干重比色法测菌重

学习手册《情境：细胞干重法》引导文-单元设计-实训指导书子情境：引导文细胞干重法阅读材料材料一、浊度法浊度法：可用来测量菌浓度·其原理是发酵罐中的发酵液按照一定的流速进入流通式比色皿中，用500-600nm的波长检测发酵液的光密度·然后发酵液再流回发酵罐中·所测的OD值与细胞浓度成正比。

浊度法:可用来测量菌浓度.其原理是发酵罐中的发酵液按照一定的流速进入流通式比色皿中,用500-600nm的波长检测发酵液的光密度.然后发酵液再流回发酵罐中.所测的OD值与细胞浓度成正比.也常用于免疫测定，基本原理是：抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。

当反应液中保持抗体过量时，形成的复合物随抗原量增加而增加，反应液的浊度亦随之增加，与一系列的标准品对照，即可计算出受检物的含量。

免疫浊度测定法按照仪器设计的不同可以分为两种，即比浊仪测定（turbidimetermeasure）和散射比浊仪测定（nephelomitermeasure）。

比浊仪测定是测量由于反射、吸收或散射引起的入射光衰减，其读数以吸光度A表示。

A什反映了入射光与透射光的比率（A=2－log10T，T代表浊度百分比）。

散射比浊仪测定是测量入射光遇到质点（复合物）后呈一定角度散射的光量，该散射光经放大后以散射值表示。

完成以下信息！浊度法的原理是。

材料二、微生物群体生长规律微生物细胞数量的增加称为微生物群体生长。

由于微生物个体微小的特殊性，难以针对单个微生物细胞或个体的生长繁殖的研究进行，故除特定的研究目的外，一般所言的微生物生长是指群体生长。

如将少量细菌纯培养物接种入新鲜的液体培养基，在适宜的条件下培养，定期取样测定单位体积培养基中的菌体（细胞）数，可发现开始时群体生长缓慢，后逐渐加快，进入一个生长速率相对稳定的高速生长阶段，随着培养时间的延长，生长达到一定阶段后，生长速率又表现为逐渐降低的趋势，随后出现一个细胞数目相对稳定的阶段，最后转入细胞衰老死亡期。

微生物生长量测定法1、体积测量法：又称测菌丝浓度法通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。

方法是取一定量的待测培养液(如10毫升)放在有刻度的离心管中,设定一定的离心时间(如5分钟)和转速(如5000 rpm),离心后,倒出上清夜,测出上清夜体积为v,则菌丝浓度为(10-v)/10.菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。

这种方法比较粗放,简便,快速,但需要设定一致的处理条件,否则偏差很大,由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物,结果会有一定偏差。

2、称干重发法可用离心或过滤法测定。

一般干重为湿重的10-20%.在离心法中,将一定体积待测培养液倒入离心管中,设定一定的离心时间和转速,进行离心,并用清水离心洗涤1-5次,进行干燥。

干燥可用烘箱在1050C或1000C下烘干,或采用红外线烘干,也可在800℃或400℃下真空干燥,干燥后称重。

如用过滤法,丝状真菌可用滤纸过滤,细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤,过滤后用少量水洗涤,在400℃下进行真空干燥。

称干重发法较为烦琐,通常获取的微生物产品为菌体时,常采用这种方法,如活性干酵母，一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

3、比浊法微生物的生长引起培养物混浊度的增高，通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值,判断微生物的生长状况。

对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时,可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。

将侧臂插入光电比色计的比色座孔中,即可随时测定其生长情况,而不必取菌液。

该法主要用于发酵工业菌体生长监测。

4、菌丝长度测量法对于丝状真菌和一些放线菌,可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度,或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管,到入合适的培养基,卧放,在开口的一端接种微生物,一段时间后记录其菌丝生长长度,借此衡量丝状微生物的生长。

细菌计数1.计数器测定法：即用血细胞计数器进行计数。

取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。

由于计数室的容积是一定的，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。

本法简便易行，可立即得出结果。

本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。

2、电子计数器计数法:电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。

该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。

因此，要求菌悬液中不含任何碎片。

3、活细胞计数法常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。

取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数。

此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。

使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。

广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法。

4、比浊法比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。

细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。

此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。

5、测定细胞重量法此法分为湿重法和干重法。

湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重法系单位体积培养物经离心后，以清水洗净放人干燥器加热烘干，使之失去水分然后称重。

此法适于菌体浓度较高的样品，是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。

细菌计数1、计数器测定法:即用血细胞计数器进行计数。

取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数。

由于计数室的容积就是一定的(O、1mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,可计算样品中的含菌数。

本法简便易行,可立即得出结果。

本法不仅适于细菌计数,也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。

2、电子计数器计数法:电子计数器的工作原理就是测定小孔中液体的电阻变化,小孔仅能通过一个细胞,当一个细胞通过这个小孔时,电阻明显增加,形成一个脉冲,自动记录在电子记录装置上。

