第二节分光光度法
(一)基础知识
分类号：P2-O
一、填空题
1．分光光度法测定样品的基本原理是利用朗伯—比尔定律，根据不同浓度样品溶液对光信号具有不同的，对待测组分进行定量测定。
答案：吸光度(或吸光性，或吸收)
2．应用分光光度法测定样品时，校正波长是为了检验波长刻度与实际波长的，并通过适当方法进行修正，以消除因波长刻度的误差引起的光度测定误差。
答案：符合程度
3．分光光度法测定样品时，比色皿表面不清洁是造成测量误差的常见原因之一，每当测定有色溶液后，一定要充分洗涤。可用涮洗，或用浸泡。注意浸泡时间不宜过长，以防比色皿脱胶损坏。
答案：相应的溶剂(1+3)HNO3
二、判断题
1．分光光度计可根据使用的波长范围、光路的构造、单色器的结构、扫描的机构分为不同类型的光度计。( )
答案：正确
2．应用分光光度法进行试样测定时，由于不同浓度下的测定误差不同，因此选择最适宜的测定浓度可减少测定误差。一般来说，透光度在20％～65％或吸光值在0.2～0.7之间时，测定误差相对较小。( )
答案：正确
3．分光光度法主要应用于测定样品中的常量组分含量。( )
答案：错误
正确答案为：分光光度法主要应用于测定样品中的微量组分。
4．应用分光光度法进行样品测定时，同一组比色皿之间的差值应小于测定误差。( ) 答案：错误
正确答案为：测定同一溶液时，同组比色皿之间吸光度相差应小于0.005，否则需进行校正。
5．应用分光光度法进行样品测定时，摩尔吸光系数随比色皿厚度的变化而变化。( ) 答案：错误
正确答案为：摩尔吸光系数与比色皿厚度无关。
三、选择题
1．利用分光光度法测定样品时，下列因素中不是产生偏离朗伯—比
尔定律的主要原因。( )
A．所用试剂的纯度不够的影响B．非吸收光的影响
C．非单色光的影响D．被测组分发生解离、缔合等化学因素
答案：A
2．分光光度计波长准确度是指单色光最大强度的波长值与波长指示值。( )
A．之和B．之差C．乘积
答案：B
3．分光光度计吸光度的准确性是反映仪器性能的重要指标，一般常用标准溶液进行吸光度校正。( )
A．碱性重铬酸钾B．酸性重铬酸钾C．高锰酸钾
答案：A
4．分光光度计通常使用的比色皿具有性，使用前应做好标记。( ) A．选择B．渗透C．方向
答案：C
5．使用分光光度法测试样品，校正比色皿时，应将注入比色皿中，以其中吸收最小的比色皿为参比，测定其他比色皿的吸光度。( )
A.纯净蒸馏水B．乙醇C．三氯甲烷
答案：A
6．朗伯，比尔定律A=kcL中，摩尔吸光系数k值表示该物质对某波长光的吸收能力愈强，比色测定的灵敏度就愈高。( )
A．愈大B．愈小C．大小一样
答案：A
7．在比色分析中为了提高分析的灵敏度，必须选择摩尔吸光系数有色化合物，选择具有最大众值的波长作入射光。( )
A.大的B。小的C．大小一样
答案：A
8．用紫外分光光度法测定样品时，比色皿应选择材质的。( )
A.石英B。玻璃
答案：A
9．一般常把nm波长的光称为紫外光。( )
A．200～800 B．200～400 C．100～600
答案：B
10．一般常把nm波长的光称为可见光。( )
A．200～800 B．400(或380)～800(或780) C．400～860
答案：B
11．朗伯-比尔定律A=kcL中，摩尔吸光系数k值与无关。( )
A.入射光的波长B．显色溶液温度C．测定时的取样体积
D．有色溶液的性质
答案：C
12．一般分光光度计吸光度的读数最多有位有效数字。( )
A． 3 B． 4 C． 2
答案：A
四、问答题
1．分光光度法是环境监测中常用的方法，简述分光光度法的主要特点。
答案：(1)灵敏度高；
(2)准确度高：
(3)适用范围广；
(4)操作简便、快速：
(5)价格低廉。
2．简述校正分光光度计波长的方法。
答案：校正波长一般使用分光光度计光源中的稳定线光谱或有稳定亮线的外部光源，把光束导入光路进行校正，或者测定已知光谱样品的光谱，与标准光谱对照进行校正。
3．简述分光光度法测定样品时，选用比色皿应该考虑的主要因素。
答案：(1)测定波长。比色液吸收波长在370nm以上时可选用玻璃或石英比色皿，在370nm以下时必须使用石英比色皿；
(2)光程。比色皿有不同光程长度，通常多用10.0mm的比色皿，选择比色皿的光
程长度应视所测溶液的吸光度而定，以使其吸光度在0.1～0.7之间为宜。
4．如何检查分光光度计的灵敏度?
答案：灵敏度是反映仪器测量性能的重要指标，检查方法为：配制0.001％重铬酸钾溶液，用1cm比色皿装入蒸馏水作参比，于440nm处测得的吸光度应大于0.010。若示值＜0.010，可适当增加灵敏度的挡数，如仍不能达到该值，应检查或更换光电管。
5．在光度分析中，如何消除共存离子的干扰?
答案：(1)尽可能采用选择性高、灵敏度也高的特效试剂；
(2)控制酸度，使干扰离子不产生显色反应；
(3)加入掩蔽剂，使干扰离子被络合而不发生干扰，而待测离子不与掩蔽剂反应；
(4)加入氧化剂或还原剂，改变干扰离子的价态以消除干扰；
(5)选择适当的波长以消除干扰：
