尿液分析仪法与磺基水杨酸法检测尿蛋白的分析与探讨
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尿蛋白定性检查一、磺基水杨酸法【目的】掌握尿蛋白(PRO)定性磺基水杨酸法(SSA)。
【原理】生物碱试剂磺基水杨酸,在酸性的条件下,其磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合,形成不溶性蛋白盐沉淀。
【器材】1. 小试管、试管架。
2.滴管、胶洗头。
3. 2ml刻度吸管、吸耳球。
4. pH广泛试纸。
5. 黑色衬纸。
【试剂】 200g/L磺基水杨酸溶液:20g磺基水杨酸溶于100ml蒸馏水中。
【标本】新鲜尿液或模拟蛋白尿标本。
【操作】1、调pH 用pH广泛试纸测试尿液酸碱度,如pH不在5—6范围,可加酸或碱予以调节。
2、加尿液取小试管2支,分别加入清晰尿液1ml。
3、加试剂于第1支试管内滴加磺基水杨酸溶液2滴,轻轻混匀;另1支试管不加试剂作为空白对照。
4、判断结果 1min内观察结果,按照书中表格判断阳性程度及大致蛋白质含量。
【参考区间】阴性【注意事项】1、标本①如果尿液呈现明显的浑浊,应先离心或过滤。
②当知患者应用大剂量青霉素、庆大霉素、磺胺、含碘造影剂时,应告知结果可能产生假阳性。
③指导患者正确采集中段尿,避免混有生殖系统分泌物。
2、调pH 本法在尿液偏碱或偏酸时(pH>9或pH<3)可呈假阴性,因此检测前可先测试尿pH,必要时用稀NaOH或5%醋酸进行调节。
3、结果判断(1)掌握好结果判断时间。
操作时严格按照操作方法进行,判断时间严格掌握在1min,极轻度的混浊并无明显临床意义。
当尿液中含高浓度尿酸或尿酸盐时,在加入试剂1—2min后可能出现白色点状物,逐渐呈蛛丝状浑浊,缓慢扩散,覆盖于尿液表面,遇此干扰可离心后的尿液上清进行检测。
(2)如果通过镜检发现大量细胞,分析其阳性可能是由于混有生殖系统分泌物造成的假阳性,则可用离心后的上清液重新测定,进行验证。
(3)对于微弱阳性的判断,可选用黑色衬纸作背景,以提高分辨力。
4、灵敏度本法灵敏度高,为0.05—0.10g/L。
尿葡萄糖班氏法定性试验【目的】掌握葡萄糖(Glu)班氏定性的方法【原理】葡萄糖含有醛基,在高热、碱性溶液中,能将试剂中的蓝色硫酸铜还原为黄色氢氧化亚铜,出现红色氧化亚铜沉淀。
三种尿蛋白定性方法的比较
傅首伟
【期刊名称】《内蒙古医学杂志》
【年(卷),期】2009(0)S7
【摘要】随着现代科技的发展,实验室的仪器设备更加自动化,实验操作也更加简便、快速,而忽略了手工方法。
笔者发现尿分析仪法(干化学试带法),磺基水杨酸法,加热
乙酸法检测尿蛋白经常出现不一致的现象。
1材料与方法1.1仪器试剂优利特尿分析仪,优利特10项试纸,200g/L磺基水杨酸,5%乙酸溶液。
1.2标本298例住院病
人新鲜随机尿。
【总页数】1页(P76-76)
【关键词】尿分析仪法;尿蛋白
【作者】傅首伟
【作者单位】内蒙古乌审旗人民医院检验科
【正文语种】中文
【中图分类】R446.12
【相关文献】
1.尿蛋白三种检验方法比较 [J], 林荣万;赖圣明;黄中超
2.三种尿蛋白定性方法的对比评价 [J], 王琳;王会平;李岩;李斌;王雀;张惠中
3.尿蛋白圆盘电泳标本三种保存方法的比较 [J], 罗有恩
4.尿蛋白定性与定量方法比较分析 [J], 薛霞;沈英;单咏梅;李冬
5.尿蛋白三种定性检测方法的对比分析 [J], 王青;王金娜;何雪;刘静;贺红艳
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尿液蛋白质测定(手工法)操作规程sop
一、项目名称:尿液蛋白质定性检查
二、方法:磺基水杨酸法
三、原理:磺基水杨酸为生物碱试剂,在酸性环境下,其阴离子可
与带正电荷的蛋白质结合成不溶性蛋白盐而沉淀。
