鞣质的研究_初试_分离_提取方法
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1.提取
提取鞣质的中药原料最好用新鲜原料,且宜立即浸提,也可以用冷冻或浸泡在丙酮中的方法贮存。
原料的干燥宜在尽短的时间内完成,以避免鞣质在水分、日光、氧气和酶的作用下变质。
提取将药材粉碎,过筛,用95%乙醇冷浸或渗漉提取,提取液或渗漉液减压浓缩成浸膏。
2.分离
(1)溶剂法:通常将含鞣质的水液先用乙醚等极性小的溶剂萃取,除去极性小的杂质,然后用乙酸乙酯提取,可得到较纯的鞣质。
亦可将鞣质粗品溶于少量乙醇和乙酸乙酯中,逐渐加入乙醚,鞣质可沉淀析出。
(2)沉淀法:向含鞣质的水液中分批加入明胶溶液,滤取沉淀,用丙酮回流,鞣质溶于丙酮,蛋白质不溶于丙酮而析出。
(3)柱色谱法:普遍采用的固定相是Diaion HP-20,Toyopearl HW-40,Sephadex LH-20及MCIGelC HP-20.以水-甲醇、水-乙醇、水-丙酮为流动相(洗脱剂)。
(4)高效液相色谱法:HPLC法对鞣质不仅具有良好的分离效果,而且还可以用于判断鞣质分子的大小、各组分的纯度及α、β-异构体等,具有简便、快速、准确、实用性强等优点。
鞣质的分离和分析方法研究进展摘要:鞣质又被称之为单宁,鞣质是一种存在植物内的结构相对复杂的化合物,肉质可以与动物皮肤中的蛋白质结合,形成稳定性较强的皮革材料,因此,单宁被称为鞣质,鞣质多元化的化合结构使得鞣质具有特殊的化学性质,以及很强的生物活性,鞣质是一种价值较高的天然的化合物,随着鞣质分离研究的不断深入,鞣质分离的技术开始得到人们的关注。
引言近年来发现,植物提取物在替代抗生素方面的研究取得了良好进展,其作用主要包括抗微生物活性、免疫增强活性和抗氧化活性等方面的提高,且负面效应甚微。
1、鞣质的提取方法鞣质有多种提取方法,最为常用的一种提取方法就是温水浸泡提取法,有机溶剂溶解提取法,创新后的提取方法有微波鞣质提取法,超声波鞣质提取法,膜技术提取法,高压水鞣质提取法等,这些创新的鞣质提取法将传统与现代的方法结合,最大限度提高了鞣质的提取效率,为鞣质在现实世界的应用提供了更加广阔的前景。
2、鞣质的分离方法当前研究的鞣质分离方法也有很多种,包括分级沉淀分离鞣质法,活性炭吸附分离鞣质法,离子交换分离鞣质法等。
2.1分级沉淀法分级沉淀分离鞣质法是基于鞣质中不同物质的溶解度有所差别,使用浓度不同的溶解剂,比如说甲醇、乙醇等,可以达到分级分离鞣质的目的,一般来说都使用乙醇作为溶质分级沉淀的溶解剂,先使用明胶将宗鞣质沉淀,之后在沉淀物中加入丙酮溶液,将鞣质释放出来,可以初步将老鹳草提取液分离出来,明胶溶液可以优化鞣质的沉淀分级工艺,有机溶液对于机械设备的要求也相对较低,成本也较低,但是这种方法分离的鞣质不容易分离有害物质,这种方法分离鞣质的安全性还没有完全得到认可。
2.2活性炭吸附活性炭是一种含碳的多孔物质,活性炭的孔隙构造高度发达,正是由于活性炭的孔隙构造高度发达,使得活性炭可以为鞣质分离提供大面积的平面,活性炭可以与鞣质流体充分接触,从而赋予活性炭更强的吸附功能,使得活性炭轻易将流体中的杂质去除,使用活性炭可以去除鞣质流体中的色素、树胶等杂质,可以一定程度上提高鞣质提取的质量,鞣质的透射率显著提高。
收稿日期:2019-04-09基金项目:山东中医药大学大学生研究训练计划项目(项目号:2018068)作者简介:孟凡恒(1997—),女,山东济宁人,山东中医药大学药学院,主要从事中药化学方面的研究。
仙鹤草中鞣质类成分的提取分离鉴定实验孟凡恒1,李佳佳1,董兴童2,李书凝3(1.山东中医药大学药学院,山东济南 250355;2.山东中医药大学中医学院,山东济南 250355;3.山东中医药大学理工学院,山东济南 250355)摘要:仙鹤草(AgrimoniapilosaLedeb.)是蔷薇科龙芽草属多年生草本植物。
因鞣质类化合物具有抗肿瘤、抗氧化、增强机体免疫力等药理作用,因此研究仙鹤草中鞣质成分对于充分开发利用仙鹤草资源有着重要的意义。
方法:本实验采用乙醇减压回流提取法获得仙鹤草中含有的鞣质成分,通过大孔树脂与硅胶层析法对鞣质进行富集、分离,应用化学方法和高效液相色谱法对其进行鉴定。
