酵母菌的形态观察大小测定和直接计数

酵母菌的形态观察, 死活细胞鉴别,微生物测量技术,显微镜直接计数法一、实验目的1．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。

2．了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理，掌握测定微生物细胞大小的方法.3. 了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。

二、实验原理染色：美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。

用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。

因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。

测量：微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。

用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。

目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。

测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。

由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。

计数：每一个大方格边长为1mm，则每一大方格的面积为1mm2，盖上盖玻片后，载玻片与盖玻片之间的高度为0．1mm，所以计数室的容积为0．1mm3。

在计数时，通常数五个中方格的总菌数，然后求得每个中方格的平均值，再乘上16或25，就得出一个大方格中的总菌数，然后再换算成1ml菌液中的总菌数。

下面以一个大方格有25个中方格的计数板为例进行计算：设五个中方格中总菌数为A，菌液稀释倍数为B，那么，一个大方格中的总菌数因1ml=1cm3=1000mm3，三、实验仪器1 菌种: 培养48h的酵母菌．２染色液和试剂：0.05%、0.1%吕氏碱性美蓝．3 器材：显微镜、血球计数板、目镜测微尺、镜台测微尺、盖玻片、吸水纸、计数器、移液器、擦镜纸。

一、实验目的本次实验旨在通过观察酵母菌的形态、生长特点以及繁殖方式，了解酵母菌的基本生物学特性，并探究酵母菌在不同环境条件下的生长情况。

二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，属于真核微生物。

在适宜的条件下，酵母菌能够进行出芽生殖，即通过产生新的细胞壁和细胞膜，使子细胞从母细胞上分离出来。

此外，酵母菌在发酵过程中，可以将糖类物质转化为酒精和二氧化碳，这一过程在食品、酿酒和生物工程等领域有着广泛的应用。

三、实验材料与方法1. 实验材料- 酵母菌培养基- 培养皿- 显微镜- 显微镜玻片- 接种环- 酒精- 美蓝染液- 碘液2. 实验方法（1）酵母菌培养将酵母菌接种于培养基中，在适宜的温度和湿度条件下培养，使其生长繁殖。

（2）酵母菌形态观察用显微镜观察酵母菌的形态，包括细胞大小、形状、细胞壁结构、细胞质结构等。

（3）酵母菌繁殖方式观察观察酵母菌的出芽生殖过程，记录子细胞从母细胞上分离出来的时间、数量和速度。

（4）酵母菌生长情况观察在不同环境条件下（如温度、pH值、营养物质等），观察酵母菌的生长情况，记录其生长曲线。

四、实验结果1. 酵母菌形态观察酵母菌呈椭圆形或卵圆形，细胞壁厚，细胞质均匀。

在显微镜下，可见细胞核位于细胞中央，细胞质内含有一定数量的内质网、线粒体等细胞器。

2. 酵母菌繁殖方式观察酵母菌主要通过出芽生殖进行繁殖。

在适宜的条件下，母细胞在细胞壁上形成新的细胞壁和细胞膜，子细胞从母细胞上分离出来。

观察结果显示，子细胞从母细胞上分离出来的时间为10-15分钟，平均每10分钟产生一个子细胞。

3. 酵母菌生长情况观察（1）温度对酵母菌生长的影响在不同温度条件下，酵母菌的生长速度存在差异。

实验结果显示，在28-30℃的温度范围内，酵母菌生长速度最快；当温度低于15℃或高于35℃时，酵母菌生长速度明显减慢。

（2）pH值对酵母菌生长的影响酵母菌在pH值为4.5-5.5的环境中生长最佳。

实验结果显示，当pH值低于4.5或高于5.5时，酵母菌生长速度明显减慢。

实验7酵母菌的形态观察、大小测定和直接计数一、实验目的酵母菌的形态及出芽生殖，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；学习并掌握用测微尺测定微生物大小和使用血球计数板进行微生物计数的方法。

