槐花米中芦丁的提取

槐米中芦丁的提取、分离与鉴定（一）一、实验目的1、通过芦丁的提取与精制掌握碱酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。

2、通过芦丁结构的鉴定，了解苷类结构研究的一般程序和方法。

二、实验原理芦丁：浅黄色针状结晶，mp174℃-178℃。

溶解度：1：8000；热水1:200；冷乙醇1:300；热乙醇1:30；冷甲醇1:100；热甲醇1:10.槲皮素：黄色结晶，mp313℃-314℃（2分子结晶水），能溶解于冷乙醇（1:650），易溶于沸乙醇（1:60），可溶于甲醇、乙酸乙酯等；难溶于水，实验室以稀硫酸水解，乙醇重结晶制得。

本实验主要是利用芦丁分子中含有较多的酚羟基，显弱酸性，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芦丁对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。

三、药品材料槐米、石灰乳、盐酸、广泛PH试纸四、实验操作芦丁的的提取和精制芦丁的提取：取槐米20g置500ml烧杯中，加入沸水400ml及1g硼砂，搅拌下加入石灰乳调至PH8-9,保持微沸30分钟（注意保持PH8-9），并随时补充蒸发掉的水分，趁热用双层纱布滤过，收集滤液，药渣再用200ml水按同样的操作再提取20分钟，合并两次滤液。

浓缩至1/2体积，滤液在60℃-70℃再用盐酸调至PH4-5，静置一周，析出芦丁。

五、实验说明及注意事项1、本实验采用碱溶液酸沉法从槐米中提取芦丁，收率稳定，且操作简便。

在提取前应注意将槐米捣碎，使芦丁易于被热水溶出。

槐花中含有大量粘液质，加入石灰乳使生成钙盐沉淀除去。

PH应严格控制8-9，不得超过10,。

因为在强碱条件下煮沸，时间稍长可促使芦丁水解破坏，使提取率明显下降。

酸沉淀时PH4-5，不宜过低，否则会使芸香苷成烊盐溶于水，降低了收率。

2、提取过程中加入硼砂作用：保护芦丁分子中的邻二酚羟基不被氧化，亦保护邻二酚羟基不与钙离子络合，使芦丁不受损失。

槐米中芦丁的提取、分离与鉴定（二）一、实验目的1、掌握芦丁水解生成苷元的方法及二者之间的分离。

实验 从槐花米中提取芦丁 P.198【实验目的】通过从槐花米中提取芦丁的实验，掌握用酸碱调节提取中药活性成分的方法。

【实验原理】槐花米又名槐米，是槐花的花蕾。

性凉、味苦，功能凉血、止血，主治肠风、痔血、便血等症。

槐花米的主要活性成分是芦丁。

芦丁又名芸香苷，不仅存在于槐花米中（含量达10-20％），在荞麦叶等中，也有存在。

结构式如下：OHO OH OHOH O O CH 2从结构式中不难看出，芦丁实际上是由黄酮与糖（葡萄糖和鼠李糖）形成的苷。

由于含有黄酮结构，所以，呈黄色。

黄酮部分连有许多酚-OH ，故易溶于碱液，酸化复析出，这是本实验采用酸-碱调节法来提取芦丁的依据。

纯芦丁为淡黄色针状结晶，不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂，熔点为188℃（理论值），带三个结晶水的熔点为174-178℃。

芦丁能增强毛细管的韧性，适用于毛细管脆弱的患者。

【实验步骤】称取15g 槐花米，用粉碎机研成粉状。

置于250ml 烧杯中，加入150ml 饱和石灰水[1]，于石棉网上加热至沸，并不断搅拌，煮沸15分钟后，抽滤[2]。

滤渣再用100ml 饱和石灰水煮沸10分钟，抽滤。

合并两次滤液，用5％盐酸调节至pH3-4[3]。

放置1-2小时，使沉淀完全，抽滤，并用水洗涤2-3次，即得芦丁粗品。

将粗品置于250ml 的烧杯中，加水150ml ，在石棉网上加热至沸，不断搅拌，并慢慢加入约50ml 饱和石灰水，调节溶液pH 值为8-9，待沉淀溶解后，趁热过滤。

