1 常用消毒与灭菌方法 (1)

文章编号:1001-7658(2010)02-0234-03 【专题讲座】常用消毒与灭菌方法袁洽劻(中国疾病预防控制中心传染病控制所,北京　102206)中图分类号:R187 文献标识码:B1热力消毒与灭菌热力消毒与灭菌是指用加热的方法使微生物体内蛋白质凝固、酶失活,致使微生物死亡。

热消毒法具有简便、经济、效果可靠等优点,己广泛用于卫生防疫、医院消毒、环境保护、食品、制药工业及废弃物处理等。

可分为干热和湿热两类。

1.1干热消毒与灭菌1.1.1焚烧法　利用点燃燃料或在焚烧炉内燃烧的方法使被处理对象焚为灰烬,排出的废气应不污染环境。

一般分为两级焚烧,一级温度约为800℃,二级温度应高于1100℃。

焚烧法主要用于有传染性的废弃物处理,如接触传染源的敷料、衣物、食物、疫源地垃圾等。

1.1.2烧灼法　烧灼灭菌适用于微生物实验室小件耐热物品灭菌,利用酒精灯或煤气灯火焰杀灭微生物,如白金耳、接种棒、剪刀、蹑子、试管等。

烧灼时,应注意将器材放在操作者与火焰相隔的彼方,并逐渐靠近火焰,防止污染物突然进入火焰而发生爆沾,以致污染周围环境。

1.1.3干烤法　用电热、电磁辐射线等依靠空气传导加热物体,因而,加热过程较慢。

干热主要用于耐高热物品消毒或灭菌,如玻璃器材、金属器械、油脂、粉剂等。

一般情况下,加热至160℃、2h;170℃、1h;180℃、30m i n,可达到灭菌。

粉剂和油脂灭菌时,厚度一般不超过1.3c m。

纸张、有机物品灭菌时,温度不宜超过170℃,且在干烤箱温度降至80℃后,才可开启干烤箱,以防玻璃迂冷空气炸裂、纸张迂氧燃烧。

新近有真空电烤箱,装载物品后,关闭箱体,抽真空至0.27k P a,然后,加热可至250℃,缩短了灭菌时间,且物品不易被氧化,延长了使用寿命。

1.1.4干热浴法　玻璃珠灭菌器的灭菌箱内装有直径3m m 左右的无铅玻珠,厚度为5c m,通过电热装置将其加热,控制温度在180℃～250℃,然后将待灭菌器械全部插入玻璃珠中,10m i n后可达灭菌。

消毒与灭菌常用方法及设备（一）干热灭菌【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机理是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。

干烤箱为常用的干热灭菌器，其杀菌作用是通过脱水干燥和大分子变性完成的。

【构造】干烤箱是中间夹着石棉的双层金属制成的方形或长方形箱，箱底装有热源，箱内有数层金属架，并附有温度计和自动温度调节器等装置。

把待灭菌的物件均匀地放入恒温干燥箱，加热至160℃～170℃维持2小时即可达灭菌目的。

【使用方法及注意事项】1.将包扎好的待灭物品（培养皿、吸管器等）放于箱内，注意不要摆得太挤，以免妨碍气流流通。

2.关门，插上电源插头（常为220伏），拨动开关，旋动恒温调节器，至红灯亮。

3.待温度上升160℃～170℃时，借恒温调节器的自动控制，保持此温度2小时。

4.灭菌后停止加热，待温度下降至40℃以下方可开门取物，在这之前切勿自行打开箱门，否则其内物品(如玻璃器皿等)会因温度骤然下降而爆裂。

【应用】干热灭菌主要用于要求干燥的、耐高温的物品灭菌，如玻璃器材、瓷器、凡士林、液体石蜡、药粉等的灭菌。

一般不耐高温的、含有水份的物质，不能用这种方法灭菌。

（二）湿热灭菌【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机理是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。

