键词：充质干细胞；痴呆，血管性；乙酰胆碱酯酶；胆碱乙酰转移酶间
ＭｅｈｄｓＭＳｉｏｌｔｄｎｄｘｐｎｄｄｎｉｒｗｅｅａｅｌｅｔｏＣｓｓａｅａｅａｅｉｖｔｏｒｌｂｌｄｗｉｈｔＢｒｄＵ．ＲａｓｅｅｖｄｔｒｃｉｅｐｅｍａｅｂｉａｅａｒｍｎｔｌｔｒｌｃｒｉｒｅｉｓｌｇａｉｎｏｅｔｂｌｓａｍｏｄｅｓｎｒｎｄａｏｔｄａｔｒｅｉｔｏｔｓａｉｈＶＤｌａｄａｏｍｌｉｉｄｉｔｔｅｇｏｙｄｖｄｅｎｏｈｒｅｒｕｐｓＧｒ．ｏｕｐＡ：Ｒａｓｔｗｅｅｒ
随机分为３组：组（ＭＳｓ植组）于双侧颈总动脉结扎后４周经尾静脉注射ＢＣ；（照组）注射同ＡＢＣ移：ＭＳｓＢ组对：
等剂量ＰＳＣ组（手术组）暴露双侧颈总动脉但不结扎，进行尾静脉注射。ＢＣ注射后４周，用免疫Ｂ；假：不ＭＳｓ采荧光染色观察大鼠海马Ｂｄ标记细胞；定海马结构内乙酰胆碱酯酶（Ｈ）胆碱乙酰转移酶（ｈｒｕ测ＡＣＥ及ｃＡＴ）活的性。结果ＢＣ移植后４周Ａ组大鼠海马结构可见荧光标记的Ｂｃ；Ｂ组ＡＣＥ和ＣＡＴ活性均较ｃＭＳｓＭｓｓＡ、ｈｈ

