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可溶性氮测定方法

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氨氮试剂盒原理

氨氮试剂盒原理

氨氮试剂盒原理
氨氮试剂盒原理
氨氮是水体中最重要的生物可溶性氮污染物之一。

它主要来自水质中鱼类、浮游生物的尿、粪和消化残渣的残余物，以及人类活动（如生活污水处理）排放的氨氮，是水体有害污染物的主要来源之一。

氨氮试剂盒检测原理：
氨氮试剂盒采用抗原-抗体原理，氨氮分子上抗原结合部位发生配位反应。

抗体溶液中含有特定天然抗体，当其接触到抗原时，两者之间发生结合反应。

经过有效期限内，在特定的pH条件下，抗原结合抗体，形成抗原-抗体复合物，该复合物发生物理化学变化，产生一定颜色的特性。

由这种特性可以转换成相应的含量值，从而判定样品中氨氮的含量。

用途：
氨氮试剂盒主要用于水处理行业、农业、环境保护、地下水保护等，用于测定水体中氨氮含量，为水质治理提供可靠的检测数据，保证水体的健康及生态平衡。

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可溶性氮测定方法

可溶性氮测定方法

FNCPSL0075 动物饲料可溶性氮的测定稀盐酸中用胃蛋白酶处理法F_NCP_SL_0075动物饲料—可溶性氮的测定—稀盐酸中用胃蛋白酶处理法1 范围该国际标准规定了在稀盐酸中用胃蛋白酶处理后测定动物饲料可溶性氮含量的方法。

该方法不能区别蛋白氮和非蛋白氮。

注:用此方法得到的值同体内消化率没有直接关系。

如果从实验结果中除去非蛋白氮，它的含量应该用一个适宜的方法测定。

2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。

在标准出版时，所示版本均为有效。

所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨，使用下列标准最新版本的可能性。

ISO 5983：1997 动物饲料中氮含量测定和粗蛋白质含量的计算——K氏法。

ISO 6498：1983 动物饲料试样的制备。

3 原理样品在胃蛋白酶稀盐酸溶液中于400C培养48h。

悬浮液过滤并按照K氏方法即可测定滤液的氮含量也可测定滤器上残渣氮含量。

4 试剂只能使用认可的分析级试剂，蒸馏水或去离子水或至少同等纯度的水。

所有试剂(除标准材料外)实际都应该是无氮化合物。

4.1 稀盐酸，c(HCl)=0.075mol/L。

4.2 胃蛋白酶，活性2.0U/mg与附录A中给出的定义一致。

按附录A中规定的方法检查胃蛋白酶活性。

4.3 胃蛋白酶盐酸溶液，酶活性约400U/L。

在1L稀盐酸溶液中(4.1)溶解0.2g±0.001g胃蛋白酶。

使用之前立即制备该溶液。

如果胃蛋白酶活性偏离2.0U/mg，调节胃蛋白酶质量以便获得一个胃蛋白酶活性为400U/L 的溶液。

4.4 盐酸，c(HCl)=7.5mol/L (ρ20=1.125g/ml)。

5 仪器设备一般实验室设备，特殊的如下。

5.1 水浴或培养葙，温度能维持在400C±10C。

5.2 K氏烧瓶，适宜容积。

5.3 滤纸，快速，耐酸。

5.4 蒸馏和滴定装置。

6 采样6.1 散装产品采样方法根据堆型和体积大小分区设点，按货堆高度分层采样。

土壤可溶性有机氮,硝态氮,铵态氮和微生物量氮测定

土壤可溶性有机氮,硝态氮,铵态氮和微生物量氮测定

土壤可溶性有机氮、硝态氮、铵态氮、微生物量氮最方便最简单的测定方法1.母液制样：称取新鲜土壤（30.0g）于放置烧杯中，加约等于田间持水量60%水在25℃下培养7~15d。

取15.0g土于烧杯，置于真空干燥器中，同时内放一装有用100ml精制氯仿的小烧杯，密封真空干燥器，密封好的真空干燥器连到真空泵上，抽真空至氯仿沸腾5分钟，静置5分钟，再抽滤5分钟，同样操作三次。

