紫外-可见分光光度法在植物多糖含量测定中的应用

第５卷第４期　２０１４年１２月　热带生物学报　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＴＲＯＰＩＣＡＬ　ＢＩＯＬＯＧＹ　Ｖｏ１．５　Ｎｏ．４　Ｄｅｃ．２０１４　

文章编号：１６７４—７０５４（２０１４）０４—０４００—０５　

紫外一可见分光光度法测定沉香中　

色酮成分的含量　

杨锦玲　，梅文莉　，余海谦　，左文健　，戴好富　

（１．中国热带农业科学院热带生物技术研究所／海南省沉香工程技术研究中心，海南海口５７１１０１；　２．海南大学园艺园林学院，海南海口５７０２２８）　

摘要：建立沉香中色酮类化合物总含量测定方法，首次利用紫外分光光度计对１１批沉香乙醇提取物进行　测定。结果表明，该方法精密度、重复性、稳定性和加样回收率均达到要求，１１批沉香样品中色酮含量范围　为４．５％一２７．１％，根据色酮成分百分含量，将其分成３个等级。该方法简便快速，为沉香中色酮类成分含量　测定和质量评价提供了科学方法。　关键词：沉香；色酮类化合物；紫外分光光度法；含量测定　中图分类号：Ｒ　２８４．１　文献标志码：Ａ　

国产沉香为瑞香科植物白木香Ａｑｕｉｌａｒｉａ　ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌｏｕｒ．）Ｇｉｌｇ含有树脂的木材，主产于我国海南、广东　等地，是我国传统的名贵药材　］。沉香中的特征性成分为２一（２一苯乙基）色酮类化合物和倍半萜类化　

合物，目前已发现了８６个２一（２一苯乙基）色酮类化合物，其中有４２个ｆｌｉｄｅｒｓｉａ类型的色酮，２７个５，６，７，　８，一四氢一２一（２一苯乙基）色酮，３个单环氧一四氢一２一（２一苯乙基）色酮，３个双环氧～四氢一２～（２一　苯乙基）色酮和１１个多聚２一（２一苯乙基）色酮　Ｊ。近年来，２一（２一苯乙基）色酮类化合物作为沉香真伪　

鉴别及其质量评价的诊断ｌ生成分，被国内外学者广泛关注，多种分析方法均被用于分析２一（２一苯乙基）　

色酮类化合物，例如：梅文莉等根据ｆｌｉｄｅｒｓｉａ类型色酮化合物的ＥＩ质谱数据，总结出了此类化合物的ＥＩ质　谱特征及裂解规律，从而可以利用ＧＣ．ＭＳ对样品中的ｆｌｉｄｅｒｓｉａ类型２一（２一苯乙基）色酮化合物的结构进　行初步鉴定　；屠鹏飞等利用ＨＰＬＣ—ＭＳ总结出了ＥＳＩ源四氢一２一（２一苯乙基）色酮类化合物裂解规　

紫外可见分光光度法在黄酮测定中的应用

摘要】 黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物，种类繁多，大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷，部分为游离态或与鞣质结合存在。近年来，黄酮类化合物以其广谱的药理作用倍受青睐，人们对含有黄酮的化合物进行大量研究，以期获得黄酮含量较高的中草药，黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。

【关键词】 紫外可见分光 光度法 黄酮测定

黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物，种类繁多，大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷，部分为游离态或与鞣质结合存在。黄酮化合物系色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物，一般具有C6-C3-C6的基本骨架结构。近年来，黄酮类化合物以其广谱的药理作用倍受青睐，人们对含有黄酮的化合物进行大量研究，以期获得黄酮含量较高的中草药。因此黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。

