果树资源学报 223,4(4):67-72葡萄属植物遗传转化影响因素研究进展张天玥,赵若岑(宁夏大学食品与葡萄酒学院,宁夏银川750021)收稿日期:2023-05-10基金项目:基于酿酒葡萄种子受体材料的遗传转化体系建立项目(G 2021107490021)㊂第一作者简介:张天玥(2001-),女,本科在读,主要从事葡萄组织培养及栽培技术研究㊂摘 要:葡萄作为世界上重要的经济类果树作物之一,在酿酒㊁鲜食㊁制干㊁制汁㊁制罐㊁砧木等方面的应用十分广泛,为人类创造了明显的社会效益㊁经济效益和生态效益㊂自美国学者1990年在沙地葡萄(V i t i s r u pe s t r i s )中首次成功获得遗传转化植株,葡萄属植物遗传转化发展迅猛㊂多年研究证实利用分子育种建立完整㊁高效的葡萄遗传转化体系对葡萄基因改良有着至关重要的作用㊂阐述了葡萄属植物遗传转化的4个阶段,并对遗传转化的影响因素进行具体分析,针对这些影响因素进行资料收集和对比研究,总结葡萄遗传转化体系研究现状并提出展望,以期对葡萄基因改良研究提供参考㊂关键词:葡萄;遗传转化;影响因素文章编号:2096-8108(2023)04-0067-06 中图分类号:S 663.1 文献标识码:AR e s e a r c h P r o g r e s s o n I n f l u e n c i n g F a c t o r s o f G e n e t i c T r a n s f o r m a t i o n o f G r a pe P l a n t s Z H A N G T i a n yu e ,Z H A O R u o c e n (F a c u l t y o f F o o d a n d W i n e ,N i n g x i a U n i v e r s i t y ,Y i n c h u a n N i n gx i a 750021,C h i n a ) A b s t r a c t :G r a p e i s o n e o f t h e m o s t i m p o r t a n t f r u i t i n t h e w o r l d ,w h i c h i s w i d e l y u s e d i n w i n e m a k i n g ,f r e s h f o o d ,d r y i n g ,j u i c e m a k i n g ,p o t m a k i n g a n d s t o c k m a k i n g ,a n d h a s c r e a t e d c o n s i d e r a b l e s o c i a l ,e c o n o m i c a n d e c o l o gi c a l b e n e f i t s f o r h u m a n b e i n g s .S i n c e A m e r i c a n s c h o l a r s f i r s t o b t a i n e d g e n e t i c a l l y m o d i f i e d p l a n t s i n V i t i s r u pe s t r i s i n 1990,t h e g e n e t i c t r a n sf o r m a t i o n o fg r a p e p l a n t sh a s d e v e l o p e d r a pi d l y .Y e a r s o f r e s e a r c h h a v e c o n f i r m e d t h a t t h e u s e o f m o l e c u l a r b r e e d i n gt o e s t a b l i s h a c o m -p l e t e a n d e f f i c i e n t g r a p e g e n e t i c t r a n s f o r m a t i o n s y s t e m p l a y s a v i t a l r o l e i n g r a p e g e n e t i c i m p r o v e m e n t .I n t h i s p a pe r ,t h ef o