银杏叶黄酮提取工艺研究

银杏黄酮提取工艺流程

《银杏黄酮提取工艺流程》

银杏黄酮是一种重要的天然植物提取物，具有多种药用价值，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等功效。因此，银杏黄酮的提取工艺流程对于其药用价值的发挥至关重要。

银杏黄酮主要存在于银杏叶和种子中，而且含量较高。因此，提取银杏黄酮的工艺流程主要分为以下几个步骤：

1. 原料准备：首先要对银杏叶或种子进行处理，如干燥、研磨等，以便提高提取效率。

2. 溶剂提取：将经过处理的银杏叶或种子与适量的溶剂（如乙醇、丙酮等）一起放入提取设备中，进行浸蚀提取。

3. 混合提取：将提取所得的浸蚀液进行混合提取，以增加提取效率。

4. 浓缩蒸发：将混合提取所得的液体进行浓缩蒸发，使溶剂蒸发掉，得到含有银杏黄酮的浓缩液。

5. 结晶沉淀：将浓缩液进行结晶沉淀，得到纯净的银杏黄酮提取物。

6. 产品干燥：最后将提取所得的银杏黄酮进行干燥处理，得到成品。

以上就是提取银杏黄酮的主要工艺流程。通过科学、合理的工艺流程，可以提高银杏黄酮的提取效率和纯度，从而实现其药用价值的充分发挥。同时，也需要注意在整个提取过程中，要严格控制各项工艺参数，以确保产品的质量和安全性。