大鼠骨髓间充质干细胞的培养与鉴定

大鼠骨髓间充质干细胞的培养与鉴定干细胞研究一直是生物医学领域的前沿热点，其中骨髓间充质干细胞（BMSCs）因其具有多向分化潜能和低免疫原性而备受。

在众多研究中，大鼠BMSCs的体外培养和鉴定方法为其在科研和临床领域的应用提供了基础。

本文将就大鼠BMSCs的培养、鉴定方法进行详细介绍，并结合实验数据进行阐述。

BMSCs是一种成体干细胞，具有自我更新和多向分化潜能，可以分化为多种细胞类型，如成骨细胞、脂肪细胞、肌肉细胞等。

因其来源广泛，免疫原性低，大鼠BMSCs已成为再生医学、免疫调节等领域的重要研究对象。

近年来，随着生物技术的不断发展，BMSCs的培养和鉴定方法也得到了不断优化和改进。

BMSCs的培养需要无菌环境，常用的培养基为DMEM、F12等，添加适量的生长因子和抗生素以维持细胞的生长和存活。

细胞的鉴定主要包括形态学观察、表面标志物检测和多向分化潜能的证实。

其中，表面标志物如CDCD90等可用来区分BMSCs和其他细胞，多向分化潜能的证实包括成骨、成脂和成肌等方向的诱导分化。

本实验采用大鼠BMSCs的常规体外培养方法。

具体步骤如下：采集大鼠骨髓：在无菌环境下，用注射器抽取大鼠股骨和胫骨骨髓，加入肝素抗凝。

细胞分离：将采集的骨髓用密度梯度离心法分离出单个核细胞。

细胞培养：将单个核细胞接种于培养瓶中，用含10%血清、1%抗生素和1%谷氨酰胺的培养基培养。

细胞鉴定：经过约7-10天的培养，细胞达到80%-90%融合时，进行细胞鉴定。

通过形态学观察、表面标志物检测和多向分化潜能的证实，对BMSCs进行鉴定。

通过观察细胞的形态和生长情况，发现培养的BMSCs呈典型的长梭形，且细胞间连接紧密（图1）。

经表面标志物检测，BMSCs表达CD29和CD90等间充质干细胞表面标志物（图2）。

在多向分化潜能的证实中，我们发现BMSCs经成骨、成脂和成肌诱导后，可分别形成矿化结节、脂肪滴和肌纤维（图3）。

这些结果说明所培养的细胞为BMSCs。

骨髓间充质干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响

ＩＣｔｅｍｅｔｇｏｐ．Ｔｅｉｓａｉｇａｅｃａｅａｕｔｄｂｏｒｉａｅａｅ．ＲｕｌｓｓｒａｔｎｒｕｈｒｅｃｐｎｌｔｎｙｗｓｖｌａｅｙＭｒｓｗｔｒｍｚｅｓｔｓ：Ｔｅｅｃｉｇｈｓａｐｎ
ｔｍｄｅｇｏｕｈｅｏｌｒｐ，ｔｅｈｅｓａｉｇａｅｃｙｆｈＳｔｅｍｅｔｒｕｓｈｏｔｎｗｔｓｇｆｉａｔｃｐｎｌｔｎｏｔｅＢＭＣｓｒａｔｎｇｏｐｗａｓｒｅｅｄｉｈｉｎｉｃｎ
ｄｖｄｄｉｔｈｈｍｏｅａｉｎｃｎｒｓｒｕｓ－ｇｏｐ．ｈＦｌｓｏｅｒｕｍｄｌｇｏｐｎｈｉｉｅｎｏｔｅｓａｐｒｔｏｏｔａｔｇｏｐ（ｃｒｕ）ｔｅＦｅｉｎｄｇｏｐ（ｏｅｒｕ）ａｄｔｅＣ
ｌａｒｉｇｍｍｒａｉｌｔｙｎｅｅｔｉｍｄｒｔｓ．Ｍｔｈｄｅｎｎ・ｅｏｙｂｉｉｄｍｎａｏｅｌａｅｏｓ：Ｆｏｔ — ｖｍｌｓａｒｔｒｒｎｏｌｒｙｆｉｅａｅＷｉｔｒａｓｗｅｅａｄｍｙ
ｏＮｅｒｌｇｆｕｏｏｙ．ｔｅＳｅｏｈｃｎｄｆｉｌａｔｄ／ｐａｌｆｆｎｈｏ № ｄｉａＣｌｅｅ．ＩｎｈＡｆｉｅ／￥ｔｏＩｚｕｏｓｅｃ１ｏｌｇｆｚｏｕ．３５０ｅ２２７

骨髓间充质干细胞移植对老年痴呆大鼠的防治作用

1 材料与方法 1. 1 试剂及动物 DMEM 培养基（ Gibco 公司），胰蛋白酶、β淀粉样蛋白多肽（ Sigma 公司），PCR 试剂盒、RNA 提取试剂盒
1 吉林大学药学院 2 吉林大学第二医院通讯作者：陈玉丙（ 1967-），男，副教授，主要从事肿瘤放射的研究及骨
髓间充质干细胞的研究。第一作者：王思淼（ 1989-），女，本科在读，主要从事公共卫生学研究。
〔关键词〕骨髓间充质干细胞；老年痴呆；预防〔中图分类号〕 R74 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202（ 2012） 13-2792-03； doi： 10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2012. 13. 056
老年性痴呆（ senile dementia）是广泛性大脑皮质萎缩引起的以功能减退和行为、性格障碍为主的老年期常见病，发病率随着年龄的增高而增加〔1〕。目前，我国老年痴呆患病人数在 600 万人左右，预计 2030 年将增至 1 200 万人〔2〕，已成为严重威胁老年人健康的四大疾病之一。提高老年人的生存质量，预防、治疗和减少老年痴呆的发生已成为当今世界研究的重点。
2结果 2. 1 BMSCs 的分离培养采用全骨髓贴壁法分离培养的 BMSCs，形态呈长梭形。显微镜下观察，接种后 3 d 可见少量细胞贴壁，轴突伸出； 5 d 呈多边形或梭状，7 d 可见集落形成。经 3 次传代后，细胞呈单一的长梭形生长，排列呈束状。见图 1。
图 1 显微镜下观察 BMSCs
（ Takara 公司），ELISA 试剂盒（上海西唐公司）。清洁级健康 Wistar 乳鼠，体重（ 12 ± 2 ） g。清洁级健康 Wistar 大鼠，体重（ 350 ± 20） g，由吉林大学实验动物中心提供。

甘露醇对骨髓间充质干细胞治疗血管性痴呆大鼠行为学及海马CA3区突触素表达水平的影响

０００２）。
１０），尾静脉注射２０％甘露醇，剂量为１．５ｇ／ｋｇ；（３）培养基组（珏＝１０），尾静脉注射１
ｍｌ
Ｌ．ＤＭＥＭ基础
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆｔｈｅ
（３９６２４±７７９８）ｗｈｅｎ
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ
ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌＣＡ３ｒｅｇｉｏｎｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｉｎｔｈｅｍａｎｎｉｔｏｌｗｉｔｈＢＭＳＣｓｇｒｏｕｐｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＢＭＳＣｓｇｒｏｕｐ，ＶＤｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉａｇｒｏｕｐ，ｍａｎｎｉｔｏｌａｆｔｅｌｍａｎｎｉｔｏｌｔｈｅｂｅｈａｖｉｏｒａｌ
可间接反映突触的数量和分布情况。海马ＣＡ，区被认为与空间记忆功能障碍密切相关’４Ｊ，特别是与年龄相关性认知功能损害有关一’。ＶＤ大鼠模型研究表明，ＶＤ大鼠海马ＣＡ，区至ＣＡ，区传导通路的
突触连接受损为其致病的关键机制，ＶＤ大鼠海马区突触素表达水平下降。“７｜。此外，形态学观察证实ＶＤ大鼠海马ＣＡ，区受损严重、神经元脱失较多¨ｏ。
ｒａｔｓ．
ａｍｐｌｉｆｙｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ
ｅｆｆｅｃｔｏｆｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ
【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｄｅｍｅｎｔｉａ，ｖａｓｃｕｌａｒ；
Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
ｓｔｅｍ
Ｍａｎｎｉｔｏｌ；
Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓ；
Ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｃｅｌｌｓ；
ｃｅｌｌｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ；Ｓｙｎａｐｔｏｐｈｙｓｉｎ；Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ
４０８・
生堡控经型苤圭垫！！生！月筮堑鲞箜！坦垦丛！』塑！！翌！，』！些！！！！：ｙ！！：堑：堕！：！

