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结核感染T细胞检测试剂盒（免疫斑点法）说明书
【产品名称】
通用名称：结核感染T细胞检测试剂盒（免疫斑点法）
英文名称：T-SPOT.TB
【包装规格】
24人份/盒。
【预期用途】
该产品用于检测人外周抗凝全血中的结核特异抗原刺激活化的效应T细胞，仅适用于临床疑似结核病的辅助诊断。
结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，作为免疫应答的一部分，T细胞受结核抗原刺激致敏，形成活化的效应T细
胞，包括CD4和CD8，从全血中单独被分离出来，在体外受特异抗原刺激并被记数。从结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、
非洲型）中选择有用的抗原降低与BCG（卡介苗）和环境分枝杆菌的交叉反应提高特异性。两个单独的抗原模仿ESAT-6和
CFP 10，联合应用提高检测灵敏度。
T-SPOT.TB是一种更简单的酶联免疫斑点（ELISPOT）检测方法。ELISPOT检测是高灵敏度的，在细胞分泌的细胞因子扩
散稀释前，其能够立即捕获细胞周围所分泌的细胞因子。这使得ELISPOT检测更加的灵敏，超过传统的ELISA实验。T-SPOT.TB
被设计出来用于检测结核特异抗原刺激活化的效应T细胞。T-SPOT.TB记数每个活化的结核特异效应T细胞。
【检验原理】
外周血单个核细胞（PBMCs）从全血样本中被分离，通过洗涤排除本底干扰因素。记数PBMCs，保证有标准的细胞数量
用于检测。这可以保证因为免疫系统削弱（免疫力低下和免疫抑制）而导致T细胞浓度低的样本也有足够的细胞数加入反应
孔检测。与ELISPOT技术一样的洗涤和记数过程，提高了检测结核病和结核感染的性能。
抗原和PBMCs一起孵育，刺激所有的致敏T细胞。分泌的细胞因子被预包被在反应孔膜上的特异抗体捕获，然后细胞和
其它不必要的物质通过洗涤被去除。标记二抗，碱性磷酸酶配对的与细胞因子上不同的抗原决定簇结合，在反应孔膜上捕获
细胞因子。通过洗涤去除任何未标记的抗体。可溶的底物溶液加入到每个检测孔中，在反应部位被酶分解形成不溶性色素沉
龙源期刊网
T—SPOT.TB试验诊断菌阳及菌阴肺结核的应用意义评价
作者：邵丹丹
来源：《检验医学》2018年第09期
摘要：目的 探究T-SPOT.TB试验诊断菌阳及菌阴肺结核的应用价值。方法 选取菌阳肺结核患者50例为实验组A，选取菌阴肺结核患者50例为实验组B，时间为2016年1月30日-2017年10月，同时选取健康体检者50例为对照组，其均接受T-SPOT.TB试验检查，对其检测的结果进行对比分析。结果 实验组A和实验组B肺结核患者，其T-SPOT.TB试验检测的阳性率相比，无统计学意义（P>005），2组肺结核患者检测的阳性率均明显高于对照组健康体检者的T-SPOT.TB试验阳性率（P
关键词：T-SPOT.TB试验；菌阳肺结核；菌阴肺结核
文章编号：1673-8640（2018）-0193-01
中图分类号：R521
文献标志码：B
结核病是传染性疾病的一种，其已经是威胁全球人类健康的卫生疾病。我国是结核病的高发国家，其发病率较高，在部分贫困国家，结核病呈反复发作、集中爆发的形式[1]。培养法是结核病诊断的金标准，但是其检测阳性率并不高，且检测的时间周期较长，从而对患者疾病的治疗造成延误[2]。分子生物学技术在不断地发展，使得核酸扩增检测技术也逐渐在结核分枝杆菌诊断中应用，但是其检测的特异性和灵敏度并不理想[3]。T-SPOT.TB试验（结核感染T淋巴细胞斑点试验）可以对外周血中结核释放的γ-干扰素相应的T淋巴细胞进行检测，从而对患者结核感染的诊断提供依据[4]。本文主要对T-SPOT.TB试验诊断菌阳及菌阴肺结核的应用价值作分析，如下文：
1资料与方法
1.1 基本资料
选取我院菌阳肺结核患者50例为实验组A，选取菌阴肺结核患者50例为实验组B，时间为2016年1月30日-2017年10月，同时选取健康体检者50例为对照组，其均接受T-SPOT.TB试验检查。 龙源期刊网
中国骨科临床与基础研究杂志2015年4月第7卷第2期ChinOrthopJClinBasicRes,Apr2015Vol.7,No.2