干燥器放入25℃培养箱中24小时后，抽真空15-30分钟以除尽土壤吸附的氯仿。

按照土：0.5M K2SO4=1:4(烘干土算，一般就是湿土：0.5M K2SO4=1：2)，加入0.5M K2SO4溶液（未熏蒸为空白直接称取15.0g土，加同样比例0.5M K2SO4溶液）震荡30分钟，过滤。

其中熏蒸后的土壤过滤液为A母液，未熏蒸的土壤过滤液为B母液。

母液要是不及时测定，需立即在-15℃以下保存2.测定可溶性有机氮=可溶性全氮-（铵态氮+硝态氮）要是有流动分析仪器还有TOC的话可以利用A母液测得碳氮减去B母液的碳氮含量根据公式计算得出微生物碳氮，可以用B母液测的铵态氮、硝态氮和可溶性全氮，是很方便的。

以下的是用传统的方法测定以上指标，经过852个土壤样品试验结果还是很好的。

土壤可溶性全氮测定氧化剂:将6g NaOH 和30g K2S2O8溶于蒸馏水中并定容至1L(K2S2O8 比较难溶，在低于60℃得瑟水浴中溶解，高于60℃配置的溶液至其氧化性失效，NaOH制成溶液，致其温度达到常温后与K2S2O8溶液混合定容至1L)测定：移取A母液10ml至消化试管，加入10ml氧化剂，水浴中加热，温度升高到120℃后保持90min，使用紫外分光光度计测定A220和A275，空白需加入1ml氧化剂并同时作水浴处理。

（Tips：农化上母液与氧化剂各取25ml，此处取其比例为1:1。

）标准曲线：0.7218g硝酸钾溶于水中，转入1000ml容量瓶中定容摇匀，制得浓度为100mg/L的氮标准贮存液。

氯仿熏蒸浸提法测定土壤微生物碳氮

氯仿熏蒸浸提法测定土壤微生物碳氮

氯仿熏蒸浸提法测定土壤微生物碳氮
采用氯仿熏蒸0.5 mol/L K2SO4浸提法测定土壤微生物量碳、氮。

首先将土样在25℃下密封培养7d 左右，然后称取预处理土样6 份放入烧杯中，将 3 份其置于底部有少量Na OH、200 m L 水和去乙醇氯仿的真空干燥器中，抽真空后保持氯仿沸腾3～5 min，然后，将干燥器移置在黑暗条件下25℃熏蒸土壤24 h，再次抽真空完全去除土壤中的氯仿。

将熏蒸好的土壤转移到200 m L 提取瓶中，加入0.5 mol/L K2SO4浸提液（水∶土质量比为4∶1）。

另外3 份做未熏蒸空白试验，每份重复3 次，分别测定浸提液中的有机碳和全氮含量。

其中浸提液中的可溶性有机碳采用总有机碳分析仪（Phoenix 8000，美国）测定，由熏蒸与未熏蒸土样有机碳的差值除以转换系数，计算得到微生物量碳。

浸提液中土壤可溶性全氮采用碱性过硫酸钾氧化法测定，浸提液中无机氮采用流动分析仪测定，土壤可溶性有机氮是可溶性全氮和无机氮的差值。

熏蒸与未熏蒸土样的全氮的差值除以转换系数，计算得到微生物量氮。

微生物量碳、氮的转换系数为0.45。

土壤的有机质、全氮、全磷、有效磷、速效钾、NO3--N、NH4+-N、pH 值采用常规的土壤农化分析方法测定。

固氮的方法-概述说明以及解释

固氮的方法-概述说明以及解释

固氮的方法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述固氮是指将氮气(N2)转化为可被植物吸收利用的氮化合物的过程，是土壤中氮循环的重要环节之一。

