Generation of DCs with CSF

树突状细胞的特性及应用172河北医药2004年2月第26卷第—HebeiMedicalJo—urnal,Feb2004,—V ol26—,No.2树突状细胞的特性及应用张庆九李春晖焦保华树突状细胞(Dendriticcell,I)C)是机体免疫系统中最强有力的一种专职的抗原呈递细胞(APC),在免疫应答的启动,调控上起着关键的作用LII.现代抗肿瘤免疫疗法利用Dc负载肿瘤相关抗原(T从)制成的肿瘤疫苗(瘤苗),在转移性前列腺癌,恶性黑色素瘤,多发性骨髓瘤和慢性髓性白血病(CML)等几种恶性肿瘤的治疗上已取得喜人的效果.现对树突状细胞的生物特性,来源,抗瘤机制,肿瘤疫苗疗法等进行综述1Dc生物学特性IX;最初是Steirmlan和Cohn等1973年从小鼠脾组织中分离发现的,因其形态具有树突样或伪足样突起而命名.目前一致认为,凡具有典型的树突状形态,膜表面高表达MttCⅡ类分子,能移行至淋巴器官和刺激初始型T细胞增殖活化,并具有一些相对特异性表面标志的一类细胞,方能称之为DE,DE广泛分布于全身各脏器,数量极微,约占外周血白细胞总数的1%,DC的前体细胞由骨髓进入外周血,再分布到全身各组织.13t2主要分为髓系D(=(myeloiddrivedDC)和淋巴系DC(1ymphoidrelatedoc)两大类.成熟的DC表现出6个主要特征:(1)细胞形态不规则,表面有许多膜样或树突佯突起;(2)细胞表面具有丰富的有助于抗原提呈的分子,如持续,高水平的表达MItCI类,Ⅱ类分子,共刺激分子cD帅(.)和cD86(13,:),细胞粘附分子CD(LFAI),CDm,C(ICA),C(ICAM.),co,8(LFA])和CD.∞(ICAM2),以及淋巴细胞功能相关抗原LFA1,LFA1等.人血中的I)C前体开始表达c.:,但随着成熟渐渐失去表达,而粘附分子,共刺激分子,MHC抗原随着成熟而表达增加J.活化后,特别是cD柏L活化后,c,c上调.在成熟中,cD86出现早,而cD町出现晚,血中DC前体几乎不能检测到..(3)在混合淋巴细胞反应中,既能激活MHC相同的自身反应性T细胞,又能激活MHC不同的同种反应性T细胞,而其最大特点是能够显着刺激初始型T细胞(NaiveTcel1)增殖并建立初级免疫应答.(4)具有向局部淋巴细胞T细胞区迁移的能力.(5)DC激发T细胞增殖及抗原提呈能力是巨噬细胞和B细胞的100～1000倍b1.(6)新近发现的D(:SIGN(DCslx~cificICAM3grabbingnoninten)分子在启动静息T细胞免疫反应中的作用引起人们的注意,Dc SIGN是DC特异表达的,第一个被鉴定的DC限制性分子,介导Dc与静息T细胞的强烈粘附从而发挥I)C诱导的T细胞增殖作用.另外,在体内外,J)C具有与其他APC不同的功能特征,可递呈抗原给静息T细胞的能力是I)(:最重要的功能之一. 其能力是其他APc的10—100倍.正是由于DC的上述特征使作者单位:050000~aI_lgN科大学第二医院神经外科其成为体内抗原提呈能力最强的AP【=,也是唯一一类可直接活化静息T细胞的APE.2树突状细胞的来源近几年来,随着人们在DC的起源,分类,摄取和加工处理抗原的机制以及引起DC迁移和成熟的信号传导等领域研究的深入,有关人DC大量培养和扩增的方法日益成熟.目前,树突状细胞有三个来源:骨髓,外周血和新生儿脐带血.从骨髓中分离获得树突状细胞的CD互的祖系细胞,或从外周血或新生儿脐带血于体外经14d培养分化(在GMCSF和TNFa存在的情况下)成为成熟的CD,C跽,HIADR的树突状细胞;或者用外周血纯化的CD;单核细胞或粘附单核细胞在二种细胞因子(GMCSF和IL4或ILl3)的培养刺激下成为CD,c聪的未成熟树突状细胞,再经TNFa或(和)CL刺激形成成熟的树突状细胞.3树突状细胞抗肿瘤的分子机制研究证明J,树突状细胞与肿瘤的发生,发展具有以下密切关系.(1)以肿瘤抗原体外专一性地冲击致敏,激活功能最强的APC树突状细胞,可保证肿瘤抗原被有效摄取.(2)树突状细胞通过细胞表面高水平的MHCI,Ⅱ类分子呈递了丰富的肿瘤抗原肽,使相应的T细胞受体(TCR)被充分占据;同时,树突状细胞提供高水平的协同刺激分子B7..(cD),B7.:(cD86),cD的分子等,使T细胞被充分激活.(3)树突状细胞与T细胞结合后,可以大量分泌:,激发T细胞增殖,诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)生成,主导了TH,型的免疫应答,有利于肿瘤细胞的清除.(4)树突状细胞还能分泌趋化因子(DCCCK),专一性地趋化初始型T细胞,通过促进T细胞聚集,增强对T细胞的激发.另外,肿瘤病人可以在中枢神经系统检测到T淋巴细胞和主要组织相容性抗原.采用细胞因子修饰的肿瘤细胞瘤苗能够产生抗中枢神经肿瘤的免疫反应,因此免疫反应可以介入中枢神经系统疾病.4关于各种类型的树突状细胞疫苗'目前已研究了各种形式肿瘤抗原体外冲击致敏树突状细胞制备的疫苗.(1)细胞性肿瘤抗原:经放射线照射灭活的肿瘤细胞,肿瘤细胞反复冻融上清或肿瘤细胞冻融后膜碎片或超声破碎方法制备肿瘤细胞的蛋白提取物直接体内免疫后都只产生极弱的抗肿瘤免疫效应,已极少作为肿瘤疫苗单独用于临床.(2)肿瘤抗原多肽:应用经弱酸洗脱肿瘤细胞表面的MHCI类抗原多肽冲击树突状细胞,其靶向性更好,肿瘤抗原浓度更高,可产生"冲击致敏"的效应,促进T细胞有效激活.(3)肿瘤抗原基因:将肿瘤抗原基因转移进树突状细胞,体内诱发特异性抗肿瘤免疫功能.其方式有多种:用脂质体介导单纯疱疹病毒(Hsv)蛋白抗原编码基因冲击树突状细胞,或脂质体介导河北医2004年2月第26卷第2期HebeiMedicalJournal一,Feb2004,V ol26,No.2 酪氨酸酶基因转移入树突状细胞;用肿瘤细胞的RNA作为抗原冲击树突状细胞,或用低免疫原性肿瘤的RNA(总RNA或polyA+RNA)冲击树突状细胞,免疫接种后可诱导出强烈抗肿瘤免疫力;用腺病毒载体介导肿瘤抗原基因对成熟树突状细胞的转染;用黑色素瘤抗原基因质粒通过基因枪技术转染体外培养的树突状细胞等.(4)抗独特型抗体:抗独特型抗体是肿瘤抗原的内影像,可模拟肿瘤抗原被机体识别,激发针对肿瘤细胞的免疫功能.临床首例应用树突状细胞治疗肿瘤就是应用抗独特型抗体致敏树突状细胞来做为瘤苗.(5)与细胞因子联合使用:是体内介导TH.型应答的细胞因子,与抗原冲击的树突状细胞瘤苗联合应用于肿瘤治疗,收到更佳的抗癌效果.