湿热灭菌所需温度较低，时间较短(表3-2)。

特别是高压蒸气灭菌，因增加压力而提高温度，灭菌效果最佳。

其主要优点是：①温度较高，灭菌所需时间较短；②蒸气穿透力强；③蒸气冷凝时释放汽化热，能迅速提高物品的温度；④物品不过分潮湿。

表3-2 热力消毒灭菌法比较方法温度(℃) 时间(min)灭菌器适用物品焚烧＞500 瞬时废弃物品、动物尸体灭菌干烤160～170 120 干热灭菌器（干烤箱）玻璃器材、瓷器等灭菌巴氏消毒法61.1～62.871.73015-30s牛奶、酒类等消毒煮沸消毒法100 5 食具、刀剪、注射器等消毒流通蒸气消100 15～30 Arnold流通蒸气灭食具等消毒毒法菌器间歇灭菌法100 30 流通蒸气灭菌器(重复3次)不耐高温的含糖、牛奶等培养基高压蒸气灭菌法121 15～30高压蒸气灭菌器耐高温、高压及不怕潮湿的物品高压蒸气灭菌器是目前应用最广泛、灭菌效果最好的灭菌器具，其种类有手提式、直立式、横卧式等。

医院消毒和灭菌常用方法一、压力蒸汽灭菌适用范围：用于耐高温、高湿的医用器械和物品的灭菌。

不能用于凡土林等油类和粉剂的灭菌。

二、干热灭菌适用范围：用于耐高温的诊疗用品如油脂、粉末和金属、玻璃等制品的消毒和灭菌。

灭菌方法1焚烧：适用于对病人尸体、废弃衣物、纸张、医疗垃圾等的处理，可直接点燃或在焚烧炉内焚烧。

2 烧灼：用于耐高温物品和小件金属器件的灭菌。

3 干烤：在特定的于烤箱内进行灭菌。

三、紫外线消毒适用范围：用于室内空气、物体表面和水及其它液体的消毒。

四、医用微波灭菌微波可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、真菌、病毒和细菌芽胞、真菌抱子等。