脐血间充质干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠行为学的影响

·4688·
中国老年学杂志 2012 年 11 月第 32 卷
氢溴酸东莨菪碱注射液购自上海禾丰制药有限公司，规格 1 ml∶ 0. 3 mg，D-半乳糖购自 Amresco 公司，用时 2. 5 g 溶于 250 ml 生理盐水中。氯化铝购自国药集团化学试剂有限公司。 1. 2 动物模型的制备选用 Wistar 大鼠依据文献〔2，3〕建立动物模型。方法如下：动物采用普通饲料适应性喂养 1 w 以后，大鼠每日 D-半乳糖腹腔注射 50mg / kg 及 20 mg / ml AlCl3 ，2 ml，每日 1 次，连续 6 w，同时在普通饲料的基础上，按体重 8% 的进食量添加 AlCl3 ·6H2 O，剂量 111. 9 mg / kg 体重，喂饲 90 d，采用 Y-电迷宫仪训练和测定大鼠学习记忆能力。在行为学实验前 10 min，一次性腹腔注射氢溴酸东莨菪碱 2 mg / kg，让大鼠在迷路箱内适应 3 min，顺时针给予灯光刺激（灯光区为安全区，其余为刺激区），待其逃避至安全区，灯光继续作用 15 s，然后停灯休息 1 min，再给予第 2 次刺激，依次重复 40 次，大鼠在 10 s内从刺激区一次性跑向安全区即被判为正确，否则均判为错误 . 记录正确与错误的次数。满分为 100 分，每出错 1 次 2. 5 分。学习 48 h 后进行记忆测试，方法同上。学习、记忆成绩均在 50 分以下者为成功模型大鼠。40 只大鼠采用随机数字表法分为对照组、hUCB-MSCs 移植组、常氧分化移植组和低氧分化移植组，每组 10 只。
〔关键词〕脐血间充质干细胞；移植；行为学；阿尔茨海默病〔中图分类号〕 R749 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 1005-9202（ 2012） 21-4687-03； doi： 10. 3969 / j. issn. 1005-9202. 2012. 21. 037

骨髓间充质干细胞移植改善慢性脑缺血大鼠空间学习记忆能力并影响BDNF及P75NTR表达

材料和方法２材料和方法２．１实验材料和仪器２．１．１实验动物提取ＢＭＳＣｓ用大鼠：采用ＳＰＦ级，８周龄ＳＤ大鼠，雄性１只；实验分组用大鼠：采用ＳＰＦ级雄性ＳＤ大鼠，体重２５０～３００ｇ，３６只；动物来源：河南省实验动物中心，许可证号：ＳＣＸＫ（豫）２０１０—０００２；动物饲养环境：温度（２０～２５）℃，湿度６０％～７０％的独立通风系统；饲料和垫料来自实验动物中心，饮用水为城市自来水。

动物房保持安静，夜晚熄灭光源。

２．１．２主要试剂ＤＭＥＭ／Ｆ１２培养液胎牛血清胰蛋白酶青链霉素ＣＤ４４ＦＩＴＣ流式抗体ＣＤ１０５ＰＥ流式抗体ＣＤ４５ＰＥ流式抗体ＣＤ３４ＦＩＴＣ流式抗体兔抗大鼠ＢＤＮＦ抗体兔抗大鼠Ｐ７５ＮＴＲ抗体ＳＰ９００１试剂盒ＤＡＢ显色试剂盒组织蛋白裂解液ＢＣＡ蛋白定量试剂盒上样缓冲液ＰＶＤＦ膜碱性磷酸酶标记标记的羊抗兔二抗３美国ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司美国Ｈｙｃｌｏｎｅ公司美国ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ公司美国Ｈｙｃｌｏｎｅ公司美国Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ公司美国Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ公司美国Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ公司美国Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ公司美国ＳＡＮＴＡＣＲＵＺ公司美国ＳＡＮＴＡＣＲＵＺ公司北京中杉金桥生物技术公司北京中杉金桥生物技术公司北京鼎国生物技术公司北京鼎国生物技术公司北京鼎国生物技术公司北京鼎国生物技术公司北京鼎国生物技术公司结果３．４大鼠Ｍｏｍｓ水迷宫检测行为学结果３．４．１定向航行试验定向航行实验中，模型组大鼠与其他两组大鼠相比，需要花费更多的时间去寻找隐匿平台，平均逃避潜伏期明显延长（Ｐ＜０．０５），说明模型组大鼠对空间的学习能力出现障碍；移植组大鼠寻找隐匿平台的时间介于另外两组之间，与假手术组相比，移植组大鼠平均逃避潜伏期延长（Ｐ＜０．０５），说明慢性脑缺血对大鼠的空间学习能力造成一定的损害，而与模型组相比，移植组大鼠平均逃避潜伏期缩短（Ｐ＜０．０５），说明其空间学习能力在移植ＢＭＳＣｓ后得到一定的改善。

骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆行为学的影响

骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆行为学的影响高明龙;孙丽;赵小川;余明;王金成【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2016(020)032【摘要】背景：临床上通过药物治疗老年性痴呆虽然在一定程度上可以缓解患者的症状，但效果甚微。