T-SPOT.TB检测在脊柱结核诊断中的应用
李宝田，焦云龙，孙文星
【摘要】目的探讨结核感染T细胞斑点（T-SPOT.TB）检测在脊柱结核诊断中的应用价值。方法对2012年
1月至2014年10月郑州市骨科医院收治的110例疑似脊柱结核病例同时进行结核菌素皮试试验（TST）及
T-SPOT.TB检查，其中TST分别采用红肿硬结直径≥5mm和≥15mm两种标准，标记为TST5和TST15。以
临床诊断结果作为标准，对比分析上述检测方法的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值。结果110例疑
似脊柱结核患者最终诊断为脊柱结核68例、非脊柱结核42例。TST5、TST15和T-SPOT.TB检测的敏感度、特
异度、阳性预测值、阴性预测值分别为93%、33%、69%、74%，47%、83%、82%、49%和91%、90%、94%、86%。
T-SPOT.TB检测敏感度优于TST15，特异度优于TST5，阳性预测值和阴性预测值均优于TST5和TST15
（P＜0.05）。结论与TST比较，T-SPOT.TB检测诊断脊柱结核敏感度、特异度均较高，可用于脊柱结核的早期
诊断。
【关键词】结核，脊柱；诊断；分枝杆菌，结核；结核菌素试验；干扰素Ⅱ型；T淋巴细胞；免疫测定；敏感性与
特异性
中图分类号：R529.23，R446.6文献标识码：A文章编号：1674-666X(2015)02-074-05
ApplicationofT-SPOT.TBassayinthediagnosisofspinaltuberculosis
LIBaotian,JIAOYunlong,SUNWenxing.DepartmentofSpinalSurgeryⅡ,ZhengzhouOrthopedics
Hospital,Zhengzhou,Henan450052,China.
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结核感染T细胞检测试剂盒（免疫斑点法）说明书
【产品名称】
通用名称：结核感染T细胞检测试剂盒（免疫斑点法）
英文名称：T-SPOT.TB
【包装规格】
24人份/盒。
【预期用途】
该产品用于检测人外周抗凝全血中的结核特异抗原刺激活化的效应T细胞，仅适用于临床疑似结核病的辅助诊断。
结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，作为免疫应答的一部分，T细胞受结核抗原刺激致敏，形成活化的效应T细
胞，包括CD4和CD8，从全血中单独被分离出来，在体外受特异抗原刺激并被记数。从结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、
非洲型）中选择有用的抗原降低与BCG（卡介苗）和环境分枝杆菌的交叉反应提高特异性。两个单独的抗原模仿ESAT-6和
CFP 10，联合应用提高检测灵敏度。
T-SPOT.TB是一种更简单的酶联免疫斑点（ELISPOT）检测方法。ELISPOT检测是高灵敏度的，在细胞分泌的细胞因子扩
散稀释前，其能够立即捕获细胞周围所分泌的细胞因子。这使得ELISPOT检测更加的灵敏，超过传统的ELISA实验。T-SPOT.TB
被设计出来用于检测结核特异抗原刺激活化的效应T细胞。T-SPOT.TB记数每个活化的结核特异效应T细胞。
【检验原理】
外周血单个核细胞（PBMCs）从全血样本中被分离，通过洗涤排除本底干扰因素。记数PBMCs，保证有标准的细胞数量
用于检测。这可以保证因为免疫系统削弱（免疫力低下和免疫抑制）而导致T细胞浓度低的样本也有足够的细胞数加入反应
孔检测。与ELISPOT技术一样的洗涤和记数过程，提高了检测结核病和结核感染的性能。
抗原和PBMCs一起孵育，刺激所有的致敏T细胞。分泌的细胞因子被预包被在反应孔膜上的特异抗体捕获，然后细胞和
其它不必要的物质通过洗涤被去除。标记二抗，碱性磷酸酶配对的与细胞因子上不同的抗原决定簇结合，在反应孔膜上捕获
细胞因子。通过洗涤去除任何未标记的抗体。可溶的底物溶液加入到每个检测孔中，在反应部位被酶分解形成不溶性色素沉