某些情况下甚至逆转由树突状细咆诱导的耐受.(6)肿瘤相关抗原和肿瘤特异性抗原:粒细胞,巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)可以促进树突状细胞的成熟,维持树突状细胞的存活.将GMCSF基因经腺病毒载体介导转入树突状细胞,具有更强的体内激发肿瘤特异性CTL的能力.用腺病毒将I基因转染树突状细胞,也可协同增强T细胞功能,促进机体的抗肿瘤效应.Fms样酪氨酸激酶Ⅲ(肿,酪氨酸激酶受体家族Ⅲ成员之一)配体(n凡L)也是一种细胞因子,能与树突状细胞或B细胞表面的受体结合,促进树突状细胞的成熟,故也有人应用肿L联合树突状细胞瘤苗增强抗肿瘤疗效".此外,曹雪涛等还将重组腺病毒介导的GMCSF基因转染的树突状细胞经肿瘤抗原冲击致敏后,与肿瘤细胞融合制备出免疫原性更强的新型瘤苗,他们还报道了肿瘤抗原多肽致敏的,淋巴细胞趋化因子基因修饰的树突状细胞诱导特异性抗肿瘤免疫应答的实验结果.法国与意大利合作小组"发现,肿瘤抗原冲击的树突状细胞胞浆内形成许多包含抗原多肽的小体(exoc~omes或dexosomes).实际上,树突状细胞除了细胞间直接接触和通过分泌细胞因子起作用外,人和小鼠的树突状细胞均能分泌或外排exo~ome.s,这种小体中不含凋亡小体,胞浆膜或内质网组组等,表达MHCI,Ⅱ类分子和cDIi6,具抗原呈递能力,能在体外刺激抗原特异性cT细胞的增殖,因而有诱导T细胞免疫反应的功能.从树突状细胞上清分离和纯化这些小体给荷瘤小鼠皮下注射(5/*gexo—sor-麟)也诱导了极强的抗肿瘤效应,在体内诱导出高水平的cT1J,并能治愈荷瘤小鼠,提示作为无细胞体系诱导体内免疫功能的应用途径,eXOC~OIIIeS也可以说是一种新型的亚细胞成分的树突状细胞瘤苗.(7)直接应用Dc:将Dc在体外进行扩增后再回输体内,以求获得更多的CTL,这本身就是一种过继性免疫治疗,而且大多数肿瘤组织内浸润Dc的数量与肿瘤患者的预后直接相关,浸润DC多则预后好.5DC的输注途径和剂量输注途径早期D(=的输注途径多采用静脉注射.近年来,采用皮下,皮内,淋巴管内,瘤体内注射的方法得到了广泛的应用.目前,多数学者认为,皮内,瘤体内注射可能更有利于DC发挥其生物学功能.DC发挥其抗肿瘤免疫效应的基础是D(=负载肿瘤抗原后,能够迁移至T淋巴细胞富集的二级淋巴器官,从而激活抗肿瘤免疫反应.因此,DC的输注途径与其能否更好地发挥生物学功能密切相关.(1)静脉及淋巴管内注射:l73Mackensen等对七HC的静脉及淋巴管内注射进行了比较,作者用转移性恶性黑色素瘤患者外周血cD五造血干细胞来源的DC 经放射性标记后,静脉或淋巴管内注射,丫照相机全身拍照观察.发现DC经静脉注射后在肺内作短暂停留,最后定位于脾和肝脏7d以上:DC注入足背淋巴管内后,可迅速迁移至引流淋巴结并停留24h以上,实验说明淋巴管内注射与静脉注射相比,更有利于DC发挥其抗肿瘤作用.(2)真皮内注射:Thomas等则比较了多种DC的输注形式后,发现真皮内注射DC后,10min内就可见标记的DC迁移入引流淋巴结,4h后引流淋巴结显象最明显,证实真皮内注射可以使DC快速迁移至引流淋巴结且可以滞留较长时间,说明真皮内注射可能是DC疫苗抗肿瘤治疗的另一较佳输注途径.(3)瘤体内注射:目前,I)C疫苗抗肿瘤治疗临床试验,大都采用肿瘤细胞抗原肽,肿瘤细胞溶解物或凋亡的肿瘤细胞先体外致敏DE,然后回输体内.6树突细胞瘤苗的剂量和用法一般用的方案是:致敏树突状细胞制成1×1个细胞/0.5n1l,注射用细胞悬液,每次剂量为1×1个细胞,每周1次,连续用4周,然后间隔2周,再次接种以增强免疫,总接种量为5×1个树突状细胞.研究认为DC注射的细胞数量与肿瘤缓解的时间成正比.但是否细胞数量越高,治疗效果越好,有无平台效应,细胞数量多少为最佳尚需进一步研究.7展望树突状细胞加肿瘤抗原将会成为有效的肿瘤免疫基因治疗手段.由于DC疫苗能促进同种异体T细胞增殖的特性及其强大的抗原提呈功能,不仅能将抗原提呈给M/-ICⅡ类分子促进cDT细胞增殖,又能提呈给MHCI类分子促进c聪T细胞增殖,诱发机体强烈的细胞免疫应答;同时研究还发现,DC在体液免疫中也发挥重要作用,可直接参与调节B细胞的成熟和分化,刺激B细胞增殖产生大量的IsA和IgM,全面调动机体的抗肿瘤免疫力,在机体抵御恶性肿瘤中发挥重要作用.DC疫苗的初步临床试用也显示出了良好的疗效.该疗法可望成为肿瘤生物治疗的又一新兴手段.参考文献】gl,En~emanEG.Dendriticcellsincancerimmunotherapy.AnnReviro—munol,2000,18:245—273.●2TakamizawaM,RivasA,FagnoniF,eta1.Dendriticcellsthatprocessandpr一~-,entnominalantigenstonaiveTlymphoeytesalederivedfromCD2pre—cursol~.Jlnmaunol,1997,158:2134-2142.3ShortmanK.|]umetoration:dendriticcells:multiplesubLypes,multipleori—gins,multiplefunctic~ns.1nmaunolCellBoil,2000,78:161—165.4BarmhemauJ,BriereJ,CauxC,etaI.Immunologyofdendn'ticcells.A/lnul~.evlnrnunol,2OO0,18:767.8l1.5LevinD,ConstantS,PasqualiniT,eta】.Roleofdendriticcellsinthepriming ofCITlymphocytestopeptideantigeninvivo.Jlmmund,1993.151:6742.6St~rmtan.DC—SIGN:Aguidetos0fT1emysteriesofdentin'ticceils.Cells.2000,100:491494.7GeijtenbeekTBH,TorensmaR,V anVlletSJ,eta1.IdentificatonofDC.SIGN, anoveldendriticcellspecificICAMsreceptorthatsupportsprimaryimmuneres.Cell,2000,100:575-585.8ChenSR,AkSMF.TanimotoK,eta1.AbsenceofCPositivematureand activateddendriticcellsatc锄cernodulesfrompatients山bepatocellular carcinomarelevancetohepatocarcinogenesis.CancerLe~em,2000,148:49.174河~t,lN药2004年2月第26趁第—2lt~J—Hebe—iMedicalJo—urnal,Feb2004,V ol26,No.2,.9曹雪涛.