温_光_盐对三角褐指藻紫外诱变株生长_总脂及脂肪酸的影响_叶丽

本科毕业设计（论文）题目：三角褐指藻户外高密度培养技术研究学院轻工与食品学院专业食品科学与工程（糖工程）学生姓名魏峰学生学号200930401131指导教师魏东教授提交日期2013年06月03日摘要三角褐指藻（Phaeodactytuum tricornutunm）是一种常用的海水经济硅藻，生长迅速，易于培养，富含丰富的多不饱和脂肪酸，特别是二十碳五烯酸（C20:5，EPA），是水产动物养殖的优质饵料。

目前，三角褐指藻的户外高密度培养技术仍处于研发阶段。

为探究不同条件（环境条件和营养盐）对三角褐指藻生长以及其脂肪酸组成和含量的影响，本研究用单一变量法分别对其培养条件进行对比优化实验。

主要结果如下：（1）选用不同盐度的培养基对三角褐指藻进行户外高密度培养，盐度设定为3个梯度，20‰、25‰、30‰。

结果表明，在盐度为20‰条件下，三角褐指藻的生长状况要优于其他两种盐度，其OD值最高为0.998、细胞密度最高为6.0⨯106个/mL、细胞干重最高为177.78mg/L。

对脂肪酸的测定结果表明，25‰盐度下三角褐指藻细胞的脂肪酸含量最高（124.95mg/g），20‰盐度与25‰盐度基本相同（123.12mg/g），而30‰盐度最低（105.67mg/g）。

（2）在20‰盐度下，通入CO2控制培养基的不同pH值，对三角褐指藻进行户外高密度培养。

pH值设定为3个梯度，7.5、8.0、8.5。

结果表明，控制pH8.0，三角褐指藻的生长状况要远好于其他两种pH值，其OD值最高为1.045、细胞密度最高为5.8⨯106个/mL、细胞干重最高为166.39mg/L。

对脂肪酸的测定结果表明，pH值为8.5时三角褐指藻细胞的脂肪酸含量最高（145.91mg/g），pH值为8.0的稍低（134.92mg/g），pH值7.5的脂肪酸含量最低（109.76mg/g）。

（3）在20‰盐度、pH 8.0条件下，分别选用碳酸氢铵和尿素作为氮源对三角褐指藻进行户外高密度培养。

第31卷第6期渔业科学进展Vol.31,N o.6 2010年12月PROGRESS IN FISH ERY SCIEN CES Dec.,2010温度影响三角褐指藻生长和脂肪酸组成的初步探讨潘瑾俞建中马晓磊潘克厚*(中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室应用微藻生物学研究室,青岛266003)摘要实验对指数生长期、指数生长末期、静止期和衰亡期的三角褐指藻脂肪酸进行研究,发现在指数生长末期二十碳五烯酸(Eico sapentaeno ic acid,EPA)含量最高。

实时定量PCR分析三角褐指藻$5脂肪酸去饱和酶基因在不同生长时期的表达变化水平差异显著,其中指数生长期表达量最高。

为了探讨温度对微藻生长和脂肪酸组成的影响,作者在不同温度下对三角褐指藻进行了培养,并测定其生长和脂肪酸组成。

结果表明,三角褐指藻的生长随着温度的升高到达指数生长末期所需时间缩短;不同温度下三角褐指藻的主要脂肪酸为C14B0、C16B0、C16B l$9、Cl8B l$9、C18B2$9,12、C20B5n3(EPA),总脂肪酸随着温度的升高依次呈现先升高后降低的趋势,在15e时EPA占总脂肪酸的百分含量达到最高值25171%。