银杏叶中黄酮类化合物提取的研究

黄可婧

收稿日期：2014-10-08（天津市药品检验所，天津300070）摘要银杏叶中黄酮类化合物的含量较高，近年来黄酮类化合物的提取方法主要有：有机溶剂提取法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法以及酶提取法等。本文就银杏叶中黄酮类化合物提取工艺进行了综述。关键词银杏叶，黄酮类化合物，提取方法中图分类号：Ｒ284．2文献标识码：A文章编号：1006-5687（2015）02-0064-03银杏树为我国古老的树种，其种子、根、叶均可入药。地球生命历经千亿年的变动，只有银杏依然保持其原有的面貌，因此具有“活化石”的美称。银杏叶为银杏科植物银杏GinkgobilobaL的干燥叶，味甘、苦、涩，性平，具有活血化瘀、通经止痛、敛肺平喘、化浊降脂等功效，用于瘀血阻络、胸痹心痛、中风偏瘫、肺虚咳喘和高脂血症［1］。黄酮类化合物是普遍存在于自然界植物中各个部位的一类化合物，其中植物的叶、茎、根、花、果、以及皮中广泛存在。黄酮类化合物具有明显的生理及药理活性，不仅具有消炎、抗菌、抗突变、清热解毒、镇静、降压、利尿等作用，还具有抗氧化、抑制脂肪酶、防癌、抗癌等功效［2］。随着对黄酮类化合物的不断深入研究，黄酮类化合物的提取技术水平也有了进一步的发展。近年来黄酮类化合物的提取方法主要包括有机溶剂提取法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法以及酶提取法等［3］。银杏叶中黄酮类化合物的含量较高，可以达到5．19%。迄今已从银杏叶提取物中分离的黄酮类化合物，按照其分子结构的不同，可分为三羟基黄酮醇及其苷类、双黄酮类和儿茶素类化合物［4］。银杏叶提取物具有改善心脑血管循环、抗过敏、抗病毒、抗癌、抗衰老及降低胆固醇等作用，而且银杏叶提取物毒副作用很小，食用安全。银杏叶中所含的黄酮类化合物具有显著的抗病毒、抗氧化、增强免疫力、防治心血管疾病等作用。1有机溶剂提取法有机溶剂提取法是近年来国内外用于提取银杏叶中黄酮应用最为普遍的一种方法。一般可用甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮或者一些极性较大的混合溶液，如甲醇－水（1∶1）溶液。李宁等［5］在510nm波长处，以银杏叶总黄酮提取液的吸光度为参考指标，对总黄酮提取工艺的正交试验进行研究，提取2次，每次1h，提取银杏叶15．6g，稳定性实验得出总黄酮至少在24h内稳定。张林涛等［6］通过对提取时间、提取温度、微波功率、微波时间、液料比、解析剂比6个因素进行正交实验，以硼砂－氢氧化钙－水为溶剂提取银杏叶黄酮，浸提温度90℃，液料比20∶1硼砂含量1%，硼砂－氢氧化钙溶液pH值7．42，浸提时间55．3min，提取率为85．57%。王心等［7］在360nm波长处，以银杏叶总黄酮峰面积为参考指标，通过正交设计法，考查乙醇浓度、提取时间、提取次数和料液比4个因素对银杏叶总黄酮提取工艺的影响，得出银杏叶总黄酮的最佳提取条件是以80%乙醇为提取溶剂，料液比为1∶50，提取1次，每次提取1h。通过稳定性考查，确定总黄酮至少在24h内稳定。李红军［8］在提取银杏叶中黄酮时，选取以硼砂－氢氧化钙－水为溶剂，得出影响黄酮提取因素顺序为：提取温度＞液料比＞提取时间＞浸提液pH，最佳提取工艺组合为料液比1∶30，浸提液pH为8，提取温度为80℃，提取时间为3h。邵京等［9］通过单因素试验和正交试验，得出银杏叶中黄酮的最佳提取溶剂为50%乙醇，料液比1∶20，提取温度为90℃，提取时间为6h。尹丽等［10］以乙醇浓度、浸提度、提取时间和料液比4种因素，每个因素设立3个水平进行正交试验设计得出，银杏叶黄酮最佳的提取条件是：浸提温度80℃，浸提1h，乙醇浓度75%，料液比1∶15，得率平均为8．86%。杨小青等［11］采用不同的乙醇浓度、浸提次数、浸提温度等因素考查对银杏叶黄酮提取效果的影响，其中乙醇浓度和温度的影响显著，得出用浓度为70%乙醇溶液于70℃条件下提取3次，每次4h是最佳浸提条件，银杏叶总黄酮提取率最高。