下载文档原格式
用响应面法优化油茶籽壳发酵产羧甲基纤维素酶的条件杨俊换;郭华;欧阳晶【摘要】以羧甲基纤维素酶(Carboxymethyl cellulase enzyme,CMCase)的酶活力作为响应值,用响应面法对康宁木霉利用油茶籽壳发酵产纤维素酶的发酵条件进行优化.在油茶籽壳预处理方法、氮源、起始pH、发酵时间、接种量、营养液体积对CMCase酶活力单因素试验的基础上,筛选出主要影响因素培养时间、起始pH 和营养液体积进行正交试验,通过Box-Behnken设计,利用Design Expert软件进行回归分析,得出3种因素的交互作用及最佳发酵条件.结果表明,用碱法处理油茶籽壳较为适宜;油茶籽壳发酵产纤维素酶的适宜氮源为0.2％的(NH4)2SO4;其他适宜条件为接种量5％、初始pH5.8、营养液体积22 mL、发酵时间5d.在此条件下,CMCase的酶活力达179.15 U/mL,比单因素试验最高酶活力提高了24.52％.【期刊名称】《湖南农业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(040)004【总页数】5页(P416-420)【关键词】油茶籽壳;康宁木霉;羧甲基纤维素酶;响应面法【作者】杨俊换;郭华;欧阳晶【作者单位】湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙410128;湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙410128;湖南农业大学食品科学技术学院,湖南长沙410128【正文语种】中文【中图分类】TS201.1据国家粮油信息中心统计，1990年中国油茶籽产量为52.3万t，2012年为109.2万t，累积增长了108.8%，平均年增长5.4%[1]。
油茶籽壳的主要成分为木质素、纤维素与半纤维素。
目前国内对油茶籽壳的利用仍处于研究阶段，主要用来制备活性炭、木糖醇和糠醛等产品，利用率较低。
利用康宁木霉发酵油茶籽壳产纤维素酶，不仅可以缓解资源浪费与环境破坏问题，还可以增加油茶籽壳利用的附加值，生产的纤维素酶可以用于食品、农业和饲料等行业。
一株高产纤维素酶菌的筛选及发酵条件优化作者：柴明艳来源：《湖北农业科学》 2014年第13期柴明艳（淄博职业学院，山东淄博２５５３１４）摘要：采用羧甲基纤维素钠（ＣＭＣ）－刚果红平板法，对富含腐烂玉米秸秆的土样进行纤维素酶产生菌的筛选及目标菌株发酵培养条件的优化试验。
结果表明，筛选分离出１０株产纤维素酶菌株，其中有３株菌株产酶效果较好，特别是菌株ｔｇ３１对玉米秸秆水解率高达３７．６２％，其最佳发酵工艺的温度为２８℃，发酵初始ｐＨ５．０，接种量６％，摇瓶转速１８０ｒ／ｍｉｎ，经５Ｌ罐放大试验，得出在１２０ｈ时其滤纸酶活力（ＦＰＡ）可达到１４．２１ＩＵ／ｍＬ。
关键词：纤维素酶；菌株；发酵；玉米秸秆；水解中图分类号：Q９３９．９６文献标识码：Ａ文章编号：０４３９－８１１４（２０１４）１３－3141－０4中国是农业大国，每年产生的农作物秸秆总量超过７亿ｔ，约占世界秸秆总产量的１／３［１，２］，其中玉米秸秆产量高达２．２亿ｔ［３］。
玉米秸秆的主要成分是纤维素、半纤维素和木质素等，难以被人类有效利用。
目前，中国玉米秸秆大部分被直接焚烧，不仅对环境造成了极大的污染，同时也浪费了大量的秸秆纤维素资源［４］。
为改变现状，开发纤维素酶降解玉米秸秆，实现废弃资源的生物利用，已逐渐成为该领域的研究热点之一。