关键词温度三角褐指藻生长脂肪酸EPA中图分类号S917.3文献识别码A文章编号1000-7075(2010)06-0090-05Effect of temperature on the growth and fatty acidcomposition of Phaeodacty lum tricornutumPA N Jin Y U Jian-zhong M A Xiao-lei PA N Ke-hou*(Labor ator y o f A pplied M icr oalgae Biolog y,Key Labor ator y o f Aquacult ur e,M inist ry o f Education,O cean U niv ersity of China,Q ingdao266003)ABSTRAC T A nalysis of fatty acids of Phaeodactylum tr icornutum at different g row t h pha-ses(the ex ponential,the end of exponential,the stationary,and t he degradation phase)indica-t ed that the percentage of eicosapent aenoic acid(EPA)in total fatty acids peaked at the end of the ex ponential grow t h phase.The gene expression pat tern of$5desaturase at different grow t h phases of P.tricornutum w as analyzed by rea-l time quant itat ive PCR.T he results show ed that it w as most hig hly expressed at t he ex ponential grow th phase.In order to study t he effect of temperature on the grow th and f att y acid composition in the microalg ae,P.tricor nutum w as cultured in batch at varied temperatures.It w as found that the algae g rew faster at higher t em-perat ures;the higher the temperature,t he g reater the grow th rate.The main fatty acids w ere C14B0,C16B0,C16B l$9,Cl8B l$9,C18B2$9,12,and C20B5n3(EPA).As t he tempera-t ure increased,the percent age of fat ty acids increased first and t hen decreased.M icroalg al cell国家科技支撑计划项目(2006BAD09A12)资助*通讯作者。