u r s t ag e s o f g e n e t i c t r a n s f o r m a t i o n o f g r a p e p l a n t s a r e e l a b o r a t e d ,a n d th ei n f l u e n c i n g fa c t o r s o f g e n e t i c t r a n s f o r m a t i o n a r e a n a -l y z e d i n d e t a i l .D a t a c o l l e c t i o n a n d c o m p a r a t i v e s t u d y o f t h e s e i n f l u e n c i n g fa c t o r s a r e c a r r i e d o u t ,a n d t h e r e s e a r c h s t a t u s o f g r a p e g e n e t i c t r a n s f o r m a t i o n s y s t e m i s s u m m a r i z e d a n d p r o s p e c t s a r e p r o p o s e d i n o r d e r t o p r o v i d e r e f e r e n c e f o r g r a p e g e n e t i c i m pr o v e m e n t r e s e a r c h .K e yw o r d s :g r a p e ;g e n e t i c t r a n s f o r m a t i o n ;i n f l u e n c i n g f a c t o r s 葡萄作为世界上重要的经济类果树作物之一,在酿酒㊁鲜食㊁制干㊁制汁㊁制罐㊁砧木等方面的应用十分广泛,为人类创造了明显的社会效益㊁经济效益和生态效益[1-2]㊂由于葡萄属植物染色体高度杂合,遗传背景复杂,采用常规杂交育种获得葡萄新品种周期长,工作繁琐,已不适应当今产业高速发展的需求㊂与传统的育种技术相比,分子育种可以克服偶然性大㊁育种年限长和后代数量庞大不易筛选等缺点,能够精确改进目前应用品种的不足,实现多个优良基因(性状)的聚合㊂因此,利用分子育种建立完整㊁高效的葡萄遗传转化体系对葡萄属植物品种改良有着至关重要的作用㊂欧洲葡萄(V i t i s v i n i fe r a L .)具有较高的经济价值,品质优良且栽培广泛,但其抗逆性较差,改良优质葡萄品种抗逆性是葡萄育种的目标之一[3]㊂近年来葡萄转基因研究主要采取农杆菌介导法进行,基因枪转化法的应用复杂且花费高,使用次数相对较少㊂美国学者M u l l i n s M G 等人自1990年首次在沙地葡萄(V i t i s r u pe s t r i s )中获得转基因植株,S c o r -z a R 和F r a n k s t r i c i a 以 无核白 (V i t i s v i n i fe r a L . T h o m p s o n s e e d l e s s )和 萨娜 (V i t i s v i n if e r a L . S u l t a n a )为材料,转外壳蛋白基因和u i d A /n pt Ⅱ基因的植株已被分别获得[4-6]㊂21世纪初,周鹏等[7]人在葡萄中导入人胰岛素样生长因子I G F -I基因,孙仲序等[8]人将鲁贝葡萄花丝所谓外植体诱导体胚,最终获得表达甜菜碱醛脱氢酶基因的葡萄,76Copyright ©博看网. All Rights Reserved.鲍睿等[9]人建立了欧洲葡萄无核白遗传转化体系,张莹[10]于2021年初步建立 霞多丽 种子遗传转化体系,葡萄属植物基因遗传转化技术日益广泛应用于葡萄属植物的研究㊂多年研究证实利用分子育种建立完整㊁高效的葡萄遗传转化体系对葡萄基因改良有着至关重要的作用㊂随着分子育种技术的不断精进,研究者通过器官发生(O r g a n o ge n e s i s )和胚状体发生(S o m a t i c e m b r y o ge n e s i s )两大途径建立了葡萄再生体系㊂遗传转化体系是以再生体系为基础建立的㊂基因型㊁受体类型㊁培养基类型和转化方式等都是遗传转化体系的重要影响因素,本文针对这些影响因素进行资料收集和对比研究,分析葡萄遗传转化体系研究现状并提出展望,以期对葡萄基因改良研究提供参考㊂1 