当前位置：文档之家 › 常用试剂及缓冲液的配制

常用试剂及缓冲液的配制

  • 格式：pdf
  • 大小：347.78 KB
  • 文档页数：9

1 实验室常用试剂及缓冲液的配制 500mM EDTA pH＝8.0 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取EDTA固体146.13g或Na2EDTA·2H2O固体186.1g，置于烧杯中 2. 加入约800ml ddH2O 3. 用NaOH调pH至8.0（约20g），EDTA完全溶解 4. 定容至1L 5. 高温高压灭菌 6. 室温保存 500mM EDTA pH8.0 配方：

1M Tris-HCl pH＝X 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取121.14g Tris碱置于烧杯中 2. 加入约700ml ddH2O，充分溶解 3. 用浓HCl调pH值至X 4. 定容至1L 5. 高温高压灭菌 6. 室温保存 注意：溶解Tris碱，待溶液冷却到室温再调pH值 1M Tris-HCl pH=X 配方：

2M Tris-HCl pH＝X 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取242.28g Tris碱置于烧杯中 2. 加入约700ml ddH2O，充分溶解 3. 用浓HCl调pH值至X 4. 定容至1L 5. 高温高压灭菌 6. 室温保存 注意：溶解Tris碱，待溶液冷却到室温再调pH值 2M Tris-HCl pH=X 配方：

2 100mM Tris-HCl 10mM EDTA pH＝7.4 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 量取1M Tris-HCl（pH8.0）100ml 2. 量取500mM EDTA(pH8.0) 20ml 3. 加入约700ml的ddH2O，混匀 4. 调pH至7.4 5. 高温高压灭菌 6. 室温保存 10×TE缓冲液 pH＝7.4 配方： 10%(W/V) SDS 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 称取10g SDS置于烧杯中 2. 加入70ml ddH2O，68℃加热溶解 3. 用浓HCl调pH至7.2 4. 定容至100ml 5. 室温保存 10%(W/V) SDS 配方： 5N HCl 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 量取56.9ml ddH2O 2. 加入43.1ml浓HCl（11.6N），混匀 3. 室温保存 注意：先加入水，再加浓盐酸 5N HCl 配方： 2.5N HCl 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 量取78.4ml ddH2O 2. 加入21.6ml浓HCl（11.6N），混匀 3. 室温保存 注意：先加入水，再加浓盐酸 2.5N HCl 配方：

3 5N NaOH 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 称取20g NaOH固体，置于塑料烧杯中 2. 缓慢加入约70ml ddH2O，边加边搅拌 3. 待完全溶解，定容至100ml 4. 室温保存 注意：烧碱溶解放大量的热 5N NaOH 配方： 2N NaOH 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 称取8g NaOH固体，置于塑料烧杯中 2. 缓慢加入约70ml ddH2O，边加边搅拌 3. 待完全溶解，定容至100ml 4. 室温保存 2N NaOH 配方： 5M NaCl 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取292.2g NaCl固体置于烧杯中 2. 加入约700ml ddH2O，搅拌溶解完全 3. 高温高压灭菌 4. 4℃保存 5M NaCl 配方：

0.9%（W/V）NaCl 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取9g NaCl固体置于烧杯中 2. 加入约700ml ddH2O，搅拌溶解完全 3. 高温高压灭菌 4. 4℃保存 0.9%生理盐水 配方：

4 65%(V/V) 丙三醇 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 量取65ml甘油（丙三醇） 2. 加入35ml ddH2O，混匀 3. 高温高压灭菌后，4℃保存 4. 或无菌操作，用灭菌1.5ml离心管趁热分装，-20℃保存 65%(V/V)甘油 配方：

80%(V/V) 丙三醇 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 量取80ml甘油（丙三醇） 2. 加入20ml ddH2O，混匀 3. 高温高压灭菌后，4℃保存 4. 或无菌操作，用无菌1.5ml离心管趁热分装，-20℃保存 80%(V/V)甘油 配方：

10%(V/V) 丙三醇 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 量取10ml甘油（丙三醇） 2. 加入90ml ddH2O，混匀 3. 高温高压灭菌后，4℃保存 10%(V/V)甘油 配方： 1M DTT 配 制 量： 配制方法： 20ml 1. 称取3.09g DTT置于50ml塑料离心管中 2. 加入20ml的0.01M NaOAc(pH5.2)，溶解完全 3. 无菌操作，0.22um滤器过滤除菌 4. 分装于灭菌1.5ml离心管，-20℃保存 1M DTT 配方： 5 500mM KCl 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 称取3.73g KCl固体置于烧杯中 2. 加入70ml ddH2O，充分溶解 3. 定容至100ml 4. 高温高压灭菌，室温保存 500mM KCl 配方： 1M KCl 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 称取7.46g KCl固体置于烧杯中 2. 加入70ml ddH2O，充分溶解 3. 定容至100ml 4. 高温高压灭菌，室温保存 1M KCl 配方：