结果:90%乙醇进行提取,15倍量的60%乙醇可以洗脱出鞣质,样品6的峰5为目标化合物,方法安全简便,重复性稳定性好。
关键词:仙鹤草;鞣质;提取;分离;鉴定;高效液相色谱法中图分类号:TQ461 文献标识码:A 文章编号:1008-021X(2019)13-0010-04ExperimentalonExtraction,SeparationandIdentificationofTanninsfromAgrimoniaPilosaMengFanheng1,LiJiajia1,DongXingtong2,LiShuning3(1.CollegeofPharmacy,ShandongUniversityofTraditionalChineseMedicine,Jinan 250355,China;2.CollegeofTraditionalChineseMedicine,ShandongUniversityofTraditionalChineseMedicine,Jinan 250355,China;3.CollegeofScienceandTechnology,ShandongUniversityofTraditionalChineseMedicine,Jinan 250355,China)Abstract:Objective:AgrimoniapilosaLedeb.isaperennialherbofRosaceae.Becausetanninshavethepharmacologicaleffectsofanti-tumor,anti-oxidationandenhancingimmunity,itisofgreatsignificancetostudythetanninsinHerbaAgrimoniaeforthefulldevelopmentandutilizationofHerbaAgrimoniaeresources.Methods:ThetanninsinHerbaAgrimoniaewereextractedbyethanoldecompressionandreflux.Thetanninswereenrichedandseparatedbymacroporousresinandsilicagelchromatography.Thetanninswereidentifiedbychemicalmethodandhighperformanceliquidchromatography.Results:Thetanninscouldbeelutedby90%ethanolwith15timesof60%ethanol.Thepeak5ofsample6wasthetargetcompound.Themethodwassimpleandsafewithgoodrepeatabilityandstability.Keywords:AgrimoniapilosaLedeb.;tannins;extraction;separation;identification;HPLC 仙鹤草是蔷薇科、龙芽草属多年生草本植物。
中药提取鞣质的方法中药提取鞣质的方法主要有水提法、醇提法、超声波辅助提取法和微波辅助提取法等。
本文将详细介绍这些方法及其原理。
水提法是一种常用的中药提取鞣质的方法。
在水提法中,首先将中药材粉碎成适当的颗粒大小,然后加入适量的水进行浸泡。
浸泡的时间可以根据实际情况进行调整,通常需要几小时到几十小时不等。
在浸泡的过程中,可以适当提高温度和调节溶液的pH值,以促进鞣质的溶出。
之后,通过滤、浓缩和沉淀等步骤,将提取液中的悬浮物和溶质分离。
最后,通过冷冻干燥或喷雾干燥等方法,将提取液中的水分去除,得到鞣质的提取物。
水提法相对简单易行,但存在一些问题。
首先,因为水的极性较大,水溶液中除了鞣质外,还会存在其他水溶性物质,如酸性和碱性物质,这些物质可能会对后续的提取工作产生干扰。
其次,由于鞣质在中药中的含量较低,提取的效率较低,需要较长时间才能够提取足够的鞣质。
醇提法是另一种常用的中药提取鞣质的方法。