该法测定结果较准确,但它只识别颗粒大小,而不能区分就是否为细菌。

因此,要求菌悬液中不含任何碎片。

3、活细胞计数法常用的有平板菌落计数法,就是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。

取一定容量的菌悬液,作一系列的倍比稀释,然后将定量的稀释液进行平板培养,根据培养出的菌落数,可算出培养物中的活菌数。

此法灵敏度高,就是一种检测污染活菌数的方法,也就是目前国际上许多国家所采用的方法。

使用该法应注意:①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数,过多或过少均不准确;②为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入O.001％2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。

广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验,就是最常用的活菌计数法。

4、比浊法比浊法就是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。

细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。

此法简便快捷,但只能检测含有大量细菌的悬浮液,得出相对的细菌数目,对颜色太深的样品,不能用此法测定。

5、测定细胞重量法此法分为湿重法与干重法。

湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重;干重法系单位体积培养物经离心后,以清水洗净放人干燥器加热烘干,使之失去水分然后称重。

此法适于菌体浓度较高的样品,就是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。

例析几种生物种群密度的取样调查方法中图分类号：g633.91取样调查法是从被调查的总体全部单位中抽取一部分单位（样本）来进行调查，并以样本特征值来推算总体特征值的一种调查方法。

不同种类的生物取样调查的方法存在着差异。

下面介绍常见的几种生物种群密度的取样调查方法：1、动物--标志重捕法标志重捕法是指在被调查种群的生存环境中捕获一部分个体，将这些个体标志后再放回原来的环境，经过一段时间后进行重捕，根据重捕中标志个体占总捕获数的比例，来估计该种群的数量。

常用于动物种群密度的取样调查，使用范围是活动能力强和活动范围大的动物，如哺乳类、鸟类、爬行类、两栖类、鱼类等。

计算公式是：种群中个体总数/重捕个体数=标志个体总数/重捕中所含标志数。

例1 为调查黄鹂的种群密度，用捕鸟网网获30只鸟，其中黄鹂5只，做标记后放回自然界，明年又网获了30只鸟，其中有标记的黄鹂有2只，没有标记的有6只，则此地区黄鹂种群个体数大约为（）a.20只b.15只c.75只d.450只解析：该调查方法为标志重捕法。

在计算时要注意每次网获的30只鸟并不都是黄鹂，要计算黄鹂的个体数，就要排除此种干扰。

设该地区黄鹂约为x只，则x：5=8：2，x=20。

答案：a2、植物--样方法样方法是在被调查种群的生活环境内，随机选取若干个样方，通过计数每一个样方内的个体数，求得每个样方的种群密度，以所有样方种群密度的平均值作为该种群的种群密度。

常用于植物种群密度的取样调查。

样方形状可以多样，但样方必须具有代表性，这可以通过随机取样来保证。

例2 某学生在测定一个生物种群分布比较均匀的原始森林中的山毛榉的种群密度时，采取如下操作：①选择山毛榉分布比较均匀、长5千米、宽1千米的长方形地块；②将该地块分成三等份，在每份的中央划一个样方；③样方为边长5米的正方形；④每个样方内山毛榉的数量记录如下：请完成下列问题：⑴根据该同学的调查，该原始森林中山毛榉的种群密度为。

⑵该调查结果是否可靠？。

微生物数量的测定1.计数器测定法：即用血细胞计数器进行计数。

取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。

由于计数室的容积是一定的，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。

本法简便易行，可立即得出结果。

本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。

2、电子计数器计数法:电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。

该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。

因此，要求菌悬液中不含任何碎片。

3、活细胞计数法常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。

取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数，可算出活菌数。

此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。

使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。

广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法。

4、比浊法比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。

细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。

此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。

5、测定细胞重量法此法分为湿重法和干重法。

湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重法系单位体积培养物经离心后，以清水洗净放人干燥器加热烘干，使之失去水分然后称重。

此法适于菌体浓度较高的样品，是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。

请教霉菌生长曲线测定方法我要测定霉菌的生长曲线，但是细菌那种测定方法好象不行，请高人指点，用称量细胞干重的方法试试:)1.抽虑取菌丝体，105度干燥5小时测干重。

2.实验下比浊法测定看看能行的不？3.抽虑取菌丝体，105度干燥5小时测干重。

不止五小时，是直道恒重！:)4.用OD值法！分时间段取样，测OD值。

5.测OD值法，分时间段取样，测OD值，XY坐标轴做点划线。

理论上应该是抛物线。

6.用称量细胞干重的方法试试:)7.干重法用过，误差好大8.楼上的各位，一看就是没有做过霉菌的，呵呵。

霉菌一般长到十几小时后就结球或者结团了，OD600几乎就跟水一样的，主要的细胞都在球或团里面。

然后这个球和团的分布也很不均匀，除非把整个摇瓶都称了。

上罐的时候，不说取的不均匀，你根本就没有办法把那些东西从罐里面取出来。

我也头疼这个事情，一般都没法测。

如果有高手，帮忙想想办法。

9.菌丝体称重法，比较合适。

测OD值法，分时间段取样，测OD值，XY坐标轴做点划线。

理论上应该是抛物线。

10.黄曲霉是丝壮真菌啊，用OD值法可行吗，用什么波长呢，黄曲霉是丝壮真菌啊，用OD值法可行吗，用什么波长呢，11.用重量法测定菌丝生物量，如果开始误差很大，建议1多做平行，2加大接种量。