1M Glucose 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取180g Glucose于烧杯中 2. 加入约700ml灭菌ddH2O，溶解完全 3. 定容至1000ml 4. 灭菌：高温高压，115℃，20分钟；或0.22um滤膜抽虑除菌 5. 4℃保存 1M Glucose 葡萄糖 配方：

10mM ATP 配 制 量： 配制方法： 20ml 1. 称取121mg ATP，置于50ml塑料离心管中 2. 加入20ml的25mM Tris-HCl(pH8.0)，溶解完全 3. 分装于1.5ml离心管中，-20℃保存 10mM ATP 配方： 6 10M NH4OAc 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 称取77.08g NH4OAc固体于烧杯中 2. 加入30ml ddH2O搅拌溶解 3. 加ddH2O定容到100ml 4. 用0.22um滤膜过滤除菌 5. 密封，常温保存 10M NH4OAc 配方：

1M MgCl2 配 制 量： 配制方法： 1L 1M MgCl2 配方： 1. 称取203.3g MgCl2·6H2O固体置于烧杯中 2. 加入700ml ddH2O，充分溶解 3. 定容至1L 4. 高温高压灭菌，室温保存

1M MnCl2 配 制 量： 配制方法： 100ml 1M MnCl2 配方： 1. 称取19.8g MnCl2·4H2O固体置于烧杯中 2. 加入70ml ddH2O，充分溶解 3. 定容至100ml 4. 高温高压灭菌，室温保存

2M MgCl2 配 制 量： 配制方法： 1L 2M MgCl2 配方： 1. 称取406.6g MgCl2·6H2O固体置于烧杯中 2. 加入700ml ddH2O，充分溶解定容至1L 3. 高温高压灭菌，室温保存 7 0.5M NH4OAc 10mM Mg(OAc)2 1mM EDTA（pH＝8.0） 0.1%(W/V) SDS 配 制 量： 配制方法： 200ml 1. 称取7.71g NH4OAc，0.43g Mg(OAc)2·4H2O固体于烧杯中 2. 吸取400ul EDTA(500mM，pH8.0) 3. 吸入2ml的SDS(10%W/V) 4. 加入100ml ddH2O，充分溶解混匀 5. 高温高压灭菌，常温保存 PAGE Diffusion Buffer 配方：

0.5M NH4OAc 10mM Mg(OAc)2 1mM EDTA（pH=8.0） 配 制 量： 配制方法： 200ml 1. 称取7.71g NH4OAc，0.43g Mg(OAc)2·4H2O固体于烧杯中 2. 吸取400ul EDTA(500mM，pH8.0) 3. 加入100ml ddH2O，充分溶解 4. 高温高压灭菌，常温保存 PAGE Diffusion Buffer (无SDS) 配方：

60mM CaCl2 100mM Pipes 15%(V/V) 丙三醇 pH＝7.0 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取6.66g CaCl2和33.53g Pipes固体 2. 量取150ml丙三醇，加约600ml ddH2O 3. 充分溶解混匀，调pH 至7.0 4. 定容至1L，高温高压灭菌 5. 4℃棕色瓶避光保存 CaCl2溶液 (感受态制备) 配方： 3M NaOAc 配 制 量： 配制方法： 100ml 1. 称取40.8g NaOAc·3H2O于烧杯中 2. 加ddH2O定容到100ml 3. 高温高压灭菌，常温保存 3M NaOAc 配方：

8 1M NaH2PO4 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取119.98g NaH2PO4于烧杯中 2. 加ddH2O定容到1L 3. 室温保存 PBS 储液A NaH2PO4 配方：

0.1M PBS pH＝X@25℃ 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 按下表进行配比 pH＝X A (ml) B (ml) 5.8 92.1

7.9 6.0 88.0

12.0 6.2 82.2 17.8 6.4 74.5

25.5 6.6

64.8

35.2 6.8 53.7 46.3 7.0 42.3 57.7 7.2 31.6 68.4 7.4 22.6 77.4 7.6 15.5 84.5 7.8 10.4 89.6 8.0 6.8 93.2 2. 混匀后，稀释至1L 3. 高温高压灭菌 4. 常温保存 100mM PBS溶液 配方： 1M Na2HPO4 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取141.96g Na2HPO4于烧杯中 2. 加ddH2O定容到1L 3. 室温保存 PBS 储液B Na2HPO4 配方： 9

1M KH2PO4 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取136.09g KH2PO4于烧杯中 2. 加ddH2O定容到1L 3. 室温保存 KPO4储液I KH2PO4 配方：

0.1M KPO4 pH＝Y@25℃ 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 按下表进行配比 pH＝Y I (ml) II (ml) 5.8 91.5