树突状细胞基础与临床研究新进展.中国免疫学杂志,1998,14:161—167.1O孙劲旅,张锦.树突状细胞与肿瘤免疫研究进展.tf1国肿瘤I临床与康复,1998,5:80—82.11叶闻斐,秦慧莲,何球藻.兀与FI-1]及其在体外诱导树突状细胞增殖的作用.闷外医学免疫学分册,1998,21:74-76.12曹雪涛,叶天星.树突状细胞研究在免疫学中的意义及发展趋势.困外医学免疫学分册,1998,21:281,285.13QuahB,O'NeillliC.Review:the)p】ieationofdendriticcell—derivedexo—s(m1esintumourimmunotherapy.CancerBiotherRadiopharm,21300,159 185,194.14M~tckensenA.KrauseT,BlumU,eta1.Homingofintravenouslyandinira—lymphatica]lyinjectedhumandendriticcellsgeneratedinvitroncoilhe—matopoieticprogenitorcells.Cancerlmmunollmmunother,lI9,48:1l8一l】2.15l!aonmsR,ChambersM,BoytarR,eta1.Metastaticlesionsinthejoint一elatedthacuteinflammatoryarthritisafterdendriticcellimmunotherapyfor metastaticmelanoma.MelanomaRes.l999.9:474.481.树突状细胞在脑胶质瘤治疗中的应用李春晖张庆九焦保华胶质瘤的主动免疫治疗(activeimmtmotherapy)一直是胶质瘤治疗研究的热点,然而有关肿瘤的免疫逃避,肿瘤特异性抗原以及肿瘤治疗中免疫的合适方法,路径等都是研究者必须妥善解决的问题.树突状细胞(dendriticce]ls,DEs)是摄取,加工,递呈抗原的最重要的专职抗原递呈细胞(antigenpresentingcell, APC),它递呈抗原的能力最强.1DEs的获得1.1DEs的来源Ronani描述了将从化疗病人骨髓抑制期间的外周血中获取的单核细胞进行培养,得到大量的树突状细胞.从这种状态下获取的单核细胞其造血干细胞的比例较稳定状态下获取的单核细胞造血干细胞的比例高.Koch等…发现培养从外周血中纯化的人CD;造血干细胞可诱导细胞表型和功能特异性DEs,是DEs个体发育和成熟理论的主要突破.Caux等的报道与此有明显争议(是否DEs直接生成于早期造血干细胞或衍生于血单核细胞?)他们阐述了DCs两种不同的发展途径.当CD;造血=F细胞(来自于人脐带血)在GMCSF+TNF-a中培养5～7d后,:两种DEs前体出现:第一种前体由表达CD..和CD.缺失而确认,将成熟为DCs,并带有表皮郎罕氏细胞的特点(表达Birbeck颗粒滞后抗原和粘滞素).第二种前体,CD..一CD将成熟为CD+DEs(缺乏Birbeck颗粒滞后抗原和B粘滞素).而cD前体代表双潜能细胞,在有巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)诱导时可有不同的反应,成为类巨噬细胞.1.2D【的培养实验中应用的DEs主要通过培养骨髓细胞获得.骨髓细胞自股骨,胫骨中获得,在GM.CSF+II厂4或GM, CSF+a中培养,在第8天可见到大量具有DCs形态学特点的细胞集合体增生.每只小鼠培养DCs的产量大约为10×1 (GM—CSF+IL广4),6×1(GM—CSF+TNF—a)和5×lo'(GM—CSF). 流式细胞技术评价这些DEs的抗原表达,包括c,C,CD.(Mac一1),CDt8,cD-Io,cD8【】(B7),cI(B7.2),并指细胞抗原NLIX;.45和MT1C—I型,U型抗原.在GM—CSF+IIJ_4中培养的细作者单位:O5OOOO河北医科大学第二医院神经外科胞MHC,Ⅱ类分子和共刺激分子(costimulatorymolecules)岛_l,岛.2 的水平最高,而且是更加有效的同基因混合淋巴细胞反应刺激物.人DCs主要将从外周血中分离的单核细胞进行培养,其DEs培养结果与上述相同.2DEs的功能DCs是最有效的同种异体混合淋巴细胞反应刺激物.DEs可传递抗原给T,B淋巴细胞,DEs对外生抗原有吞饮作用.在细胞内,抗原被加工成短肽,递呈到DEs细胞表面的MHC分子上.作为初级淋巴细胞基本要求的共刺激分子在DEs上有高水平表达,这些共刺激分子包括cD町(.)cD龉(岛.)和cD舶….在共刺激分子存在的条件下,已致敏的淋巴细胞被递呈给免疫系统,这提供了一种对抗自身免疫的保护作用.侵入抗原被摄取后,可能在TNF-ct的影响下,DCs转变为成熟树突状细胞,迁移到局部淋巴结,将抗原递呈给T淋巴细胞.DEs再成熟前摄取,加工抗原的能力较强,抗原递呈功能较弱,而成熟后抗原递呈功能较强,摄取,加工抗原的能力较弱.3DEs在脑胶质瘤中的应用中枢神经系统很长时间内被认为免疫豁免区,免疫活性在颅内受限制的机制还不能被完全理解,但好象包括明显解剖学特点,如淋巴引流的缺如,血脑屏障的存在,并且在主要组织相容性复合体存在的情况下,小胶质细胞和星形细胞可递呈抗原.但中枢神经系统的免疫豁免不是绝对的,Esther等将小鼠脑组织与GM-CSF共同培养,得到了具有良好抗原递呈功能的DCs,Stao发现小鼠的垂体问质细胞中主要成分为DEs.在实验性过敏性脑脊髓炎中,对髓磷脂基础蛋白的外周免疫引出的特异性抗原诱导了细胞毒性T淋巴细胞(CTL)介导的脱髓鞘作用,暗示中枢神经系统特异性免疫反应来自于合适的靶抗原的递呈和有效的诱导免疫反应….4DEs疫苗的制备多种应用DEs诱导免疫反应的方法已得到研究:提取肿瘤细胞蛋白或肽致敏DEs,将转录肿瘤相关抗原的基因转导入DEs,DEs与肿瘤细胞共同培养,DEs与肿瘤细胞融合等.。