氮素是植物生长的关键营养元素之一，但大部分植物无法直接利用大气中的氮气。

因此，固氮对于植物的生长发育和土壤生态系统的健康至关重要。

固氮的方法主要可以分为生物固氮和非生物固氮两大类。

生物固氮是指通过植物与一些特定的菌株或微生物共生来实现。

这些共生菌株能够将空气中的氮气转化为植物可吸收的氮化合物，主要包括根瘤菌和蓝藻等。

非生物固氮则是利用化学反应或物理方法将氮气转化为其他可被植物利用的化合物。

本文将介绍三种主要的固氮方法及其相关内容。

方法一是通过选择适宜的菌株并在合适的培养条件下培养它们，通过评估固氮效率并优化培养策略来实现固氮。

方法二是通过与植物的共生菌株形成根瘤，在根瘤中固氮，通过营养管理来促进植物的生长和固氮效果。

方法三是利用化学反应，选择合适的催化剂和反应条件来实现固氮。

通过比较这三种方法的优劣和应用前景，可以为解决氮肥过度使用和农业可持续发展提供指导和借鉴。

不过，每种固氮方法都存在一定的局限性，如生物固氮受环境因素影响较大，非生物固氮的能源消耗较大等。

因此，在应用固氮方法时需要结合具体情况和需求，选择适合的方法来提高固氮效率，促进农业可持续发展。

1.2文章结构文章结构部分是对整篇文章的组织和安排进行说明。

下面是对文章结构部分的内容的一个示例：1.2 文章结构本文共分为引言、正文和结论三个主要部分。

其中，引言部分对固氮的概述、文章的结构和目的进行介绍，为读者提供了文章的背景和整体框架。

正文部分包括三个方法：方法一、方法二和方法三，分别介绍了不同的固氮方法。

方法一详细介绍了菌株选择、培养条件、固氮效率评估和优化策略。

方法二则讲解了植物共生菌株的选择、根瘤形成、固氮效果评估以及营养管理等方面的内容。

方法三则涉及了化学固氮的原理、催化剂选择、反应条件以及环境影响等相关内容。

土壤凯氏定氮法

土壤凯氏定氮法

土壤凯氏定氮法
土壤凯氏定氮法是一种用于测定土壤中可溶性氮含量的方法。

该方法利用硫酸钠与苏打灰反应生成氨气的特性，通过收集氨气并用酸进行中和，计算出样品中的氮含量。

具体操作步骤如下：
1. 准备样品：将需要测定的土壤样品取若干克，经过干燥处理后，将土壤样品孔隙内的空气排净，保证样品中只有土壤。

2. 加入试剂：将样品放入一个特制的凯氏消化管中，加入一定量的酸，然后加入硫酸钠试剂和氢氧化钠试剂，反应生成氨气。

3. 收集氨气：利用凯氏影射瓶收集生成的氨气，通过长管与影射瓶相连，将氨气从凯氏消化管中传输到影射瓶中。

4. 中和氨气：在影射瓶中加入一定量的酸，将氨气中和至酸碱中性，使氨气转化为水。

5. 测定氮含量：测定影射瓶中酸的剩余量，计算出氨气转化为氮酸的质量，并通过计算得出土壤中可溶性氮的含量。

土壤凯氏定氮法主要适用于测定土壤中的无机氮含量，包括铵态氮和硝态氮。

该方法操作简单、准确性高，广泛应用于土壤肥力评价和农业生产中。

氮氧化物的测定 定电位电解法

氮氧化物的测定定电位电解法氮氧化物是一类空气污染物，包括氮氧化物（NOx）和氧化亚氮（NO）。

测定氮氧化物的浓度是评估空气质量和控制污染的重要指标之一。

定电位电解法是一种常用的方法来测定氮氧化物的浓度。

该方法基于氮氧化物在电极上的反应产生的电流与浓度之间的关系。

在定电位电解法中，一种常用的电极是气体扩散电极（gas diffusion electrode），该电极可以使气态氮氧化物在电解质溶液中转化为可测的电流。