滤液置于250ml 的烧杯中，用5％盐酸调节至pH4-5，静置30分钟。

芦丁即以浅黄色结晶析出，抽滤，并用水洗涤1-2次，烘干，称重[4]，测熔点。

【注解】[1] 加入饱和石灰水既可达到用碱液提取芦丁的目的，同时，还可除去槐花米中的多糖粘液质。

[2] 抽滤时，宜先小心倾出上层清液，再慢慢倒出带结晶的溶液，以防结晶过早堵住滤纸孔。

后面的抽滤均需如此。

[3] 注意小心滴加，约需7-8ml稀盐酸。

槐米中芦丁的提取注意事项
提取槐米中的芦丁需要注意以下几点：
1. 原料选择：选择质量好、成熟度合适、没有明显病虫害的槐米。

2. 清洁处理：在提取过程之前，应对槐米进行清洁，去除杂质和灰尘等。

3. 切碎处理：将槐米研磨成适当的颗粒大小，以方便后续的提取过程。

4. 提取方法选择：芦丁的提取一般可以采用酒精提取、水提取、超临界流体提取等方法。

根据实际情况选择适合的提取方法。

5. 操作温度控制：提取过程中，应根据芦丁的理化性质和提取方法的要求控制合适的温度，避免温度过高或过低对芦丁的分解或热不稳定性造成影响。

6. 时间控制：提取时间的长短对提取效果有一定的影响。

根据不同的提取方法和需求，控制提取时间合适。

7. 槐米与提取剂的比例：槐米与提取剂的比例也会影响到提取效果。

根据实际情况调整比例，达到较好的提取效果。

8. 环境保护：在提取过程中应注意环境保护，避免对环境造成污染。

9. 实验设备清洁：提取过程中的实验设备应保持清洁，避免杂质的污染。

10. 合理储存：提取后的芦丁样品应储存在干燥、阴凉的地方，避免阳光直射和潮湿，以免对芦丁的稳定性造成影响。

以上是提取槐米中芦丁时需要注意的一些事项，具体操作还需根据实际情况和提取方法的要求进行调整。

实验从槐花米中提取芦丁一、实验目的1．学习黄酮苷类化合物的提取方法。

2．掌握趁热过滤及重结晶等基体操作二、实验原理芦丁（Rutin ）又称芸香苷（Rutioside ）有调节毛细血管壁的渗透性的作用，临床上用作毛细血管止血药，作为高血压症的辅助治疗药物。

芦丁存在于槐花米和荞麦叶中，槐花米是槐系豆科槐属植物的花蕾，含芦丁量高达12%~16%，荞麦叶中含8%，芦丁是黄酮类植物的一种成分，黄酮类植物成分是存在于植物界并具有以下基本结构的一类化合物：就黄色色素而言，它们的分子中都有一个酮式羰基又显黄色，所以称为黄酮。

黄酮的中草药成分几乎都带有一个以上羟基，还可能有甲氧基、烃基、烃氧基等其它取代基，3、5、7、3'、4'、几个位置上有羟基或甲氧基的机会最多，6、8、1'、2'、等位置上有取代基的成分比较少见。

由于黄酮类化合物结构中的羟基较多，大多数情况下是一元苷，也有二元苷。

芦丁是黄酮苷，其结构如下：黄酮骨架OO123456782'3'4'5'6'芦丁（Rutin ）三、基本操作训练【操作步骤】1、 称取3g 槐花米于研钵中研成粉状，置于50mL 烧杯中，加入30mL 饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸一刻钟后，抽滤，滤渣再用20mL 饱和石灰水溶液煮沸10min ，合并滤液用15%盐酸中和，调节PH=3-4,放置1-2小时,使沉淀，抽滤，水洗，得芦丁粗产物。

2、 将制得的芦丁粗品置于50ml 烧杯中，加入30ml 水，加热至沸，并不断搅拌，并慢慢加入10mL饱和石灰水溶液，调节PH=8-9，等沉淀溶解后，趁热过滤，滤液置于50mL烧杯中，用15%盐酸调PH=4-5，静置30min，芦丁以浅黄色结晶析出，抽滤，水洗，烘干得芦丁纯品。

【实验流程】槐花米粉末煮沸提取，抽滤饱和石灰水粗提液中和、沉淀、抽滤粗提物洗涤水粗品煮沸、溶解溶液趁热过滤滤液酸化，静置，过滤结晶洗涤芦丁15%HCl四、实验关键及注意事项1、加入饱和石灰水溶液既可以达到碱溶解提取芦丁的目的，又可以除去槐花米中大量多糖粘液质。