电信领域常用的英文缩略语16QAM 16-State Quadrature Amplitude Modulation 16状态正交幅度调制2G Second Generation 第二代移动通信3G Third Generation 第三代移动通信3GPP Third Generation Partnership Project 第三代协作项目组织4G Fourth Generation 第四代移动通信AA/D Analog / Digital 模拟/数字A-F Account-Function 计费功能AAA Authentication Authorization Account 验证、授权和计费AAL ATM Adaptation Layer ATM适配层ACF Admission ConFirm 接入确认ACL Access Control List 访问控制列表ACM Address Complete Message 地址全消息AD ADvertisement 广告ADM Add Drop Multiplexer 分插复用器ADSL Asymmetric Digital Subscriber Line 不对称数字用户线AG Access Gateway 接入网关AGCF Access Gateway Control Function 接入网关控制功能AH Authentication Header 认证头AIS Alarm Indication Signal 告警指示信号AKA Authentication and Key Agreement 认证和密钥协商协议ALG Application Level Gateway 应用层网关ALS Automatic Laser Shutdown 自动激光关断AMC Adaptive Modulation and Coding 自适应调制和编码AMR Adaptive Multi Rate 自适应多速率AN Access Network 接入网ANM ANswer Message 应答消息ANSI American National Standard Institute 美国国家标准协会AON Active Optical Network 有源光网络API Application Programming Interface 应用编程接口APM Application Transport Mechanism 应用传输机制APON A TM Passive Optical Network A TM无源光网络APR Automatic Power Reduction 自动功率降低ARIB Association of Radio Industries and Businesses 日本无线电产业协会ARJ Admission ReJect 接入拒绝ARPU Average Revenue Per User 平均用户贡献度ARQ Admission ReQuest 接入请求ARQ Automatic Repeat Request 自动请求重传AS Application Server 应用服务器AS-F Application Server-Function 应用服务器功能ASN.1 Abstract Syntax Notation one 抽象语法记法1ASON Automatic Switched Optical Network 自动交换光网络ASP Application Service Provider 应用服务提供商ASP Abstract Service Primitive 抽象业务原语ASTN Automatic Switched Transport Network 自动交换传输网A T Access Terminal 接入终端ATIS Alliance for Telecommunications Industry Solutions 电信业解决方案联盟ATM Asynchronous Transfer Mode 异步传输模式AUC AUthentication Center 鉴权中心BB-INAP Broadband-Intelligent Network Application Protocol 宽带智能网应用协议B-ISDN Broadband-Integrated Services Digital Network 宽带综合业务数字网B-ISUP Broadband-ISDN User Part 宽带ISDN用户部分B-SCE Broadband-Service Create Environment 宽带业务生成环境B-SCP Broadband-Service Control Point 宽带业务控制点B-SDP Broadband-Service Data Point 宽带业务数据点B-SMS Broadband-Service Manage System 宽带业务管理系统B-SSP Broadband-Service Switch Point 宽带业务交换点B-VPN Broadband Virtual Private Network 宽带虚拟专用网络B3G Beyond 3G 超3GBA Border Agent 边界代理BAS Broadband Access Server 宽带接入服务器BCF Bandwidth ConFirm 带宽确认BCF Bearer Control Function 承载控制功能BCMCS Broadcast and Multicast Service 广播和组播业务BCTP Bearer Control Tunneling Protocol 承载控制隧道协议BCU Bearer Control Unit 承载控制单元BcN Broadband Convergence Network 宽带融合网络BER Basic Encoding Rules 基本编码规则BG Border Gateway 边界网关BGCF Breakout Gateway Call Function 出口网关控制功能BGF Border Gateway Function 边界网关功能BGP Border Gateway Protocol 边界网关协议BHCA Busy Hour Call Attempts 忙时试呼次数BICC Bearer Independent Call Control 与承载无关的呼叫控制BICSCN Bearer Independent Circuit Switching Core Network 与承载无关的电路交换网络BIP Broadband Intelligent Peripheral 宽带智能外设BIS Bump In the Stack 栈内凸块BIWF Bearer InterWorking Function 承载互通功能BMAC Basic Media Access Control 基本媒体接入控制BMF Bearer Media Function 承载媒体功能BNC Backbone Network Connection 骨干网连接BNF Backus-Nayr Format Backus-Nayr形式BPON Broadband Passive Optical Network 宽带无源光网络BRAS Broadband Remote Access Server 宽带远程接入服务器BRJ Bandwidth ReJect 带宽拒绝BRQ Bandwidth Request 带宽请求BSC Base Station Controller 基站控制器BTS Base Transceiver Station 基站收发信台CC/S Client/Server 客户端/服务器CAC Connection Admission Control 连接允许控制CAMEL Customized Applications for Mobile Network 移动网增强逻辑的客户化应用CAP CAMEL Application Part CAMEL应用部分CAP Carrierless Amplitude and Phase Modulation 无载波幅相调制CATV CAble TeleVision 有线电视CBC Call Bearer Control 呼叫承载控制CBR Constant Bit Rate 固定比特率CCAMP Common Control and Measurement Plane 通用控制和测量平面CCI Connect Control Interface 连接控制接口CCM Call Control Management 呼叫控制管理CCNR Call Completion on No Reply 未应答的呼叫完成CCSA China Communications Standards Association 中国通信标准化协会CCU Call Control Unit 呼叫控制单元CCXML Call Control Extensible Markup Language 呼叫控制可扩展标识语言CDM Code Division Multiplexing 码分复用CDMA Code Division Multiple Access 码分多址接入CDR Call Detail Record 呼叫详细记录CDRS Call Detail Record Server 呼叫详细记录服务器CELP Code Excited Linear Prediction 码本激励线性预测CGI Common Gateway Interface 公共网关接口CIC Circuit Identification Code 电路识别码CIDR Classless Inter Domain Routing 无类域间路由选择CIF Common Intermediate Format 公共中间格式CIR Committed Information Rate 承诺信息速率CJK China Japan Korea 中日韩合作组织CLI Command Line