测定过程中，首先将氮氧化物样品与适当的电解质溶液接触，然后将电极浸入溶液中。

通常会施加一个特定的电位到电极上，并测量由氮氧化物反应产生的电流。

测定氮氧化物的浓度需要事先进行校准，一般使用标准气体或标准溶液来制备一系列浓度的标准曲线。

通过将待测样品的电流与标准曲线进行比较，可以确定氮氧化物的浓度。

定电位电解法具有以下优点：1. 灵敏度高：可以测定低至ppb (parts per billion)级别的氮氧化物浓度。

2. 准确性高：通过使用标准曲线进行校准，可以得到准确的浓度结果。

3. 简便易行：测定过程相对简单，不需要复杂的设备和操作。

然而，定电位电解法也存在一些局限性：1. 受电解液pH值和温度等因素影响：电解液酸碱度和温度的变化可能会影响氮氧化物的浓度测定结果。

2. 要求样品处理：需要将氮氧化物样品与电解质溶液接触，可能需要对样品进行预处理或适当的稀释。

3. 适用性受限：该方法适用于氨气（NH3）、氮氧化物（NOx）等具有一定可溶性的氮气体。

总的来说，定电位电解法是一种可靠且常用的测定氮氧化物浓度的方法，但在具体测定时需要考虑实际样品特性和一些实验条件。

DON(可溶性有机氮)测定方法

DON（可溶性有机氮）测定方法编辑 | 删除 | 权限设置 | 更多▼设置置顶推荐日志转到私密记事本DemのHunt‰发表于2009年08月12日 08:12 阅读(0) 评论(0) 分类：东游记权限：指定好友可见原理：与MBC一样，DON(可溶性有机氮）TDN的测定不能够直接进行，而是由TDN（可溶性总N）减去TIN（可溶性无机氮）而得出结果。

TIN又包括NH4+-N和NO3--N。

即：DON = TDN - NH4+-N - NO3--N测定方法如下：TDN：（过硫酸钾氧化-紫外分光光度法，农化p128，12.3.4）；NO3--N：(紫外分光光度法，农化p129，12.4）；NH4+-N：（靛酚蓝比色法，农化p159）；具体操作步骤（此处较简略，详见农化分析）：前处理：称取10.00克左右过2mm筛鲜土于100ml离心管中，加入2mol/L的KCl溶液50ml（149.1g KCl溶于去离子水，定容至1L），250r/min震荡1h后静置30min,使用普通定性滤纸&漏斗&小三角瓶过滤，制得母液。

TDN测定：移取1ml母液至50ml容量瓶中，加入1ml氧化剂，水浴中加热，温度升高到100℃后保持90min，使用紫外分光光度计测定A220和A275，空白需加入1ml氧化剂并同时作水浴处理。

（Tips：农化上母液与氧化剂各取25ml，此处取其比例为1:1。

） TDN标准曲线：0.7218g硝酸钾溶于水中，转入1000ml容量瓶中定容摇匀，制得浓度为100mg/L的氮标准贮存液。

稀释10倍即为10mg/L的氮标准溶液。

吸取氮标准溶液（梯度为0ml，1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml；对应浓度分别为0 mg/L，0.02 mg/L，0.04 mg/L，0.06 mg/L，0.08 mg/L，0.10 mg/L，0.12mg/L）于50ml容量瓶中，各加入1ml氧化剂并定容，得氮的标准系列，与样品同样消煮测定A220和A275。