1 紫外—可见分光光度法在药物分析中的应用

紫外可见分光光度法以其设备简单、适用性广、准确度和精密度较好等特点，已在中药总黄酮含量分析中发挥着重要作用，并已经成为应用最广泛的分析手段之一[1]。据统计，在药物分析中，分光光度法占29.1% ，色谱法占25.5% ，荧光、化学发光法占2.4% ，与光度法有关的方法共计占31.5% ，由此可见，光度法是药物分析最常用的方法之一[2]。研究结果表明，光度法在药物分析中的可靠性可以和色谱法相媲美 ，但其设备简单、操作方便、价格低廉、易于普及等特点是色谱法难于做到的[3]。

2 紫外—可见分光光度法在黄酮类化合物中的应用

紫外可见分光光度法是利用某些物质的分子在200～800 nm光谱区的吸光度来进行分析测定的方法。一般以中草药、中药制剂自身所含的黄酮类化合物作为对照品，在紫外区或经显色后在可见光区，选择对照品的最大吸收波长处进行测定[4]。中草药的成分十分复杂，在进行黄酮含量测定时要根据具体条件选择适当方法。

ｌ０　北方药学２０１４年第１１卷第１期　紫外一可见分光光度法测定复方苯甲酸软膏中水杨酸的含量　王　慧（河南省洛阳市食品药品检验所洛阳４７１０２３）　摘要：目的：建立复方苯甲酸软膏中水杨酸含量的测定方法。方法：采用紫外一可见分光光度法，在２９７ｎｍ波长处测定水杨酸的　含量。结果：水杨酸在２．９４６～２９．４６　ｇ・ｍｌ－－（ｒ＝０．９９９９）的浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系；平均回收率为９８。２３％，ＲＳＤ为　０．７７％。结论：该方法简便、准确、重现性好，可为该制剂的质量评价提供依据。　关键词：复方苯甲酸软膏水杨酸紫外一可见分光光度法含量　中图分类号：Ｒ９２７．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１６７２—８３５１（２０１４）０１—００１０—０１　复方苯甲酸软膏『批准文号：豫食药监注制（２００４）０３００００４　号１是我市第三人民医院自制的复方制剂，由水杨酸、苯甲酸及　基质羊毛脂、凡士林组成，具有软化角质、杀灭霉菌的作用。制　剂质量标准仅对总酸量进行控制，本文采用紫外一可见分光光　度法测定该制剂中水杨酸的含量。　１仪器与试药　岛津ｕｖ一２４０１ＰＣ紫外一可见分光光度计；Ｐｒｅｅｉｓａ　９２ＳＭ一　２０２Ａ—ＤＲ电子分析天平；ＫＨ５２００ＤＥ型数控超声波清洗器。　水杨酸对照品（批号：１００１０６—２００３０３，供含量测定用），购　自中国药品生物制品检定所；复方苯甲酸乳膏（批号：　２０１２１１２６、２０１３０１１５、２０１３０３２４），水杨酸含量：３０ｒａｇ・ｇ～，由洛　阳市第＿一人民医院制剂室提供。水为娃哈哈纯净水；其他试剂　为分析纯。　２方法与结果　２．１对照品溶液的制备：取水杨酸对照品约６０ｒａｇ，精密称定，　置１００ｍｌ量瓶中，加水适量，超声３０ｒａｉｎ使溶解，用水稀释至　刻度，摇匀，作为对照品储备液。精密量取２ｒｎｌ，置ｌＯＯｍｌ量瓶　中，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。　２．２供试品溶液的制备：取本品ｌｇ。置小烧杯中，加水约５０ｍｌ，　８０％水浴中加热使基质熔化并搅拌至固体物全部溶解，放冷，　过滤至ｌＯＯｍｌ量瓶中，用适量水洗涤烧杯和滤器，合并滤液并　加水至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液２ｍｌ，置５０ｍｌ量瓶　中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。　２．３阴性样品溶液：按处方比例及相同工艺制备不含水杨酸的　阴性样品溶液，按“２．２”项下方法同法制备。　２．４测定波长的选择：取水杨酸对照品溶液、供试品溶液、阴性　样品溶液，分别在２３０～４０Ｏｈｍ波长范围内扫描，测得水杨酸最　大波长为２９７ｎｍ，而苯甲酸及基质在２９７ｎｍ波长处无吸收，故　选择２９７ｎｍ作为测定波长（见图１）。　