(完整版)技能操作考试细菌平板划线分离技术技能操作评分标准
- 格式:doc
- 大小:15.46 KB
- 文档页数:1
CSSD技能考核操作标准目录1.全自动喷淋清洗机操作技术---------------------------------22.环氧乙烷灭菌器操作技术-----------------------------------43.压力蒸汽灭菌器使用技术-----------------------------------64.3M Steri-Sealing II封口机使用技术-----------------------85.快速生物监测阅读器使用技术------------------------------106.六步洗手法----------------------------------------------127.器械物品包装操作法--------------------------------------148.手工清洗器械操作法--------------------------------------169.管腔类器械清洗操作法------------------------------------1810.防护服穿脱法--------------------------------------------201.全自动喷淋清洗机操作技术科室姓名考试日期监考人得分一、技术操作方法及评分标准 100%P3程序上清洗剂不上润滑油适用于轻微污染且需预洗的碗和弯盘P4程序上清洗剂不上润滑油适用于麻醉管道P5程序上清洗剂不上润滑油适用于重度污染的碗和弯盘P6程序上清洗剂上润滑油适用于重度污染的的器械9、按“”开始键(2%),黄灯将闪烁10秒,如果此时须停止程序,再按一下“”,屏幕将显示初始状态(1%),否则10秒钟后机器将自动运行所选程序步骤(6%)(预冲洗主洗漂洗(中和冲洗)终末漂洗(冲洗)消毒(最后冲洗)干燥)。
在程序循环过程中观察有无泄漏(1%)。
做好清洗机日常维护及清洗消毒运行情况记录,便于追溯(3%)10、程序完成后,绿灯亮,此时可从清洁侧打开门(绿灯灭)(1%),用洁净的手取出消毒物品(2%),然后关上舱门并锁好(1%),清洁侧门关闭后将无法再打开(1%)。
食品微生物检验技能操作考核方案与评分标准一、食品微生物检验技能操作试题本次考试有五组技能测试题供学生随机抽取,每一组题满分均为100分,占该门课程总成绩的70,。
第一组:使用高压灭菌锅进行培养基的灭菌,并回答相关问题。
第二组:微生物划线分离技术操作,并回答相关问题。
第三组:食品中细菌总数的测定操作,并回答相关问题。
第四组:食品中大肠菌群测定,并回答相关问题。
第五组:常用仪器的使用二、考试程序1、组织学生抽取考试序号,按照此序号依次进行技能考试。
2、按照考试序号组织学生在考前5分钟抽取试题,拿到试题后可以准备5分钟,然后开始操作和回答。
其他学生集中在另一教室等待。
3、考试完的学生不允许与等待考试的学生接触,要迅速离开考场,防止学生利用通讯工具交流试题内容。
三、评分标准第一组湿热灭菌操作一、一、操作用具及物品:高压灭菌锅、试管培养基、三角瓶、线绳、报纸或牛皮纸等。
二、操作过程及评分标准1(首先将内层灭菌桶取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。
(10分)2(放回灭菌桶,并装入待灭菌物品。
注意不要装得太挤,以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。
(10分)3(加盖,并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。
再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。
(10分) 4(用电炉或煤气加热,并同时打开排气阀,使水沸腾以排除锅内的冷空气。
(或等压力上升到0.5时,打开放气阀排出冷空气)待冷空气完全排尽后,关上排气阀,让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。
当锅内压力升到所需压力时,控制热源,维持压力至所需时间。
本实验用 1(05kg/cm2,121(3?,20分钟灭菌。
(10分) 提问:1.为什么要放出冷空气,答:因空气是热的不良导体,当高压锅内的压力升高后,它聚集在锅的中下部,使饱和热蒸汽难与被灭菌物品接触。
实验六平板划线法分离菌种一、实验目的1、了解平板划线法分离菌种的基本原理2、练习平板划线法分离菌种的基本操作,掌握无菌操作技术二、实验原理平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。
一般是将混杂在一起的不同种微生物或同种微生物群体中的不同细胞,通过在分区的平板表面上作多次划线稀释,形成较多的独立分布的单个细胞,经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。
通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。
实际上同种微生物数个细胞在一起通过繁殖也可形成一个单菌落,故在科学研究中,特别是在菌种鉴定等工作中,必须对实验菌种的单菌落进行多次划线分离,才可获得可靠的纯种。
平板划线分离对细菌、酵母菌较为适宜,而霉菌和放线菌的分离多采用稀释分离法进行菌种的分离纯化。
具体的划线形式有多种,这里仅介绍一种经过长期实践并证明可获得良好实验效果的方法将一个平板分成A、B、C、D4个面积不同的小区进行划线,A区面积最小,作为待分离菌的菌源区,B和C区为经初步划线稀释的过渡区,D区则是关键的单菌落收获区,它的面积最大,出现单菌落的概率也最高。
由此可知,这4个区的面积安排应做到D>C>B>A。
鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助于快速鉴别某种微生物。
这样的培养基称之为鉴别培养基。
例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。
(参考GB47838-2012食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数)其配方中含有乳糖、伊红和美蓝,用以鉴别肠道病原菌及其他杂菌。
伊红、美蓝作为指示剂,伊红系酸性染料,当大肠埃希氏菌或产气肠杆菌分解乳糖产酸时,由于细菌带正电荷,所以被伊红着色。
在大肠埃希氏菌中因为伊红与美蓝结合,所以菌落不呈红色,而是蓝紫黑色,且具有绿色金属光泽;菌落呈棕色者为产气肠杆菌;不分解乳糖的肠道病原菌则不着色,有时因产生碱性物质较多,细菌带负电荷,被美蓝着色后,菌落并不呈蓝色,因美蓝与伊红结合,所以菌落为淡紫色。
临床微生物学检验技术考试题库及答案2、(正常菌群)条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。
3、G+菌特有成分:磷壁酸(重要表面抗原,可用于细菌血清学分型)(外毒素)4、G-菌特有成分:外膜层(由脂多糖(内毒素)、脂质双层(磷脂)、脂蛋白)5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。
结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥(G-菌无。
是溶菌酶、青霉素作用部位)6、细菌的主要遗传物质:核质(染色体)、质粒(存在于胞质,双链闭合环状DNA分子)、转位因子7、细菌特殊结构:荚膜(保护,致病,抗原性,鉴别)、芽胞、鞭毛(运动器官)、菌毛(普通菌毛—粘附,致病性;性菌毛—接合方式转移遗传物质)*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标8、L型(细胞壁缺陷)菌落:①“油煎蛋”(荷包蛋)样菌落(典型L型细菌)。
②颗粒型菌落(简称G型菌落)③丝状菌落(简称F型菌落)。
高渗环境生长。
(环丙沙星)9、自营菌:以无机物为原料;异营菌(腐生菌:以无生命的有机物质为营养物质;寄生菌:以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。
10、细菌营养物质:水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。
11、细菌个体的生长繁殖方式:无性二分裂,在对数期以几何级数增长12、细菌分类(伯杰)等级依次为界、门、纲、目、科、属、种(最小分类单位)。
13、常用的细菌培养方法是:需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法;14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板,置于空气或含5%~10%CO2的气缸中培养,大部分细菌可于24~48h生长良好。
15、血清学诊断时,一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2~3份检查,抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。
16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构;扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。
17、细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→初染→染色(媒染)→(脱色)→(复染,使脱色菌体着色)。
18、胃部细菌喜酸,肠道细菌喜碱19、SS琼脂有较强的抑菌力,用于志贺菌和沙门菌的分离。