李含薇等［12］对溶剂乙醇不同浓度在相同抽提时间下，萃取总黄酮含量进行对比，随着乙醇浓度的降低，银杏叶提取物量、提取率、总黄酮含量也逐渐增高，在同样时间条件下，浸提溶剂浓度选择20%的乙醇最为适宜。46天津药学TianjinPharmacy2015年第27卷第2期2超声波提取法超声波提取法是利用超声波具有空化作用，在超声波的作用下，液体内部产生强大的微射流和冲击波，加快物质分子的运动速度和频率，增强溶剂的穿透力，从而提高药物的溶出效率，减短提取时间的提取方法。动植物细胞组织会被超声波的冲击流所产生一种力剪切后使植物细胞破裂，并释放出内含物质。超声技术应用于天然活性产物的提取，超声波提取法具有很多特点，包括节约能耗、提取率高、快速的传质速度、强溶解力、低温操作、不破坏有效成分等。刘晶芝等［13］进行了超声技术与水浸提取相结合的试验方法，结果表明，超声提取的最佳工艺条件为超声频率40kHz，提取温度35℃，超声时间55min，料液比1∶100，静置3h，提取率为81．9%。杨荣华等［14］采用醇提取法提取银杏叶中黄酮类化合物，与此同时以超声技术加以辅助，结果表明，提取率比传统溶剂法有了显著提高。豁银强等［15］采用超声提取法提取银杏叶中总黄酮，利用正交试验得出银杏叶中黄酮的最佳提取工艺为：乙醇体积分数70%，超声提取时间为50min，液料比为30∶1。3超临界流体萃取法超临界流体萃取法是一项新技术，其利用超临界流体替代常规有机溶剂来对有效成分进行萃取和分离。CO2是应用最普遍的萃取剂，当超临界状态（控制条件超过临界压力和温度）下，CO2的状态变得极其特殊，其性质介于液体和气体之间（密度与液体接近，扩散系数和黏度与气体接近），此时传质能力和溶解性能较好。超临界二氧化碳萃取技术不仅节能、省时，而且这种低温、高压的条件尤为适宜热不稳定和易氧化物质的提取。佳红等［16］采用SFE－HPLC测定银杏叶粗提物中银杏黄酮的含量，得出超临界流体萃取的最佳条件：温度为60℃，压力为41364Pa，静态萃取时间为4min，动态萃取体积为4ml，改性剂加入0．2ml的乙醇。张玉祥等［17］采用超临界二氧化碳萃取法提取银杏叶中成分，得到的银杏叶中黄酮含量可达27%，高于国际公认的银杏叶标准提取物的质量标准。但是超临界流体萃取技术存在一定的局限性，如投资费用较高，存在安全隐患等，目前较难以推广。4微波提取法微波提取法是利用分子或离子在微波场中的导电效应直接对物质进行加热，从而提取植物细胞内耐热物质的新工艺。微波提取技术，又称微波辅助萃取法或微波萃取法，具有提取时间短、能保持分析对象本身的化合状态、仪器简单、应用范围广、节省试剂、提取率高、产品纯度高、污染小、耗能少等优点，被广泛运用于实验室中［18］。段蕊等［19］运用微波对银杏叶进行处理来萃取黄酮，实验表明，微波处理能提高产率18．8%，纸层析表明，微波温度没有改变黄酮类物质性质。陈金娥等［20］利用微波法提取银杏叶中黄酮，采用正交试验和单因素实验得出提取的最佳条件为功率800W，温度55℃，时间60min，液固质量比为70∶1，提取率可达3．578%。毛龙火等［21］用有机溶剂法，微波加以辅助提取银杏叶中总黄酮，研究微波辅助下各因素对银杏叶总黄酮提取效率的影响，以银杏叶总黄酮提取液在511．2nm波长处的吸光度为参考指标，通过总黄酮提取工艺的正交试验研究，确定了从银杏叶中提取黄酮的最佳条件为：乙醇浓度90%、提取时间3min、料液比1∶25，此时黄酮得率为1．52%。微波提取的局限性是其只适用于生物细胞内耐热物质的分离提取，否则细胞很难吸收充足的微波来将自身击破，产物也很难快速释放出来，且要求被处理的物料具有很好的吸水性。而银杏叶黄酮是热稳定的，理论上适用。5酶提取法酶反应具有高度专一性，可以水解或降解细胞壁的组成成分来破坏细胞壁，酶提取法就是利用这一原理来提高有效成分的提取率。利用酶解来增强提取的传质过程是酶解法的实质。酶解法的提取条件适合热敏性成分的提取，且较其他方法更为温和，具有高效性［22］。