干细胞移植是对该疾病的一种新的尝试和探索。

目的：观察骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠行为学的影响。

方法：选取SD大鼠20只，给予连续灌胃及饮食三氯化铝60 d建立老年性痴呆大鼠模型，造模后随机分为模型组和实验组，实验组海马区注射骨髓间充质干细胞，模型组注射生理盐水，另取10只大鼠正常喂养作为对照组。

移植后4周，通过Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力，取大鼠脑组织检测超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平。

结果与结论：①与模型组比较，实验组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P <0.05)，跨越平台次数增加(P <0.05)；②与模型组比较，实验组大鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性升高(P <0.05)，丙二醛水平降低(P <0.05)；③结果表明，骨髓间充质干细胞移植后能够改善老年性痴呆大鼠的学习记忆能力，有助于大鼠行为学的恢复。

%BACKGROUND:Drug treatment for senile dementia has unsatisfactory outcomes although to a certain extent it can reduce and delay the progression of Alzheimer’s disease. Stem cel transplantation is a new attempt for the treatment of senile dementia. OBJECTIVE:To observe the effect of bone marrow mesenchymal stem cel transplantation on the behavior of senile dementia rats. METHODS: Rat models of senile dementia were made in 20 Sprague-Dawley rats that were givencontinuous 60-day gavage of aluminium chloride solution. Then, model rats were randomized into model group treated with normal saline injection and experimental group treated with hippocampal injection of bone marrow mesenchymal stem cels, respectively. Another 10 rats undergoing normal feeding served as control group. Learning and memory ability of rats were tested by Morris water maze, and superoxide dismutase activity and malondialdehyde content in brain tissues of rats were measured by colorimetric method at 4 weeks after cel transplantation. RESULTS AND CONCLUSION:Compared with the model group, the escape latency was shortened and the cross-platform frequency was increased in the experimental group (P < 0.05), and moreover, significantly elevated superoxide dismutase activity and reduced malondialdehyde content inthe brain tissues of rats were found in the experimental group (P < 0.05). These findings indicate that bone marrow mesenchymal stem cel transplantation contributes to behavior improvement in senile dementia rats by improving the learning and memory ability.【总页数】7页(P4798-4804)【作者】高明龙;孙丽;赵小川;余明;王金成【作者单位】河北医科大学第一医院精神科，河北省石家庄市 050031;解放军第260医院神经内科，河北省石家庄市 050031;河北医科大学第一医院精神科，河北省石家庄市 050031;河北医科大学第一医院精神科，河北省石家庄市 050031;河北医科大学第一医院精神科，河北省石家庄市 050031【正文语种】中文【中图分类】R394.2【相关文献】1.骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠空间学习记忆能力的影响 [J], 王金华;王世民;孔繁明;张文治;唐帆;张学斌;苏心;王新平2.骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆行为学的影响 [J], 高明龙;孙丽;赵小川;余明;王金成;3.骨髓间充质干细胞移植治疗老年性痴呆模型大鼠的行为学检测 [J], 张颖;郭建华;闫洪娟;罗秋华;李鑫萍;郭玮;王海霞4.骨髓间充质干细胞移植治疗老年性痴呆模型大鼠的行为学检测 [J], 张颖;郭建华;闫洪娟;罗秋华;李鑫萍;郭玮;王海霞;5.骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠学习和记忆能力的影响 [J], 牟心红;张岭;张玥;张文成;李海生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

骨髓间充质干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠行为学的影响

骨髓间充质干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠行为学的影响李海生;陈振锋;李海英【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2009(013)049【摘要】背景:目前研究表明,骨髓间充质干细胞作为包括阿尔茨海默病在内的神经退行性疾病的细胞替代治疗,可能是一种有应用前景的工程细胞,但其对阿尔茨海默病的治疗效果尚不明确.目的:观察定向诱导骨髓间充质干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠行为学的影响,试图发现有效治疗阿尔茨海默病的策略.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2009-03在武警医学院生理学与病理生理学教研室完成.材料:健康雄性Wistar大鼠40只,鼠龄24个月,体质量450 g左右.方法:自然衰老痴呆模型大鼠是通过迷宫试验筛选,将大鼠随机数字表法分为4组,每组10只.对照组大鼠双侧海马注射生理盐水;骨髓间充质干细胞移植组大鼠注射骨髓间充质干细胞:常氧分化移植组大鼠注射常氧环境下向神经元样细胞诱导的骨髓间充质干细胞;低氧分化移植组大鼠注射低氧环境下向神经元样细诱导的骨髓间充质干细胞.主要观察指标:阿尔茨海默病大鼠的学习和记忆能力在移植前及实验后8周通过Y迷宫试验测定,记忆能力测定在学习能力测定48 h后进行.结果:对照组阿尔茨海默病大鼠术后学习记忆成绩均下降,与术前相比,差异无显著性意义(P>0.05);骨髓间充质干细胞移植组大鼠学习记忆成绩提高,与移植前相比差异无显著性意义(P>0.05);常氧分化移植组和低氧分化移植组大鼠学习记忆成绩均较移植前提高:与对照组相比,其他3组大鼠学习记忆成绩均提高(P<0.01).结论:骨髓间充质干细胞移植可以改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力,提示骨髓间充质干细胞移植对痴呆大鼠的认知功能障碍有治疗作用,且定向诱导分化的骨髓间充质干细胞移植治疗优于未分化的骨髓间充质干细胞,低氧诱导分化的骨髓间充质干细胞移植治疗效果最佳.【总页数】4页(P9659-9662)【作者】李海生;陈振锋;李海英【作者单位】武警医学院,生理学与病理生理学教研室,天津市300162;武警医学院,教务处,天津市300162;武警医学院,生理学与病理生理学教研室,天津市300162【正文语种】中文【中图分类】R394.2【相关文献】1.骨髓间充质干细胞移植对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响 [J], 邬伟;杨景全;陈松芳;王小同;郑国庆;张昱2.血管生成素－1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植对脑梗死大鼠行为学的影响[J], 刘凯;姜云霞;邓文帅;侯长江;余程;孙鹏3.琐琐葡萄多糖对阿尔茨海默病模型大鼠行为学和形态学的影响 [J], 李悦;马丽娟;袁芳;肖辉4.人参皂苷联合骨髓间充质干细胞移植对大鼠阿尔茨海默病模型学习记忆能力及神经元再生的影响 [J], 张艳; 马莉; 杨爽; 潘广雯; 樊榕5.涤痰汤通过PKA/CREB通路对阿尔茨海默病模型大鼠脑内tau蛋白磷酸化及行为学的影响研究 [J], 王玥;杨畅;金春峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠中枢胆碱能系统的保护作用研究

骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠中枢胆碱能系统的保护作用研究邬伟;杨景全;张艳梅;王小同;王秀云;刘皖生【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2009(034)006【摘要】目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗对老年性痴呆(AD)大鼠中枢胆碱能系统的保护作用及机制.方法雄性Wistar大鼠45只,采用随机数字法分为)双侧穹隆海马伞(FF)切断模型组(模型组,复制AD模型),假手术对照组(SOC组,除不切断双侧FF以外,其他操作同模型组),骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗组(BMSCs组,在模型制作成功2周后,每只大鼠接受1×106个BMSCs治疗).采用免疫组化法检测海马胆碱能神经纤维胆碱乙酰转移酶(CHAT)的表达,RT-PCR检测基底前脑神经生长因子(NGF)mRNA表达.结果模型组在FF切断术后6周,其海马ChAT阳性神经纤维的积分光密度值(1 249.71±143.25)明显低于SOC组(2 059.58±166.69,P<0.05),BMSCs组(1 807.02±133.85)与模型组相比,ChAT阳性纤维数量增多(P<0.05).模型组基底前脑神经元NGF mRNA表达水平(0.45±0.08)与SOC组(1.14±0.12)比较明显降低(P<0.05),BMSCs组(0.78±0.09)较模型组有所升高(P<0.05).结论 BMSCs移植治疗对AD模型大鼠中枢胆碱能系统有保护作用,其机制可能与BMSCs移植上调基底前脑神经元NGF的表达有关.【总页数】3页(P752-754)【作者】邬伟;杨景全;张艳梅;王小同;王秀云;刘皖生【作者单位】325027,浙江温州,温州医学院附属第二医院脑科康复中心;325027,浙江温州,温州医学院附属第二医院手外科;内蒙古自治区医院;325027,浙江温州,温州医学院附属第二医院脑科康复中心;325027,浙江温州,温州医学院附属第二医院脑科康复中心;325027,浙江温州,温州医学院附属第二医院脑科康复中心【正文语种】中文【中图分类】R742【相关文献】1.清肝解郁法对老年性痴呆模型中枢胆碱能系统活性的影响 [J], 吴正治;田先翔;刘洋;胡利;李映红;李明;张永锋;杨敏2.地黄益知浸膏对老年性痴呆大鼠行为学及中枢胆碱能系统的影响 [J], 李强;胡长林;王景周3.补肝养髓方对自发老年性痴呆模型中枢胆碱能系统活性的影响 [J], 刘志承;吴正治;李明;贾秀琴;张永锋4.老年性痴呆的治疗和中枢胆碱能系统的关系 [J], 周瑾;夏春华5.天泰1号对自发老年性痴呆模型中枢胆碱能系统活性的影响 [J], 吴正治;李明;李耀芳;贾秀琴;张永锋因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