四、试剂:10%磺基水杨酸乙醇溶液。
五、仪器:手工法
六、操作步骤:
1、取试管加尿液3ml。
2、滴加10%磺基水杨酸溶液3-4滴,形成界面。
3、如尿呈浑浊,表示有蛋白质存在,混浊深浅表示含量的多
少。
七、结果判断:
●阴性:尿液外观仍清晰透明,不呈浑浊。
●微量(+/-):轻微浑浊,隐约可见。
●阳性(+):明显的白色混浊,但无颗粒出现。
(++):稀薄乳样浑浊,出现颗粒。
(+++):混浊,有絮片状沉淀。
(++++):絮状混浊,有大凝块下沉。
八、参考范围:正常人为阴性。
九、标本要求:
1、标本应新鲜,并及时送检。
2、尿液标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。
3、容器应清洁、干燥。
十、临床意义:分为功能性、体位性、病理性蛋白尿,后者见于肾
炎、肾病综合症等。
十一、注意事项:
1、此法比较敏感。
2、如尿液浑浊,应先离心或过滤。
3、强碱性尿可出现假阴性,应加5%醋酸溶液数滴酸化后再做试
验。
4、有机碘造影剂、超大剂量使用青霉素等均可致假阳性。
5、尿中含高浓度尿酸或尿酸盐时,可呈假阳性。
十二、参考文献:
全国临床检验操作规程(第3版)
十三、
编写者:
制定日期:
修改日期:
科主任对规程认可:。
三种尿蛋白定性检测方法的比较摘要】目的:探讨分析尿蛋白定性检测的干化学法、加热乙酸法及磺基水杨酸法的三种检验方法比较。
方法:选取我院2019年3月~2019年12月期间采集的住院患者尿液标本120例为观察对象,采用干化学法、加热乙酸法及磺基水杨酸法检测尿液标本,对比三种检验方法的检查结果。
结果:三种方法阳性率比较,干化学法阳性率31.67%高于加热乙酸法和磺基水杨酸法,(P<0.05),加热乙酸法和磺基水杨酸法阳性率为22.5%和23.33%,对比差异不明显(P>0.05)。
干化学法灵敏度、误诊率高于加热乙酸法,特异度和漏诊率低于加热乙酸法,有统计学意义(P<0.05)。
结论:三种尿蛋白检验方法各有优劣,应依据具体情况选择定性检查方法,应综合分析,慎重选择检测方法,提高结果准确性。
【关键词】尿蛋白;干化学法;加热乙酸法;磺基水杨酸法蛋白尿是肾小球疾病常见的临床表现之一,也是导致肾功能进行性减退的重要原因[1]。
尿蛋白检测是肾脏疾病诊断和治疗过程中的常规检测项目。
尿液干化学法、磺基水杨酸法和加热乙酸法作为三种尿蛋白定性方法[2],在应用中各有所长,合理利用资源,得出最可靠的结果,现对三种尿蛋白定性方法进行对比分析如下。
1 资料与方法1.1一般资料选取我院2019年3月~2019年12月期间采集的住院患者尿液标本120例为观察对象,其中男80例,女40例,年龄16~72岁,平均年龄32.5±2.5岁。
1.2 方法一次性尿杯收集患者清洁中段晨尿,于2 h内检测完毕,应用尿液干化学分析仪及尿干化学十项试纸条和尿液干化学质控品、离心机、10 mL离心试管和玻璃试管、试管夹、酒精灯; 5%醋酸溶液和200 g /L ( 10% )磺基水杨酸试剂。
干化学法:检测过程严格遵循实验室标准操作流程,确保仪器状态良好、质控结果在控后,取新鲜未离心尿样检测并记录结果; 检测完毕后,取10 mL尿样400 g离心力离心5 min。
科技创新科技视界Science &Technology Vision 科技视界,,[1]。
(<40000),,。
,,(>90000)。
[2]。
,,[3]。
,,。
1材料与方法1.1标本7d 500,2h 。
1.2试剂与器材,,5%,10%。
1.3方法(1)。
、,,。
(2)。
2mL ,10%1~2,、,。
(3)。
8mL 2/3,,60°,,,2~3,,,。
1.4统计学处理、,,。
,、。
2结果500。
117,23.40%;161,32.20%,111,22.20%。
1。
、,、。
2、3。