Interface 命令行接口CLIP Calling Line Identification Presentation 主叫号码识别显示CLIR Calling Line Identification Restriction 主叫号码识别限制CLP Cell Loss Priority 信元丢失优先级CM Cable Modem 电缆调制解调器CMIP Common Management Information Protocol 通用管理信息协议CMISE Common Management Information Service Element 公用管理信息业务单元CMN Call Mediation Node 呼叫协调节点CN Core Network 核心网COPS Common Open Policy Service 公共开放策略业务CORBA Common Object Request Broker Architecture 公共对象请求代理结构CoS Class of Service 业务分类CPE Customer Premises Equipment 用户终端设备CPN Customer Premises Network 用户驻地网CPL Call Processing Language 呼叫处理语言CPS Character Per Second 每秒字符数CR-LDP Constraint-Based Routing Label Distribution Protocol 基于路由受限的标签分发协议CS Circuit Switched 电路交换CS-1 Capability Set 1 能力集1CSA Carrier Service Area 载波服务区CSCF Call Session Control Function 呼叫会话控制功能CSF Call Service Function 呼叫业务功能CSI Circuit Switched Interworking 电路交换域互通CSS Customer Service System 客户服务系统CSSNP Circuit-Switched Service Notification Protocol 电路交换业务通知协议CWDM Coarse Wave Division Multiplexer 稀疏波分复用CWTS China Wireless Telecommunication Standards 中国无线通信标准研究组DD/A Digital/Analog 数字/模拟DBA Dynamic Bandwidth Assignment 动态带宽分配DCF Disengage ConFirm 终止确认DCM Distributed Call and Connection Management 分布式呼叫和连接管理DCN Data Communication Network 数据通信网DCS Digital Cross-connect System 数字交叉连接DDN Digital Data Network 数字数据网DDoS Distributed Denial of Service 分布式拒绝服务DDRP Domain to Domain Routing Protocol 域到域路由协议DECT Digital Enhanced Cordless Telecommunication 数字增强型无绳通信DFE Decision Feedback Equalizer 判决反馈均衡器DFT Discrete Fourier Transform 离散傅里叶变换DHCP Dynamic Host Configuration Protocol 动态主机配置协议DiffServ Differentiated Service 区分服务DMT Discrete Multi-Tone 离散多音频DNS Domain Name Service 域名服务DNS-ALG DNS- Application Level Gateway 域名服务器-应用层代理网关DOPRA Distributed Object-oriented Programmable Real-time Architecture 分布式面向对象可编程实时构架DoS Denial of Service 拒绝服务DP Detection Point 检测点DRJ Disengage ReJect 终止拒绝DRQ Disengage ReQuest 终止请求DS-CDMA Direct Sequence-Code Division Multiple Access 直扩码分多址DSC Downlink Shared Channel 下行链路共享信道DSCP Differentiated Services Code Point DiffServ代码点DSL Digital Subscriber Line 数字用户线DSLAM Digital Subscriber Line Access Multiplexer 数字用户线接入复用器DSMP Data Service Management Platform 数据业务管理平台DSP Digital Signal Processor 数字信号处理器DSS1 Digital Subscriber Signaling No1 1号数字用户信令DSS2 Digital Subscriber Signaling No.2 2号数字用户信令DSTM Dual Stack Transition Mechanism 双协议栈过渡机制DTE Data Terminal Equipment 数据终端设备DTMF Dual Tone Multi Frequency 双音多频DU Distribution Unit 分配单元DVC Data V oice Conflux 数据语音合线DWDM Dense Wavelength Division Multiplexing 密集波分复用DXC Digital Cross Connection 数字交叉连接EE-NNI Exterior-Network Network Interface 外部网络-网络接口EAS Erisson 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快速蜂窝选择FCS Frame Check Sequence 帧检验序列FDD Frequency Division Duplex 频分双工FDDI Fiber Distributed Data Interface 光纤分布式数据接口FDM Frequency Division Multiplexing 频分复用FDMA Frequency Division Multiple Access 频分多址FE Fast Ethernet 快速以太网FFT Fast Fourier Transform 快速傅立叶变换FG NGN NGN Focus Group 下一代网络专题组FICON Fiber Connection 光纤互联FISU Fill-In Signal Unit 填充信号单元FITL Fiber In The Loop 环路光纤FMC Fixed Mobile Convergence 固定通信与移动通信融合FPBN Future Packet-Based Networks 未来分组网FPLMTS Future Public Land Mobile Telecommunication System 未来公众陆地移动通信系统FR Frame Relay 帧中继FSAN Full Service Access Networks 全业务接入网FSTP Fast Spanning Tree Protocol 快速生成树协议FTP File Transfer Protocol 文件传输协议FTTB Fiber To The Building 光纤到大楼FTTC Fiber To The Cabinet 光纤到接线柜FTTC Fiber To The Curb 光纤到路边FTTH Fiber To The Home 光纤到户FTTO Fiber To The Office 光纤到办公室GGE Gigabit Ethernet 千兆比特以太网GEM GPON Encapsulation Method GPON封装方法GEPON Gigabit Ethernet Passive Optical Network 千兆比特以太网无源光网络GERAN GSM/EDGE Radio Access Network GSM/EDGE无线接入网GFP Generic Framing 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Signaling Gateway 信令网关SGCP Simple Gateway Control Protocol 简单网关控制协议SGF Signaling Gateway Function 信令网关功能SGSN Serving GPRS Supporting Node GPRS服务支持节点SIB Service Independent Building Blocks 基于与业务无关的模块SIGTRAN Signaling Transport 信令传输协议SIIT Stateless IP/ICMP Translation 无状态IP/ICMP转换SIM Subscriber Identity Module 用户身份模块SIP Session Initiation Protocol 会话发起协议SIP-I SIP with Encapsulated ISUP 带有ISUP消息封装的SIP协议SIP-S SIP Servlet 应用于伺服系统的会话发起协议SIP-T Session Initiation Protocol for Telephone 应用于电话网的SIP协议SLA Service Level Agreement 服务等级协议SLF Subscriber Location