猪两种腹泻病毒混合感染的病原诊断

猪轮状病毒病是由猪轮状病毒(porcine rotavirus,PoRV)引起的一种以腹泻、呕吐、厌食、脱水为临床症状的急性胃肠炎传染病。

猪轮状病毒是导致世界范围内仔猪剧烈腹泻的主要病原之一，给全球养猪业造成巨大的经济损失。

猪轮状病毒感染具有潜伏期短、传染性强、流行范围广、发病率高等特征，常与其他细菌、病毒混合感染而使病情加重，导致患病猪群死亡率升高，是我们养猪人需要重点关注的病原之一。

01、病原学特点猪轮状病毒是导致仔猪严重腹泻的主要病原之一，属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)，轮状病毒属(Rotavirus)。

猪轮状病毒粒子没有囊膜结构，形状类似球形，呈20面体对称结构，在电镜观察下病毒颗粒直径约为70nm，有三种蛋白质衣壳：核衣壳、内衣壳和外衣壳。

外衣壳包裹着内衣壳，它是由厚度约20nm的光滑薄膜组成，形成了轮状病毒特有的车轮状特征，因此根据其特征将其命名为轮状病毒。

猪轮状病毒全基因组长约18522bp，由11节段的双股RNA（16~21 kb）组成，分别编码6种结构蛋白（VP1~VP4、VP6和VP7）和5种非结构蛋白（NSP1~NSP5），其中，VP1~VP3为髓芯蛋白；VP4、VP7为外衣壳蛋白，共同构成轮状病毒的外层衣壳结构蛋白，VP7为糖蛋白，VP4为非糖基化蛋白，VP4经胰蛋白酶裂解可产生具有增强病毒感染性的VP5和VP8，对病毒的传染性至关重要；VP6构成中间一层衣壳，决定了血清群的特异性，是最重要的免疫原性蛋白。

图1 猪轮状病毒结构模式图轮状病毒具有不同的血清群和血清型，根据 VP6分为7个抗原性存在差异的血清群。

猪轮状病毒已被证实至少有五个血清群（A、B、C、E和H）可以感染猪。

其中血清A型是引起断奶前后仔猪腹泻最常见的亚型，在由PoRV引起商品化猪群的腹泻病中占90%以上。

根据vp7和vp4抗原分型，又可分为G和P型，其中G型有27个血清型，P型有37个血清型。

图2 猪轮状病毒血清型分类（数据引自肖少波教授）02、流行特点2.1传染源病猪、隐性感染猪及带毒猪是本病的传染源。

山西农业科学2019，47（8）：1474-1476猪流行性腹泻与猪圆环病毒2型混合感染的诊断与分析韩陆婵,薛翼鹏,赵岳,孟帆,樊振华,米瑞娟,吴忻（山西省农业科学院畜牧兽医研究所，山西太原030032）摘要:猪流行性腹泻病毒是引起猪腹泻的主要病原，近几年来，国内猪流行性腹泻呈高发态势，山西省多个地区规模化猪场发生哺乳仔猪腹泻，死亡率高达80%～100%。