纤维素酶可充分降解秸秆中的纤维素，将其转化为微生物可利用的糖类，大大提高玉米秸秆的经济利用价值，该技术在医药中间体、精细化工、食品、饲料及生物能源等领域都有广泛的应用前景［５，６］。
因此，展开高产纤维素酶菌株的选育、发酵工艺条件优化等研究工作，对纤维素的商业化开发具有重大意义。
本研究在玉米秸秆地进行针对性的取样筛选，获得一株高产、高玉米秸秆水解率的菌株，并对其产酶条件进行了摇瓶优化及５Ｌ罐发酵工艺放大，为玉米秸秆纤维素资源的产业化应用打下基础。
１材料与方法１．１材料１．１．１样品采集从辽宁省喀左县富含腐烂玉米秸秆地区取土样若干。
片烟黑曲霉菌株产纤维素酶的条件优化及酶的分离纯化范坚强;周彬;宋纪真;王金华;陈义强;王永泽【期刊名称】《浙江农业学报》【年(卷),期】2012(024)006【摘要】为降低烟叶燃吸的刺激味、改善口感、增加香气、提高烟叶品质,从烟叶表面筛选到一株产纤维素酶活性较高的黑曲霉,应用Plackett-Burman试验确定4种显著因子,RSM法对4种显著因子进行了优化和分析,并对酶蛋白的分离纯化作了初步研究.结果显示:发酵产酶的最适碳源为玉米芯,氮源为NH4 NO3,当玉米芯用量为1.4％,NH4NO3为0.4％,温度为30.4℃,pH为5.6时产酶比活力最高,可达40.02 U· mL-.纤维素酶酶蛋白的硫酸铵盐析最佳饱和度为60％,经SephadexG100凝胶柱层析纯化后的比活力提高了3.5倍,回收率为32.6％,达到较高水平.【总页数】7页(P1122-1128)【作者】范坚强;周彬;宋纪真;王金华;陈义强;王永泽【作者单位】福建中烟工业有限责任公司技术中心,福建厦门361022;湖北工业大学生物工程学院,湖北武汉430068;郑州烟草研究院,河南郑州450001;湖北工业大学生物工程学院,湖北武汉430068;福建中烟工业有限责任公司技术中心,福建厦门361022;湖北工业大学生物工程学院,湖北武汉430068【正文语种】中文【中图分类】Q814.1【相关文献】1.黑曲霉菌株产纤维素酶的固态发酵条件优化 [J], 周晨妍;朱新术;王燕;郭阳阳;陈兆会2.黑曲霉2277菌株产纤维素酶最佳液体发酵条件的研究 [J], 武谮;卜可华;李平;杜先锋3.产纤维素酶细菌菌株的分离鉴定及产酶条件优化 [J], 毛丽春;修立辉;胡刚4.黑曲霉ZM-8菌株产纤维素酶的培养条件优化 [J], 马旭光;张宗舟5.航天诱变黑曲霉菌株ZM-8产纤维素酶的固态发酵条件研究 [J], 马旭光;张宗舟;刘星斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
海洋黑曲霉固态发酵耐盐纤维素酶的培养条件优化及粗酶制剂的制备纤维素酶是降解纤维素的一组酶系总称,其主要由葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶组成。
纤维素降解后可产生经济、丰富的生产原料,且有望解决自然界中不断产生的固体废物问题。
本文将从固态发酵技术的优化、纤维素酶提取工艺的比较、在固态与液态发酵条件下丹宁-PEG提取工艺的研究及适应性、浓缩液真空冷冻干燥形成粗酶制剂等几个方面来探讨纤维素酶的生产问题,主要研究内容及结果如下:在单因素条件下,确定了以麸皮:玉米秸秆(1:1)作为混合碳源,氯化铵作为氮源、含水量70%作为培养基。
利用Plackett-Burman设计筛选出影响滤纸酶活力的显著因素:含水量、起始pH值。
将显著因子通过最陡爬坡试验逼近最大酶活力区域。