槐米中芦丁的提取方法
提取槐米中的芦丁可以采用以下方法：
1. 热水浸提法：将槐米粉末加入适量的热水中，浸泡一段时间后，用滤纸或布过滤，收集滤液。

滤液中含有芦丁等水溶性成分。

2. 乙醇浸提法：将槐米粉末加入适量的乙醇中，加热回流浸泡一段时间后，用滤纸或布过滤，收集滤液。

滤液中含有芦丁等乙醇溶性成分。

3. 超声波辅助浸提法：将槐米粉末与适量的溶剂（如水、乙醇）混合后，利用超声波的作用加速浸提过程。

超声波的振动作用可以促使槐米中的芦丁等成分更好地溶解在溶剂中。

4. 色谱法：使用柱色谱或液相色谱等分离方法，将浸提得到的槐米滤液进行进一步分离和纯化，得到纯度较高的芦丁。

这些方法都是一些常用的提取槐米中芦丁的方法，根据需要可以选择适合的方法进行实验操作。

从槐花米中提取芦丁实验报告实验报告：从槐花米中提取芦丁摘要：本实验旨在提取槐花米中的芦丁，并考察提取过程中各因素对芦丁含量的影响。

通过多次实验，确定最优提取条件为乙酸乙酯提取5次，每次30分钟，并以硅胶薄层色谱对提取物进行检测和分析。

实验结果表明，在最优条件下，槐花米中的芦丁提取率达到了87.2%。

引言：芦丁是一种常见的植物黄酮类物质，具有抗氧化、抗炎、保肝、降血压等多种药用价值。

槐花米是一种常见的食品材料，含有丰富的芦丁，因此从槐花米中提取芦丁是一种有效的制备方式。

然而，提取芦丁的过程中，各因素如溶剂种类、提取次数、提取时间等均会影响提取率和芦丁含量。

因此，本实验旨在优化提取条件，并测定最优条件下的芦丁提取率。

材料与方法：材料：槐花米、乙酸乙酯、甲醇、十六烷基三甲基溴化铵、硅胶、芦丁标准品。

提取过程：1. 将槐花米粉末加入木盆中，用甲醇翻拌30分钟，滤去渣渣。

2. 取适量提取液，加入十六烷基三甲基溴化铵，使其具有良好的亲油性。

3. 用乙酸乙酯对提取液进行从水到有机相的萃取，共提取5次，每次30分钟。

4. 合并乙酸乙酯层，并用硅胶薄层色谱对提取物进行分离、检测和分析。

5. 以芦丁标准品进行对照，测定槐花米中的芦丁含量。

结果与讨论：通过对比多组实验条件，确定最优提取条件为乙酸乙酯提取5次，每次30分钟。

此时，槐花米中的芦丁提取率达到了87.2%。

其中，不同因素对提取率的影响如下：1. 溶剂种类：尝试了甲醇、丙酮、乙酸乙酯等多种溶剂，最终选用乙酸乙酯效果最佳。

2. 提取次数：提取次数越多，芦丁含量越高，但提取率逐渐降低，因此选择提取5次。

3. 提取时间：提取时间过短，芦丁含量较低；过长则盐度较高，对分离过程不利。

因此，选择提取30分钟。

4. 色谱条件：硅胶薄层色谱是一种常见的分析手段，实验中选择的是乙酸乙酯-正丙醇-甲醇（10:1:1）的移液相作为显色剂，结果表明此条件下分离效果最佳，可以明显区分出芦丁和其他杂质。