二、实验原理1.酵母菌形态观察酵母菌个体较大，常规涂片方法可能损伤细胞，因此用美蓝染液水浸片法观察其出芽生殖。

美蓝染液的氧化形式蓝色，还原形式无色。

活细胞由于新陈代谢，细胞内还原性物质还原美蓝而呈现无色，死细胞或代谢能力弱的细胞不能将美蓝还原呈现蓝色。

2.细胞大小测量微生物大小的测定需借助测微尺：目镜测微尺和镜台测微尺。

镜台测微尺用于矫正目镜测微尺，总长1mm，分100个小格，每小格10μm。

目镜测微尺是一块可放入目镜的圆形玻片，有50小格和100小格2种。

由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格代表的实际长度也不一样。

因此，用目镜测微尺测量微生物大小时，必须先用镜台测微尺进行校正，以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度，然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数，计算出细胞的实际大小。

3.细胞计数血细胞计数板，大格1.0mm，体积0.1m3。

三、步骤1.酵母菌观察1)在载玻片中央加一滴0.05%吕氏碱性美蓝染色液，用滴管取1滴酵母菌菌液于染液中，混合均匀。

2)加盖玻片。

3)将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况，并根据颜色区别死、活细胞。

4)染色约0.5h后再次进行观察，观察死细胞数量是否增加。

5)形态记录，计算0.5h后酵母菌的死亡率。

2.细胞大小测量1)装目镜测微尺：把目镜上的透镜旋下，将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的格板上，然后旋上目镜透镜，再将目镜插入镜筒内。

2)校正目镜测微尺：将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。

校正：先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰地看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。

实验四酵母菌的形态观察, 死活细胞鉴别,微生物测量技术,显微镜直接计数法生物科学贺冰冰 040012010025 周二 9、0 节一实验目的1．观察酵母菌的形态及出芽生殖方式，学习区分酵母菌死活细胞的实验方法；掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。

2.了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造及使用原理，掌握测定微生物细胞大小的方法 .3. 了解血球计数板的构造和使用方法,学会用血球计数板对酵母细胞进行计数。

二实验原理美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型无色。

用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。

因此，具有还原能力的酵母细胞是无色的，而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色。

微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体微小，只能在显微镜下测量。

用于测量微主物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。

目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把 10 mm长度刻成 100等分。

测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此处正好与物镜放大的中间物像重叠)用于测量经显微镜放大后的细胞物象。

由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小格所代表的相对长度。

镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的专用载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长10μm，每格长（0.01mm），是专门用来校正目镜测微尺的。

校正时，将镜台测微尺放在载物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成像进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的实际长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物细胞大小。

一、实验目的1. 观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。

2. 学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。

二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，其细胞结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。

酵母菌主要通过出芽生殖进行繁殖，即在母细胞的一端形成芽体，芽体逐渐长大并与母细胞分离，形成新的个体。

美蓝是一种无毒性的染料，其氧化型呈蓝色，还原型无色。

活细胞具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型，因此，活细胞无色，而死细胞或代谢缓慢的老细胞则呈蓝色或淡蓝色。

三、实验器材1. 酿酒酵母或卡尔酵母（Saccharomyces calsbergensis）2. 0.1%吕氏碱性美蓝染液3. 革兰氏染色用的碘液4. 显微镜5. 载玻片6. 盖玻片7. 接种针8. 烧杯9. 火柴四、实验步骤1. 准备酵母菌培养物：取少量酿酒酵母，接种于土豆平板培养基上，28-30℃培养3-5天。