最后用Box-Behnken响应面分析确定了浅盘固态发酵产酶的最优培养条件:玉米秸秆 48.53%、麸皮48.53%、NH4Cl1.94%、KH2PO40.2%、Fe(OH)30.16%、料水比为1:2.2、接种量2%、初始pH4.28、装液量30g,置于温度为280C的培养箱中培养7天。
将培养基样品溶解在10倍体积的自来水中,于200C摇床浸提1 h,得到实验优化后的滤纸酶活达到了 14.826U/g,比优化前提高了 75.12%。
将固体发酵得到的粗酶液进行纤维素酶提取。
探究丹宁-聚乙二醇(PEG)沉淀在固态发酵条件下的工艺。
结果表明:丹宁浓度12 mg/mL、丹宁沉淀静置时间为70min时,纤维素酶沉淀率最高。
PEG提取效果优于PVP,在PEG浓度为30mg/mL、静置时间10min下,对沉淀进行复溶,其纤维素酶回收率为96.97%,浓缩倍数为10。
比较了丹宁-PEG沉淀、硫酸铵沉淀、超滤的浓缩效果,发现硫酸铵沉淀、超滤和丹宁-PEG沉淀均可达到一定的浓缩程度,但存在差异:硫酸铵用量大、酶活损失比较大;超滤浓缩耗时长、且膜易污染、易形成浓差极化;丹宁-PEG方便、快捷、易操作,但是成本也将是不容忽视的问题。
黑曲霉发酵生产纤维素酶实验一、实验目的1、了解纤维素酶的生产工艺和原理2、掌握液体发酵和固体发酵工艺3、学会DNS法测定还原糖含量的方法和原理二、实验原理纤维素酶可以用于一切含纤维素的生物质的降解，具有广阔的应用前景。
高产纤维素酶的微生物主要有木霉属、曲霉属、根霉属，黑曲霉所产的纤维素酶中β-葡萄糖苷酶活力高，能避免酶解产物纤维二糖的阻遏作用，而且安全无毒，故而成为生产纤维素酶的主要菌种之一。
纤维素酶是诱导酶，故发酵生产时需有纤维素物质作诱导剂。
以羧甲基纤维素钠作底物，用发酵所得纤维素酶对底物进行酶解，测定酶解液中的还原糖含量（以葡萄糖计），可以计算酶活力高低。
还原糖与DNS反应形成棕色物质，颜色深浅与糖含量成正比。
三、材料与试剂配制1、生产菌种：黑曲霉2、斜面（活化）培养基：酵母膏0.4%，蛋白胨0.6%，可溶性淀粉1%，葡萄糖0.9%，马玲薯浸出液7%，琼脂2%，陈海水（或人工海水）配制，pH7.0-7.4。
3、人工海水：NaCl = 24 g/L ;MgSO4·7H2O = 7.0 g/L ;NH4NO3= 1 g/L ;KCl= 0.7 g/ L ; NaH2PO4= 2.0 g/ L ;Na2HPO4=3.0 g/ L ,pH7.4。
4、微量元素液：FeSO4·7H2O 5.0mg/L，MnSO4·H2O 1.6mg/L，ZnSO4· 7H2O 1.4mg/L，CoCl22.0mg/L，加蒸馏水200ml使之溶解。
5、液体发酵产酶培养基：麸皮作碳源 3 g，氯化铵或硫酸铵作无机氮源1 g，蛋白胨0.05g作有机氮源，人工海水100 ml（含1%微量元素液），自然pH值。
6、固体发酵产酶培养基：麸皮：稻草粉=2：1作碳源5 g，人工海水12 ml（含1%微量元素液，1%氯化铵或硫酸铵，0.05%蛋白胨），自然pH值。
7、6% DNS试剂：称取酒石酸钾钠182g溶于500ml水中，加热溶解，于热溶液中依次加入3,5-二硝基水杨酸6g，20.8gNaOH,5g苯酚，5g无水亚硫酸钠，加热搅拌溶解，冷却后定容至1000ml。
三种霉菌产纤维素酶能力分析与培养条件优化胡翠英李良智赵建钱玮顾华杰（苏州科技学院化学生物与材料工程学院，苏州 215009）【摘要】摘要：对实验室现有3种真菌产纤维素酶能力的分析及培养条件优化。
比较了3种菌在刚果红培养基上的透明圈大小、并分析产纤维素酶酶活；通过单因素与响应面分析的方法优化毛酶产纤维素酶的培养条件。
通过试验得出3种真菌均能产纤维素酶，毛霉能产较多的纤维素酶。