王敏等［23］通过用纤维素酶辅助银杏叶黄酮成分的提取，得出提取率较传统的醇提取法提高近1/3。王建伟等［24］首先采用复合酶对银杏叶进行预处理，再用转化酶把黄酮苷转化成生物活性较强的苷元类物质，使银杏叶提取物（GBE）的生理活性和苷元黄酮的含量有了显著提高。石会军等［25］采用正交试验法，在单因素试验基础上，以银杏叶总黄酮提取率为指标，考查了料液比、浸提液pH、酶解温度和酶解次数等因素对银杏叶总黄酮提取率的影响，得出纤维素酶提取银杏叶总黄酮的最佳工艺：料液比1∶20、浸提液pH5．2、酶解温度80℃、酶解时间60min、酶解4次、纤维素酶质量浓度0．9%，银杏叶总黄酮的提取率可达3．452%。近年来，国内外对银杏的使用不断广泛和深入，开发生产出各种银杏药品、食品、保健品、化妆品等产品，取得了巨大的经济效益和社会效益。与此同时，大量极富发展的新技术应用于银杏叶黄酮的提取研究，各项技术较传统的提取工艺各有优势，但仍存在尚未解决的问题，在目前工业上的使用并不普遍，若想要实现大规模的应用，还需要不断地进行优化和改进。参考文献1中国药典［S］．一部．2010：2962肖诗明，张忠，李勇，等．苦荞麦麸皮中黄酮的提取工艺条件研究56天津药学TianjinPharmacy2015年第27卷第2期［J］．食品科学，2006，27（1）：156－1583陆敏，张文娜．银杏叶中黄酮类化合物的提取、纯化及测定方法的研究进展［J］．理化检验－化学分册，2012，48（5）：6164何健．银杏叶的研究进展［J］．中国药房，2011，22（15）：14345李宁，李楚．银杏叶总黄酮提取工艺的正交设计研究［J］．山西农业大学学报（自然科学版），2010，30（1）：756张林涛，张锋，王志祥，等．银杏叶黄酮提取工艺的优化［J］．中国药物警戒，2011，8（3）：1477王心，李峰．银杏叶总黄酮提取工艺研究［J］．山东中医药大学学报，2012，36（5）：4498李红军．银杏叶中黄酮类化合物的提取及其体外抗氧化活性研究［J］．中草药，2013，44（5）：156－1599邵京，李百健．银杏叶总黄酮的提取分离工艺研究［J］．化学世界，2013，5（8）：46010尹丽，郭小慧．银杏叶总黄酮正交提取工艺优化及其抗氧化能力与抑制亚硝化反应研究［J］．中国实验方剂学杂志，2013，19（18）：260－26211杨小青，王新，李瑞瑞，等．银杏叶中有效成分的提取及功能探究［J］．饮料工业，2014，17（5）：52－5512李含薇，李咏梅，陈曦，等．溶剂萃取银杏叶总黄酮的探讨［J］．吉林医药学院学报，2014．35（1）：1213刘晶芝，赵永光，冯玉珠，等．超声法提取银杏叶黄酮类化合物的工艺［J］．安徽农业科学，2007，35（14）：4105－410614杨荣华，任京东，屈云霞，等．超声波提取银杏叶中黄酮类化合物的研究［J］．中国医药导报，2010，7（20）：25－2715豁银强，尹杰，陈雪，等．银杏叶黄酮的超声波提取及其抗菌研究［J］．食品工业，2012，33（5）：47－4916佳红，柳正良．SFE－HPLC测定银杏叶粗提物中银杏黄酮的含量［J］．中草药，2000，31（2）：101－10317张玉祥，邱蔚．CO2超临界萃取银杏叶有效成分的工艺研究［J］．中国中医药科技，2006，13（4）：255－25618王俊儒．天然产物提取分离与鉴定技术［M］．杨凌：西北农林科技大学出版社，2005：14－2219段蕊．王蓓，时海峡，等．微波法提取银杏叶黄酮最佳工艺的研究［J］．淮海工学院学报，2001，10（3）：46－4920陈金娥．匡强民．正交优化－微波辅助提取银杏叶黄酮［J］．光谱实验室，2011，28（2）：623－62621毛龙火．王丽丽，熊英，等．微波辅助法提取银杏叶总黄酮的研究［J］．九江学院学报（自然科学版），2014，1：78－8122韩伟．马婉婉，骆开荣，等．酶法提取技术及其应用进展［J］．机电信息，2010，17：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银杏叶提取黄酮类物质工艺