BMSCs移植改善老年性痴呆大鼠空间记忆能力的实验研究

BMSCs移植改善老年性痴呆大鼠空间记忆能力的实验研究谷玉静;刘敬禹【期刊名称】《临床医学工程》【年(卷),期】2013(020)003【摘要】目的探讨BMSCs移植对老年痴呆大鼠空间记忆能力的改善情况,为细胞移植治疗老年痴呆实验依据.方法海马注射Aβ1-40蛋白制备AD动物模型,模型成功后移植BMSCs.Morris水迷宫检测大鼠行为学变化,采用BrdU、NSE和GFAP 的免疫荧光双标技术观察移植的细胞生存及分化.结果 AD组大鼠逃避潜伏期较对照组明显延长(P＜0.05),移植BMSCs治疗后大鼠逃避潜伏期明显缩短(P＜0.01)；移植细胞后大鼠海马周围可见分化为NSE或GFAP阳性的细胞.结论 BMSCs移植AD大鼠后能在局部存活并分化,并且能够改善AD大鼠空间学习记忆能力.【总页数】3页(P285-287)【作者】谷玉静;刘敬禹【作者单位】辽宁医学院附属第三医院呼吸内科,辽宁锦州 121000【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠空间学习记忆能力的影响 [J], 王金华;王世民;孔繁明;张文治;唐帆;张学斌;苏心;王新平2.不同传代倍数BMSCs向神经元样细胞分化后移植对认知功能障碍大鼠学习记忆能力的影响 [J], 张轶;李光来;郭墚3.脑纹状体内植入CREB基因修饰的BMSCs对帕金森大鼠学习记忆能力影响的实验研究 [J], 余恒; 宋光捷4.骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠学习和记忆能力的影响 [J], 牟心红;张岭;张玥;张文成;李海生5.BMSCs移植后通过分泌神经营养因子对大鼠脑缺血神经功能改善的实验研究[J], 叶伟标;邓宇斌;王晔;蔡拓;周艳芳;叶美红;李燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

骨髓间质干细胞对血管性痴呆大鼠长时程增强的影响

骨髓间质干细胞对血管性痴呆大鼠长时程增强的影响高唱;王景周;陈曼娥【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2003(007)016【摘要】目的采用神经电生理方法观察静脉注射骨髓间质干细胞 (marrow stromal cell,MSC)对血管性痴呆 (vascular dementia,VD)大鼠脑长时程增强(long- term potentiation,LTP)的影响.方法体外分离培养、扩增成年大鼠 MSC.利用结扎双侧颈总动脉方法制备慢性前脑缺血动物模型,检测注射 MSC后 30, 60 d海马齿状回 LTP变化.结果造模 30和 60 d后, VD大鼠 LTP诱导率 (25%, 38% )、群体电位 (PS)平均振幅[(0.91± 0.13),(1.02± 0.11) mV]与正常对照组[88% ,(1.31± 0.12),(1.36± 0.14) mV]相比差异有显著性意义(χ 2=4.2～16.25,P< 0.01).静脉注射 MSC后 30和 60 d, VD大鼠 LTP诱导率 (50%, 63% )、LTP振幅[(1.21± 0.11),(1.32± 0.18) mV]较模型组有显著改善 (P< 0.01).高频刺激后 60 min时各组间产生 LTP的 PS潜伏期分别为:正常组(4.8± 1.0) ms,模型组(5.2± 1.3) ms, MSC组(4.9± 1.8) ms.模型组的潜伏期较正常组显著延长 (P<0.05), MSC组潜伏期较模型组缩短 (P< 0.05). 结论静脉注射 MSC可显著易化 VD 大鼠海马齿状回 LTP.【总页数】2页(P2268-2269)【作者】高唱;王景周;陈曼娥【作者单位】解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科,重庆市,400042;解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科,重庆市,400042;解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所神经内科,重庆市,400042【正文语种】中文【中图分类】R74【相关文献】1.葛根素对血管性痴呆大鼠海马突触传递长时程增强的影响 [J], 张冰清;王玉良2.丹银提取物对血管性痴呆模型大鼠海马长时程增强的影响 [J], 张敏;李永江;潘娅;陈粲3.耳针对血管性痴呆大鼠海马长时程增强的影响 [J], 潘娅;戴桃李;杨琼;陈粲;张敏4.丁苯酞对血管性痴呆大鼠海马CA1区长时程增强的影响 [J], 李健5.骨髓间质干细胞对血管性痴呆大鼠BDNF和NGF的影响 [J], 高唱;王景周;陈曼娥因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