各种物质对微波的吸收不同，消毒效果也不同。

一般来说，吸收微波越多的物品，消毒效果越好，例如水、肉类和含水份高的物品，均是强吸收介质。

很少吸收微波的物质，称为微波的良介质，例如：玻璃、石英、陶器、凡上林、聚四氟乙烯等塑料制品。

而金属制品不吸收微波，不易达到消毒。

五、甲醛气体消毒剂甲醛是一种灭菌剂，对所有的微生物都有杀灭作用，包括细茵繁殖体、芽胞。

真菌和病毒。

甲醛气体灭菌效果可靠，使用方便，对消毒、灭菌物品无损害。

适用范围：可用于对湿、热敏感、易腐蚀的医疗用品的灭菌。

六、环氧乙烷气体灭菌环氧已烷在低温下为无色液体，常压下为无色气体，易燃易爆。

环氧乙烷气体杀菌力强、杀菌谱广，可杀灭各种微生物，属灭菌剂。

适用范围：环氧乙烷不损害消毒的物品且穿透力较强，故大多数不宜用一般方法消毒的物品均可用环氧乙烷消毒和灭菌。

例如，电子仪器、光学仪器、医疗器械、书籍、文件、皮毛、棉、化纤、塑料制品、木制品、陶瓷及金属制品、橡胶制品、内窥镜、透析器和一次性使用的诊疗用品等。

七、臭氧消毒臭氧在常温下为爆炸性气体，是一种强氧化剂。

臭氧稳定性极差，在常温下可自行分解为氧。

所以臭氧不能瓶装贮备。

只能现场生产，立即使用适用范围：臭氧是一种广谱杀菌剂，可杀灭细菌繁殖体和芽胞、病毒、真菌等，并可破坏肉毒杆菌毒素C在医院消毒方面，臭氧的用途主要有下列几种。

常用的消毒和灭菌方法
常用的消毒和灭菌方法有以下几种：
1. 物理方法：
- 高温灭菌：使用高温蒸汽或热气将细菌和病毒杀死，常见的方法有煮沸、高压蒸汽灭菌等。

- 紫外线消毒：利用紫外线辐射杀死细菌和病毒，常见的方法有紫外线消毒灯、紫外线箱等。

- 过滤法：通过物理隔离的方式去除或杀灭细菌和病毒，常见的方法有过滤器、过滤膜等。

2. 化学方法：
- 酒精消毒：使用含有70%以上酒精的液体对物体表面进行擦拭或浸泡，酒精能够破坏细菌和病毒的细胞膜，达到杀菌的效果。

- 氯化物消毒剂：如漂白粉或含氯消毒液，氯离子能够与细菌和病毒中的蛋白质反应，造成细胞死亡。

- 醛类消毒剂：如福尔马林，具有很强的杀菌能力，但使用需注意毒性。

3. 生物方法：
- 生物灭菌剂：利用一些可以生产抗菌物质的生物体，如放线菌等，来进行消毒和灭菌，常见的方法有利用乳酸菌发酵产生的乳酸来进行消毒。

需要根据具体的场合和需求选择合适的消毒和灭菌方法。

常用的基本操作技术（一）消毒和灭菌技术消毒（disinfection）与灭菌（sterilization）两者的意义有所不同。

消毒一般是指利用物理或化学方法消灭病原菌或有害微生物的营养体，而灭菌则是指利用强烈的物理或化学方法杀灭一切微生物的营养体、芽孢和孢子。

但日常生活中两者常常通用。

灭菌的方法很多，一般可分为物理灭菌和化学灭菌两大类。

1. 物理灭菌物理灭菌是最常用的灭菌方法。

主要包括热力学灭菌、过滤除菌和紫外线灭菌等。

（1）热力学灭菌又可分为干热灭菌和湿热灭菌两大类。

①干热灭菌干热灭菌是利用高温使微生物的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

细胞内的蛋白质的凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快；含水量越小，凝固减慢。

因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度更高（160~170℃），时间更长（1~2h）。

进行干热灭菌时最高温度不能超过180℃，否则，包扎器皿的纸或棉塞就会被烤焦，甚至引起燃烧。

通常所说的干热灭菌是指利用干燥箱（或称烘箱）进行灭菌，主要用于玻璃器皿如培养皿、移液管和接种工具等的灭菌。

灭菌时将被灭菌的物体用双层报纸包好或装入特制的灭菌筒内，装入箱中，不要摆的太挤，以免妨碍热空气流通。

逐渐加温，使温度上升至160～170℃后保持2h。

灭菌结束后，切断电源，自然降温，待箱内温度降至70℃以下后，才能打开箱门，取出灭菌物品。

注意在温度降至70℃以前切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。

另外，灼烧灭菌也属于干热灭菌。

在进行无菌操作时，接种工具如接种环、接种钩、接种铲、镊子等要在酒精灯火焰上充分灼烧，试管口、菌种瓶口在火焰上作短暂灼烧灭菌等。

②湿热灭菌a.高压蒸汽灭菌此法是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾产生蒸气。

待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度，导致菌体蛋白质凝固变性达到灭菌的目的。

消毒和灭菌常用方法
一、物理方法
1.干热灭菌法：利用高温对微生物的杀灭作用，一般在160℃下持续1-2小
时，可以杀灭一切微生物，包括细菌、病毒、真菌和芽孢等。

此方法常用于玻璃器皿、金属器具等物品的灭菌。

2.湿热灭菌法：利用高温湿度的蒸汽对微生物的杀灭作用，通常在121℃下
持续30分钟，也可以杀灭一切微生物。

此方法适用于不耐高温的物品，如塑料、橡胶、玻璃器皿等。

3.过滤法：通过物理手段将微生物从空气中或液体中分离出来，主要用于空
气或液体中微生物的分离和去除。

二、化学方法
1.化学药剂灭菌法：利用化学药剂对微生物的杀灭作用，常用的化学药剂有
甲醛、乙醇、次氯酸钠等。

此方法适用于表面消毒、空气消毒等。

2.熏蒸法：将具有杀灭作用的化学气体导入密闭的空间，使其杀灭空间内的
微生物。

此方法常用于仓库、车厢等场所的消毒。

三、生物方法
生物方法主要是利用某些微生物本身具有的杀灭或抑制其他微生物生长的作用，如乳酸菌、霉菌等。

这些微生物可以分泌某些抗菌物质，对其他微生物的生长起到抑制作用。

生物方法常用于食品保存、生物防治等领域。

四、辐射方法
辐射方法主要包括紫外线照射和臭氧照射等方法，这些方法主要利用紫外线和臭氧具有杀菌作用，对细菌、病毒等微生物的生长起到抑制作用。

辐射方法常用于表面消毒、空气消毒等方面。

以上就是消毒和灭菌常用方法的简要介绍，不同的方法具有不同的适用范围和优缺点，在实际应用中需要根据具体情况选择合适的方法。