可溶性有机氮的测定实验报告

可溶性有机氮的测定实验报告实验目的：本实验旨在通过一种化学方法测定水样中可溶性有机氮的含量，了解水体中有机氮的污染程度。

实验原理：本实验采用Kjeldahl法测定水样中的可溶性有机氮。

首先将水样进行酸化处理，使无机氮转化为氨。

然后通过蒸发浓缩，将水样中的氨转化为氨气。

最后，利用氨气与硫酸反应生成铵盐，再通过滴定法测定铵盐的含量，间接计算出水样中可溶性有机氮的含量。

实验步骤：1.准备水样，并记录其初始体积。

2.取适量水样加入酸化剂，使其酸化至pH为2-3。

3.将酸化的水样进行蒸发浓缩，直至残留物干燥。

4.将干燥的残留物与硫酸混合，加热反应生成氨气。

5.将生成的氨气通过氨气收集装置收集。

6.将收集到的氨气转化为铵盐，利用盐酸滴定法测定铵盐的含量。

7.根据滴定结果计算出水样中可溶性有机氮的含量。

实验结果与分析：根据滴定法测定的铵盐含量，结合水样的初始体积，可以计算出水样中可溶性有机氮的含量。

根据实验数据，得出水样中可溶性有机氮的含量为Xmg/L。

根据国家标准，当水样中可溶性有机氮的含量低于Xmg/L时，水质可以被认为是良好的。

实验结论：通过Kjeldahl法的测定，我们成功地测定了水样中可溶性有机氮的含量，并得出了水样的污染程度。

根据实验结果，我们可以评估水质的良好程度，并采取相应的措施来净化水源，保护环境。

实验注意事项：1.在实验过程中，要注意安全操作，避免接触到有害物质。

2.按照实验步骤进行实验，严格控制实验条件和操作时间。

3.在实验中，要注意仪器仪表的使用和维护，确保实验结果的准确性。

4.实验结束后，要及时清理实验场地，并正确处理实验废液和废品。

以上是关于可溶性有机氮的测定实验报告的内容，希望对您有帮助。

烟叶含氮化合物测定

烟草含氮化合物测定烟叶中氮化合物的特性及其测定意义1、烟草中氮素形态：蛋白质 氨基酸 酰胺 NH3 硝酸盐 植物碱 未知氮化物2、烟草氮化合物分类：1 水不溶性氮：部分蛋白质（醇溶性和脂溶性蛋白质）2 水溶性氮：除去不溶性蛋白质，剩余氮化物都是水溶性的，其中也包括了水溶性蛋白质。

蛋白质占整个含氮化合物的60％-90％，植物体中蛋白质的含氮量为15％-17.6％，平均为16％（蛋白质系数）烟草样品（干烟叶）中主要的含氮化合物是蛋白质（8%）和生物碱（1.5-3.5％），其次是游离氨基酸（0.8％）等。

3、 含氮化合物测定意义1 含氮量高的鲜烟叶，其多酚氧化酶活性也高，烘烤时易出现黑糟烟2 含氮化合物高的干烟叶，燃吸时，味苦，辛辣，刺激性强，杂气大。

烟叶总氮测定烟叶中总氮含量高，则其它氮化物含量往往也高，蛋白质和烟碱也高，因此测定总氮的含量对了解烟叶氮化物的特征具有代表性。

一、测定方法测定主要有凯氏法和杜马法两种。

杜马法就是将烟叶燃烧，收集N2和其它氮的氧化物，所用仪器十分精密。

现在主要用的是凯氏法。

二、凯氏法定氮1原理：烟草中的含氮化合物用浓硫酸消煮分解，使其中各种形态的氮素全部转化为氨，并与硫酸结合形成硫酸铵，然后加碱（NaOH）蒸馏，使硫酸铵中的NH3释放出来，用硼酸吸收，然后用标准酸（H2SO4）滴定，计算出N含量。

1 烟样消化在高温下浓硫酸是一种强氧化剂，能将有机物中的碳全部分解氧化成CO2,从而破坏了有机物的结构，样品中的含氮化合物，如蛋白质，在浓硫酸的作用下，水解为氨基酸，氨基酸脱氨产生NH3,NH3与硫酸结合成为硫酸铵留在溶液中。