猪圆环病毒2型是我国目前感染率最高的疫病，可引发断奶仔猪多系统衰竭综合征，损害免疫系统，造成免疫抑制。

山西省农业科学院畜牧兽医研究所猪病研究室从各地规模化猪场采集因腹泻病死哺乳仔猪肠道内容物及肠系膜淋巴结各53份进行分子学检测诊断。

结果发现，猪流行性腹泻病毒阳性率为90.6%；猪圆环病毒2型阳性率为69.8%。

认为当前猪流行性腹泻严重发生与猪圆环病毒2型混合感染有密切关系。

因此，在预防猪流行性腹泻的同时，要重视猪圆环病毒2型的免疫工作，并采取相关的综合防控措施，控制猪流行性腹泻的发生。

关键词:猪流行性腹泻；猪圆环病毒2型；混合感染；诊断分析中图分类号:S858.28文献标识码:A文章编号:1002-2481（2019）08-1474-03Diagnosis and Analysis of Porcine Epidemic Diarrhea andPorcine Circovirus Type 2Mixed InfectionHAN Luchan ，XUE Yipeng ，ZHAO Yue ，MENG Fan ，FAN Zhenhua ，MI Ruijuan ，WU Xin（Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine ，Shanxi Academy of Agricultural Sciences ，Taiyuan 030032，China ）Abstra ct ：Porcine epidemic diarrhea virus （DEDV ）is the main cause of diarrhea in pigs.In recent years,domestic porcine epidemic diarrhea exhibits high incidence of disease.Since 2015,the diarrhea of suckling piglets occurred in large-scale pig farms in many areas of Shanxi province,and the mortality rate was as high as 80%-100%,which led to a serious loss.Porcine circovirus type 2（PCV2）was the highest infection rate epidemic disease in our country,which contributed to weaning piglet multisystemic wasting syndrome,destroyed immune system and caused immunodepression.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Shanxi Academy of Agricultural Sciences collected 53cases of intestinal contents and mesenteric lymph nodes of suckling piglets died of diarrhea from large-scale pig farms for molecular detection and diagnosis.The results showed that the positive rate of PEDV was 90.6%,while the PCV2was 69.8%.It was believed that the cause of the current epidemic diarrhea was closely related to the mixed infection of PCV2.Thus,while preventing porcine epidemic diarrhea,it was meaningful to pay more attention to the immune work of PCV2and took relevant comprehensive prevention to control the occurrence of porcine epidemic diarrhea.Key words ：porcine epidemic diarrhea;porcine circovirus type 2;mixed infection;diagnostic and analysis收稿日期:2019-03-15基金项目:山西省重点研发计划项目（201703D221023-2）；山西省农业科学院特色攻关项目（YGG17089）作者简介:韩陆婵（1968-），女，山西原平人，研究实习员，主要从事动物疫病分子生物学研究工作。

猪流行性腹泻的诊断及治疗猪流行性腹泻（PED）是由PED病毒引起的一种猪的急性肠道传染病，其症状主要包括腹泻、呕吐、腹痛、发热等，严重的情况下可导致猪的死亡。

该病毒在全球范围内广泛存在，对猪业造成了巨大的经济损失。

本文将对PED的诊断和治疗进行简要介绍。

一、PED的诊断1. 临床表现PED的主要症状是猪的急性腹泻。

刚开始时，粪便呈黄色或浅黄色，含有未消化的饲料，后期变为稀水状或泥状，有时会夹杂着血液。

猪可能还会表现出呕吐、腹痛、食欲不振、发热等症状。

猪只有一到两天的潜伏期，症状来得异常迅速。

另外，PED的病猪通常不会瘦削，仍然能够保持食欲和水分摄取。

2. 病毒检测PCR技术能够对PED病毒进行快速、敏感和特异性检测，可利用肠道或粪便样品进行检测。

3. 组织学检查猪的肠道组织样本能够用来进行组织学检查，该检查可以帮助鉴别PED和其他猪的肠道疾病。

目前，治疗PED的方法主要是对症治疗和预防措施。

1. 对症治疗饮食疗法：提供易消化的饲料，如麸质、大米、米汤等。

在恢复期应该逐渐将正常饲料混合进饲料中，以帮助猪的肠胃适应。

水分和电解质治疗：腹泻病猪经常脱水，所以要保证水分的摄取。

另外，电解质平衡也很重要，可以通过口服或注射等方式进行补液。

抗生素治疗：PED是一种病毒性感染，一般情况下不需要使用抗生素。

但对于继发细菌感染或复杂的临床情况，可适当地使用抗生素治疗。

2. 预防措施疫苗预防：PED病毒疫苗的研发已经取得了一定的进展，但由于突变性强，疫苗的效果还需要进一步研究。

消毒措施：定期进行清洁和消毒，尤其是粪便清除和饲料和用具的消毒。

PED病毒能够在环境中存活数周、甚至数月之久，因此消毒需要足够彻底。

检疫措施：猪场应该对来自其他猪场或国家的猪进行检疫，防止病毒的传播。

总之，在预防PED的过程中，我们需要综合运用疫苗、清洁消毒、检疫等措施，以减少PED的发生。

在PED发生时，及时对症治疗也是十分重要的。

猪的疾病猪流行性腹泻的知识和防治一、概述：猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea，PED)是由猪流行性腹泻病毒引起的猪的一种高度接触性肠道传染病，以呕吐、腹泻和食欲下降为基本特征，各种年龄的猪均易感。