不同光照条件下氮浓度对衣藻生长及油脂积累的影响陈余佳;涂晓盟;王永强;王全喜;许丽丽【摘要】为探究莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)油脂含量的最佳条件,在不同的光照条件下检测了氮浓度对莱茵衣藻生物量及油脂含量的影响.结果表明:在氮添加和光照强度增加的梯度上,衣藻的油脂含量逐渐降低;光照强度和氮添加量对衣藻的油脂含量都有显著影响;控制光照强度和氮添加量后发现,当光照强度为30 μE·m-2·s-1,氮质量浓度为100 mg·mL-1时,衣藻油脂含量的质量分数为39.79％,叶绿素质量浓度为17.08 mg ·mL-1,最适宜衣藻油脂积累.【期刊名称】《上海师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2018(047)006【总页数】7页(P697-703)【关键词】氮浓度;莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii);油脂【作者】陈余佳;涂晓盟;王永强;王全喜;许丽丽【作者单位】上海师范大学生命科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234;上海师范大学生命科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234;上海师范大学生命科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234;上海师范大学生命科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234;上海师范大学生命科学学院植物种质资源开发协同创新中心,上海200234【正文语种】中文【中图分类】Q9450 引言传统化工能源在生产过程中会产生含硫及含氮污染物,新能源的开发利用已成为一项迫切的任务[1].在生产过程中,生物质能源通过光合作用将空气中的二氧化碳转化成有机物储存,其在燃烧时又把二氧化碳再次释放到大气中,因此被认为是一种新型的低排放、低污染的清洁能源[2].藻类可以通过光合作用将二氧化碳和水转化为氧气、碳水化合物或者脂质形式的大分子有机物[3].在某些胁迫条件下,如高光或营养缺乏,一些藻类可积累大量脂质,如三酰甘油酯等[4-5].由于微藻生长速度快,脂质含量高,又被认为是生产生物柴油的理想材料[4-5].目前发现产油量高的藻类主要包括金藻(Chrysophytes)、定鞭藻(Haptophytes)、双鞭毛虫(Dinophytes)、黄藻(Xanthophyceae)、红藻(Rhodophytes)和莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)等.它们在正常环境下生长时的平均油脂质量分数为干重的27.1%,处于环境胁迫条件下时则可上升到44.6%[4].相比其他藻类,莱茵衣藻(以下简称衣藻)是一种单细胞绿藻,其基因组已被完全测序,便于进行遗传研究,且生长快,培养成本低,在缺氮条件下能产生油脂,被认为是油脂生产研究的模式物种[6].与其他微藻类一样,衣藻在缺氮条件下的生长受到抑制,其生物量与油脂的积累及缺氮程度呈负相关[6-8],这导致其脂质生产效率及积累量均低于理论值.因此,探明衣藻油脂积累的最佳条件,是当前藻类产油的研究热点.本研究设置不同氮含量的培养基,在不同光照条件下进行衣藻产油诱导,并测定衣藻的生物量及油脂含量,以确定最适于衣藻油脂积累环境的氮含量.1 材料与方法1.1 实验材料与培养方法选用的衣藻藻种为衣藻(C.reinhardtii)cc849,购自美国杜克大学藻种库,其正常培养条件为:温度(25±1) ℃,水平摇床转速120 r·min-1,光照强度 0～200 μE·m-2·s-1,培养基为Tris-Acetate-Phosphate(TAP) (pH=7.0),液体培养每5 d继代1次,接种量为1%;固体TAP培养基含1%(质量分数)的琼脂,藻种的纯化和保存是以藻液或单克隆通过划线方法接种在TAP琼脂平板上,每二周继代1次[9].用相等物质的量的氯化钠替换正常TAP培养基内的氯化铵来配制缺氮培养基(TAP-N)以培养衣藻产油[9-10].1.2 衣藻的缺氮培养当培养瓶中的衣藻细胞生长到对数期(约2～3 d)时,在25℃温度下,以3500 r·min-1转速离心5 min,弃上清,使用TAP-N培养基缓慢洗涤藻细胞3次,以彻底除去氮[8].用TAP-N培养基洗涤过的衣藻,按照体积分数1%接种量加入到容积为500 mL 的培养瓶中.然后用TAP-N培养基及TAP培养基定容混合培养液400 mL,使得培养基中氮的质量浓度分别为100,200,300 mg·mL-1,轻轻晃动培养瓶中的样品,使藻类悬浮均匀.用TAP-N培养基及正常TAP培养基培养的衣藻样品作为实验对照组.最后将培养瓶分别置于光照强度为30,60,100,200 μE·m-2·s-1的光照条件下进行缺氮培养.1.3 衣藻生长的测定衣藻在750 nm处的吸光度(OD750)值与其细胞数正相关,因此可用分光光度计测定衣藻的OD750值来反映衣藻的生长情况[10].所用分光光度计为TU-1901双光束可见-紫外光分光光度计(北京普析通用有限责任公司).衣藻叶绿素含量的测定是用95%(体积分数)酒精萃取,测定OD665值(A665)和OD649值(A649),计算出衣藻中的叶绿素a(Chla)、叶绿素b(Chlb)及总叶绿素(Chl)的质量浓度(CChla,CChlb, CCh1)(单位为mg·L-1),计算公式[10]为:CChl=CChla+CChlb= 6.10×A665 + 20.04×A649,(1)并进行3次生物学重复,取平均值.1.4 衣藻油脂的测定采用文献[11]的方法检测衣藻中的油脂含量,并进行3次生物学重复.