2 蒸馏向消化液中加入过量的强碱NaOH，使（NH4）2SO4的NH3逸出，并用硼酸溶液吸收之。

3 滴定 用标准酸滴定硼酸吸收的氨，根据标准酸的用量计算出消化液中的N量。

这种测定总氮的方法最初是由凯德尔（Kjeldahl）1884年在研究蛋白质中的N时发明的，所以叫凯氏定氮法。

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在出料口采样，每 10 袋或间隔 2min，取样铲采样。 6.5 样品的缩分
将样品倒在清洁、光滑、平坦的桌面或光面硬纸上，充分混匀后将样品摊成平面正方形，然后以两 条对角线为界分成四个三角形，取出其中两个对角三角形的样品，剩下的样品再按上述方法反复缩分，直 至最后剩下的两个对顶三角形的样品接近平均样品所需的重量为止。
如果不能同时进行滴定, 滴定应在蒸馏完成后尽快进行, 保证馏出液温度不超过 25℃，以避
免氨的损失。
用相同程序完成空白试验但省略试料。按条款 9 进行。
8.4.3 空白试验
用相同步骤完成空白试验但省略试料。
9 结果计算 9.1 用 8.3 中规定的步骤得到的可溶性氮含量的计算
对 于 样 品 测 定 和 空 白 试 验 所 提 供 接 收 氨 的 硫 酸 用 量 是 相 等 的 ，试 样 可 溶 性 氮 含 量 的 计 算 用 公
FNCPSL0075 动物饲料 可溶性氮的测定 稀盐酸中用胃蛋白酶处理法
F_NCP_SL_0075 动物饲料—可溶性氮的测定—稀盐酸中用胃蛋白酶处理法
1 范围 该国际标准规定了在稀盐酸中用胃蛋白酶处理后测定动物饲料可溶性氮含量的方法。 该方法不能区别蛋白氮和非蛋白氮。 注: 用此方法得到的值同体内消化率没有直接关系。 如果从实验结果中除去非蛋白氮，它的含量应该用一个适宜的方法测定。
报告结果精确至 0.1g/kg。 9.2 用 8.4 规定的步骤所得可溶性氮含量的计算
对 于 样 品 测 定 和 空 白 试 验 所 提 供 接 收 氨 的 硫 酸 用 量 是 相 等 的 ，试 样 可 溶 性 氮 含 量 的 计 算 用 下
述公式：
w2= WN
−
(V0
− V1) × c × M m
保持溶液充分沸腾直至水分几乎全部蒸发。小心去除最后微量水，减低加热速度。液体变清
澈后，继续加热 1h，然后移开放冷。 8.3.2 蒸馏和滴定 8.3.2.1 氨的蒸馏
小心加入 250~350ml 水, 使硫酸盐全部溶解, 如必要可将烧瓶放在热水加速溶解, 回旋混合, 冷却。加几粒浮石。
注：对某些特定的样品,其硫酸盐不能完全溶于水中, 此时建议, 用较少的硫酸钾重新消解。 向蒸馏装置的收集瓶中吸移 25ml 硫酸 , 根据试料预期的氮含量, 选择其浓度。加 100~150ml 的水加几滴混合指示剂，也可在收集瓶中移入 250ml 硼酸, 加几滴混合指示剂。 注：建议蒸馏中同时进行氨滴定, 这样有助于确定蒸馏终点。 将冷凝器末端插入收集瓶的溶液中, 没入深度至少 1cm。 向消煮瓶中沿瓶壁慢慢加入 100ml 氢氧化钠溶液。
m——试料质量，g；
M——氮的摩尔质量( M=14g/mol)，g/mol；
WN——8.4.3 中测定的试样的氮含量，g/kg； 报告结果精确至 0.1g/kg。
9.3 可溶性粗蛋白质含量的计算
如果以可溶性粗蛋白质表示结果，用测定的可溶性氮含量乘系数 6.25。
10 精密度
10.1 重复性 用相同方法，同一种试验材料，在同一实验室，同一操作者用相同设备在短时间间隔内所得
2 引用标准 下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。在标准出版时，所示
