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第十章动物营养物质需要的研究方法思考题：一. 消化试验和代谢试验有何异同，试验目的和方法有何区别？消化实验就是测定饲料和粪便中某种营养物质的含量，折算为绝干样中的含量，计算消化率。
代谢试验需要在消化试验基础上增加收集尿液的设备，并测定尿液排泄总量以及尿液中能量或营养物质含量，其它步骤与消化试验相同消化实验的目的是测定饲料营养物质及能量消化率消化试验的方法：全收粪法体内法指示剂法(内源和外源)消化试验尼龙袋法动物消化液体外法微生物消化酶代谢试验的目的是测定饲料的代谢能或营养物质利用率。
家禽由于其粪尿一起经泄殖腔排出，粪尿可以同时收集，适合进行代谢试验。
猪、牛等动物进行代谢试验时，需要在消化试验基础上增加收集尿液的设备，并测定尿液排泄总量以及尿液中能量或营养物质含量，其它步骤与消化试验相同。
家禽的代谢试验根据饲喂方式的差别分为诱饲法和强饲法。
二. 全粪收集法和指示剂法各自有哪些优点和缺点？全粪收集法：全粪收集法操作繁琐，工作量大，要求准确记录试验动物的采食量，且需收集全部粪便，通常准确的收集全部粪便难度较大，但该方法的准确度高。
矿物质的消化率难于应用全粪收集法。
由于动物消化道排出大量的内源矿物质，测定结果误差较大，所以，应用此方法测定矿物元素的吸收率不准确。
维生素在消化道内有大量的合成和破坏，因而，测定饲料维生素的消化率也没有意义。
指示剂法：指示剂法可以减少全部收粪法中每日收集和记录试畜采食量与排粪量的麻烦，省时省力，尤其是在收集全部粪便较困难的情况下，采用指示剂法更具优越性。
由于搅拌技术及动物采食、消化饲料方面的原因，加入外源指示物的比例不宜过高，故外源指示剂法不宜用于直接测定单个饲料养分的消化率，只能相对准确地测出整个饲粮的能量、干物质与有机物的消化率。
指示剂方法的缺点是，很难找到一种完全不被吸收和回收率高的指示剂。
近年来有报道认为氧化钛（TiO2）作为指示剂具有更高的回收率。
由于分析测定方法上的误差，外源指示剂法和内源指示物在粪中的回收率均不能达到100%，作严格的饲料消化率测定时，必须利用全收粪法进行校正。
动物营养学的研究方法动物营养学是研究动物摄取、消化、吸收和利用营养物质的科学，因此，如何科学地进行动物营养学研究是十分重要的。
动物营养学研究方法多种多样，包括用于测定营养素的化学方法、测定疾病的生物学方法、测定细胞和分子水平的分子学方法等。
本文将介绍一些常用的动物营养学研究方法。
一、生物学方法生物学方法是一种研究动物对各种饲料的反应和生理代谢的方法。
这类方法通常涉及动物的生长速度、饲料摄入量、元素代谢率、泌乳量等指标的测定。
常用的生物学方法包括：1.生长研究生长研究是一种基本的动物营养学方法。
通过对动物生长曲线的测定，可以了解不同饲料对动物生长的影响，从而确定动物所需的饲料或营养素。
2. 元素代谢率测定元素代谢率（EMR）测定是研究代谢的重要方法，通常用于测定动物对不同饲料中矿物质的吸收情况。
测定EMR需要对饲料进行标记，然后测定动物体内的同位素含量，进而计算出EMR。
3. 泌乳研究泌乳研究是以母牛产奶量、奶脂率和奶蛋白质含量等为观测指标的研究方法。
通过对不同饲料组的牛奶产量和品质的比较，可以确定最适宜的饲料或营养素组合。
二、化学方法化学方法是一种量化营养素的方法。