2. 制备美蓝浸片：a. 在载玻片中央滴一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液。

b. 用接种针挑取少量酵母菌，均匀涂布在染液上。

c. 盖上盖玻片，轻压使酵母菌与染液充分接触。

3. 制备水浸片：a. 在载玻片中央滴一滴无菌水。

b. 用接种针挑取少量酵母菌，均匀涂布在水中。

c. 盖上盖玻片，轻压使酵母菌与水充分接触。

4. 显微镜观察：a. 将美蓝浸片和水浸片置于显微镜下观察。

b. 观察酵母菌的细胞形态、大小、细胞核、芽体等特征。

c. 比较美蓝浸片和水浸片中酵母菌的形态差异。

5. 死活细胞鉴别：a. 观察美蓝浸片中酵母菌的染色情况。

b. 活细胞呈无色，死细胞或代谢缓慢的老细胞呈蓝色或淡蓝色。

五、实验结果1. 酵母菌细胞形态：a. 酵母菌细胞呈椭圆形、圆形或卵圆形，大小不一。

b. 细胞核位于细胞中央，呈圆形或椭圆形，核膜清晰。

c. 细胞质均匀，无色或淡蓝色。

2. 出芽生殖方式：a. 观察到酵母菌细胞一端形成芽体，芽体逐渐长大。

b. 芽体与母细胞分离，形成新的个体。

实验五酵母菌形态的观察和显微镜下细胞测量和计数刘洋生物101 1002040120一、实验目的1、观察酵母菌的形态，掌握区分酵母菌死活细胞的染色方法。

2、掌握利用显微测微尺测量酵母菌大小的方法。

3、学习利用血球计数板测定微生物细胞数量的原理和方法。

二、实验原理（一）酵母菌的形态观察酵母菌是单细胞真核微生物，细胞呈圆形、椭圆形或柱状。

酵母的细胞比细菌大得多，经过特殊的染色，在高倍镜下就可以观察到。

酵母菌既可无性繁殖，又可有性繁殖。

无性繁殖有芽殖和裂殖两种，芽殖又有单出、双出和多出之分。

酵母菌的有性生殖一般能形成4~8个子囊孢子。

在一定条件下，有的酵母菌进行芽殖后，长大的子细胞不与母细胞立即分离，并继续出芽，细胞成串排列，这种菌丝状的细胞串就称为假菌丝。

假菌丝的各细胞间仅以狭小的面积相连，呈藕节状。

酵母菌的死活细胞可以通过美兰染色加以区分。

美兰是一种无毒性染色剂，其氧化型为蓝色，还原型为无色。

由于活细胞具有较强的还原能力，可以使美兰由蓝色的氧化型转变为无色的还原型。

处于代谢旺盛的细胞还原美兰的能力强，细胞为无色，为代谢缓慢的老细胞、幼嫩芽体为浅蓝色，死细胞为深蓝色。

（二）显微镜下的细胞计数本次实验采用血球计数法测定微生物细胞数。

方法是将经过适当稀释的菌体细胞或孢子悬液，加到血球计数板的计数室内，在显微镜下逐格计数。

因为计数室的容积是固定的（0.1mm3），所以可以将在显微镜下计得的菌数换算成单位体积试样中的菌数。

血球计数板使一块特制的载玻片，中部有H形的沟槽将中部分成上下两个计数室。

计数室方格的边长为3mm，每个方格分为9个大方格，正中央的大方格被分为25个中方格，而每个中方格又被分为16个小方格。

这样正中央的大方格总共分成400个小方格，每个小方格的体积为1/4000mm3（计数室的高度为0.1mm）。

由此得到如下公式：每毫升的菌数个=平均每个中方格内的菌数16×稀释倍数×4000×1000（三）显微镜下细胞大小的测量用来测量微生物大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。

【精品】酵母菌的形态观察
酵母菌是一种单细胞真菌，常见于发酵食品和发酵饮料中。

虽然酵母菌只有一种单细胞，但在不同阶段却会表现出不同的形态，本文将介绍酵母菌在发酵过程中的几种形态。

1. 酵母菌的单细胞状态
酵母菌的单细胞状态呈现为圆形或类似卵形的形状，直径约为5-10微米。

其表面光滑，无毛发脊纹，质地松软。

在显微镜下观察，它的胞质呈现出明显的颗粒状结构，这是由于
它富含蛋白质和核酸所致。

在适当的营养和环境条件下，酵母菌会进入新细胞的生长期，这个过程叫做萌芽。

此时，酵母菌的胞体会膨胀，生成新的萌芽细胞。

萌芽细胞主要是由细胞壁和胞质膜组成，
可以看到细胞壁上呈现出一圈圈的条纹。

在酵母菌产生足够多的新细胞之后，它们会开始聚集在一起，形成细长的菌丝状结构。

这个过程通常发生在发酵液中。

菌丝的长度和形态都会随着不同的生长条件而变化。

菌丝
结构的变化也会影响发酵的成分和发酵速度。

当酵母菌处于厌氧或营养不良的环境中时，它会形成一些孢子，能够通过空气媒介进
行传播。

孢子通常是圆形或卵形的，由坚硬的细胞壁包裹，具有抵御外部侵害的耐受性。

当环境适合时，酵母孢子会萌发成新的酵母菌，恢复其生长和发酵的能力。

总而言之，酵母菌在不同的发酵过程中会呈现出不同的形态和特点。

观察和细致研究
这些不同状态下的酵母菌形态和特性可以帮助我们更好地了解和利用酵母菌在发酵中的作用。