版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨，使用下列标准最新版本的可能 性。
ISO 5983：1997 动物饲料中氮含量测定和粗蛋白质含量的计算——K 氏法。 ISO 6498：1983 动物饲料试样的制备。 3 原理 样品在胃蛋白酶稀盐酸溶液中于 400C 培养 48h。 悬浮液过滤并按照 K 氏方法即可测定滤液的氮含量也可测定滤器上残渣氮含量。 4 试剂 只能使用认可的分析级试剂，蒸馏水或去离子水或至少同等纯度的水。 所有试剂(除标准材料外)实际都应该是无氮化合物。 4.1 稀盐酸，c(HCl)=0.075mol/L。 4.2 胃蛋白酶，活性 2.0U/mg 与附录 A 中给出的定义一致。按附录 A 中规定的方法检查胃蛋白 酶活性。 4.3 胃蛋白酶盐酸溶液，酶活性约 400U/L。 在 1L 稀盐酸溶液中(4.1)溶解 0.2g±0.001g 胃蛋白酶。使用之前立即制备该溶液。 如果胃蛋白酶活性偏离 2.0U/mg，调节胃蛋白酶质量以便获得一个胃蛋白酶活性为 400U/L 的溶液。 4.4 盐酸，c(HCl)=7.5mol/L (ρ20=1.125g/ml)。 5 仪器设备 一般实验室设备，特殊的如下。 5.1 水浴或培养葙，温度能维持在 400C±10C。 5.2 K 氏烧瓶，适宜容积。 5.3 滤纸，快速，耐酸。 5.4 蒸馏和滴定装置。 6 采样 6.1 散装产品采样方法
注：推荐滴定时用 pH 计自动指示终点, 否则用混合指示剂的颜色变化指示终点。
如果用硫酸做吸收液, 用氢氧化钠溶液滴定收集瓶中过量的硫酸(选
择适当的浓度 c(NaOH) = 0.1mol/L 或 c(NaOH) = 0.25mol/L), 直至 pH 计指示终点或
溶液颜色由紫变绿。
如 果 用 硼 酸 做 吸 收 液 , 则 用 硫 酸 [ 选 择 适 当 的 浓 度 c(H2SO4)= 0.05mol/L 或 c(H2SO4)= 0.125mol/L] 滴定氨, 直至 pH 计指示终点或溶液颜色由绿变紫。
立即将此烧瓶接入蒸馏装置。 加热，使其 30min 内可以收集约 150ml 的馏出液。蒸馏终点用石蕊试纸检验冷凝器末端馏出 液的 pH, 如反应呈碱性, 需继续蒸馏。 注意：蒸馏结束前, 应将冷凝器末端提离收集液, 以避免倒吸。 如果用硫酸做吸收液，蒸馏期间收集瓶内溶液呈碱性，需做适当调整后重新测定。 8.3.2.2 滴定 注：推荐滴定时用 pH 计自动指示终点, 否则用混合指示剂的颜色变化指示终点。 如果用硫酸做吸收液, 用氢氧化钠溶液滴定收集瓶中过量的硫酸(选 择适当的浓度 c(NaOH) = 0.1mol/L 或 c(NaOH) = 0.25mol/L), 直至 pH 计指示终点或 溶液颜色由紫变绿。 如 果 用 硼 酸 做 吸 收 液 , 则 用 硫 酸 [ 选 择 适 当 的 浓 度 c(H2SO4)= 0.05mol/L 或 c(H2SO4)= 0.125mol/L] 滴定氨, 直至 pH 计指示终点或溶液颜色由绿变紫。 如果不能同时进行滴定, 滴定应在蒸馏完成后尽快进行, 保证馏出液温度不超过 25℃，以避 免氨的损失。 用相同程序完成空白试验但省略试料。按条款 9 进行。 8.4 残渣和试样氮含量测定 8.4.1 残渣中有机物的消化 用温水冲冼滤纸和残渣至它们无酸性。转移滤纸和残渣到一个 K 氏消化瓶中。加入 15g 的硫 酸钾，0.3g 氧化铜或 0.9~1.2g 五水硫酸铜。 对于 1g 干物质的试料要加 25ml 硫酸, 以后每增加 1g 干物质多加 6~12ml。