这种方法通常基于测定动物组织或排泄物中的化学成分，从而研究不同饲料或营养素对营养物质的影响。
常用的化学方法包括：1. 量化饲料成分化学方法最基本的应用之一是分析不同饲料中的主要成分。
通过分析饲料中碳水化合物、脂肪、蛋白质、维生素和矿物质等主要成分，可以为动物研究提供重要的营养学信息。
2. 分析动物组织或排泄物中的化学成分化学方法也可以用于分析动物体内的化学成分。
例如，通过分析粪便、尿液、尿素和血清等样品中的蛋白质、氮、磷、钙等元素，可以确定动物对特定饲料的反应。
三、分子学方法分子学方法是一种研究营养素和基因之间关系的方法，它可以揭示营养素与基因之间的相互作用，从而为动物营养学研究提供更深入的信息。
常见的分子学方法包括：1. 分子生物学方法分子生物学方法主要研究营养与生物过程之间的关系。
一 1.饱和链烷技术测定放牧家畜采食量及采食组成的原理和方法？链烷（alkane）是一种饱和的直连碳氢化合物，植物蜡质中所含的链烷一般含有21~35个碳原子，其中奇数链的碳原子占大多数，而且不同牧草品种链烷的含量和模式不同。
由于链烷在草食动物的消化道中不被消化，因此，根据采食牧草及排泄的粪中链烷含量和模式来评价草食动物对牧草的消化率及食性组成，以及结合外源定量投喂的偶数烷，用内外双指示剂的方法来评价草食动物的采食量。
*采食量计算：应用链烷估测采食量的原理就是根据链烷浓度在消化过程中变化，求出排粪量（F）和牧草的消化率（D），之后根据公式DMI=F/（1-D）求出干物质的采食量（DMI）。
*采食组成估测：通过放牧动物粪中链烷组成和所提供植物品种的链烷组成对比进行。
由于链烷的回收率不同，链烷的浓度必须用回收率的差异加以矫正，为了防止与实际日粮的偏差，常用几种碳链长的链烷。
Dove和Moore （1995）建立了一个“EatWhat”软件，可以利用牧草和放牧动物粪中链烷浓度寻找动物最适宜的食性组成。
二 1.简述双标记法测定食糜流量方法？原理：假定消化道某一部位食糜的流入与流出符合一室模型。
其中存在两个不同的相，两种标记物在两相中的分配系数不同；物质流入与流出是均衡的；并且无法取得代表性样本。
则标记物的浓度与注入时间的关系为：C(t)=C0(1-e-kt)，C0=f/Mk双标记测定法可以通过重组校正而获得代表性食糜样本。
2.试述常用液相和固相标记物及其制备？近年来最常用的液相标记物为Co-EDTA；颗粒标记物为Cr-CWC铬标记纤维（Cr-CWC)通过特定的媒染过程，使铬与植物细胞壁间形成很强的复合物，当媒染物中的铬含量超过8%时，这种复合物在瘤胃液和酸性介质中有良好的稳定性，并且基本上不被消化，这种复合物是目前所应用的颗粒相标记物中最独特的一种。
Cr标记纤维制备：称取一定量的重铬酸钠，溶于温水中，倒入待测饲料内，使铬的含量达到待测饲料干物质的12%-14%。
一、简答题1.简述体外试验、体内试验和数字模拟试验之间的关系？2.动物消化率的常用测定方法有哪些？1.体内消化实验：用动物测定饲料养分经过其消化道后的消化率常称体内消化实验。
体内消化实验通常分为全收粪法(常规法)和指示剂法。
因收粪的部位不同，全收粪法又可分为肛门收粪法（从肛门收集动物的全部粪便）和回肠末端收粪法（通过外科手术在回肠末端安装一瘘管收集食糜，或施以回─直肠吻合术，在肛门收集回肠食糜）。
指示剂法也可分为内源指示剂（是指用饲粮或饲料自身所含有的不可消化吸收的物质作指示剂，如盐酸不溶灰分。