8.5 6.0 86.8

13.2 6.2 80.8 19.2 6.4 72.2

27.8 6.6 61.9

38.1 6.8 50.3 49.7 7.0 38.5 61.5 7.2 28.3 71.7 7.4 19.8 80.2 7.6 13.4 86.6 7.8 9.2 90.8 8.0 6.2 94.0 2. 混匀后，稀释至1L 3. 高温高压灭菌 4. 常温保存 100mM KPO4溶液 配方： 1M K2HPO4 配 制 量： 配制方法： 1L 1. 称取174.18g K2HPO4于烧杯中 2. 加ddH2O定容到1L 3. 室温保存 KPO4储液II K2HPO4 配方：

合集下载

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L

□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。

2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。

5.高温高压灭菌后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl（pH8.8）□配制量1L

□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。

2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。3.用浓盐酸调pH值至8.8。4.将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl，10mMEDTA（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L □配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。

1MTri-HClBuffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500mMEDTA（pH8.0）20mL

2.向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。3.将溶液定至1L后，高温高压灭菌。4.室温保存。

4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL

□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。3.加入去离子水将溶液定容至100mL。

4.高温高压灭菌后，室温保存。

分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法

分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法

1、1M Tris-HCl □组份浓度 1 M Tris-HCl

（pH7.4，7.6，8.0） □配制量 1L

□配制方法 1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。

2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值 浓HCl

7.4 约70mL

7.6 约60mL

8.0 约42mL

4. 将溶解定容至1L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂的配制方法

2×SDS gel-loading buffer

10×PBS

10×SDS-PAGE电泳液

10×转膜液

细胞裂解液

□ 组分浓度 50mM Tris-HCl(pH6.8)，100mM DTT，2%SDS，0.1%Bromophenol blue，10%Glycerol

□ 配制量 10ml

□ 配制方法 DTT 0.1572g，Bromophenol blue 0.01g，Tris-HCl(1M pH6.8) 500ul，10% SDS 2ml，Glycerol

1ml，超纯水定容至10ml。分装后于4度保存。

□ 组分浓度 NaCl 8%，KCl 0.2%，Na2HPO4.12H2O 2.9%g，KH2PO4 0.2%g

□ 配制量 1L

□ 配制方法 称取NaCl 80.0g，KCl 2.0g，Na2HPO4.12H2O

29.0g，KH2PO4 2.0g，超纯水定容至1L。

□ 组分浓度 Tris 250mM，甘氨酸 2M，SDS 1%

□ 配制量 1L

□ 配制方法 称取Tris 30.3g，甘氨酸 144.0g，SDS 10.0g,超纯水定容至1L。

□ 组分浓度 Tris 250mM，甘氨酸 2M

□ 配制量 1L

□ 配制方法 称取Tris 30.3g，甘氨酸 144.0g，超纯水定容至1L。

注意：1×转膜液的配制为100ml 10×转膜液，200ml甲醇定容至1L。

□ 组分浓度 NaCl 150mM，NP-40 0.5%，Tris-HCl 10mM，

PMSF 0.1mM， aprotimin 2ug/ml， NaN3 0.02%

□ 配制量 100ml

□ 配制方法 称取17mgPMSF溶于1ml甲醇，2mg

aprotimin溶于10ml水配制成200ug/ml的储存液备用；称取NaCl 0.88g，NaN3 20mg,加入NP-40 0.5ml，Tris-HCl(1M pH7.2) 1ml，溶有PMSF的甲醇1ml，aprotimin储存液1ml，混匀溶解后超纯水定容至100ml。 注意：4度保存，2～3个月内有效。

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法

实验室常用试剂、缓冲液的配制方法

1 M Tris-HCl

(pH7.4，7.6，8.0)

■ 组份浓度 1 M Tris-HCl

■ 配制量 1 L

■ 配制方法 1. 称量121.1 g Tris置 于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。

pH值 浓HCl

7.4 约70 ml

7.6 约60 ml

8.0 约42 ml

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的

pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液

的pH值大约降低0.03个单位。

1.5 M Tris-HCl

(pH8.8)

10×TE Buffer

(pH7.4，7.6，8.0)

■ 组份浓度 1.5 M Tris-HCl

■ 配制量 1 L

■ 配制方法 1. 称量181.7 g Tris置 于1 L烧杯中。

2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。

4. 将溶液定容至1 L。

5. 高温高压灭菌后，室温保存。

注意：应使溶液冷至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的

pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液

的pH值大约降低0.03个单位。

■ 组份浓度 100 mM Tris-HCI，10 mM EDTA

■ 配制量 1 L

■ 配制方法 1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。

1 M Tris-HCl Buffer（pH 7.4,7.6,8.0） 100 ml

500 mM EDTA (pH 8.0) 20 ml

2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，均匀混合。

3. 将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。

4. 室温保存。

3 M 醋酸钠

(pH5.2)

PBS Buffer

10 M 醋酸铵

■ 组份浓度 3 M 醋酸钠