临床医学检验中级考试—免疫

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免疫

PEG

1. 可用来检测CIC,特点是简便,特异性差,易受温度影响,PEG最终浓度为3-4%(分子量越大,PEG浓度越小);

2. 是最常用的细胞融合剂,分子量大约6000。

3. 可加速IC的形成;

补体:

1. 由肝脏或巨噬细胞产生。(抗原刺激机体不可产生!!)属于β球蛋白

2. 灭活:56℃ 30min。低温不能灭活。

3. 补体降低:

a) 消耗:SLE,冷球蛋白血症,自免性溶贫,类风关,移植排斥等;

b) 丢失:烧伤,失血,肾脏病变;

c) 合成不足:肝病,营养不良;

d) 细菌感染(G-尤甚),替代途径激活(凝聚的Ig、内毒素,菌体多糖、水解蛋白酶等可激活替代途径);

4. 补体升高:感染恢复期,恶性肿瘤(C2/3/4);心梗、病毒肝炎、糖尿病、正常妊娠则升高。

5. 补体活化:①经典:IC激活C1q,进一步激活C1r和C1s;激活顺序,142356789;经典途径激活可用C1q结合试验来检测;②MBL:MBL结合至细菌启动的途径,激活物是MBL或CRP,绕过C1途径;③旁路:C3开始。

6. CH50测定:检测的是经典途径的溶血总活性。

7. 单个补体测定:①免疫溶血法:非检测含量,而检测活性;②免疫化学法:单向免疫扩散,火箭免疫电泳,透射比浊法,散射比浊法;

8. 补体结合试验(cft):不检测补体,而是利用补体检测抗原抗体。不溶血为阳性。所用补体多为豚鼠血清;

9. 溶血反应和补体结合试验所用溶血素多为兔抗羊RBC抗体;溶血试验用2个单位的溶血素;

10. C1抑制分子缺陷,导致遗传性血管神经性水肿;

11. C3a和C5a叫做过敏毒素,可作用于肥大细胞和嗜碱性粒细胞,引起过敏反应。

12. C3b与C3b受体结合后促使B细胞活化。

基因工程抗体的优点:

非异源性。

人鼠嵌合体指:Ig的人(C区)和鼠(V区)连接。

白介素

1. IL-1、6刺激肝脏细胞分泌急性时相反应蛋白;

2. IL-2:T细胞生长因子。活化T细胞产生,促进淋巴细胞增殖。可促B细胞分泌抗体;激活NK细胞;

3. IL-4:可促进免疫球蛋白的类型转换,促进IGE转换;

4. IL-5刺激EO增殖分化;

5. IL-6支持浆细胞增殖分化,以及B细胞杂交瘤细胞增殖;

6. IL-8对中性粒有趋化作用;

7. IL4/10是Th2细胞分泌的细胞因子,可负调节细胞免疫应答;IL-10抑制IL-2合成;

细胞因子

1. 多数细胞因子以单体形式存在,以非特异方式发挥作用,不受到MHC的限制。

2. TGF-α刺激靶细胞产生IL-1,IL6;激活NK细胞;

3. TGF-β可负调节免疫应答;

4. 干扰素可抑制TH0细胞向TH2细胞转换,激活NK细胞;

B细胞

1. B细胞:

①󰀀 不成熟B细胞仅表达SmIgM;

②󰀀 成熟B细胞表面表达SmIgM, SmIgD;CD21

③󰀀 B2是外周血中的主要B细胞。

2. 功能:B1主要和免疫调节、免疫病、B细胞源性肿瘤密切相关;B2是体液免疫的执行细胞。

3. B1:CD5/19/20/22

4. B2:CD23/12/20/22

5. CD21可与EB病毒结合;

6. B细胞到浆细胞发育发生障碍,可发生选择性免疫缺陷症;

T细胞

1. Th1细胞:分泌IL-2/IFN-γ/IFN-β;Th2细胞:分泌IL-4/5/6/10;

2. 全部T细胞都表达CD2;

3. 成熟T细胞表达CD3;

4. 部分T细胞表达CD4, CD8;

5. 与绵阳红细胞结合的是CD2;

6. 记忆性T细胞表面是CD45RO;

7. 部分NK细胞表达CD2;

8. CD28主要表达在T细胞

免疫球蛋白

1. IgA:

2. IgD:低;0.2%

3. IgE:最少。

4. IgG:Fc段可与SPA结合。

5. IgM:①可激活补体;②原发性巨球蛋白血症可增高;

冷球蛋白

4℃自发沉淀

免疫球蛋白测定

1. IgG/M/A:①单向环状免疫扩散法;②免疫比浊法;

2. IgD:

M蛋白

1. 良性单克隆丙球蛋白常见骨髓中M蛋白;轻链病尿中增高的主要为M蛋白;

2. 多发性骨髓M蛋白不具免疫活性;

3. 理化性质单一,多无免疫活性;

4. 血清蛋白区带电泳:经典分析方法。

5. 免疫球蛋白定量:粗筛

6. 免疫电泳:鉴定的方法。取代电泳和免疫扩散电泳的结合。

7. 免疫固定电泳:鉴定的常用方法。区带电泳和特异抗血清免疫沉淀反应相结合。

k-Ig和入-Ig定量测定

主要为单项免疫扩散法和免疫比浊法。

抗原抗体反应

1. 前带现象:抗体过剩;