葡萄属植物遗传转化体系的建立葡萄属植物遗传转化可以分为以下4个阶段:第1阶段是遗传转化受体系统的建立㊂这1阶段主要是准备用于遗传转化的受体,主要受到培养途径和培养条件的影响;第2阶段是目的基因的导入㊂借助各种不同的方法将目的基因高效准确的导入受体,该阶段主要受到目的基因和转化方法的影响;第3阶段是受体生长与植株发育㊂遗传转化的最终目的是培养转基因植株㊂这一阶段需要给受体提供适宜的生长环境,使受体继续生长直至成苗,并且将没有成功导入基因的受体筛选出来;第4阶段是目的基因的分析与检测㊂根据目的基因携带的报告基因,对导入的目的基因进行检测,检验遗传转化是否成功㊂近年来有重要推进意义的遗传转化报道详见表1,各阶段图片展示详见图1㊂表1 近年来报道的重要遗传转化体系建立方案序号葡萄品种外植体外植体处理培养基组成基础培养基液体/固体激素组成/(m g ㊃L -1)诱导目标参考文献1V i t i s v i n i f e r a C o l o m b a r dT h o m ps o n s e e d l e s s 叶柄㊁叶片造伤N i t s c h 固体B A P 2不定芽S t a m p et a l .,19902V i t i s v i n i f e r a ˑV .l a b r u s c aB l a c k b a n a n a叶柄㊁叶片造伤M S ㊁N N 69固体6-B A 1.0-4.0,I B A 0.025-0.1,N A A 0.02-0.06不定芽㊁不定根常新等,20183V i t i s v i n i f e r a 绯红无核带芽茎段叶片㊁卷须造伤造伤B 5B 5固体固体6-B A 0-1.5,I B A 0-1.02,4-D 0-2.0侧芽㊁不定根愈伤组织苗卫东等,20214V i t i s c v . R u b y Se e d l e s s R o o t s t o c k S O 4带芽茎段造伤M S ㊁1/2M S 固体6-B A 0.5-1.5,I B A 0.05-0.2,N A A 0-0.2不定芽张美玲等,20105V i t i s v i n i f e r a M a n i c u r e F i n ge r 叶片㊁叶柄㊁茎段造伤M S固体6-B A 0.5-3.5,I B A 0.01-0.3,T D Z 0.5-0.75不定芽陶建敏等,20056V i t i s r o o t s t o c k s p e c i e s V i t i s v i n i f e r a R e d G l o b e叶片带芽茎段造伤造伤M S ㊁MM M S ㊁D K W 固体㊁液体固体B A 0-3.06-B A 0.1-0.2,I A A 0.1-0.5,I B A 0.5-1.0,N A A 0.5-1.0愈伤组织㊁不定芽不定芽㊁不定根C l o g e t a l .,1990胡文斌等,20187V i t i s v i n i f e r a R e d G l o b e 叶片㊁叶柄造伤M S ㊁B 5㊁N N 69固体B A 2.0-10.0,I B A 0-0.5愈伤组织㊁不定芽李云等,20028V i t i s v i n i f e r a M e l o t胚珠㊁叶柄诱导愈伤组织N N D B ㊁E R ㊁C P S E M S ㊁W P M ㊁1/2M S 固体B A 0.2㊁2,4-D 1.0o r N O A1.0B A 0.2-1.0,T D Z 1.0-4.0,I B A 0-1.0体细胞胚不定芽㊁不定根王华等,20059V i t i s v i n i f e r a T h o m ps o n S o n a k a T a s -e -G a n e s h卷须诱导愈伤组织E R ㊁G R固体B A P 0.2,I A A 0.17不定芽㊁不定根㊁植株S a l u n k h e e t a l .,199710V i t i s v i n i f e r a C e n t e n n i a l S e e d l e s s叶盘㊁茎段㊁叶柄造伤M S固体6-B A 1.0-8.0,K T 1.0-8.0,T D Z 