本病的流行特点、临诊症状和病理变化都与猪传染性胃肠炎(TGE)十分相似，但哺乳仔猪死亡率较低，在猪群中的传播速度相对缓慢。

猪流行性腹泻于1971年首次在英国发现，随后在许多国家都报道有该病，中国自20世纪80年代初以来陆续有本病发生的报道，并分离到病毒。

二、病原：猪流行性腹泻病毒(PEDV)为冠状病毒科冠状病毒属的成员。

病毒形态略呈球形，在粪便中的病毒粒子常呈现多形态，平均直径为130nm(95～190nm)。

有囊膜，囊膜上有花瓣状纤突，长12～24nm，由核心向四周放射，其间距较大且排列规则，呈皇冠状。

病毒在蔗糖中的浮密度为 1.18g/mL。

病毒核酸为线性单股正链RNA，具有侵染性。

基因组长为27000～33000个核苷酸(nt)，分子量为6×106～8×106。

免疫荧光(IFA)和免疫电镜(IEM)试验表明，猪流行性腹泻病毒与鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、猪血凝性脑脊髓炎病毒(HEV)、新生犊牛腹泻冠状病毒(NCDCV)，犬冠状病毒(CCV)、猫传染性腹膜炎冠状病毒(FIPV)之间没有抗原相关性。

但更敏感的试验检查表明，其中PEDV的N蛋白和FIPV 的N蛋白有一定相关性。

中和试验和ELISA等都证明PEDV和TGEV在抗原性上不同，无共同抗原。

目前，尚无迹象表明存在不同的PED血清型，所有分离的PEDV 毒株属于同一个血清型。

本病毒不能凝集人、兔、猪、鼠、犬、马、羊、牛的红细胞。

对外界抵抗力弱，对乙醚、氯仿敏感，一般消毒药物都可将其杀灭。

病毒在60℃ 30min，可失去感染力，但在50℃条件下相对稳定。

病毒在4℃，pH5.0～9.0或在37℃，pH6.5～7.5时稳定。

第４卷第２期２０２０年６月现　代　牧　业ＭＯＤＥＲＮＡＮＩＭＡＬＨＵＳＢＡＮＤＲＹＶｏｌ．４　Ｎｏ．２Ｊｕｎ．２０２０　收稿日期：２０１９－０９－２０　基金项目：２０１９年湖南省大学生创新创业训练计划项目（１５５４）　作者简介：李佳艳（１９９７—），女，湖南常德人，硕士研究生。

　通讯作者：王贵平（１９７３—），男，湖北咸宁人，副教授，博士。

猪流行性腹泻病毒和魏氏梭菌混合感染的诊断李佳艳１，符利辉２，方鑫玉１，张小冬１，王贵平１（１．湖南农业大学动物医学院，湖南长沙４１０１２８；２．湘潭县农业农村局，湖南湘潭４１１１００）摘要：用ＰＣＲ和序列分析等方法对从湖南湘潭某猪场送检的６份仔猪内脏和肠系膜淋巴结进行鉴定，同时进行细菌的分离、培养、鉴定。

结果发现，所有样品中均检出猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），序列分析发现为ＰＥＤＶ变异株；样品中均检出产气荚膜梭菌（魏氏梭菌）。