尿蛋白三种定性检测方法的对比分析王青王金娜何雪刘静贺红艳(西安医学院医学技术学院,陕西西安710021)【摘要】目的:对比三种尿蛋白定性检测方法检测结果的差异并进行分析评价。
方法:采用干化学法、加热乙酸法、磺基水杨酸法对500例尿标本进行检测,对比分析三种尿蛋白定性方法的结果。
结果:三种方法同时检测,阳性率依次为:干化学法蛋白阳性率32.20%,磺基水杨酸法蛋白阳性率23.40%,加热乙酸法蛋白阳性率22.20%;以磺基水杨酸法作为参考方法,干化学法灵敏度95.70%高于加热乙酸法83.9%,干化学法误诊率12.5%高于加热乙酸法4.3%。
结论:三种尿蛋白定性方法各有优劣,应该根据具体情况合理选择,特别要注重干扰因素对结果的影响从而降低方法学所带来的假阳性率和假阴性率。
【关键词】尿蛋白;干化学法;加热乙酸法;磺基水杨酸法中图分类号:G307文献标识码:ADOI:10.19694/ki.issn2095-2457.2021.13.38※基金项目:2019年度陕西省大学生创新创业训练计划项目(S201911840045);2019年度西安医学院大学生创新创业训练计划项目(121519069)。
作者简介:王青,女,西安医学院医学技术学院本科生。
*通信作者:贺红艳(1976.12—),女,硕士,医学检验技术专业教师。
尿液检测中假阳性、假阴性结果的分析及监控随着尿分析仪在各大、中、小医院的普及,其标本量少,检测速度快,检测项目多,检测准确性、重复性好等优点被人们广泛接受;但由于试纸在检测过程中易受多种药物及其他外源性物质或人为因素等因素的干扰,在临床造成假阳性、假阴性结果时有发生。
我院在使用6EB-500尿十一项自动分析仪过程中,发现蛋白质,白细胞二个结果易出现假阳性或假阴性,为此本人通过几年的临床观察和实践,总结出了几个处理的方法。
1 蛋白质1.1尿蛋白测定原理(1)分析仪法检测尿液蛋白质的原理:各种酸碱指示剂在一定PH缓冲液中色调比较稳定,当溶液中存在蛋白质时,指示剂发生颜色改变。
溶液中蛋白质浓度越高,变色程度越大,这一现象称指示剂的蛋白质误差。
四溴酚蓝为酸性的碱指示剂(PH3.0-4.6),在溶液中的蛋白质作用产生颜色变化,根据光反射原理,用积分球测定试剂代颜色变化测得结果,此种方法测定敏感度为0.05g/l。
(2)磺柳酸法测定尿液中蛋白质的原理:又称磺基水杨酸法。
磺柳酸为生物碱试剂,在略低于蛋白质等电点的酸性环境中,尿蛋白氨基带正电荷,能与带负电荷的磺基水杨酸根相结合,形成不溶性蛋白盐而沉淀。
根据反应的混浊程度可作为尿蛋白的定性或半定量检查。
该方法检测尿中蛋白质含量的敏感度为0.05-0.1g/l。
(3)加热乙酸法:为传统的经典方法。
加热煮沸使蛋白变性,凝固(但本周蛋白则反而溶解),然后加酸使尿液PH接近尿蛋白质等电点(PH 4.7),在含有适量无机盐状况下,蛋白质更易于变形下沉,同时可消除某些磷酸盐(如无定形磷酸盐,铵镁磷酸盐等),在碱性条件下易析出结晶,造成混浊的干扰,但是敏感度较低,一般在0.15g/l左右。
1.2检测出现假阳性和假阴性尿的原因(1)试纸本身存在着些质量问题;(2)环境温度的影响;(3)尿PH值的变化对测定影响较大,当尿液PH≥9时超过试纸带的缓冲能力,结果出现假阳性,当尿液PH≤3时蛋白质变性结果呈假阴性。
科学咨询/科技管理2019年第33期(总第652期)摘 要:磺基水杨酸方法是一种常用的尿蛋白定性检测方法,可以检测球蛋白、白蛋白、本周蛋白等,是尿蛋白检测的初步筛选方法,也是临床检验专业学生必须掌握的实验方法。
利用蛋白质等电点的原理,在略低于蛋白质等电点的pH条件下,蛋白质氨基阳离子与磺基水杨酸的酸根阴离子结合,形成不溶性蛋白盐沉淀。
根据反应的混浊程度,我们可做尿蛋白的定性检查。
因此,溶液的pH值是影响实验结果的关键因素。
因此,我们将设计相应的探索性实验,验证不同pH对实验结果的影响,并将此作为实验教学的重点,扩展学生的科研思维。
