临床检验基础_血小板检验讲解

第二节血小板检测血小板以其数量（血小板计数、血小板平均容积和血小板分布宽度）和功能（黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩等）参与初期止血过程。

一、筛检试验（一）血小板计数见本篇第二章。

（二）血块收缩试验【原理】血块收缩试验（clot retraction test，CRT）是在富含血小板的血浆中加入Ca2＋和凝血酶，使血浆凝固形成凝块。

血小板收缩蛋白使血小板伸出伪足，伪足前端连接到纤维蛋白束上。

当伪足向心性收缩，使纤维蛋白网眼缩小，检测析出血清的容积可反映血小板血块收缩能力。

【参考值】①凝块法：血块收缩率（％）=[血清（ml）／全血（ml）×（100％-Hct％）]×10-0％，参考值：65．8％±11．0％。

②血块收缩时间（h）：2h开始收缩，18～24h完全收缩。

【临床意义】1．减低（<40％）见于特发性血小板减少性紫癜（ITP）、血小板增多症、血小板无力症、红细胞增多症、低（无）纤维蛋白原血症（hypo（a）fibrinogenmia）、多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）、原发性巨球蛋白血症（primarymacroglobtr1inemia）等。

2．增高见于先天性和获得性因子Ⅷ缺陷症等。

二、诊断试验（一）血小板相关免疫球蛋白测定【原理】血小板相关免疫球蛋白（platelet associated immunoglobulin，PAIg）包括PAIgG、PAIgM、PAIgA，现以PAIgG 测定为例叙述。

将人抗IgG抗体包被在酶标反应板孔内，加入受检血小板破碎液，再加入酶标记的抗人IgG抗体，与结合在板上的PAIgG 相结合，最后加入底物显色，颜色深浅与血小板破碎液中的PAIgG的量成正相关。

受检者所测得的吸光度（A值）可从标准曲线中计算出血小板破碎液中的PAIgG含量。

近来用流式细胞术（FCM）和免疫荧光显微术测定日趋增多。

【参考值】ELISA法：PAIgG为0～78．8ng／107血小板；PAIgM为0～7．0ng／107血小板；PAIgA为0～2．0ng／107血小板；FCM：一般<10％（应建立本实验室的参考值）。

血小板表面有2类抗原：一类是为非特异性抗原或血小板相关抗原，与ABO血型系统和HLA 有关，另一类是血小板特异的抗原。

人类血小板特异性抗原（HPA）有5个血型系统和10个抗原，为HPA-1（Zw）、HPA-2（Ko系统）、HPA-3、HPA-4、HPA-5。

（二）血小板抗体
同种抗体：由输血或妊娠等同种免疫产生，多为IgG型。

自身抗体：多在原发性血小板减少性紫癜中检出，也多为IgG型。

（三）检测方法
主要有：血清学法，操作简单，重复性和特异性较高。

分子生物学法，常用PCR技术。

（四）临床意义
1.提高血小板输注疗效：选择与患者血小板和HLA相配的供血者，可提高输注浓缩血小板效果。

2.诊断新生儿同种免疫血小板减少性紫癜。

3.诊断原发性血小板减少性紫癜。

临床检验基础 红细胞及血小板检验红细胞检验目录红细胞检验目的要求1.掌握红细胞计数、血红蛋白测定的原理、方法、参考范围及临床意义。

2.掌握红细胞比容、红细胞沉降率的测定原理、方法学评价及临床意义。

3.掌握红细胞平均指数的计算方法及临床意义。

4.掌握网织红细胞计数的原理、方法、参考范围及临床意义。

5.熟悉红细胞检验的质量保证。

6.了解红细胞的生理和血红蛋白的组成。

红细胞检验一、红细胞计数(手工计数法)原 理用等渗稀释液将血液稀释一定 倍数， 充入计数池中， 于显微镜 下计数一定体积内的RBC数 ，经过 换算求得每升血液中的RBC数量。

器 材显微镜、微量吸管、改良Neubauer计数板。

红细胞检验一、红细胞计数(手工计数法)检测试剂1. Hayem稀释液：由NaCl 、Na2SO4、HgCl2和蒸馏水组成 。

其中由NaCl和Na2SO4调节渗透压，Na2SO4还可以提高稀释液比重防止细胞粘连，HgCl2为防腐剂。

该稀释液的主要缺点是遇到高球蛋白症患者， R BC易因蛋白沉淀而凝集。

2. 枸橼酸钠甲醛盐水溶液： 由枸橼酸钠、 甲醛、 NaCl及蒸馏水组成。

其中NaCl和枸橼酸钠调节渗透压 ，枸橼酸钠还具有抗凝作用， 甲醛为防腐剂。

配制简单 ， 可时RBC 在稀释后较长时间内形态不发生改变且不凝集，应用较广。

3. 生理盐水或含1%甲醛的生理盐水：仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用。

红细胞检验一、红细胞计数(手工计数法)计数和计算1. 计数：在2 ml红细胞稀释液中加血10 μl ，混匀后 ，充入计数池 ，静置3～5 min后 ，在高倍镜下 ，计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。

计数时需 遵循一定方向逐格进行 ，以免重复或遗漏 ，压线细胞 (数左不数右、数上不数下)。

2. 计算公式：红细胞/L=N ×25/5× 10 × 106×200=N/100× 1012N表示5个中方格内数得红细胞数×25/5：由5个中方格红细胞数 ，换算为一个大方格红细胞数× 10：由一个大方格红细胞数 ，换算为1ml稀释血液内红细胞数× 106： 1L= 106ml×200：为血液稀释倍数红细胞检验一、红细胞计数(手工计数法)注意事项1. 清洁：使用前应擦拭保证计数板和盖玻片清洁。