病猪被诊断为ＰＥＤＶ与魏氏梭菌混合感染。

采用ＰＥＤＶ疫苗紧急接种及综合防治措施后，疫情得到了有效控制。

关键词：猪流行性腹泻病毒；魏氏梭菌中图分类号：Ｓ８５１ 文献标识码：Ａ 文章编号：２０９６－２９７５（２０２０）０２－００４０－０３ＤｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｍｉｘｅｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｆＰｏｒｃｉｎｅｅｐｉｄｅｍｉｃｄｉａｒｒｈｅａｖｉｒｕｓａｎｄＣｌｏｓｔｒｉｄｉｅｕｍｗｅｌｃｈｉｉＬＩｊｉａｙａｎｇ１，ＦＵｌｉｈｕｉ２，ＦＡＮＧＸｉｎｙｕ１，ＺＨＡＮＧＸｉａｏｄｏｎｇ１，ＷＡＮＧＧｕｉｐｉｎｇ１（１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙｍｅｄｉｃｉｎｅｏｆＨｕｎａｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ，Ｈｕｎａｎ４１０１２８；２．ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌａｎｄＲｕｒａｌＢｕｒｅａｕ．ｉｎｘａｎｇｔａｎＣｏｕｎｔｙ，ｘａｎｇｔａｎ，Ｈｕｎａｎ４１１１００）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅｖｉｓｃｅｒａｌａｎｄｍｅｓｅｎｔｅｒｉｃｌｙｍｐｈｎｏｄｅｓｏｆ６ｐｉｇｌｅｔｓｆｒｏｍＸｉａｎｇｔａｎ，ＨｕｎａｎｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙＰＣＲａｎｄｓｅｑｕｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ，ａｎｄｔｈｅｂａｃｔｅｒｉａｗｅｒｅｉｓｏｌａｔｅｄ，ｃｕｌｔｕｒｅｄｃａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｅｄａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｓｅｑｕｅｎｃｅｏｆｓｗｉｎｅｄｉａｒｒｈｅａｖｉｒｕｓ（ＰＥＤＶ）ｗｅｒｅｆｏｕｎｄｉｎａｌｌｓａｍｐｌｅｓ．ＩｔｗａｓｄｉａｇｎｏｓｅｄａｓｍｉｘｅｄｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｆＰＥＤＶａｎｄＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｗｅｌｃｈｉｉ．ＡｆｔｅｒｃｕｒｅｄｗｉｔｈＰＥＤＶｖａｃｃｉｎｅａｎｄｏｔｈｅｒｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅｍｅａｓｕｒｅｓ，ｔｈｅｅｐｉｄｅｍｉｃｗａｓｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｐｏｒｃｉｎｅｅｐｉｄｅｍｉｃｄｉａｒｒｈｅａｖｉｒｕｓ；Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｅｕｍｗｅｌｃｈｉｉ ２０１８年１月上旬，湖南湘潭某猪场几个饲养单元的哺乳仔猪出现水样腹泻、呕吐、被毛较脏现象。

猪流行性腹泻由猪流行性腹泻病毒引起，属于高传染性疾病，病猪会出现黄色水样腹泻、呕吐等症状，且不同年龄段的猪群均可以感染，其中哺乳仔猪最为严重，为养殖人员带来较大的经济损失。

对此，养殖人员应明确猪流行性腹泻的发病症状，采用科学的防控措施，以严格控制疾病传播，并未此后猪流行性腹泻的治疗工作提供更多借鉴。

一、猪流行性腹泻概述1、病因猪流行性腹泻病毒传染力较强，主要通过口鼻传播，很容易引发大面积感染，其发病原因包括多个方面。

一是引种不当，养殖人员没有做好科学防控，在猪流性腹泻病毒养殖场内引种，导致外界病原体进入养殖场，出现疫情扩散。

且新引进的后备猪必须隔离后方可混群饲养，若没有做好科学检疫，则会导致病原体入侵。

二是猪群抗体水平较低，没有接种猪流行性腹泻等疾病的相关疫苗，一旦被腹泻病毒侵害，症状更为强烈，发病率较高。

三是免疫抑制性疾病，蓝耳病等免疫抑制性疾病会降低猪群整体抵抗力，当受到猪流行性腹泻病毒侵袭时，无法抵御，以致感染疾病。

四是饲养管理不当，没有为猪群提供充足营养，养殖环境较差，这些均会导致猪体抵抗力下降，增大患病率。

五是没有严格消毒，猪只一旦感染猪流行性腹泻病毒，会长期带毒，持续向外界传输，并通过粪便等感染健康猪只。

因此，养殖场应定期做好消毒工作，全面通风。

若没有严格执行消毒措施，极易导致养殖场内爆发腹泻病毒。

2、临床症状受发病日龄、个体免疫力、饲养环境等因素的影响，猪只感染猪流行性腹泻病毒后的症状各不相同，一般会出现水样腹泻，粪便呈灰黄色或黄色，伴随恶臭气味，猪只全身严重脱水。