２．５线性关系考察：精密量取对照品储备液０．５、１．０、２．０、３．０、　５．Ｏｒａｌ，分别置ｌＯＯｍｌ量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，作为　标准溶液，在２９７ｎｍ波长处分别测定吸光度。以标准溶液浓度　ｘ为横坐标，吸光度（Ｙ）为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：　Ｙ水杨　＝３９．８４Ｘ一０．２４９１，ｒ＝Ｏ．９９９９（ｎ＝５）。　结果表明：水杨酸在２．９４６—２９．４６　ｇ・ｍｌ　范围内与吸光度　线性关系良好。　２．６精密度试验：取水杨酸对照品溶液，在２９７ｎｍ波长处测定　ｊ；ｌ　｝　叫１　ｌ；　ｌ　【ｌ　ｌ　０　ｌ　ｌ　ｌ　棚　叫｛　、　Ｉ　／　ｊ＼　ｊ　１　Ｉ　｝　０　｝　＼／　１　ｌ　－　ｊ　／　。　１　ｌ　、　、　＿　～一一…一一　。　—　。　—　。　——　—　—　・　昔—　——　——　．　ａ对照品溶液　ｂ．供试品溶液　ｃ．阴性样品溶液　图１紫外扫描光谱圈　吸光度５次，ＲＳＤ为０．６７％，表明仪器精密度良好。　２．７稳定性试验：取同一供试品溶液，在配置后０、４、８、１２ｈ进　行测定，结果其吸光度的ＲＳＤ为Ｏ．９３％。表明供试品溶液在阴　凉处密闭放置１２ｈ内基本稳定。　２．８重复性试验：取同一供试品６份，按“２－２”项下方法进行制　备并测定其吸光度，结果其ＲＳＤ为０．９１％。　２．９回收率试验：精密称取已知含量（水杨酸含量为３０．１４ｒａｇ・　）　的供试品６份，每份约０．５ｇ，分别置１００ｍｌ量瓶中，再分别精　密加入一定量的对照品储备液（水杨酸浓度０．５８９ｍｇ・ｍｌ　），按　“２．２”项下方法制备供试品溶液，｛９１ｌｌ定吸光度，计算含量，测得　平均加样回收率为９８．２３％，ＲＳＤ为０．７７％。　２．１０样品测定：分别取三批不同批号的复方苯甲酸软膏各３　份，按“２．２”项下方法制备供试品溶液，按照紫外一可见分光光　度法Ｉ”，以水为空白，在２９７ｎｍ波长处分别测定吸光度，计算含　量。结果，批号为２０１２１　１２６、２０１３０１　１５、２０１３０３２４的三批样品　中水杨酸的含量分别为３０．２３、３０．０４、３０．１　ｌｍｇ・ｇ～。　３讨论　本文曾使用甲醇一水【　提取水杨酸，但基质在２３０～２５０ｎｍ　范围内有较大吸收，考虑到水杨酸可在热水中溶解，故用热水　提取。该方法简便、准确、重珊性好，可为该制剂的质量评价提　供依据。　参考文献　『１］顾培军．紫外分光光度法测定复方苯甲酸软膏中两组分含量　Ⅲ．江苏药学与临床研究，２００３，１１（１）：２２—２３．　『２降爱华．反相离子对ＨＰＬＣ法同时测定复方苯甲酸软膏中两　组分的含量ｆＪ１．中国药师，２０１２，１５（１）：７７—７８，８５．　（上接１１６页）　况是近年来产科临床超声医学积极探讨和研究的课题。产前　发现胎儿异常，给临床及早提供了妊娠处理方法的选择。胎儿　超声检查孕期和检查次数的不同，异常的检出率也受影响。综　上所述，产前超声检查以其无创、可重复、结果可靠等优势已　成为胎儿产前筛查最常用、最有效的方法。　参考文献　【ｌ】郑忠宝，李彤，刘瑛，等．产前超声在筛查胎儿畸形诊断中的　应用价值【Ｊ１．中国超声医学杂志，２００９，２５（１２）．　［２】曾家琛．胎儿畸形１８２例超声诊断分析【ＪＪ．实用医学杂志，　２００８，２４（２Ｏ）．　［３］蔡月娥，虞荷莲，潘琢如，等．高龄孕妇多种高危因素４７６例　临床分析【ｊ］．中国实用妇科与产科杂志，２００３，１９（５）．　『４】陈薇，刘朝阳．胎儿畸形６１例的超声诊断和临床分析［Ｊ１．上　海医学影像，２００８，５（８）：１９５—１９６．　［５］周毓青，严英榴．产科超声筛选及高危胎儿畸形的诊断ＩＪ】．上　海医学影像，２Ｏ０７，１６（１）：３０—３２．　［６】赵小静，杭红，裴秋艳．基层医院胎儿产前超声检查分析『Ｊ１．　中国妇产科临床杂志，２０１１，３．