）和外源指示剂法（外源指示剂是加入饲粮中的指示物质，如用Cr2O3作指示剂），进一步仍可分为肛门收粪和回肠收粪。
2.尼龙袋法：此法是将被测饲料装入一特制尼龙袋，经瘤胃瘘管放入瘤胃中，48小时后取出，冲洗干净，烘干称重，与放入前的饲料蛋白质含量相比，差值即为饲料可降解蛋白量。
目前国际上已普遍采用此法测定饲料蛋白质的降解率。
3. 离体消化实验：指模拟消化道的环境，在体外(实验室内)进行饲料的消化。
可分为消化道消化液法（用安装瘘管的办法收取小肠液或瘤胃液，在试管中进行孵化）和人工消化液法（消化液不是来自消化道，而是采用合成的消化酶，模拟制成消化液）。
这两类方法也常混合使用。
3.测定营养物质在动物体内沉积率的常用方法有哪些？4.什么是蛋白质周转？测定方法有哪些？动物机体蛋白处于一个不断合成和分解的过程。
机体组织在合成新的蛋白质时，不断更新旧的组织蛋白质，被更新的组织蛋白质降解为氨基酸，其中大部分又重新合成组织蛋白质，少部分通过其他途径进行转化。
这种合成和降解的两个可逆过程统称为蛋白质的周转代谢。
蛋白质合成率的测定可以通过体内实验进行，通常采用同位素标记法。
目前，用于测定蛋白质合成率的方法主要有：(1)连续灌注法，其基本原理为：用含一定浓度同位素标记氨基酸溶液连续稳定向动物体内细胞外代谢池引人数小时，使前体代谢池中的比放射性活性达到一个“坪”值。
《动物营养实验技术》（硕士）讲稿教学大纲一、课程性质和任务本门课程的实践性很强，全部教学内容要求在实验室完成。
学完本课程后，要能够根据特定实验项目进行实验用品计划和建立新实验室；能够根据所掌握的技能对饲料原料、配合饲料产品及其半成品进行营养成分分析和品质鉴定；结合动物实验对饲料原料、配合饲料等进行生物学评定；掌握一些精密仪器的工作原理和使用方法等。
二、主要教学内容1.动物营养实验基础药品的规格、合理使用和管理；容量器的使用和校正；实验室常用洗涤剂的配制；指示剂的配制；标准溶液的配制和标定。
2.饲料样品的采集与制备样品的采集与制样方法（采集样品的目的要求，采集方法原则，制备样品方法等）；风干样品的制备；主要内容为制样过程和方法；半干样品的制备（附：初水分测定）；样品的登记与保管。
3.饲料营养成分分析饲料干物质（水分）的测定；饲料粗灰分测定；饲料粗蛋白质测定；饲料粗脂肪测定；饲料粗纤维测定；饲料无氮浸出物计算；饲料钙测定；饲料总磷测定；饲料水溶性氯化物测定。
4.消化、代谢试验（串讲或幻灯片演示）猪的消化实验；鸡代谢实验；动物营养实验方法简介。
5.精密仪器和贵重仪器的使用安捷伦6890N气相色谱仪的熟悉与化学工作站的简单操作、测热仪的使用、紫外分光光度计等的演示。
三、教学基本要求1.掌握动物营养与饲料分析必备的一般实验室操作技能，概略养分分析法和某些纯养分测定法；了解饲养分析实验室的要求及各实验所需仪器，药品的规格、数量等，能够进行实验用品计划和建立新实验室。
2.消化代谢实验。
3.能根据文献所提供的方法做出未做过的实验；能编写实验指导书；能指导本、专科学生进行动物营养学和饲养学实验.4.创新性设计实验，对现有实验方法有所改进。
四、参考学时分配五、主要参考书目及文献1．饲料分析与饲料质量检测技术，杨胜主编，中国农业大学出版社，1993。
2．实用饲料分析手册，宁开桂编，中国农业科技出版社，1993。
3．畜禽营养与饲料学技能教程，宋金昌等编，中国农业科技出版社，1999。