在醇提法中,可以选择不同的醇类作为提取剂,如乙醇、甲醇和丙酮等。
提取的步骤与水提法类似,首先将中药材粉碎,然后加入适量的醇类提取剂进行浸泡。
浸泡的时间和温度可以根据实际需要进行调整。
醇类提取剂常常能够更好地溶解鞣质,因为鞣质是一类具有一定疏水性的化合物。
在浸泡的过程中,可以进行适当的搅拌或振荡,以加速鞣质的溶出。
之后,通过滤、浓缩和沉淀等步骤,将鞣质的提取物分离出来。
最后,通过蒸馏和脱溶剂等处理,去除醇类溶剂,得到鞣质的干燥提取物。
醇提法相对于水提法具有一些优势。
首先,醇类提取剂可以更好地溶解鞣质,提取效率较高。
其次,醇类溶剂在蒸发后可以相对容易地去除,不会对后续的分析造成干扰。
但醇提法也存在一些问题,如醇类溶剂对环境的影响比较大,而且醇类提取剂的成本较高。
超声波辅助提取法是一种近年来发展起来的中药提取鞣质的方法。
在这种方法中,利用超声波的机械与热效应,促进鞣质的溶解和迁移。
首先,将中药材粉碎成适当的颗粒大小,然后加入适量的溶剂进行浸泡。
鞣质类成分原来是作为一种杂质去除的,由于现代研究表明,鞣质中也有多种单体或某种中药的一些部位具有良好的药理作用或者临床效果,目前也被越来越多的研究者所重视,本讨论仅对鞣质类成分的检识方法进行阐述,与大家共同研究讨论,希望各位不吝赐教,在此先表示感谢。
鞣质又称植物多元酚,是分子量500~3000的能使生物碱、明胶及其他蛋白质沉淀的水溶性酚类化合物。
从这个定义我们就可以知道鞣质最基本的检识反应为明胶反应阳性。
具体操作方法如下:取植物粗粉,水煎煮或含水丙酮渗滤提取(提取液回收试剂至无丙酮味,再加水调成一定浓度的浓缩液),将煎煮液或浓缩液中逐渐加入氯化钠水饱和的明胶溶液,若出现混浊或者沉淀均为阳性反应。
2000年版药典中的皮粉法测定鞣质含量的原理就是鞣质的这个特性;干络素法也是基于这个反应。
此外由于鞣质的水溶液能与重金属盐,如醋酸铅、醋酸铜、氧化亚锡或碱土金属的氢氧化物溶液等作用,生成沉淀;鞣质的水溶液可与生物碱生成难溶或不溶于水的沉淀;这两类反应也可用作鞣质的鉴别、提取分离或者除鞣的方法,但专属性不如明胶沉淀法。
另外鞣质的水溶液与三氯化铁作用生成蓝黑或绿黑色反应或沉淀,可以确定鞣质的类型为可水解鞣质还是缩合鞣质。
互通有无,呵呵,希望大家有意见多交流。
22 饱和碳酸钠溶液除鞣酸将杜仲各萃取部位样品溶液进行去鞣酸处理, 分别加入等量饱和碳酸钠溶液,萃取 3次,取酯层, 再用蒸馏水清洗 3次,将样品放置- 20∋冰箱预冻48 h,然后置冷冻干燥机冷冻干燥48 h ,称量冻干粉末配置样品水溶液,浓度为1 mg /m l 。
24 Fo l in酚试剂法测定鞣质浓度在96孔板中加入40l不同浓度的样品液后, 加入200l混合试剂( 4%碳酸钠溶液与02N氢氧化钠溶液等体积混合, 1%硫酸铜溶液与2 %酒石酸钾钠溶液等体积混合, 再将两混合液按50& 1混合) ,置于20~ 25∋水浴保温10m i n , 再加入20 l酚试剂, 立即混匀, 在20~ 25∋保温30 m i n , 700 nm比色, 测定光密度值。
一种鞣质的制备方法
鞣质是一种能够与蛋白质结合,形成稳定的化合物的物质,常用于皮革工业中对皮革的处理。
以下是一种常见的鞣质制备方法:
1. 原料准备:选择适合的植物原料,如橡皮树皮、栲树皮、栗树皮等。
将原料进行碾碎或切碎,使其表面积增大,便于鞣质的提取。
2. 鞣质提取:将碾碎的植物原料加入水中,进行煮沸。
可以加入一些酸性物质,如醋酸或硫酸,以提高鞣质的溶解度。
煮沸后,将提取液过滤或离心,得到含有鞣质的液体。
3. 鞣质纯化:将含有鞣质的液体进行蒸发浓缩,以去除其中的水分和杂质。
可以利用低温下的蒸发,避免鞣质的分解。
也可以使用活性炭等吸附剂对液体进行处理,去除其中的杂质。
4. 鞣质处理:将纯化后的鞣质液体加入待处理的皮革中,进行浸渍或喷涂。
鞣质与皮革中的蛋白质发生反应,形成稳定的化合物,提高了皮革的硬度、韧性和耐久性。
需要注意的是,鞣质的制备方法还有很多种,具体选用哪种方法要根据不同的情况进行选择,如原料的可获得性、鞣质的需求量、制备成本等因素。
以上只是其
中一种常见的制备方法,仅供参考。