动物细胞工程试题
1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基
B都需用培养箱
C都要在无菌条件下进行
D都可体现细胞的全能性
解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。
动物细胞培养：
1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。
2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。
4、动物细胞培养需要满足以下条件
(1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。
(2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。
(3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。
(4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
5、动物细胞培养的过程：
取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D）
A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同
解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。
3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A）
①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植
A．①②B．①③C．②③D．③④
解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。
4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D）
A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C. 将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
解析：A错误一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差；B错误单克隆抗体是杂交瘤细胞合成并分泌的，杂交瘤细胞是由浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成的；C错误制备单克隆抗体过程中的筛选：筛选是将未融合的B 淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B瘤融合的细胞。筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。
5用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是()
A. 将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞
B. 用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C. 用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D. 筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体
解析：动物细胞没有细胞壁，所以不需要纤维素酶去除细胞壁
6某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_多___。
(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是血清可以补充合成培养基中缺乏的物质____。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_
维持培养液pH _______。
(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长__停止___。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更___多___。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_胰蛋白酶____消化处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的__抗生素_______。
(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入__Y_____，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的__mRNA____或____蛋白质___合成水平的差异，确定Y的药效。
7回答下列有关细胞培养的问题
(1)在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面__相互接触____时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的__接触抑制______。此时，瓶壁上形成的细胞层数是__单层_ ______。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是___胰蛋白酶______ _______。
(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_衰老甚至死亡____现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成__不死性______细胞，该种细胞的黏着性__降低______，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量___减少_________。
(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是_由于死细胞膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色_____。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到_中____期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在__超低温______条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中