提取400 mL 藻细胞,以3500 r·min-1转速离心10 min,然后用新鲜的TAP-N培养基洗涤3次,之后将固体样品放入干燥的称量瓶中在温度80 ℃的烘箱中干燥24 h,直到质量不再减少为止.称取0.2 g的干细胞(质量记为W0),将其转移到离心管中,然后将5 mL 的氯仿和甲醇的混合物(体积比为1∶1)加入到离心管中.将离心管中的细胞和混合物在振荡器上震荡30 min,然后以5000 r·min-1转速离心10 min,取上清液.重复以上步骤直到萃取的上清液为无色.收集所有上清液(质量记为W1),并转移至质量已知的干燥旋转蒸发仪中蒸发至干燥(质量记为W2).总脂含量(质量分数)Ct= (W2-W1)/W0×100%.(2)1.5 数据分析采用独立样本t检验,分析实验组和对照组的油脂产量的差异,显著性水平设定为p<0.05.显著性差异的结果用*标注在相应的图中.同时本文作者采用双因素方差分析探索了光照、氮,以及光照和氮的交互作用对油脂产量的影响.所有数据处理过程均在SPSS 19.0中完成.2 结果与分析2.1 氮浓度对衣藻生长的影响以TAP-N培养基及正常TAP培养基作为实验对照组,对不同氮浓度胁迫下的衣藻在不同光照强度下的油脂产量进行检测,结果如图1所示.当光照强度为30 μE·m-2·s-1,培养基中氮的质量浓度分别为0 (TAP-N),100,200,300和375 mg·L-1(TAP培养基)时,衣藻的OD750值随着培养时间增加逐渐增长,至第7 d时达到最大值,分别为0.08,1.61,1.61,1.62和1.75,如图1(a)所示;衣藻的叶绿素质量浓度也随着培养时间增加逐渐增长,最初为0.35 mg·mL-1,至第7 d时达到最大值,分别为0.04,7.08,17.87,26.01,27.84 mg·mL-1,如图1(b)所示.相对于TAP培养基中的衣藻,缺氮条件下衣藻的生长受到了抑制,尤其在完全缺氮(TAP-N)条件下,本研究结果显示:在第7 d,衣藻的生长受到明显的抑制,OD750值比TAP条件下的降低了97.3%,叶绿素质量浓度降低了99.8%.当培养基中氮的质量浓度为100,200,300 mg·L-1时,所培养衣藻的OD750值分别比TAP条件下的值降低了45.8%,45.8%和45.5%.叶绿素的质量浓度下降更为显著,分别比TAP 条件下的值降低了74.6%、35.8%和6.6%.其他培养时间均有类似的趋势,但是抑制效果没有第7 d的明显.同30 μE·m-2·s-1类似,当光照强度为60 μE·m-2·s-1和100 μE·m-2·s-1条件时,衣藻的OD750值和叶绿素质量浓度也随着培养时间增加逐渐增长,如图1(c)～1(f)所示.在完全缺氮条件下,在第7 d时分别达到最大值,OD750值分别为2.96和3.01,如图1(c),1(e)所示;叶绿素质量浓度最大值分别为29.26 mg·mL-1和28.88 mg·mL-1,如图1(d),1(f)所示.由结果可知,在光照强度为60 μE·m-2·s-1和100μE·m-2·s-1时,缺氮后的衣藻生长都同样受到了影响,尤其是TAP-N条件下,衣藻的OD750值比对照组TAP条件下的值降低了92.9%～97.0%,叶绿素浓度降低了98.8%～99.4%.其他培养时间均有类似的趋势,但是抑制效果没有第7 d的明显. 图1 不同氮质量浓度下,衣藻OD750值与叶绿素质量浓度随时间增长的变化.光照强度为(a),(b)30 μE·m-2·s-1;(c),(d) 60 μE·m-2·s-1;(e),(f) 100 μE·m-2·s-12.2 氮浓度对衣藻油脂积累的影响由图1可知,尽管氮浓度及光照强度条件不同,但衣藻的生长在第2 d基本处于对数增长时期.因此,为了统一培养时间,本文作者检测了衣藻在不同光照强度及氮浓度条件下培养至第2 d的油脂含量,结果如图2,表1所示.由图2可知,缺氮胁迫可以促进衣藻体内油脂的积累,氮浓度越低衣藻的总脂含量越高,在3个光照强度下,完全缺氮条件(0 mg·L-1,TAP-N)下衣藻的总脂含量最大,显著高于氮质量浓度为100,200,300,375 mg·L-1时的(p<0.05).当光照强度为30 μE·m-2·s-1时,TAP-N 培养基培养的衣藻的总脂含量(质量分数)为48.6%,大约是TAP培养条件下的3.2倍,其他氮浓度条件下衣藻的总脂含量大约分别是对照组TAP条件下的2.7,2.4和1.7倍.当光照强度为60 μE·m-2·s-1时,衣藻的油脂产量也随着氮浓度的增多逐渐降低,尤其是完全缺氮的情况下总脂含量(质量分数)最高为42.2%,大约是对照组TAP条件下的3.2倍,其他氮浓度条件下的总脂含量大约分别是对照组条件下的2.5,1.8和1.4倍.同样地,当光照强度为100 μE·m-2·s-1时,衣藻的总脂含量也随着氮浓度的增多逐渐降低,完全缺氮的情况下总脂含量(质量分数)最高为39.2%,大约是对照组TAP条件下的3.3倍,其他氮浓度条件下的总脂含量大约分别是对照组TAP条件下的3.0,2.9和1.9倍.通过独立样本t检验进行显著性差异分析可知,缺氮条件下培养的衣藻的总脂含量相比于TAP培养基中的衣藻的总脂含量均有显著性提高(p<0.05).图2 不同光照强度及氮浓度条件下衣藻在第2 d的总脂含量.