以100% 凝集的病毒最大稀释度为该病毒血凝价,即为一 个血凝集单位。
二、血凝抑制(HI)试验
1、4个单位抗原的制备:按HA试验测出的病毒血凝价除以4即为4个单位血凝素的稀释度。 例128÷4=32即 1毫升(抗原)+31毫升(生理盐水)即成。其1个单位抗原孔的红血球 必须达到100%凝集。
1.做标记; 2.加生理盐水 ; 3. 第一孔加25uL待检血清,然后作倍比稀释; 4. 加4单位病毒 5. 室温静置作用15-30min; 6.加1%红细胞,立即振荡1min,静置20-30min; 7.观察结果。
以100%抑制凝集(完全不凝集)的被检血清最大稀 释度为该血清的血凝抑制效价,即HI效价。凡被已知新 城疫阳性血清抑制血凝者,该病毒为新城疫病毒。
HA HI
100%抑制红血球凝集的血清最大稀释度为血凝抑制价。表中的血凝抑制价为1:128 判定标准:HI血凝抑制价小于或等于8×(3㏒2)判为阴性;等于16×(4㏒2)为可 疑,需复检;大于或等于32×(5㏒2)为阳性。
结果判定:
待病毒对照(11孔)孔出现红细胞100%凝(++++), 而血清对照孔(第12孔)为完全不凝集(-)时,即可 进行结果观察。
病毒的血凝(HA)及血 凝抑制(HI)试验
[目的要求]
1.理解病毒HA和HI试验的原理
2.掌握HA和HI试验的操作方法、结果判 定并了 解其实用价值。
[实验原理]
❖ HA:许多病毒表面具血凝素,具有凝集某些动物或人红细胞 的特性,称为血凝现象,可用于鉴定病毒。HI:血凝现象可以被 特异性抗体所抑制,称为血凝抑制现象,利用这种特性可进行血 清学试验,称 通过HA-HI实验可用已知血清来鉴定未知病毒,也可用已知 病毒来检查被检血清中的相应抗体和滴定抗体的含量