1.0-8.0不定芽金万梅等,200811V i t i s v i n i f e r a T h o m ps o n s e e d l e s s S u l t a n a花药㊁花朵诱导愈伤组织M S ㊁N N 69固体B A P 0.2㊁I A A 3.5㊁N O A 2.0体细胞胚F r a n k s e t a l .,199812V i t i s v i n i f e r a C h a r d o n -n a y合子胚诱导初生子叶胚M S固体6-B A 2.0,M E L 0-0.9二次体细胞胚张莹等,202113V i t i s v i n i f e r a L -T r i u m ph 花药㊁花丝造伤B 5固体6-B A 2.0,2,4-D 0.5愈伤组织张克忠等,199786 果树资源学报 2023,4(4)Copyright ©博看网. All Rights Reserved.表1近年来报道的重要遗传转化体系建立方案(续表)序号葡萄品种外植体外植体处理培养基组成基础培养基液体/固体激素组成/(m g㊃L-1)导目标参考文献14V i t i s v i n i f e r a R e d G l o b e 叶柄㊁叶片㊁无芽茎段㊁根造伤诱导不定芽M S㊁B5㊁N N69B5固体B A2.0,I B A0.02I B A0.12不定芽不定根权冬玲等,200515V i t i s a m u r e n s i s Z u o y o u-h o n g 叶片㊁叶柄㊁茎段造伤M S㊁1/2M S㊁B5㊁N N69固体B A2.0,I B A0.02愈伤组织王宁等,201116V i t i s v i n i f e r a C h a r d o n-n a y 花蕾诱导胚性愈伤组织M S固体K T0.2,N O A0.1体细胞胚代玲敏等,201517V i t i s v i n i f e r a L.茎尖㊁茎段㊁叶柄㊁根尖造伤诱导愈伤组织M S㊁1/2M S㊁B5㊁N N691/2M S固体6-B A1.0,I B A0.5I B A0-2.0,N A A0-2.0愈伤组织不定根李国树等,201118V i t i s a m u r e n s i s R u p r.v a r.d i s se c t a 带芽茎段㊁嫩茎段及叶片造伤诱导愈伤组织诱导丛生芽M S1/2M S1/2W P M固体6-B A0.2-0.6,N A A0-0.056-B A1.0-2.67,N A A0.05-2.33I B A0-0.4愈伤组织丛生芽不定根宾宇波等,201319V i t i s v i n i f e r a T h o m p s o ns e e d l e s s 小花蕾造伤M S㊁N N69固体6-B A2.0㊁2,4-D1.0o rM E L0-3.0愈伤组织雅蓉等,202020V i t i s v i n i f e r a C h a r d o n-n a y 带芽茎段造伤M S固体B A P1.0-4.0,2,4-D2.5-10.0愈伤组织M a i l l o t e t a l.,2016注:a-c:接种前采样图片;d:种子预培养;e:种子共培养;f:种子脱菌;g-h:萌发初生子叶胚;i:初生子叶胚生根成苗㊂图1葡萄属植物遗传转化各阶段图例2不同因素对葡萄属植物遗传转化的影响2.1受体类型遗传转化受体系统主要包括器官发生和胚状体发生两大类㊂近年来,可用于遗传转化受体诱导方法及条件的研究报道甚多,详见表2㊂器官发生是指在一定诱导条件下,由离体的细胞㊁组织经分裂㊁增殖以及再分化,形成根㊁芽等器官的过程㊂叶器官和根器官是用于器官发生途径的主要外植体㊂由表2可以得出,不同品种器官发生的诱导率差异较大,不同外植体诱导率没有普遍规律,且不同品种之间差异较为明显㊂胚状体发生是指具有胚芽㊁胚根和胚轴的胚状结构经培养细胞诱导分化后,再生长为一个完整植株的过程[11]㊂M a u r o M C和S c o r z a