银杏叶中的黄酮类物质是主要有效成分之一，银杏黄酮有强烈的清除细胞内自由基的作用，能降低细胞的氧化代谢，对脑和四肢动脉血流失调引起的一系列心脑血管疾病有明显和独特的疗效。银杏叶中的黄酮类物质含量占干叶的0.8%～3.5%,随品种、地理分布和季节变化而异。

传统的提取工艺比较成熟，工艺路线如下：

原料预处理—浸提—过滤—抽滤—浓缩—沉降离心—色谱分离—浓缩—干燥—银杏叶提取物成品

改进后的提取工艺过程如下：

原料—预处理—浸提—过滤—膜过滤—色谱分离—膜浓缩—减压浓缩—干燥—银杏叶提取物成品

改进后的提取工艺过程描述：

原料：以采摘的银杏叶为原料。

预处理：将原料放入烘箱于60~65℃温度下烘干，然后用高速组织捣拌机粉碎。

浸提、过滤：以1:5(W/V)加入纯净水，煮沸4小时，经纱布过滤，滤渣再同法提取二次，三次浸提液直接经陶瓷膜过滤后合并。

膜过滤：在高温下用直接陶瓷膜系统逐遍过滤处理，并用纯净水采用水赶料法洗滤浓缩液，收集澄清透明滤液，弃去浓缩液。

色谱分离：按树脂体积的4倍量取离心液过聚酰胺柱，然后用蒸馏水过柱洗涤，至流出液清亮为止，再加入与树脂等体积的25%乙醇洗涤，流干后用80%乙醇洗脱，收集颜色较深部分，因洗脱液浓度较低，可进一步用卷式膜系统浓缩。

膜浓缩、减压浓缩、干燥：洗脱液先经膜浓缩，浓缩3-4倍后再进行减压浓缩，真空低温干燥，即得到淡黄色的银杏叶提取物成品。

采用膜分离技术和膜浓缩技术与传统分离浓缩技术相结合，可大大降低生产成本，提高收率和品质。 精品整理

银杏叶黄酮的生物合成途径研究

银杏叶黄酮是一种重要的植物化学成分，具有多种药理活性。如今，人们对银杏叶黄酮的认知越来越深入，其中最重要的是了解其生物合成途径，这有助于生产出更为优质的银杏叶黄酮产品。

一、银杏叶黄酮的基本介绍

银杏叶黄酮是一种黄色的植物次生代谢产物，广泛存在于许多植物体中，多为酚类或黄酮类化合物。而银杏叶黄酮，是银杏树的主要活性成分，可以提高人体免疫力，促进血液循环、改善脑血管功能、抗炎和氧化应激等。因此，银杏叶黄酮被广泛应用于医疗、保健和化妆品行业。

二、银杏叶黄酮的生物合成途径

银杏叶黄酮的生物合成途径是一个复杂的代谢网络，包括几个关键基因和调控因子。在银杏树体内，银杏叶黄酮的合成主要取决于银杏叶黄酮类物质的生物合成途径。银杏叶黄酮的生物合成途径研究不仅可以深入了解它的形成机制，而且可以为生产出更优质的银杏叶黄酮产品提供依据。

1. 芽九酮途径

芽九酮途径是银杏叶黄酮生物合成途径的核心，广泛存在于植物中。芽九酮途径的关键酶是芽丙烯醇合酶（GPPS）、静止芽丙烯醇合酶（FPPS）和芽九酮酸合酶（GGPS），它们参与了芽九酮的合成和分解过程。

2. 甲基茉莉酸途径

甲基茉莉酸途径也是银杏叶黄酮的主要生物合成途径之一。在这个途径中，甲基茉莉酸生成脱甲基茉莉酸，接着脱甲基茉莉酸生成苯丙酸，从而形成银杏叶黄酮。

3. 去氧赤藓糖途径 去氧赤藓糖途径是银杏叶黄酮生物合成的第三个途径。它的关键酶是4-羟丙基-3-甲基-2-联苯醚氧化酶（HMME），能够促进银杏叶黄酮的合成。

三、银杏叶黄酮的应用

银杏叶黄酮作为一种天然健康食品，具有多种应用价值。近年来，银杏叶黄酮的利用逐渐扩大，被广泛应用于保健食品、化妆品、医药等领域。在实际应用中，银杏叶黄酮还可以与其他活性物质结合，以提高其生物活性和药效。

1. 保健食品

银杏叶黄酮在保健品中应用较为广泛。它的生化特性决定了其能促使微血管扩张，增强血管的抵抗力、改善微循环和脑血流量。此外，银杏叶黄酮还能减少自由基的生成，增强免疫力，改善人体免疫功能。