槐米芦丁提取分离的原理
槐米芦丁是一种从槐米中提取和分离的活性成分，其原理如下：
1. 原料选择：选择优质、新鲜的槐米作为提取的原料，其中含有丰富的槐米芦丁。

2. 研磨：将槐米进行研磨，将其转变为较为均匀的粉末状态，增加提取效果。

3. 提取溶剂选择：选择适当的有机溶剂，例如乙醇或乙醚，作为提取溶剂。

该溶剂能够有效溶解槐米芦丁。

4. 提取方法：将研磨后的槐米与提取溶剂混合，放入提取器中，在一定的温度和时间条件下进行提取。

提取的过程中，溶剂与槐米之间发生物质交换，将槐米芦丁逐渐溶解到溶剂中。

5. 分离：待提取完成后，通过特定的操作方法，将溶剂与槐米芦丁分离。

常见的分离方法包括蒸馏、浓缩、萃取等。

6. 纯化：将分离得到的槐米芦丁进行纯化，去除杂质，提高纯度。

纯化方法包括结晶、凝胶层析、薄层色谱等。

7. 干燥：将纯化后的槐米芦丁进行干燥，去除残留溶剂，使其呈粉末状。

常用
的干燥方法包括真空干燥、喷雾干燥等。

通过以上步骤，可以从槐米中提取和分离得到槐米芦丁，用于药物开发、保健品生产等领域。

这种提取和分离的原理是基于物质溶解、萃取、分离等化学过程的基础上进行的。

※实验三槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。

尤以槐花米（为植物Sophora japonica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。

槐花米为豆科植物槐花的未开放花蕾。

味苦性凉，具清热、凉血、止血之功。

槐花的主要化学成分为芦丁，又名芸香甙，含量可达12-16%。

芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。

为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。

溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。

微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。

芦丁具有维生素P样作用。

可降低毛细管前壁的脆性和调节渗透性，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，临床上用作毛细管脆性引起的出血症，并常用作防治高血压病的辅助治疗剂。

现在国处也常用芦丁作食品及饮料的染色剂。

一、实验目的1．通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。

2．掌握芦丁的一种提取、精制方法及提制过程中防止甙水解的方法。

3. 掌握黄酮甙水解生成甙元的方法及二者之间的分离。

4．熟悉芦丁、槲皮素的结构性质、检识方法和纸层析鉴定方法。

二、实验原理本实验主要是利用芸香苷中含有较多的酚羟基，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出芸香苷结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芸香苷对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。

芦丁可被稀酸水解，生成槲皮素及葡萄糖、李糖，并能通过纸层析鉴定。

芦丁及槲皮素还可通过化学反应及紫外光谱鉴定。

三、实验材料槐米、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、2％的硫酸溶液、浓盐酸、正丁醇、醋酸、氨水、1％的氢氧化钠溶液、1％的三氯化铝乙醇溶液、1％的葡萄糖溶液、1％的鼠李糖溶液、1％芸香苷乙醇溶液、1％槲皮素乙醇溶液、95％乙醇、碳酸钡、广泛pH试纸、中速层析滤纸等。

※实验三槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在70种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有。

尤以槐花米（为植物Sophora japonica的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料。

槐花米为豆科植物槐花的未开放花蕾。

味苦性凉，具清热、凉血、止血之功。

槐花的主要化学成分为芦丁，又名芸香甙，含量可达12-16%。

芦丁是由槲皮素（Quercetin）3位上的羟基与芸香糖（Rutinose）〔为葡萄糖（Glucose）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷。

为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为174~178℃，无水物188~190℃。

溶解度：冷水中为1:10000；热水中1:200；冷乙醇1:650；热乙醇1:60；冷吡啶1:12。

微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色。

芦丁具有维生素P样作用。

可降低毛细管前壁的脆性和调节渗透性，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，临床上用作毛细管脆性引起的出血症，并常用作防治高血压病的辅助治疗剂。

现在国处也常用芦丁作食品及饮料的染色剂。

一、实验目的1．通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作。

2．掌握芦丁的一种提取、精制方法及提制过程中防止甙水解的方法。

3. 掌握黄酮甙水解生成甙元的方法及二者之间的分离。

4．熟悉芦丁、槲皮素的结构性质、检识方法和纸层析鉴定方法。

二、实验原理本实验主要是利用芸香苷中含有较多的酚羟基，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出芸香苷结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芸香苷对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。

芦丁可被稀酸水解，生成槲皮素及葡萄糖、李糖，并能通过纸层析鉴定。

芦丁及槲皮素还可通过化学反应及紫外光谱鉴定。

三、实验材料槐米、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、2％的硫酸溶液、浓盐酸、正丁醇、醋酸、氨水、1％的氢氧化钠溶液、1％的三氯化铝乙醇溶液、1％的葡萄糖溶液、1％的鼠李糖溶液、1％芸香苷乙醇溶液、1％槲皮素乙醇溶液、95％乙醇、碳酸钡、广泛pH试纸、中速层析滤纸等。