Function 签约用户定位功能SLR Subscriber Location Router 用户位置路由器SMAP Service Management Access Point 业务管理接入点SMP Service Management Point 业务管理点SMS Service Management System 业务管理系统SMS Short Message Service 短消息业务SMTP Simple Mail Transfer Protocol 简单邮件传输协议SN Serving Node 服务节点SNC Sub-Network Connection 子网络连接SNCP Sub-Network Connection Protection 子网连接保护SNI Service Node Interface 业务节点接口SNMP Simple Network Management Protocol 简单网络管理协议SNR Signal to Noise Ratio 信噪比SOHO Small Office/Home Office 小办公室/家庭办公室SONET Synchronous Optical Network 光同步网SP Signaling Point 信令点SPAN Services and Protocols for Advanced Networks 高级网络的服务与协议SPC Soft Permanent Connection 软永久连接SPD Security Policy Database 安全策略数据库SPI Security Parameter Index 安全参数索引SPIRITS Service in the PSTN IN Requesting InTernet Service PSTN/IN请求因特网服务业务SPX Sequential Packet eXchange 序列分组交换SQ Sequence Indicator 序列指示器SRBP Signaling Radio Burst Protocol 信令无线突发协议SRF Specialized Resource Function 专用资源功能SRP Spatial Reuse Protocol 空间重用协议SS7 Signaling System 7 7号信令网SSF Service Switching Function 业务交换功能SSP Service Switching Point 业务交换点STC Space-Time Coding 空时编码STC Signaling Transport Converter 信令传输转换器STM Synchronous Transfer Mode 同步传输模式STM-N Synchronous Transport Module Level N 第N级同步传输模块STP Signaling Transfer Point 信令转接点STP Spanning Tree Protocol 生成树协议STS Synchronous Transport Signal 同步传输信号SUA SCCP User Adaptation Layer SCCP用户适配层TT-SG Transport Signaling Gateway 传输信令网关T2P Traffic-to-Pilot 业务到导航信道TACS Total Access Communication System 全接入通信系统TC Transmission Convergence 传输汇聚TCA Terminal Control Area 终端控制区TCAP Transaction Capabilities Application Part 事物处理应用部分TCP Transmission Control Protocol 传输控制协议TD-CDMA Time Division-Code Division Multiple Access 时分码分多址TD-SCDMA Time Division-Synchronization Code Division Multiple Access 时分同步码分多址TDD Time Division Duplex 时分双工TDM Time Division Multiplexing 时分复用TDMA Time Division Multiple Access 时分多址TE Terminal Equipment 终端设备TE Traffic Engineering 流量工程TeS Telephony Server 电话服务器TFTP Trivial File Transfer Protocol 普通文件传输协议TG Trunk Gateway 中继网关TIA Telecommunication Industry Association 电信工业协会TIPHON Telecommunications and Internet Protocol Harmonization Over Networks 透过网络的电信及网际网路通信协议TISPAN Telecommunications and Internet Converged Services and Protocols for Advanced Networking 电信和互联网融合业务及高级网络协议组TLS Transparent Local Area Network Service 透明局域网业务TML Telephone Markup Langue 电信标记语言TMN Telecommunications Management Network 电信管理网TMSC Trunk Mobile Switching Center 汇接移动交换中心TOS Type Of Service 服务类型TRAU Transcoder and Rate Adapter Unit 码型变换/速率适配器TRIP Telephony Routing over IP IP电话路由TSM TD-SCDMA System for Mobile TD-SCDMA移动通信系统TSN Trunk Service Node 中继服务节点TSP Terminal Supporting Processor 终端支持处理机TTC Telecommunication Technology Committee 日本情报通信技术委员会TTA Telecommunication Technology Association 韩国电气通信技术协会TTI Transmission Time Interval 传输时间间隔TTS Text To Speech 文本转换为语音TU Transaction User 事务用户TUP Telephone User Part 电话用户部分UUAS Universal Audio Server 通用语音服务器UBR Unspecified Bit Rate 未指定比特率UCF Unregistration ConFirm 注销确认UDP User Datagram Protocol 用户数据报协议UE User Equipment 用户设备UICC Universal Integrated Circuit Card 通用集成电路卡ULH Ultra Long Haul 超长距离传输UMS User Mobility Service 用户移动服务UMS Unified Messaging Service 统一消息业务UMTS Universal Mobile Telecommunications System 通用移动通信系统UNI User Network Interface 用户网络接口UPC Usage Parameter Control 使用参数控制UPT Universal Personal Telecommunication 通用个人通信URI Uniform Resource Identifier 统一资源标识URL Uniform Resource Locator 统一资源定位器URJ Unregistration ReJect 注销拒绝URQ Unregistration ReQuest 注销请求UBR Unspecified Bit Rate 未指定比特率USB Universal Serial Bus 通用串行总线USP Universal Signaling Point 通用信令网关UTRAN Universal Terrestrial Radio Access Network 通用地面无线接入网络VV5UA V5.2 User Adaptation Layer V5.2用户适配层VAD Voice Activity Detection 语音激活检测VC Virtual Container 虚容器VC Virtual Channel 虚拟通道VCG Virtual Concatenation Group 虚级联组VCI Virtual Channel Identifier 虚拟通道标识VCSEL Vertical Cavity Surface Emitting Lasers 垂直腔面发射激光器VDSL Very High Speed Digital Subscriber Line 甚高速数字用户线VHE Virtual Home Environment 虚拟归属环境VLAN Virtual LAN 虚拟局域网VLR Visited Location Register 拜访位置寄存器VoD Video on Demand 视频点播VoDSL Voice over DSL 在数字用户线上传输语音VoIP Voice over IP IP话音VP Virtual Path 虚拟路径VPG Virtual Path Group 虚拟路径组VPHS Virtual Private Hub Service 虚拟专用Hub业务VPI Virtual Path Identifier 虚拟路径标识VPLS Virtual Private LAN Service 虚拟专用局域网业务。

Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报收稿日期：2020-07-21基金项目：上海市自然科学基金面上项目（20ZR1469400）；上海市兽医生物技术重点实验室开放基金（shklab202007）；国家自然科学基金面上项目（32072868）作者简介：杨晓凤，女，硕士研究生，预防兽医学专业通信作者：谭磊，E-mail：***************.cn 2023,31(1):9-15·研究论文·新城疫病毒利用网格蛋白和小窝蛋白受体途径感染鸡骨髓来源树突状细胞摘 要：新城疫病毒（NDV ）可以通过多种内吞途径感染细胞，且其入胞途径可能具有细胞类型特异性。

本研究以鸡骨髓源树突状细胞（chBM-DCs ）为模型，探究NDV 入侵该细胞的内吞途径。

首先利用CPZ （CME 抑制剂）和Dynasore （dynamin1/2抑制剂）预处理DCs ，然后感染NDV 强毒株Herts/33，通过Western blot 和IFA 检测NDV NP 的胞内表达水平变化。

药物预处理组NP 的表达水平均显著降低，表明NDV 能够通过网格蛋白介导的内吞途径进入DCs 。

进一步利用甲基-β-环糊精（M βCD ）预处理DCs ，然后感染Herts/33，通过Western blot 和IFA 检测NDV NP 的胞内表达水平变化。

结果显示药物预处理组NP 的表达水平显著降低，表明NDV 能够通过小窝蛋白介导的内吞途径进入DCs 。

本研究为全面阐明NDV 感染宿主细胞的途径提供了理论基础。

关键词：新城疫病毒；鸡骨髓源树突状细胞；网格蛋白介导内吞；小窝蛋白介导内吞中图分类号：S852.4文献标志码：A文章编号：1674-6422（2023）01-0009-07Infection of Chicken Bone Marrow-Derived Dendritic Cells with Newcastle DiseaseVirus through Clathrin and Caveolin Receptor PathwaysYANG Xiaofeng 1, QIU Xusheng 1, SUN Yingjie 1, SONG Cuiping 1, MENG Chunchun 1, LIU Weiwei 1,LIAO Ying 1, DING Chan 1, TAN Lei 1,2(Shanghai Veterinary Research Institute, CAAS, Shanghai 200241, China)杨晓凤1，仇旭升1，孙英杰1，宋翠萍1，孟春春1，刘炜玮1，廖 瑛1,丁 铲1，谭 磊1,2（1.中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241；2.上海市兽医生物技术重点实验室，上海200240）Abstract: Newcastle disease virus (NDV) can infect cells through various endocytosis pathways and its entry may be cell type specifi c. In this study, chicken bone marrow-derived dendritic cells (chBM-DCs) were used as models to explore the endocytosis pathways of NDV entering DCs. Firstly, DCs were pre-treated with CPZ (CME inhibitor) and Dynasore (dynamin1/2 inhibitor), respectively and then infected with the NDV virulent strain Herts/33. The intracellular expression levels of NDV NP were examined by Western blot and IFA. The expression levels of NP in the drug pretreatment groups were signifi cantly reduced, indicating that NDV could enter DCs through clathrin-mediated endocytosis. The DCs were further pre-treated with methyl-β-cyclodextrin (MβCD) and then infected with Herts/33. The intracellular expression levels of NDV NP were detected by Western blot and IFA. The results showed that the expression levels of NP in the drug pretreatment groups were significantly reduced, indicating that NDV could enter DCs through caveolin-mediated endocytosis. This study provided experimental data for clarifying the pathways in which NDV infected host cells.Key words: Newcastle disease virus; chicken bone marrow-derived dendritic cells; clathrin-mediated endocytosis; caveolin-mediated endocytosis· 10 ·中国动物传染病学报2023年2月网格蛋白介导的内吞途径（clathrin-mediated endocytosis, CME）利用网格蛋白包被的囊泡将物质从细胞表面摄取到细胞中[1]。

树突状细胞的培养与鉴定【摘要】目的研究利用磁珠分离方法获取单核细胞，用细胞因子gm-csf和il-4联合诱导使之分化为树突状细胞（dendritic cells, dcs）的方法，并对培养的细胞从形态，表型，功能等三个方面进行鉴定，从而探索出一套较成熟的dcs的培养方法。

方法通过密度梯度离心的方法获取白细胞悬液中的白膜层，然后通过磁珠分离的方法，收集高纯度的单核细胞。

在细胞因子gm-csf和il-4的刺激下，将细胞培养至7天左右，收集细胞进行流式分析，并进行淋巴细胞增殖实验，鉴定细胞是否为树突状细胞。

结果在倒置显微镜下观察，细胞培养第7天，大部分细胞呈单个悬浮，并有明显的毛刺样突起。

流式分析发现细胞高表达dc表面特异性抗原cd80，cd86，hla-dr，并且不再表达单核细胞表面抗原cd14，细胞纯度约为93.12%。

淋巴细胞增殖实验显示dcs可明显刺激初始型淋巴细胞增殖。

结论通过磁珠分离的方法获得单核细胞并利用gm-csf和il-4细胞因子诱导可成功培养出纯度高的树突状细胞。

【关键词】树突状细胞；磁珠；流式molecular and functional characteristics of dendritic cells differentiated from highly purified blood monocytes. 【abstract】 objectives：to develop a simple and efficient method to generate human dendritic cells (dcs) from highly purified cd14 + monocytes from human peripheral blood. methods：monocytes were purified by negatively sortingperipheral blood mononuclear cells (pbmc) with dynal magnetic negative isolation kit. monocytes were then differentiated into immature dendritic cells stimulated by the combination of interleukin-4 (il-4) and granulocyte-macrophagecolony-stimulating factors (gm-csf) for 7days. cells were analyzed for phenotype by flow cytometry。