但整个发病期间，猪只体温处于正常范围，波动不大。

①仔猪症状处于哺乳期内的仔猪感染猪流行性腹泻病毒后，会出现呕吐症状，呕吐物呈黄白色，带有少量粘液。

之后腹泻，腹泻物呈灰色或黄色，在肛门流出，污染臀部。

若出现严重腹泻症状，仔猪肛门下方皮肤会发红，并严重脱水。

发病期间，病猪眼窝下陷、食欲减退、精神萎靡，甚至出现停滞进食的问题，并在严重脱水3-4d 后死亡。

引起猪腹泻的病毒分离鉴定林庆燕;祁振强;阮周曦;吕建强;杨俊兴;曹琛福;张彩虹;花群义;秦智锋;陈书琨;孙洁;唐金明;陈兵;卢体康;刘建利;廖立珊;曾少灵【摘要】Porcine diarrhea virus strains were isolated in recent three years.Both porcine epidemic diarrhea virus(PEDV)and porcine rotavirusA(PRoVA)were gotten from small intestines in 2011 with MA-104 cell line with clinical signs.PEDV,PRoVA and Porcine transmissible gastroenteritis(TGEV)were identified together in one sample of 2012.Only PEDV was isolated in 2013.In order to overcome the cytotoxicity of PEDV and lost in cell passage,both trypsin and porcine pancreatin were used with vero-76 cell line during 1-3 passages,and only trypsin was used after 4th passage,PEDV could propagated well in cell line and cy-topathic effect(CPE)could be observed after 8th passage.In order to purify the PRoVA from co-infected samples,hens were immunized with PEDV isolated in 2003 and IgY antibodies were purified and inoculated with supernatant of MA-104 cell line co-infected with PEDV and PRoVA,and the purified PRoVA.The pi-demiologic investigation indicated that PEDV was mostly popular in recent three years.%为了对近年来引起仔猪腹泻的主要病毒进行分离鉴定，进而为疫苗的研发奠定基础，自2011年开始，从华南地区猪场连续3年检测出多个引起猪腹泻症状的病毒。

猪博卡病毒感染的综合诊断要点及其防控作者：暂无来源：《兽医导刊》 2019年第1期夏道伦／湖北省襄阳市襄州区畜牧兽医局猪博卡病毒是2009年由瑞典科学家从表现断奶仔猪多系统衰竭综合征的发病猪群中监测到的一种新型DNA病毒。

而从近年来的一些相关生猪疫病流行的报道中，我们进一步了解到，随着优良生猪品种的跨国和跨地区引进以及生猪及其猪肉产品交易的日益频繁，经权威机构检测，在我国一部分省份的养猪场喂养的仔猪发生严重腹泻、并伴随有呼吸道感染病死仔猪的病料中，检测到的猪博卡病毒阳性样品的比例远远高出最常见三种猪流行性腹泻（即猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻和猪轮状病毒），这充分表明，我国也不是猪博卡病毒的净土，猪博卡病毒的流行与传播将会给我国的养猪业构成潜在的威胁，甚至还会在一定程度上影响到动物性食品安全和人类的健康。

因此，养猪场对猪博卡病毒感染则不可小视。

一，病原学特点猪博卡病毒是一种单链无包膜的DNA病毒，属于RNA细小病毒科的成员。

猪博卡病毒在2009年瑞典科学家从仔猪体内发现之前，就已经有科学家从人和牛的体内发现了该病毒，该病毒是导致猪发生胃肠道疾病的主要病原菌之一。

猪博卡病毒对外界环境有较强的抵抗力，但对碘制剂等消毒类药物（如5%聚维酮碘溶液）则较为敏感，某些消毒剂如过氧乙酸、卫康、菌毒敌、强力消毒灵等也可以起到一定的杀灭病毒作用。

二，流行病学特征据分析，猪博卡病毒广泛存在于一些隐性带毒猪和患病仔猪的各个器官、体液和排泄物中，且该病毒在低温状态下可长期存活，并可通过空气和飞沫经呼吸道传播感染，也可通过被污染的饲料和饮水经消化道传播，血液和胎盘也可垂直传播。

猪博卡病毒全年均可感染猪群而引起发病，但秋末冬初和冬末春初的季节交换之际，天气发生骤变气温下降时节则更容易诱发猪群发病。

仔猪是猪博卡病毒的主要携毒者和传染源，且仔猪的出生日龄越小发病症状越重，在临床上通常多与猪流行性腹泻等发生混合感染，可引起仔猪发生严重腹泻，并伴随有呼吸道感染症状出现，仔猪的发病率和死亡率均较高，随着仔猪年龄的增长，带毒猪的发病率和死亡率会相应地降低，而成年种猪（包括成年公母种猪）和育肥猪虽然也可带毒，但成年种猪和育肥猪的发病症状则较轻，一般3～5d均可自愈，有的成年种猪和育肥猪甚至只带毒而不表现明显的发病症状，死亡率也相应较低。