R证明了胚性细胞比叶片㊁叶柄和茎段等有较高的再生能力[5,12]㊂目前用于遗传转化的有胚性愈伤组织㊁原胚团和体细胞胚3种类型的胚性组织[13-14],其中胚性愈伤组织和体细胞胚的报道较多㊂与茎段,叶片相比,将胚性愈伤组织用作农杆菌侵染转化外植体的优势在于转化胚性愈伤组织能够高频的进行再生植株的转化,通过筛选可以避免嵌合体转化,降低假阳性,从而获得真正意义上的转基因植株㊂2.2培养条件无论是器官发生途径还是胚状体发生途径,培养条件都是影响外植体生长发育的关键因素㊂对于某一基因型葡萄的特定外植体而言,必须在某一特定的培养基中和培养条件下才能再生出植株[15]㊂大量研究表明,培养外植体的基础培养基和激素种类及浓度是最重要的影响因素㊂不同外植体的最适培养基不同,所以,根据不同的外植体,我们要选用最适合其生长的基础培养基㊂对于器官发生途径,诱导愈伤组织最适基础培养基为M S和B5,诱导不定芽的最适培养基与品种和外植体类型有很大关系,常用的有M S㊁N N69和B5培养基㊂对于胚状体发生途径,诱导体胚常用的基础培养基有N N69㊁M S㊁1/2M S㊁P I V㊁M C和改良培养基㊂不同外植体所使用的基础培养基一般不尽相同,含芽茎段和花丝一般接种于1/2M S基础培养基,而叶柄㊁叶片和96张天玥,等:葡萄属植物遗传转化影响因素研究进展Copyright©博看网. All Rights Reserved.表2 近年主要报道的遗传转化受体诱导方案序号葡萄品种受体类型目的基因转化方法检测方法是否得到转基因植株参考文献1V i t i s r u pe s t r i s ,V i t i s v i n if e r a C a b e r -n e t S a u v ig n o n Ch a r d o n n a y愈伤组织㊁不定芽u i d A /n pt I I 农杆菌介导法G U S 染色是M u l l i n s e t a l .,19902V i t i s v i n i f e r a L .未成熟合子胚u i d A /n pt I I 农杆菌介导法和基因枪法G U S 染色和P C R检测是S c o r z a e ta l .,19953V i t i s v i n i f e r a T h o m ps o n s e e d l e s s 体细胞胚u i d A /n pt I I 农杆菌介导法和基因枪法G U S 染色㊁P C R 检测和S o u t h e r n b l o t是S c o r z a e t a l .,19964V i t i s v i n i f e r a T h o m ps o n s e e d l e s s S u l t a n a 愈伤组织㊁增值胚胎㊁悬浮细胞u i d A /n pt I I 农杆菌介导法和基因枪法G U S 染色和S o u t h -e r n b l o t是F r a n k s e t a l .,19985V i t i s v i n i f e r a T h o m ps o n S e e d l e s s 叶盘h u I G F -I农杆菌介导法P C R 检测和S o u t h -e r n b l o t 是周鹏等,20026V i t i s v i n i f e r a L u b e i愈伤组织㊁悬浮细胞B A D H农杆菌介导法G U S 染色和P C R检测是孙仲序等,20037V i t i s b e r l a n d i e r i P l a n c h ˑV .r u p e s t r i s S c h e e l e 99R 叶片㊁叶柄㊁茎段A t N H X 1农杆菌介导法G U S 染色是庄智敏,20068V i t i s v i n i f e r a M a n i c u r e F i n ge r 叶片及叶柄B a r n a s e 农杆菌介导法G U S 染色和P C R检测是杨丽娜等,20099V i t i s v i n i f e r a L .体细胞胚H D E L农杆菌介导法P C R 检测赵凤霞等,201110V i t i s v i n i f e r a M o l d o v a体细胞胚h G L P 1农杆菌介导法G U S 染色和P C R检测是梁宏伟等,201311V i t i s v i n i f e r a R e d G l o b e 和V .v i n i f e r a T h o m ps o n S e e d l e s s 愈伤组织V q R S G T 农杆菌介导法G U S 染色㊁P C R 检测和W e s t e r n b l o t是鲍睿,201712V i t i