高一生物月季的花药培养PPT优秀课件

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培养基的组成
小麦中为N6，马铃薯、月季中为MS，油菜 中为B5培养基
实验操作
一、材料的选取 二、材料的消毒 三、接种和培养
（一）材料的选取
选择花药时，一般通过镜检来确定其 中的花粉是否处于适宜的发育期。
最常用的方法有醋酸洋红法。但是， 某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用 焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核 染成蓝黑色。
再分
诱 导
生根
愈伤组织 化 从芽
移栽
人工种子
又称人造种子、合成种子或无性种子， 就是将组织培养所产生的体细胞胚、 不定芽、顶芽、腋芽或小鳞茎等繁 殖体，包裹在能提供营养的胶囊 （人造胚乳）里，再在外面包上一 层具有保护功能和防止机械损伤的 外膜（人造种皮），造成一种类似 种子的结构，能在一定的条件下萌 发生长，形成完整植株。
②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞 进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟 时，含有一个营养核和两个精子。
③两个精子和一个营养核的基因型相同。

④
减分
1花粉母细胞
有分 4个小孢子
4个花粉管细胞核
4个生殖细胞核 有分
8个精子
产生花粉植株的两条途径
花粉 花粉
分化
脱 胚状体
从芽
分 化
影响花药培养的因素
一、材料的选择：
花期早期时的花药比后期的更容易产生花 粉植株。一般，月季的花药培养时间选在五月初 到五月中旬，即月季的初花期。
选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成 功率的重要因素。一般来说，在单核期，细胞核 由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率最 高。
为了挑选到单核期的花药，通常选择完 全未开放的花蕾。
（二）材料的消毒
1、花蕾用V/V为70%的酒精浸泡30秒
2、无菌水清洗
3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分
4、放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中 2~4分钟（也可质量分数为1%的次氯酸 钙溶液或饱和漂白粉溶液）
5、无菌水冲洗3~5次
用于培养花药，实际上多数未熟，由 于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护， 通常处于无菌状态，所以只要将整个花 蕾或幼穗消毒即可。
月季的花药培养
基础知识：
（一）、被子植物的花粉发育 （二）、产生花粉植株的两条途径 （三）、影响花药培养的因素
被子植物的花粉发育
花丝
雄蕊：
花药：囊状结构，内有很多花粉粒
花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花 粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期
注意：
①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和 生殖细胞核。（精子在花粉管中形成）
一般经过20-30天培养后，会发现花药开 裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织 及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再 生植株。
如果花药开裂释放出胚状体， 则一个花药内就会产生大量幼小植 株，必须在花药开裂后尽快将幼小 植株分开，分别移植到新的培养基 上，否则这些植株将很难分开。
在花药培养中，特别是通过 愈伤组织形成的花粉植株，常常会 出现染色体倍性的变化。（主要原 因是营养核和生殖核融合造成的。）
（三）接种和培养
灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和 花瓣，并立即将花药接种到培养基上。在剥离花 药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从 受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻 底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤 组织或胚状体的形成。
通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在 25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要 光照。