关键词:尿蛋白;磺基水杨酸;酸碱度;新鲜尿液;生理盐水尿蛋白检测是一项非常重要的常规检测,可以帮助临床医生诊断疾病,了解患者病情以及判断药物疗效。
尿蛋白检测分为湿化学检验和干化学检验。
干化学检验是利用尿液干化学分析仪检测尿液中清蛋白的一种方法,对尿液中的其他蛋白灵敏度极低[1,2]。
然而,湿化学检验不仅可以检测尿液中的清蛋白,还可以检测球蛋白、本周蛋白等[1,2]。
因此,湿化学检验在尿蛋白检测中具有不可替代的作用。
湿化学检测方法中,最常用的是磺基水杨酸方法。
其可以检测球蛋白、白蛋白、本周蛋白等,是尿蛋白检测的初步筛选方法,也是临床检验专业学生必须掌握的实验方法。
然而,这种检测方法会受到很多因素的影响,如尿液的酸碱度(pH)。
当尿液的pH>9.0或pH<3时,其会引起尿蛋白检测出现假阴性。
因此,为了减少尿液酸碱度对检测结果的影响,我们在检测前需要先检测尿液的pH,并在必要的时候,将尿液的pH值调到5~6左右,再进行尿蛋白的测定[1—3]。
本实验以磺基水杨酸尿蛋白定性检测为研究对象,通过氢氧化钠和乙酸调节蛋白尿样本(尿液类似物)的酸碱度,再使用磺基水杨酸检测尿蛋白。
这种实验设计非常有利于学生理解和掌握磺基水杨酸尿蛋白定性的检测方法。
一、试验试剂去离子水、生理盐水(0.9% NaCl)、新鲜尿液(36人份)、蛋白尿标本(30人份)、乙酸溶液(纯度为99.5%),NaOH(1M)、磺基水杨酸溶液200g/L、Mettler Toled0 pH计配套校准溶液、人血浆(6人份)。
尿液分析仪法与尿液沉渣镜检法结果分析及探讨尿液分析仪法是一种自动化检测尿液的方法,可以高效、准确地测定尿液中的物质含量和化学成分。
使用尿液分析仪可以得到尿液的生化指标,如蛋白质、葡萄糖、酸碱度等,以及一些特定的疾病指标,如泌尿系统感染的标志物、肾功能的指标等。
尿液分析仪法的优点在于高度自动化、结果准确可靠、操作简便快速。
然而,尿液分析仪法的缺点是较为昂贵,需要专业设备和维护,同时不适用于一些特定疾病诊断,无法对尿液中的细胞、结晶等微小颗粒进行准确检测。
尿液分析仪法和尿液沉渣镜检法在尿液检验中各有其独特优点,可以相互补充和比较。
对于常见的尿液异常情况,如血尿、蛋白尿、尿路感染等,两种方法的结果可以相互印证,提高诊断的准确性。
在临床实践中,可以先使用尿液分析仪法进行初步筛查,然后根据结果选择性地进行尿液沉渣镜检法,以进一步明确异常情况和指导治疗。
同时,尿液分析仪法和尿液沉渣镜检法的结果还可以与其他检验方法,如尿蛋白电泳、尿细胞学检查等进行比较,以提高诊断的准确性和可靠性。
值得注意的是,尿液分析仪法和尿液沉渣镜检法的结果都是定性和半定量的,并且结果可能受到多种因素的干扰。
因此,在进行尿液检验时,需要结合患者的临床症状、体征以及其他检查结果进行综合分析和判断,以得出正确的诊断和治疗方案。
总之,尿液分析仪法和尿液沉渣镜检法是常见的尿液检验方法,各有其优缺点。
在临床实践中,可以根据具体情况选择使用其中一种或结合使用,以提高尿液检验的准确性和可靠性。
尿液检验结果的分析和探讨需要综合考虑多种因素,以作出正确的诊断和治疗决策。
World Latest Medicine Information (Electronic Version) 2016 Vo1.16 No.47
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·医学检验·
0 引言
自动尿液分析仪在各级医疗机构中早已广泛成为疾病的筛选或辅助诊断和健康普查不可缺少的项目。
但许多因素在
一定程度上影响了仪器的准确性[1]。
而同时操作者又忽略了引起尿蛋白假阳性和假阴性的因素。
笔者对1000份尿液标本同时进行了尿分析仪法与磺基水杨酸法的检测,对两种方法检测尿蛋白的结果做了分析与比较,实验如下:
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