2. 后带反应:抗原过剩;

抗原呈递细胞:

初次应答多为DC和单核巨噬,再次应答主要是B细胞。

中性粒细胞

1. 趋化能力下降(小室法,皮窗试验):糖尿病

2. 吞噬能力下降:补体缺陷

3. 代谢能力下降:慢性肉芽肿

4. NBT(+):细菌感染(NBT测试杀菌能力),正常为5-10%; 5. 中性粒发育不良可出现慢性肉芽肿

巨噬细胞

1. 巨噬细胞直接参加2,4型超敏反应,不直接参加1.3型超敏反应。

2. 具有ADCC效应。

3. 表面受体有清道夫受体,FcγR,TLR,补体受体。

1型超敏反应

1. 变应原:选择性激活CD4+Th2细胞、B淋巴细胞;

2. 效应抗体:IgE

3. 效应细胞:BASO, EO, 肥大细胞

4. 举例:过敏性休克,皮肤过敏,呼吸道过敏。

5. 特点:具有明显的特体差异。

2型超敏反应(细胞毒型)

1. 抗体:IgG, IgM。

2. 细胞:NK, 补体,巨噬细胞。

3. 举例:新生儿溶血

3型超敏反应(循环免疫复合型)

1. 抗体等:IgG, IgM,复合物,补体。

2. 细胞:中性粒细胞浸润

3. 举例:血清病、链球菌感染肾小球肾炎、SLE,类风关。

4型超敏反应

1. 反应物质:无补体、抗体

2. 细胞:巨噬细胞,淋巴细胞

3. 举例:接触性皮炎

4. 备注:关键作用的细胞还是T细胞,活化的CD4+Th1可招募单核巨噬细胞并活化,

脱敏治疗

诱导机体产生的封闭抗体是IgG

乙肝

1. HBV DNA感染第一个出现的为HBsAg;

2. HBV存在和复制活跃的直接指标为HBcAg;

SLE

IgG,IgA升高较多

类风关

IGM增高为主

标志性抗体

SLE:①抗Sm抗体:不与活动度相关;②抗dsDNA抗体:活跃期明显升高;

DiGeorge综合征:

先天性胸腺发育不良,胚胎胸腺移植治疗有效。

结核分枝杆菌:

抗PPD抗体+,结核菌活动的重要标志。

HLA抗原

1. HLA分子多态性主要体现在多肽结合区上,而非Ig样区;

2. 1类分布较广,有核细胞。淋巴、WBC表面最多。而RBC、神经细胞、滋养层细胞则不表达。

3. 2类分布较窄,主要在B细胞,单和巨噬细胞,DC及其他APC上。

4. 检测淋巴细胞HLA抗原:微量淋巴细胞毒试验。

5.

移植

1.

① 超急性排斥反应:数分钟,数小时,长至24-48小时发生;

② 急性排斥反应:数周——数月,免疫抑制剂治疗后可缓解;

③ 亚急性排斥反应:

④ 慢性排斥反应:数月——数年,免疫抑制剂治疗后常无效;

2. 同种异体移植:排斥反应最主要,受者T细胞,针对移植物抗原发生免疫应答。

3. 移植物抗宿主反应:常见于骨髓移植,骨髓中的免疫细胞攻击受体(严重免疫抑制状态)。

4. 受者对供体MHC识别,间接识别被激活的T细胞以CD4+为主。

原发性巨球蛋白血症

浆细胞恶性增殖,分泌IgM增多。

遗传性血管性水肿

补体系统缺陷病,缺乏C1/NH,导致炎症介质产生失控。

普通易变型免疫缺陷

B细胞功能缺陷病,信号转导异常。

慢性肉芽肿: 属于原发性吞噬细胞功能缺陷。中性粒细胞和单核细胞的调理、吞噬、杀伤能力受损。

ADA缺陷病

联合免疫缺陷病,ADA下降,多见于婴幼儿。

沉淀反应

1. 免疫浊度反应:要保持抗体过量,若抗原过量则不准确;

2. 单向扩散:单抗结果偏低,多抗偏高;

3. 双向扩散法:①可测定抗体效价;②抗体多,线靠近抗原孔;抗原多,线靠近抗体孔;

免疫电泳

1. 对流免疫电泳:双向免疫扩散+电泳;

2. 火箭免疫电泳:单向免疫扩散+电泳

3. 免疫电泳:定性试验:分析成分的种类和性质。

4. 免疫固定电泳:用于蛋白质的鉴定

5. 交叉免疫电泳:抗原蛋白质的定量

免疫散射比浊

颗粒直径如远小于入射波长,成为Rayleigh散射。

化学发光

1. (直接)吖啶酯类

2. (催化)碱性磷酸酶标记:底物为AMPPD。

3. (能量传递)参与氧化反应,非酶标记物,三联吡啶钌;

4. 辣根过氧化物酶标记:底物为鲁米诺。

放免与免放

1. 放免标记抗原,竞争性抑制,

2. 免放标记抗体,非竞争抑制,抗体过量。

时间分辨荧光免疫测定

1. 特异光信号是长寿命荧光;

2. 蛋白质、激素、药物、肿瘤标志物、病原体抗原抗体等;

间接免疫荧光

1. 公认最有效的检测疟疾抗体的方法;

荧光抗体染色法

1. 可检测病毒及其繁殖情况