尤其是刚开始的几个小时生物量比较小，测定相对误差很大，实验要更细心一些，菌丝离心或过滤之后要将上面附着的培养基冲洗干净，另外在烘干时也要注意，烘箱顶容易生锈，有时一些小渣滓很容易掉下来如果掉进样品中会引起很大误差，最好用带盒子的容器承载12.首先讨论测定吸光度的问题。

我培养过曲霉属（包括黑曲霉、黄曲霉、米曲霉、塔宾曲霉、棘孢曲霉、黄柄曲霉、亮白曲霉等）、青霉属（包括草酸青霉、嗜松青霉等），枝状枝孢霉种，根霉属，木霉属，还有很多没有鉴定过的真菌，超过一千株，发现除非是污染了细菌，不然真菌在液体培养（180rpm）时菌丝长了之后都会相互纠结成球或块状，所以测定OD值不能反映真菌的生长时期。

浮游植物的采集计数和定量方法浮游植物是水生态系统中重要的底层生物类群，对于水质评价、生态监测以及环境保护都具有重要的意义。

因此，准确、高效地采集、计数和定量浮游植物是水环境研究的关键步骤。

下面将介绍浮游植物的采集计数和定量方法。

一、浮游植物的采集方法：1.根据采样目的和特定环境条件选择合适的采样方法，常用的采样方法有以下几种：(1)铁丝网挡截式采样：在浮游植物出现较为集中的水域使用，将铁丝网固定在一个框架上，让水流通过铁丝网，实现浮游植物的挡截和收集。

(2)网捞式采样：适用于浮游植物密度较高的水域，用网捞将浮游植物从水中捞出。

(3)浮游植物捕集器的采集：常用的浮游植物捕集器有浮游植物网式捕集器、浮游植物漏斗捕集器、浮游植物湖泊型捕集器等。

2.采样前要选择合适的采样点，宜选择浮游植物密度较高的水域进行采样。

采样容器要先用水冲洗，尽量不带有任何异物，以避免对采样物质的污染。

3.采集浮游植物时应避免过度搅荡水体，以防浮游植物的破碎和污染。

4.采集样本时要注意保持样本的完整性，以确保后续的计数和分析的精确性。

二、浮游植物的计数方法：1.显微镜计数法：将采样的浮游植物样本放入显微镜下，通过目视计数的方式，记录不同种类的浮游植物数量。

2.染色计数法：采用一些常见的染色剂（如碘酒、卡内基氏溴酸可乐定等）将浮游植物样本染色后，在显微镜下对染色后的样本进行计数。

3.流式细胞仪计数法：利用流式细胞仪可以对样本中的细胞进行高效、自动化的计数和分析。

三、浮游植物的定量方法：1.干重法：将采集回来的样本在高温下干燥至恒定重量后，通过测量干物质的质量差值计算浮游植物的生物量。

2.叶绿素-a含量测定法：通过提取样本中的叶绿素-a，利用比色法测定其叶绿素-a的含量。

然后根据叶绿素-a的含量可以推算出浮游植物的生物量。

3.DNA分子量法：通过提取样本中的DNA，利用分子生物学技术测定其DNA的分子量。

再根据已建立的浮游植物DNA分子量和生物量的线性关系，可以推算出浮游植物的生物量。

干重法测定大肠杆菌计算题
摘要：
1.引言
2.干重法的原理
3.大肠杆菌的测定方法
4.干重法在测定大肠杆菌中的应用
5.结论
正文：
1.引言
在生物科学研究中，对微生物的数量和质量进行准确的测定是十分重要的。

其中，大肠杆菌作为一种常见的微生物，被广泛应用于生物实验和生产过程中。

对于大肠杆菌的测定方法，有多种方法可以进行，如湿重法、干重法等。

本文将介绍干重法在测定大肠杆菌中的应用。

2.干重法的原理
干重法是一种常用的微生物数量测定方法，其基本原理是将微生物样品通过干燥处理，使其水分完全蒸发，然后再通过称重，计算出微生物的干重。

通过微生物的干重和已知的水分含量，可以计算出微生物的数量。

3.大肠杆菌的测定方法
大肠杆菌的测定方法有多种，如湿重法、干重法、比浊法等。

其中，干重法是一种常用的方法。

在使用干重法测定大肠杆菌时，首先需要将大肠杆菌样品进行干燥处理，然后通过称重，计算出大肠杆菌的干重。

通过大肠杆菌的干
重和已知的水分含量，可以计算出大肠杆菌的数量。

4.干重法在测定大肠杆菌中的应用
干重法在测定大肠杆菌中具有广泛的应用。

首先，干重法可以准确地测定大肠杆菌的数量，为科研和生产提供准确的数据支持。

其次，干重法可以快速地测定大肠杆菌的数量，提高了工作效率。

最后，干重法还可以方便地保存样品，便于后续的实验和分析。

5.结论
总的来说，干重法是一种准确、快速、方便的测定大肠杆菌的方法，具有广泛的应用前景。