采用桂林医疗电子仪器厂生产的Uritest-300尿液分析仪及配套试纸条。
10%磺基水杨酸乙醇溶液按《全国临床检
验操作规程》配制[2]。
1.2 标本来源
检测对象为2014年4月-9月来笔者所在医院分部的住院患者及社区老年人体检者1000例,留取合格的中段尿,有随机尿和晨尿。
结果均在2H 内完成。
其中男459例,女541例。
1.3 方法
将尿液分析纸条浸入用专门的塑料杯盛装的尿液标本内
2S 后取出放在滤纸上吸去多余的尿液,然后放入Uritest-300尿液分析仪上进行分析。
如遇浑浊尿再将尿标本以1500r/min 离心5min,用上清液做分析;另取小试管加尿液3-5ML,滴加磺基水杨酸乙醇试剂3-4滴,形成界面。
如尿显浑浊,表示有蛋白存在,浑浊深浅表示含量多少。
结果判断阴性(-):不显浑浊,尿液外观仍清晰透明(相当于尿液分析法-)
微量(+-):轻微浑浊,隐约可见(相当于尿液分析法+- 0.15g/L)
阳性(+):明显白色浑浊,但无颗粒出现(相当于尿液分析法+)(2+):稀薄乳样浑浊,出现颗粒(相当于尿液分析法2+)(3+):乳浊,有絮片状沉淀(相当于分析仪法3+ >3g/L)
尿液分析仪法与磺基水杨酸法检测尿蛋白的分析与探讨
潘兴益
(广西柳州市中医院,广西 柳州)
摘要:目的:通过对尿蛋白进行尿液分析仪法和磺基水杨酸法两种方法的检测与分析,探讨尿常规分析中尿蛋白最佳方法。
方法:抽取笔者所在医院分部临床科室住院病人及社区老年人体检1000份尿液标本,同时进行尿液分析仪法和磺基水杨酸法进行分析比较其结果。
结果:尿液分析仪法和磺基水杨酸法检测尿蛋白均阳性占30.9%,均阴性占62.0%,二者符合率为92.9%,尿液分析仪法阳性而磺基水杨酸法阴性占3.3%,尿液分析仪法阴性,而磺基水杨酸法阳性占3.8%,二者不符合率为7.1%。
结论:尿液分析检查中有必要将尿液分析仪法和尿蛋白定性法结合起来,才能为临床提供更为准确可靠的检验结果。
关键词:尿液分析仪;磺基水杨酸法;蛋白质中图分类号:R446.12 文献标识码:B DOI:10.3969/j.issn.1671-3141.2016.47.124
(4+):花絮状浑浊,有大凝块下沉(相当于尿液分析法3+
>3g/L)
1.4 统计学处理
应用SPSS17.0统计学软件进行分析,计数资料采用χ2检验P <0.05为差异有统计学意义。
2 结果
尿液分析法为阳性且磺基水杨酸法为阳性(均包括出现微量(+-)在内)共309例,占标本总数的30.9%,两种方法均为阴性620例,占标本总数的62.0%,两者符合率为92.9%;尿液分析仪法阳性,而磺基水杨酸法为阴性33例,占标本总数的3.3%。
尿液分析仪法阴性,而磺基水杨酸法阳性有38例,占总数的3.8%。
两者不符合率为7.1%,两种方法比较差异有统计学意义(P <0.05)。
3 讨论
尿液分析仪法和传统的尿蛋白定性磺基水杨酸法检查
有着明显差异,出现了假阴性假阳性的结果。
尿液分析仪法检测蛋白质的原理是根据染料结合蛋白质误差原理,蛋白质染料结合形成复合物产生色变,特别是对白蛋白的反应比对球蛋白,血红蛋白,本-周蛋白和粘蛋白更为灵敏。
因此,阴性结果并不能排除尿液中这些蛋白质的存在而引起假阴性。
高比重尿,高缓冲尿,碱性尿,某些消毒剂或清洁剂的污染可致假阳性结果。
尤为值得注意的是标本中尿胆原(URO+1 33umol/L)阳性时即可引起尿蛋白假阳性,且假阳性程度与URO 呈正相关。
尿液分析仪法既简单又快速,但临床中绝不可单纯依靠尿液分析仪进行分析,一定要同时结合敏感的蛋白质定性法,两者结合起来才能有效正确的为临床提供检验结果。
参考文献
[1] 张修亮.尿液分析仪法与尿沉渣镜检结果分析及探讨[J].中国医
药导报,2010,12(35):58-60.[2] 叶应妩,王毓三.全国临床操作规程[M].第三版.南京:东南大学
出版社,2006:123-124.。