毛霉产纤维素酶的最佳条件为：pH 5.0，转速 220 r/min，发酵时间47 h，发酵温度 35 ℃，纤维素酶活为6.99 U/mL。
毛霉、青霉、曲霉均产纤维素酶，毛霉能降解玉米芯纤维素。
【期刊名称】生物技术通报【年(卷),期】2014(000)001【总页数】6【关键词】霉菌纤维素酶培养条件优化节约粮食和提高农副产品的利用率，减少农业废弃物燃烧带来的环境污染问题，已经引起众多人的关注，将农业废弃物转为可利用能源成为大家研究的课题。
我国北方每年都有大量玉米芯被焚烧，如能加以利用，将节约原料成本，故降解此物成为本研究的目的。
但一方面由于半纤维素与木质素等组成的致密结构，另一方面纤维素本身不能为丙酮丁醇梭菌直接利用，故需先进行一连串的预处理、酶解等［1-3］，将纤维素降解为葡萄糖、木糖等单糖。
纤维素酶的提取过程［4，5］较繁琐，酶损失较大，成本较高，如能直接利用纤维素酶产生菌降解纤维素为单糖，可省去酶的提取、纯化的过程，减少酶活力损失、节约成本。
其降解物直接作为产能源菌的碳源，形成两菌共培养的情形。
目前纤维素降解菌研究［6-9］中多为真菌，且大多为青霉、曲霉、木霉等。
本文的主要研究内容为从实验室现有霉菌中寻找纤维素降解菌，比较纤维素酶活，优化培养条件，为进行共培养提供参考。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 菌种青霉、毛霉、曲霉，来自本实验室。
玉米芯：来自山西农村，往年搁置1年，风干粉碎过40目筛子备用。
1.1.2 主要仪器纤维素酶活测定采用723PC型分光光度计（上海欣茂），发酵溶剂分析用气相色谱仪GC112A型（上海精科），FID检测器，PEG毛细管柱。
纤维素酶产生菌及其发酵条件优化刘丹;王红英;吴星;钱斯日古楞【摘要】通过刚果红染色产脱色圈初筛出能分解纤维素的菌株,再利用DNS法分别测定纤维素酶的酶活,得到分解纤维素能力最强的一株真菌Lv-1.该菌株菌丝为黄绿色,孢子为深绿色,有多分支的无隔菌丝,长孢子囊孢子,用DNS法测定其酶活为62.42 U/mL,后对其进行了产酶条件优化.经单因素试验和正交试验得到该菌的最佳产酶条件为:在以10 g/L羧甲基纤维素钠为碳源,4 g/L蛋白质,2 g/L硫酸铵为氮源,1 g/L硫酸二氢钾为无机盐的最适产酶培养基中,初始pH为6.0,培养温度37℃,装液量100 mL/250 mL,发酵36 h.在此发酵条件下,其产酶活力可达96.898U/mL,试验结果显示,该菌株在产纤维素酶能力上具有显著优势,且菌株Lv-1产酶活力较优化前高出34.478 U/mL,提高了55.24％.【期刊名称】《工业微生物》【年(卷),期】2015(045)004【总页数】7页(P19-25)【关键词】纤维素酶;筛选;正交试验;酶活【作者】刘丹;王红英;吴星;钱斯日古楞【作者单位】大连工业大学生物工程学院,辽宁大连116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连116034;大连工业大学生物工程学院,辽宁大连116034【正文语种】中文纤维素是细胞壁成分，是自然界分布最广、最丰富、最廉价的多糖类物质，也是数量最多的可再生资源[1-2]。
在自然界很多微生物利用其产的纤维素酶降解和利用纤维素, 如厌氧真菌、放线菌、细菌等。
纤维素酶可将纤维素降解为可溶性小分子糖或单糖，因此对生物能源、造纸、纺织、洗涤纺织工业、食品加工、中草药中有效成分的提取及植物遗传工程中都得到广泛应用，有巨大应用价值 [3-6]。