*表示通过独立样本t 检验实验组与对照组具有显著性差异表1 不同光照强度及氮浓度条件下衣藻在第2 d的总脂含量氮质量浓度/(mg·mL-1)光照强度/(μE·m-2·s-1)30总脂含量/%生物量CChl /(mg·mL-1)60总脂含量/%生物量CChl /(mg·mL-1)100总脂含量/%生物量CChl /(mg·mL-1)048.590.3442.23 0.4039.200.3510039.7917.0831.9718.2435.9616.0920035.4417.8723.0020.8334.6319.4 030025.3526.0118.0730.5122.5326.1537515.0027.8413.0029.7812.0028.88 2.3 衣藻油脂积累的影响因素分析由图1和表2可知,光照强度和氮质量浓度都能对衣藻的油脂积累量产生影响.利用双因素方差分析了第2 d的数据.结果表明,光照强度、氮质量浓度及这2个因素的交互作用对总脂含量的影响都是显著的(p<0.05).光照强度与油脂积累量成负关联,油脂积累量随氮质量浓度增加而减小(图2,表1).这说明,光照强度为30 μE·m-2·s-1和低氮浓度条件下衣藻的总脂含量最优,在探究影响衣藻总脂含量时需同时考虑这两个因素的作用.表2中,df表示自由度;F为检验的数值;p为相应的影响因素对总酯含量影响的显著性水平;R2为决定系数,表示双因素方差分析整体可信程度,R2越高,表示双因素方差分析的结果越可信.R2=0.98.表2 光照强度和氮质量浓度对总脂含量影响的双因素方差分析结果因素dfFp氮质量浓度4414.03<0.001光照强度267.70<0.001氮质量浓度×光照强度89.47<0.0013 讨论自然条件下微藻体内的油脂含量相对比较低,但是在氮浓度不足的情况下,脂肪和碳水化合物产量会増加,因此大部分的微藻产油都是基于缺氮条件培养.SIAUT等[12]研究发现,衣藻的油脂积累量与其生物量有直接关系,同时也会受到光照强度、pH 值等其他因素的影响[13].本研究设置了5个不同的氮浓度及3个不同的光照强度梯度以探究衣藻产油的适宜条件.实验结果表明:缺氮条件下衣藻的生长受到抑制,尤其是叶绿素含量相对于正常TAP培养基中的衣藻受到严重抑制,由于氮元素是叶绿素的主要组成部分,因此缺氮后衣藻的叶绿素合成受到较大影响,可以进一步通过检测衣藻的光系统二的活性来验证.KIM等[13]指出:光照强度过大,衣藻细胞容易受到光损伤,而较低的光照强度下衣藻细胞的光合作用较弱,也不利于其生物量的积累,因此很有必要寻找衣藻生物量积累的适宜光照强度.本研究利用双因素方差分析光照强度和氮浓度对衣藻油脂积累量的影响.结果发现,光照强度和氮浓度都对油脂积累具有重要作用.结合t检验对比分析结果发现,利于衣藻生物量积累的最佳光照强度为30 μE·m-2·s-1.同时,与HU等[14]和WANG等[15]的研究结果相同.本研究结果显示衣藻在完全缺氮(TAP-N)状态下的油脂含量增加最为显著.但是考虑到生物量因素,选取最佳氮质量浓度为100 mg·mL-1为宜.当光照强度30 μE·m-2·s-1,氮质量浓度为100 mg·mL-1时,衣藻的油脂积累量取得最优值,为39.79%(表1).此外,由于本研究中设置的初始衣藻细胞浓度过低(OD750仅为0.34),导致了完全缺氮条件下衣藻的生物量极低,而氮浓度设置梯度过大,这导致较低水平的氮含量培养的衣藻生物量偏差太大.因此在今后的研究中,应提高衣藻的初始细胞浓度,并缩小氮浓度梯度间隔.4 结论检测了不同氮浓度下及光照强度下衣藻的油脂产量,结果显示,氮浓度和光照强度都对衣藻油脂积累量存在显著影响,利用衣藻产油时,需综合考虑这两个因素.本研究得出衣藻最佳积累油脂的氮质量浓度为100 mg·mL-1,光照强度为30 μE·m-2·s-1. 参考文献:【相关文献】[1] PARMAR A,SINGH N K,PANDEY A,et al.Cyanobacteria and microalgae:A positive prospect for biofuels [J].Bioresoure Technology,2011,102:10163-10172.[2] ZHANG D X.Progress in research and application of biomass energy [D].Beijing:Beijing Institute of Technology,2015.[3] SCOTT S A,DAVEY M P,DENNIS J S,et al.Biodiesel from algae:challenges and prospects [J].Current Opinion in Biotechnology,2010,21(3),277-286.[4] QIANG H,MILTON S,ERIC J,et al.Microalgal triacylglycerols as feedstocks for biofuel production:Perspectives and advances [J].The Plant Journal,2008,54(4):621-639.[5] WANG Z T,ULLRICH N,JOO S,et al.Algal lipid bodies:stress induction,purification,and biochemical 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不同氮源对三角褐指藻生长和脂类含量的影响摘要：研究了不同氮源及浓度对三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）的生长、总脂及脂肪酸组成的影响。