s v i n i f e r a T h o m ps o n S e e d l e s s 原胚团V pC N 农杆菌介导法P C R 检测是张修铭,201713V i t i s v i n i f e r a T h o m p s o n S e e d l e s s 愈伤组织V v B A K 1和V v L e c R K 1农杆菌介导法P C R 检测是贾慧,201914V i t i s v i n i f e r a C h a r d o n n a y成熟合子胚V v H O S 1农杆菌介导法G F P 检测是张莹,2021卷须一般接种于N N 69基础培养基[16]㊂有研究表明,在胚状体形成阶段,有利于胚状体生长发育的是低浓度生长素和中低浓度细胞分裂素,其他外源激素则不再需要[17]㊂2.3 转化方法遗传转化体系的建立可以依靠不同的转化方式导入基因,而转化方式不同,对于不同受体材料的转化率也有所不同㊂目前,主要用于葡萄基因转化的方式有农杆菌介导法和基因枪法㊂2.3.1 基因枪法基因枪法是通过一种类似枪结构的装置,将表面附有外源遗传物质的金属颗粒射入受体,其表面吸附的外源遗传物质也会随之进入细胞[18]㊂该方法转化效率高㊁受体细胞类型限制少㊁操作简单且可控度高,但仪器费用过高,花费较多㊂研究发现,通过葡萄悬浮细胞均可实现转化,分别获得了基因转化植株和愈伤组织[19-20]㊂2.3.2 农杆菌介导法农杆菌介导法是导入目的基因的主要方法,以其费用低㊁重复性好㊁基因沉默现象少㊁转化周期短以及能转化较大片段等优点而备受科学工作者的青睐㊂农杆菌株系和菌液浓度对于研究有较大影响,而菌株本身致病力的强弱和外界诱导致病力表达的因素也同样是影响葡萄属植物遗传转化的关键因素[15]㊂对于农杆菌的种系,大量研究显示,与G V 3101㊁L B A 4404等菌株相比,E H A 系列的菌株具有更好的转化效果㊂赵亭亭[21]研究E H A 105㊁G V 3101和L B A 4404共3种不同的农杆菌菌株对葡萄遗传转化的影响时发现E H A 105和G V 3101的转化效率显著高于L B A 4404,且二者无明显差异,但农杆菌E H A 105更易于活化且具有更广泛的适用性㊂对于菌液浓度,研究人员发现低浓度的农杆菌菌液可以降低植物性毒素带来的作用[22]㊂T a oJ 在研究苜蓿时发现菌液浓度(O D 600)0.3~0.5时,07 果树资源学报 2023,4(4)Copyright ©博看网. All Rights Reserved.G U S的阳性愈伤率明显超出其他浓度[23]㊂农杆菌介导法也常与基因枪法结合使用来提高转化效率㊂B o u a n a m a B和B i d n e y D将微粒轰击和农杆菌介导转化结合应用,发现比常规基因枪转化的转化率提高至少100倍[24-25]㊂2.4抗生素浓度对于运用农杆菌介导法进行目的基因导入的受体材料,筛选时所用的抗生素的种类㊁浓度对葡萄遗传转化能否成功至关重要㊂对于抗生素的选择,卡那霉素在遗传转化中筛选效果比其他的抗生素效果好,在较低浓度下仍然可以有较好的筛选力,而巴龙霉素容易对外植体有过多抑制导致组织无法生长[26]㊂但后来的研究者认为巴龙霉素可将无效用细胞快速消灭,避免卡那霉素长续性抑制细胞生长[27]㊂抗生素的种类由载体和农杆菌菌株决定,使用浓度因物种而异,浓度过低会导致出现嵌合体及假转化体;浓度过高,毒性也会过高,使植物细胞无法生存,死细胞也会抑制临近活细胞的生长[28]㊂因此,进行预试验确定抗生素使用浓度十分重要㊂经研究发现对于葡萄种子,当卡那霉素为30m g/L就可起到筛选作用,70m g/L卡那霉素浓度筛选效果最为明显[29]㊂当受体生长出子叶胚时,应及时将其转移到成苗培养基中,并黑暗环境下培养[30]㊂3遗传转化中存在的问题及展望3.1胚性愈伤诱导困难且嵌合体较多据介绍,目前研究人员多选择胚性组织作为遗传转化的受体,但胚性愈伤组织的诱导难度较大,过程繁琐复杂,诱导率极低,使遗传转化效率大大降低[16]㊂直接将器官作为外植体进行再生,可以有效提高再生频率,但很容易在遗传转化时发生嵌合体,而且容易发生变异,很难保证与母株基因型转化后的植物基因型保持一致[31]㊂因此,探索更有利于遗传转化的再生受体系统和研究各独立品种的最佳受体和再生方案是今后葡萄遗传转化研究的重点之一,如此便能进一步提高胚性愈伤组织的诱导率,有效降低器官再生嵌合体出现的几率㊂3.2基因沉默基因沉默在葡萄基因工程的研究中是一个普遍存在的现象㊂共抑制㊁位置效应㊁D