８　中兽医医药杂志　ＪＴＣＶＭ　

［５］张凌志，李福生．应用酯酶标记染色法检查鸡　

血Ｔ淋细胞（Ｊ］．家畜传染病，１９８５，１：３７￣３８　

［６］张思明，陈迪贵．应用酯酶染色法对初生仔猪　

哺乳前猪瘟免痤外周血Ｔ细胞的检测（Ｊ］．中　国畜禽传染病，ｌ９９８，５；５７　Ｅ７３安丽英．兽医实验诊断［Ｍ］．北京：中国农业　

大学出版杜，１９９８：３６￣４０　

Ｅ８３王勤．苏勇功．碘杂环化合物对小鼠免疫功　

能的影响（Ｊ］．中兽医医药杂志，１９９２，ｌ：４～５　

紫外一可见分光光度法测定蛇毒中精氨酸酯酶的含量　

李荣誉　，吕万良　，石　靖　，董学清　

（】＿郑州牧业工程高等专科学校．河南部州４５０００８；８．北京大学药学院）　

摘要；应用建立的紫外一可见分光光度法测定蛇毒中精氨酸酯酶含量的方法．检测波长＾一　

４９１ｉｌｍ赴，在Ｎａ一甲苯磺酰一Ｌ一精氨酸盐酸盐甲酯＇采度２～１０　ｋ￣ｍｏｌ・ｍｌ　范围内．线性关系Ｒ　好（ｒ＝０．９９９９）；测定结果是每ｌｍｇ蛇毒中精氨酸酯酶的平均酶活力单位为０．６７６士０．０３５ｈ一５）；　

高、中、低三种最度水平的蛇毒在淀粉中的平均回收率依成为９９．４２土０．０３２　、９２．８ｌ士Ｏ．０１６　、　

ｌＯ０．９５土０　０４２　一５）；日内和日问相对标准偏差均一１、于ｌｊ　。　关键词　蛇毒；紫外一可见分光光度法；精氨酸酯酶　

中图分类号：￥８５２．４４　文献标识码：Ａ　文章编号：１０００—６３５４（２００２）０３　０００８一Ｏ３　

蛇毒液除了毒性成分以外，富古多种酶，目前发　

现的已有４０余种．因此，蛇毒被　为是自然界最集　

中的酶原之一。蛇毒酶不论是在生物学研究，还是在　

临床应用等方面都具有重要的意义，如Ｌ一氨基酸　

氧化酶被广泛用于氨基酸构性的研究以及ａ一酮酸　

的产生；磷酸二酯酶被用于核酸和核苷酸辅助因子　

的分析；蛋白酶破用于蛋白质和多肽一级结构的测　定；抗凝血酶被临床广泛用于抗血栓病等。精氨酸酯　

酶是蛇毒的重要成分之一．本研究根据精氨酸酯酶