槐花米中芦丁的提取分离与鉴定实验一预试；苷的碱提取，酸沉淀；薄层层析铺板。

实验二产品的精制:重结晶；苷的水解。

实验三苷、苷元的定性鉴定；甙、甙元的TLC 鉴定；糖的纸层析鉴定。

槐花米中芦丁的提取分离与鉴定（一）预试；苷的碱提取，酸沉淀；薄层层析铺板。

（二）产品的精制：重结晶；苷的水解。

（三）苷、苷元的定性鉴定；甙、甙元的TLC鉴定；糖的纸层析鉴定。

教学目的：1 •掌握酸碱法提取黄酮苷类的原理及方法。

2 •掌握化学鉴别试验、苷水解、薄层层检查等手段在苷类结构鉴定上的作用。

已知重要成分及其性质1. 芦丁（芸香苷，rutin ）淡黄色针晶，水中结晶者含3分结晶水，C27H30O16 3H2O lOOmmHg和11O C 加热12小时后，变为无水物，无水物于25C变棕，115〜7C软化，214〜5C发泡分解，1g芦丁溶于约300ml冷水，200ml沸水，7ml沸甲醇，溶吡啶，甲酰胺和碱液，微溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯，不溶于氯仿，二硫化碳、乙醚、苯和石油醚。

2. 槲皮素（Guereetin ）为芦丁的苷元，C15H10O7，MW302.23 ;含二分子结晶水为黄色针晶，（稀乙醇），5〜7C失水，314C解，1g溶于290ml无水乙醇、23ml沸乙醇，溶于冰醋般在碱水中溶解显黄色，几不溶于水R=一glu—rha 芦丁R= — 0H 槲皮素3. 皂苷（Saponin）粗品为白色粉末，mp 210C〜20C（dec）。

易溶于吡啶。

能溶于200倍的甲醇，酸水解得下列两种苷元及糖。

糖为葡萄糖，葡萄糖醛酸和葡萄醛酸内酯。

（1）白桦酯醇（Betulin）无色针晶，mp215〜2C,能溶于醋酸，丙酮、醋酸乙酯、甲醇、乙醇、氯仿、苯等；难溶于石油醚和水(2)槐花二醇(Sophoradiol)无色针晶, 醚、苯、丙酮、甲醇、难溶于水。

整套实验的过程：预试一一提取分离一一鉴定实验一预试；甙的碱提取，酸沉淀实验目的通过系统预试，了解检品中含有哪些类型的成分，可能含有哪些化学类型的成分，为进一步提取分离有效成分提供线索。

实验一槐米中芦丁的提取、分离和鉴定一、概述槐米系豆科植物槐树（Sophora japonica L.）的花蕾（槐米）。

具有清热、凉血、止血的功效，用于治疗便血、痔血，尿血、血淋，崩漏，赤血痢下，风热目赤，痛疽疮毒，还可用于预防中风。

近年来被用作治疗高血压的辅助药物。

药理实验证明，槐花米具有调节毛细血管的渗透作用，抗炎作用，解痉、抗渍疡作用，影响脂质代谢，抗菌等多种生物活性。

槐花米中主要含有黄酮苷，皂苷、甾醇和鞣质等成分，其中芦丁(Rutin)含量最高，达12～20%。

主要化学成分的结构及理化性质：芦丁（rutin）：C27H30O16·3H2O，浅黄色针状结晶，mp174～178℃（含三分子水）；188℃（无水物）。

难溶于冷水（1：8000～10000），可溶于热水（1：180～200），热甲醇（1：10），冷甲醇（1：100），热乙醇（1：60），冷乙醇（1：650）；难溶于乙醚、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮等，易溶于碱液。

槲皮素（quercetin）：C15H10O7·2H2O，黄色结晶，mp313～314℃（2分子结晶水），316℃（无水物）。

能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；难溶于水、苯、石油醚等溶剂。

二、实验部分（一）实验目的1、通过芦丁的制备，掌握黄酮类化合物提取分离的原理和操作。

2、掌握酸水解将芦丁生成槲皮素的方法。

3、掌握芦丁与槲皮素的鉴别方法，聚酰胺薄膜的操作方法，电子天平的使用方法。

（二）实验原理1、芦丁的提取原理：芦丁中含有多个酚羟基，具有酸性，故用碱提酸沉法。

2、芦丁的分离原理：芦丁在沸水中溶解，在冷水中析出。

3、芦丁的鉴定原理：芦丁与槲皮素分别为黄酮类化合物的苷与苷元，用Molish反应可以进行鉴别，也可以利用聚酰胺的氢键吸附性质进行定性分析，Rf值也应不同。

（三）实验药材、仪器与试剂1、药材：槐米50g(每组)。