结果表明，三角褐指藻在氮源缺乏时生长缓慢，表现出油脂积累的特性。

以初始浓度大于3.9 mmol/L的氯化铵作为氮源，可以促进三角褐指藻生物量和油脂含量的同步增长。

高浓度的尿素有利于三角褐指藻的生长，但达到8.0 mmol/L时脂肪含量下降。

不同浓度硝酸钠都促进三角褐指藻的生长，但不能促进脂肪的积累。

脂肪酸组成分析表明，单不饱和脂肪酸占总脂肪酸的比例为45%～50%，受各种氮源变化的影响较小，可为生物柴油提供较好的流动性。

氮源的添加有利于二十碳五烯酸（EPA）和多不饱和脂肪酸（PUFAs）的合成，当氯化铵浓度为3.9 mmol/L时，EPA和PUFAs占总脂肪酸的比例达到最大，分别为20.4%和26.7%。

关键词：氮源；三角褐指藻（Phaeodactylum tricornutum）；生长；脂肪；脂肪酸组成Abstract：Effects of different nitrogen sources and their concentrations on the growth，total lipids and fatty acids composition of Phaeodactylum tricornutum were studied. The results showed that P. tricornutum growed poorly in cultures without addition of any nitrogen source，but accumulated lipids effectively. The biomass and lipid content of P. tricornutum were promoted simultaneously with more than 3.9 mmol/L of initial ammonium chloride in medium；8.0 mmol/L of urea enhanced the biomass of algae while decreased the lipid content；in the range of tested concentration，sodium nitrate promoted growth of algae and depressed the accumulation of lipid. The fatty acids composition analysis showed that monounsaturated fatty acid（MPUAs）accounted for 45%～50% of the total fatty acids and was less affected by nitrogen sources，thus provided better mobility for biodiesel. The synthesis of C20∶5（n-3）（EPA）and polyunsaturated fatty acid （PUFAs）were increased with addition of nitrogen sources. With 3.9 mmol/L of ammonium chloride，the ratio of EPA and PUFAs to total fatty acids was the highest，20.4% and 26.7%，respectively.Key words：nitrogen sources；Phaeodactylum tricornutum；growth；lipid content；fatty acids composition微藻具有光合作用效率高、环境适应能力强、生长周期短、生物产量高等特点，被认为是最有前途的新型生物柴油原料之一[1，2]。

光和营养盐对三角褐指藻生化组成的影响
李文权;蔡阿根
【期刊名称】《中国环境科学》
【年(卷),期】1994(014)003
【摘要】采用＾１４Ｃ标记技术，测定三角褐指藻光合作用速率及其光合产物生化组成的相对含量，实验结果表明，在常温和适宜的光强围范内，随光强增强，三角褐指藻光合产物中蛋白质百分比减少，碳水化合物百分比增加，脂类相对含量基本不变，当海水氮磷比为１６时，藻类蛋白质合成的相对量最高。

光合产物生化组成蛋白质与碳水化合物之比（Ｐ／Ｃ）的变化可以反映在不同海洋环境下藻类的生长状态。

【总页数】5页(P185-189)
【作者】李文权;蔡阿根
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】Q949.206
【相关文献】
1.铁对三角褐指藻生长、光合作用及生化组成的影响 [J], 朱明远;牟学延;李瑞香;吕瑞华
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3.充气培养对半叶马尾藻生长、营养盐吸收和生化组成的影响 [J], 韩婷婷;付贵权;
齐占会;廖秀丽;黄洪辉
4.营养盐对三角褐指藻脂肪酸含量与百分组成的影响 [J], 廖启斌;李文权;陈清花;郑爱榕
5.不同的营养盐浓度对三角褐指藻生长的影响 [J], 梁英;麦康森;孙世春;潘敬洪;周华财
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