N A甲基化㊁反式失活㊁重复序列等都会引起基因的沉默,基因被成功导入植株却不表达,严重制约了葡萄基因工程的发展,难以让试验与生产实践相结合[32]㊂基因沉默现象的发生与转基因条件和人为因素也密切相关,所以,深入研究引起沉默的机理,调控转基因过程的各个条件,有利于葡萄属植物基因工程研究的发展㊂3.3潜在生态病害转基因技术在8年前就成为了全球的热点话题,尽管转基因技术在提高作物产量和质量㊁改善作物抗逆性等方面发挥作用,但在一定程度上也危害了人体㊂研究显示,插入外源基因会导致生物体内基因组不稳定,出现各种不良变异,甚至会出现危害人类性状的现象[32]㊂就转基因而言,它会产生新的有害生物类型,外源基因逃逸对其他植物的造成基因污染,引发潜在生态危害,如产生新的毒性或者过敏原等[32]㊂因此,应加强转基因植物特异表达的研究,对于尚未完全成熟的成果不应急于应用到生产实际当中,尽可能避免转基因植物对人体与生态环境伤害㊂葡萄属植物遗传转化体系已经发展了30年之久,但仍存在很多亟待解决的问题㊂经过研究人员几十年共同努力,酿酒葡萄 黑比诺 基因组测序已初步完成;与葡萄果实品质相关优良抗病㊁抗虫㊁抗寒㊁抗旱㊁抗盐碱等基因也被不断发掘[33];许多栽培品种和砧木品种已建立较为成熟的再生体系;抗病虫和抗毒素等基因的成功转化,初步建立遗传转化体系,葡萄育种工作取得不可小觑的进展㊂但是,目前葡萄属植物遗传转化效率较低,严重制约了葡萄基因工程的发展㊂未来,我们应聚焦提高遗传转化效率和简化转化过程两大内容,尽快解决葡萄属植物遗传转化效率低的问题㊂近年来,葡萄基因工程的研究发展势头正盛,相信在未来会有更多优良品质㊁抗逆性强的葡萄品种出世,基因工程的研究定能带领葡萄产业走向更光明的未来㊂参考文献[1]B I S S O N L F,W A T E R H O U S E A L,E B E L E R S E,e t a l.T h e p r e s e n t a n df u t u r e o f t h e i n t e r n a t i o n a l w i n ei n d u s t r y[J].N a t u r e,2002,418(6898):696-699.[2]贺普超,罗国光.葡萄学[M].中国农业出版社,1999.[3] V I D A L J R,G O M E Z C,C U T A N D A M C,e t a l.U s eo f g e n e t r a n s f e r t e c h n o l o g y f o r f u n c t i o n a l s t u d i e s i ng r a p e v i n e[J].A u s t r a l i a n J o u r n a l o f G r a p e a n d W i n eR e s e a r c h,2010(16):138-151.[4] M U L L I N S M G,T A N G F A&F A C C I O T T I D.A g r o b a c t e r i u m-m e d i a t e d g e n e t i c t r a n s f o r m a t i o n o fg r a p e v i n e s:t r a n s g e n i c p l a n t s o f V i t i s r u p e s t r i s S c h e e l ea n db u d s o f V i t i s v i n i f e r a L.[J].N a t u r e B i o t ec h n o l o-g y,1990(8):1041-1045.[5]S C O R Z A R,C O R D T S J M,G R A Y D J,e t a l.P r o d u-c i n g T r a n s g e n i c T h o m p s o n S e ed le s s g r a p e(V i t i s17张天玥,等:葡萄属植物遗传转化影响因素研究进展Copyright©博看网. 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