骨髓间充质干细胞移植治疗血管性痴呆模型鼠的实验研究的开题报告

骨髓间充质干细胞移植治疗血管性痴呆模型鼠的实验研究的开题报告一、研究背景随着人口老龄化的加剧，血管性痴呆已成为影响老年人身体健康的重要因素之一。

目前，临床上常用的治疗手段主要是针对症状缓解药物治疗，如脑血管扩张剂、抗凝药物等，但这些药物只能缓解血管性痴呆的症状，不能改善或逆转疾病的进程。

因此，探寻一种创新的治疗策略，能够切实改善甚至治愈血管性痴呆，是当今医学和生命科学领域迫切需要解决的问题。

骨髓间充质干细胞（MSCs）是一种具有自我复制能力和多向分化潜能的细胞，可广泛存在于骨髓、脂肪、肌肉等多种组织中。

通过移植等技术，MSCs已被应用于心血管疾病、神经系统疾病、骨损伤等疾病的治疗，并取得了一定的疗效。

研究表明，MSCs具有调节免疫系统、促进组织再生、修复损伤纤维组织、抗氧化等多种生物学功能，且移植后能够在体内长期存活，具有较大的临床应用前景。

二、研究目的本研究旨在探究MSCs移植治疗血管性痴呆的临床价值和其治疗机制，为血管性痴呆的治疗提供新的理论和实践依据。

三、研究内容和方法1.建立实验动物模型选用SD大鼠作为实验动物，采用尼古丁诱导血管性痴呆的方法建立动物模型，对模型动物进行行为学、神经病理学等多个方面进行评估。

2.MSCs的分离和培养采用骨髓抽取法分离并培养大鼠MSCs，采用免疫细胞化学和流式细胞术鉴定MSCs的表面标记和分化潜能。

3.移植MSCs将培养好的MSCs通过尾静脉注射的方式移植到模型大鼠体内，每只动物移植5×106个MSCs。

4.行为学评估采用Morris水迷宫和旋转杆等行为学试验对治疗前后的动物进行评估，分析MSCs对认知和运动功能的影响。

5.神经病理学检测采用光镜和电镜等方法对动物脑组织进行病理学检测，分析MSCs对炎症、神经元损伤和血管结构的影响。

四、预期结果本研究预期通过实验动物模型和MSCs移植等多个方面对血管性痴呆的治疗和机制进行研究，探讨MSCs在治疗血管性痴呆方面的机制和优势，为未来探索血管性痴呆治疗新途径提供实验基础和理论依据。

骨髓基质细胞移植治疗大鼠血管性痴呆的实验研究的开题报告

骨髓基质细胞移植治疗大鼠血管性痴呆的实验研究的开题报告一、研究背景血管性痴呆是一种因脑血管病变导致的神经功能不全的疾病，其特征为认知和情感功能受损。

目前，针对血管性痴呆的治疗方法主要包括药物治疗和康复训练。

然而，这些方法的疗效并不理想，且存在一定的副作用。

因此，开发新型的治疗方法对于提高血管性痴呆的治疗效果具有重要的学术和临床意义。

骨髓基质细胞移植是近年来发展起来的一种有前途的治疗方法，通过将骨髓基质细胞移植到患者体内进行再生和修复，达到治疗疾病的效果。

目前，针对血管性痴呆的研究表明，骨髓基质细胞移植对于血管再生和神经再生具有潜在的治疗作用，但具体机制尚未明确。

因此，本研究旨在探究骨髓基质细胞移植治疗大鼠血管性痴呆的疗效及其作用机制。

二、研究目的本研究旨在评估骨髓基质细胞移植治疗大鼠血管性痴呆的疗效，并探究其可能的作用机制。

具体目的包括：1. 评估骨髓基质细胞移植对于大鼠认知和情感功能的影响；2. 探究骨髓基质细胞移植对于大鼠血管再生和神经再生的影响；3. 推测骨髓基质细胞移植的可能作用机制。

三、研究方法1. 动物模型制备采用大鼠血管性痴呆模型进行研究，具体方法为将大鼠从颈动脉注射高脂饮食和碳酸钙片等，连续6周后，通过行为学和病理学方法确认建立了血管性痴呆模型。

2. 实验组设计将建立好的血管性痴呆模型大鼠随机分为两组：对照组和实验组，每组15只。

对照组只接受正常饮食和水，而实验组则在对照组的基础上进行骨髓基质细胞移植治疗。

3. 骨髓基质细胞移植在大鼠颅骨下窝植入骨髓基质细胞，具体移植方案根据先前研究的经验进行优化确定。

4. 方法评估通过行为学实验、病理学检测和分子生物学实验等方法评估治疗效果，包括血管和神经再生情况以及认知和情感功能的变化。

同时，通过体外细胞培养和分子生物学实验探究移植细胞的可能作用机制。

四、研究意义本研究将为探索针对血管性痴呆治疗的新型手段提供一定的理论基础，同时为临床治疗提供新的思路。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

中国组织工程研究第20卷第36期 2016–09–02出版Chinese Journal of Tissue Engineering Research September 2, 2016 Vol.20, No.36·研究原著·www.CRTER .org张颖，女，1973年生，河北省涉县人，汉族，2003年河北医科大学毕业，副主任医师，主要从事老年痴呆相关疾病的研究。

中图分类号:R394.2 文献标识码:B 文章编号:2095-4344 (2016)36-05371-07 稿件接受：2016-06-23骨髓间充质干细胞移植治疗老年性痴呆模型大鼠的行为学检测张颖，郭建华，闫洪娟，罗秋华，李鑫萍，郭玮，王海霞(邯郸市第一医院老年病二科，河北省邯郸市 056000)引用本文：张颖，郭建华，闫洪娟，罗秋华，李鑫萍，郭玮，王海霞. 骨髓间充质干细胞移植治疗老年性痴呆模型大鼠的行为学检测[J].中国组织工程研究，2016，20(36):5371-5377.DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.36.008 ORCID: 0000-0002-2858-3952(张颖)文章快速阅读：文题释义：Morris 水迷宫：是英国心理学家Morris 于20世纪80年(1981)代初设计并应用于脑学习记忆机制研究的一种实验手段，其在阿尔茨海默病研究中的应用非常普遍。