中国肿瘤生物治疗杂志　htt p://www .bi other .orgChin J Cancer B i other,Aug .2009,Vol .16,No .4DO I:10.3872/j .iss n.10072385X .2009.04.001・述评・MD SCs 与肿瘤免疫逃逸刘秋燕,曹雪涛(第二军医大学免疫学研究所,医学免疫学国家重点实验室,上海　200433) 刘秋燕,博士,副教授,中国免疫学会和中国抗癌协会会员。

1988年毕业于河北医科大学预防医学系(本科),2001年获免疫学硕士学位,2004年获免疫学博士学位,2006年完成浙江大学免疫学博士后研究。

2007年1月通过人才引进至第二军医大学免疫学研究所工作,任肿瘤免疫实验室负责人。

主要从事肿瘤免疫逃逸及其相关机制的研究,以第一作者在国内外刊物发表论文20多篇,其中SC I 期刊论文10篇,包括J I mm unol 2篇、J M ol M ed 1篇、M ol I mm unol 2篇、BB RC 3篇等。

作为课题负责人承担了多项国家级研究课题,并参与多项国家级、省部级科研项目,参加编写教材3部。

E 2mail:lqy1969@yahoo .com.cn 曹雪涛,博士,教授,博士生导师,中国工程院院士。

现任第二军医大学副校长和免疫学研究所所长,医学免疫学国家重点实验室主任,中国免疫学会理事长,国家重点基础研究发展计划(973)项目首席科学家,兼任《中国肿瘤生物治疗杂志》主编以及Journa l of I mm u 2nology,Jou rnal of B iological Che m istry 、European Journal of I mm unology 、Gene Therapy 、Cancer I mm unology I mm unotherapy 、Cancer S cience 等SC I 收录杂志编委。

1 小鼠腹腔巨噬细胞雌性小鼠脊椎脱臼处死, 75% 酒精消毒3 min; 用预冷的Hanks液（不含钙镁离子）洗出腹腔细胞, 1 000 r/m in 离心5min , 调整细胞浓度为每毫升1×106个, 置细胞瓶中培养4 h, 弃去培养液,，留下贴壁细胞，即为巨噬细胞，PBS洗涤两次, 加入含10%小牛血清的1640培养基。

参考文献【1】The immune response of peritoneal macrophages due to exposure to inorganic lead in the house mouse Mus musculus【2】A study on the immune receptors for polysaccharides from the roots of Astragalus membranaceus, a Chinese medicinal herb【3】海洋真菌多糖YCP结合的免疫细胞类型的体外筛选2 小鼠脾巨噬细胞通过研磨法获取脾细胞, 将脾细胞重悬在1mL细胞培养基内，小心加于2mL的淋巴细胞分层液面上, 2000r/min密度梯度离心20min, 小心吸出第二层细胞, 放入含Hanks液15mL 的试管中充分混匀后, 离心弃上清, 加入含10%小牛血清的1640 培养基6mL, 调整细胞浓度为每毫升5×106个, 37℃、5% CO2培养瓶中培养2h, 洗去非贴壁细胞, 获得纯化的脾巨噬细胞。

主要试剂：淋巴细胞分层液参考文献【3】海洋真菌多糖YCP结合的免疫细胞类型的体外筛选【4】Effects of repeated social stress on leukocyte distribution in bone marrow, peripheral blood and spleen【5】Differential response of splenic monocytes and DC from cattle to microbial stimulation with Mycobacterium bovis BCG and Babesia bovis merozoites【6】Flow cytometric identification of murine neutrophils and monocytes【7】CHARACTERIZATION AND REGULATION OF RB6-8C5 ANTIGEN EXPRESSION ON MURINE BONE MARROW CELLS3脾B、T细胞研磨法获取脾细胞，红细胞裂解液去除红细胞。

IFN-DC分化相关信号通路初探中文摘要IFN-DC分化相关信号通路初探中文摘要目的：研究JAK-STAT信号转导通路在IFN-α促进及加速单核细胞分化产生高度活化的、部分成熟的DC（IFN-DC）发生发展过程中所起的作用。

方法：采集正常供体动员的外周造血干细胞（G-PBSC），Ficoll法分离获得单个核细胞，采用磁珠分离获得CD14+单核细胞，根据培养条件的不同分为三组，分别为CD14+单核细胞(对照组),CD14+单核细胞+800U/ml GM-CSF(GM-CSF组)和CD14+单核细胞+1000U/ml IFN-α2b+800U/ml GM-CSF(IFN-α2b+GM-CSF组)。

进行如下实验：1.IFN-α2b+GM-CSF组和GM-CSF组分别于加入细胞因子0min、10min、30min、1h、2h、4h提取总蛋白，通过Western blot实验，观察两组在不同时间点下相关信号蛋白（JAK1,p-JAK1,STAT1及p-STAT1）的表达情况；并检测IFN-α2b+GM-CSF组和GM-CSF组分别加入JAK-STAT信号通路阻断剂（AG490）后相关信号蛋白的表达高峰是否减弱；2.以CD14+单核细胞CD80、CD86及CD83的表达水平作为基线水平，分别检测IFN-α2b+GM-CSF组和GM-CSF组各培养三天后上述CD分子的表达水平，并检测在以上两组分别加入AG490各培养三天后上述CD分子的表达水平。

结果：1.IFN-α2b+GM-CSF组培养三天后的IFN-DC表达DC较为特征性标志，包括CD11c、CD86、CD80、HLA-DR及CD209；CD83为DC的成熟标志之一，在IFN-DC上部分表达；同时在浆细胞样树突状细胞（pDC）高表达的CD123，在IFN-DC 亦高表达；培养三天后的细胞形态上可见突起。

2.Western blot检测IFN-α2b+GM-CSF 组在不同时间点相关蛋白表达显示：JAK1和STAT1磷酸化水平在30min表达达到高峰，后逐渐减弱。