充分混合，确保 试料完全润湿，混合并煮沸。 注：可以适当的加入一种抗泡剂。 开始猛烈煮沸去掉水分，然后减低加热速度至去掉最后微量水分。液体变清澈后，继续加热 1h，然后移开放冷。 8.4.2 蒸馏和滴定 8.4.2.1 氨的蒸馏 小心加入 250~350ml 水, 使硫酸盐全部溶解, 如必要可将烧瓶放在热水加速溶解, 回旋混合, 冷却。加几粒浮石。 注：对某些特定的样品,其硫酸盐不能完全溶于水中, 此时建议, 用较少的硫酸钾重新消解。 向蒸馏装置的收集瓶中吸移 25ml 硫酸 , 根据试料预期的氮含量, 选择其浓度。加 100~150ml 的水加几滴混合指示剂，也可在收集瓶中移入 250ml 硼酸, 加几滴混合指示剂。 注：建议蒸馏中同时进行氨滴定, 这样有助于确定蒸馏终点。 将冷凝器末端插入收集瓶的溶液中, 没入深度至少 1cm。 向消煮瓶中沿瓶壁慢慢加入 100ml 氢氧化钠溶液。 立即将此烧瓶接入蒸馏装置。 加热，使其 30min 内可以收集约 150ml 的馏出液。蒸馏终点用石蕊试纸检验冷凝器末端馏出 液的 pH, 如反应呈碱性, 需继续蒸馏。 注意：蒸馏结束前, 应将冷凝器末端提离收集液, 以避免倒吸。 如果用硫酸做吸收液，蒸馏期间收集瓶内溶液呈碱性，需做适当调整后重新测定。 8.4.2.2 滴定
完整鉴定样品所需全部信息；
使用的采样方法，如果知道；
应用的方法；
获得的试验结果，以可溶性氮或可溶性蛋白质表示，后者使用转换系数(即 6.25)；
如果重复性被检查的话，最后得到的结果；
该国际标准中没有规定的操作细节，或者被认为是可任意选择的，还有当完成方法时难
可溶性粗蛋白质
含量均值， g/kg 1)
136.6 141.5 149.5 192.9 512.0 574.3
r， g/kg
7.2 8.9 7.4 7.9 8.9 22.1
R， g/kg
26.5 28.9 31.6 36.3 63.1 166.3
1) 以干物质为基础
11 试验报告
试验报告应详细说明：
式：
w1=
V0
−
V 1
)
m
×
c
×
M
式中：
w1——用 8.3 规定的步骤得到的试样可溶性氮含量，g/kg； V0——空白试验所用氢氧化钠溶液体积，ml； V1——测定(8.3.2)所用氢氧化钠溶液体积，ml； c——滴定用氢氧化钠溶液浓度，mol/L；
m——试料质量，g；
M——氮的摩尔质量( M=14g/mol)，g/mol；
实验室收到的样品的真实性和代表性以及在传送和贮存时不发生损坏是十分重要的。
保存样品时应避免样品发生变质和变化。 7 试样制备
按照 ISO 6498(即 FNCPSL0067)制备试样。 如果试样脂肪含量超过 10%(m/m)，按照 ISO 6498 提取脂肪，计算(条款 9)时要考虑提取的脂 肪含量。 8 操作步骤 8.1 试料 称取 2g 制备的试样，精确至 0.001g。 8.2 培养 将试料置于 500ml 容量瓶中并加 50ml 事先加热到 400C 的胃蛋白酶溶液。振摇以避免结块。 检查悬浮液的 pH 值低于 1.7。将烧瓶置于 400C 水浴或培养箱中放 48h。8h、24h 和 32h 后振摇。 48h 后加 15ml 盐酸并冷至 200C。用水稀释至刻度，振摇并通过滤纸过滤。按 8.3 或 8.4 进行。 8.3 滤液氮含量的测定 8.3.1 有机物消化 取 250ml 滤液转移到 K 氏烧瓶中，加入 15g 的硫酸钾，0.3g 氧化铜或 0.9~1.2g 五水硫酸铜。 对于 1g 干物质的试料要加 25ml 硫酸, 以后每增加 1g 干物质多加 6~12ml。充分混合，确保 试料完全润湿，混合并煮沸。