较为经典的Morris 水迷宫，测试程序主要包括定位航行试验和空间探索试验两个部分。

定位航行试验：历时数天，每天将大鼠面向池壁分别从4个入水点放入水中若干次，记录其寻找到隐藏在水面下平台的时间(逃避潜伏期)。

空间探索试验：是在定位航行试验后去除平台，然后任选一个入水点将大鼠放入水池中，记录其在一定时间内的游泳轨迹，考察大鼠对原平台的记忆。

摘要背景：最近研究证实，骨髓间充质干细胞在体外可诱导分化成为神经元样细胞，体内移植后可修复神经损伤。

目的：观察骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠学习及记忆能力的影响。

方法：将30只成年SD 雄性大鼠分为3组：假手术对照组、干细胞治疗组及模型对照组，后2组脑内注射β-淀粉样蛋白1-40制作老年性痴呆模型，造模后3周，干细胞治疗组大鼠双侧海马区注射诱导分化后的骨髓间充质干细胞悬液，模型对照组和假手术组不做任何处理。

采用Morris 水迷宫检测各组实验大鼠学习记忆能力，苏木精-伊红染色观察脑组织病理形态变化。

结果与结论：①造模成功后，模型对照组大鼠的逃避潜伏期高于假手术对照组，跨越平台次数低于假手术对照组；②细胞移植后第1，2，4，8，10周，随着治疗时间的延长，干细胞治疗组大鼠的逃避潜伏期明显缩短，跨越平台次数明显增加。

与模型对照组相比，干细胞治疗组大鼠的学习、记忆能力有所改善；③干细胞治疗组脑组织细胞形态比较完整，细胞变性、坏死数量与模型对照组相比明显减少；④结果表明，骨髓间充质干细胞移植能有效改善老年性痴呆大鼠的学习和记忆能力，对老年性痴呆有一定的治疗作用。

关键词：干细胞；移植；骨髓间充质干细胞；老年性痴呆；学习记忆；大鼠主题词：骨髓；间质干细胞移植；阿尔茨海默病；组织工程基金资助：河北省医学科学研究重点课题(20130921)Zhang Ying, Associate chief physician, Second Department of Geriatrics, First Hospital of Handan, Handan 056000, Hebei Province, ChinaBone marrow mesenchymal stem cell transplantation improves behavior performance of senile dementia ratsZhang Ying, Guo Jian-hua, Yan Hong-juan, Luo Qiu-hua, Li Xin-ping, Guo Wei, Wang Hai-xia (Second Department of Geriatrics, First Hospital of Handan, Handan 056000, Hebei Province, China)AbstractBACKGROUND: More recently, studies have demonstrated that bone marrow mesenchymal stem cells can be induced in vitro to differentiate into neuron-like cells that are used for in vivo transplantation to repair nerve damage.OBJECTIVE: To study the effect of bone marrow mesenchymal stem cell transplantation on learning and memory ability of senile dementia rats.METHODS: Thirty male Sprague-Dawley rats were randomly divided into three groups: normal control group, stem cell therapy group and model control group. Rats in the latter two groups were used toestablish animal models of senile dementia by intracranial injection of β-amyloid 1-40. Three weeks after modeling, rats were given bilateral hippocampal injection of induced bone marrow mesenchymal stem cell suspension in the stem cell therapy group, whereas no treatment was given in the normal control and model control groups. Morris water maze test was used to detect learning and memory ability of rats, and rat’s brain tissues were detected pathologically using hematoxylin -eosin staining.RESULTS AND CONCLUSION: After modeling, the escape latency was higher and the cross-platform frequency was lower in the model control group compared with the normal control group. After celltransplantation, the escape latency and cross-platform frequency were gradually shortened and increased with time, respectively. Compared with the model control group, the learning and memory abilities of rats were improved in the stem cell therapy group. The brain tissues were relatively intact in structure and exhibited less cell degeneration and necrosis in the stem cell therapy group compared with the model control group. To conclude, bone marrow mesenchymal stem cell transplantation exerts certain therapeutic effects on senile dementia by effectively improving the learning and memory ability.Subject headings: Bone Marrow; Mesenchymal Stem Cell Transplantation; Alzheimer Disease; Tissue EngineeringFunding: the Medical Research Project of Hebei Province, No. 20130921Cite this article: Zhang Y, Guo JH, Yan HJ, Luo QH, Li XP, Guo W, Wang HX. Bone marrowmesenchymal stem cell transplantation improves behavior performance of senile dementia rats. Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu. 2016;20(36):5371-5377.0 引言 Introduction老年性痴呆又称阿尔茨海默病，是大脑的老化、萎缩，大脑功能受到严重损坏而引起的认知功能、记忆功能、人际交往能力、人格等智能障碍的一种综合征。

老年性痴呆与患者的年龄呈现出一定的相关性，是一种不可逆的神经系统退行性疾病[1]。

人类的神经元缺乏再生能力，中枢神经系统损伤后的修复相当困难，近年来对其研究主要集中在干细胞移植治疗脑和脊髓病变上[2-7]。

老年性痴呆发病机制尚不十分明确，目前暂时没有有效的治疗方法[8]。

目前，针对老年性痴呆的临床治疗药物主要有胆碱酯酶抑制剂、分泌酶抑制剂、过渡金属元素螯合剂、HMG-CoA 还原酶抑制剂和β淀粉样蛋白疫苗[9]。

上述方法只能暂时缓解病症，并不能从根本上修复变性、坏死的脑神经细胞，有效阻止病情的发展，而且具有较强的不良反应，疗效不能持久，因此急需找出一种新的治疗方法。