动物饲料中添加饲用微生物能改变饲养的禽畜肠道的微生物菌群数量及肠道发酵模式, 促进纤维的降解，提高饲料利用率[7-9]，对纤维素利用的前提是首先分离到能够产生纤维素酶的菌种。
黑曲霉产纤维毒酶系各组分特性及酶解条件第22卷第1期200t年1月华侨大学(自然科学版)Journal0FHuaqiaoUniversity(Natural,Science)V0L22No.1Jan.200t文章编号1000—5013(2001)Ol一065—05黑曲霉产纤维素酶系各组分特性及酶解条件戴四发贺淹才(华侨大学材料科学与工程学院.泉州3620l1)摘要采用正交实验法分析出黑曲霉3,316纤维索酶系各组分最适酶解条件,其组台分别为C1酶(pH5.O,45℃)C酶(pH35.65_c)和卢G酶(pH4.5,65℃).在液体发酵条件下,添加质量分数为o.003的碳酸钙时.各组分酶活性最高.其中以C酶明显增高.c】酶几乎无影响.G酶则明显降低.c和C比酶栝只有在碳酸钙质量分数小于n005时才有提高.G酶别明显降低.暴加蛋白胨.C和卢G酶的最高酶活在碳酸钙质量分数小于0.003时有增加,C酶则无明显变化.碳酸钙和蛋白胨对各组分最高酶活形成时间均无影响.在各组分酶分泌规律方面,仅有碳酸钙对C和口G酶有一定影响美毽词黑曲霉.纤维紊酶系,酶组分.液体发酵.酶解条件中围分类号Q55603文献标识码A真菌纤维索酶系(CellulaseSystem)是一类复杂的复台酶,一般包括3种水解酶.(1)内切葡聚糖酶(end0g1ucanase).1,4(1,3,1.4)一卢一D—glucan4glucanohydrolase,EC3.2.L4,简称C1酶或EG.(2)外切葡聚糖酶(exoglucanase).1,4-8一D—glucanceIl0bi0hydr0lase,EC3.2.1.9l,简称C酶,亦称外切纤维二糖水解酶(CBH).(3)葡萄糖苷酶(p—glucosidase).p-D—glu—cosideglucohydrolase,EC3.2.1.2l,简称卢G,亦称纤维二糖酶.C1酶和C 酶存有多种异构酶,只有各组分酶的共同协同作用,才能将纤维索彻底水解为葡萄糖..在黑曲霉(As—pergiUusNiger)产纤维索酶变化规律特性方面,一般是通过固体发酵从单一组分酶考虑分析的.一.本文就在液体发酵条件下,对添加一些物质对酶系不同组分的影响效应,以及产酶变化特性方面进行了研究.1材料与方法1.1菌种及来源黑曲霉3.316,中国科学院微生物研究所菌种组提供1.2培养基与菌种保藏收稿日期2000—06—19作者简介戴四发(1973一),男.讲师基金项目福建省自然科学基金资助项目华侨大学(自然科学版)2001年(1)斜面培养基.即土豆汁葡萄糖琼脂培养基.将孢子接种于斜面培养基,于28℃下培养,待形成一层绿色孢子后(约7d),于4℃保藏备用.(2)基础培养基.加浓的Mandles盐,添加质量分数为0.01的纤维索粉和质量分数为0.02的麦麸.(3)产酶培养基.在基础培养基中添加不同浓度的营养物质.1.3孢子悬液与酶液制备(1)孢子悬液制备.从新长成的斜面洗下孢子,以磁力搅拌器搅拌约20min打散孢子后,用显微镜记数,并调节为每毫升孢子(1.00_--4-0.05)×10个.(2)酶液制备.将孢子悬液以体积分数为0.01的接种量接人装有50mI,产酶培养基的250mL摇瓶中,转速为190r?min,28℃发酵培养.取适量发酵液,于转速4000r?minI1下离心15min,用0.1mol?LI1磷酸氢二钠一0.1mol?LI1柠檬酸缓冲液适当稀释上清液即为酶液.1.4定糖分析采用DNS法”进行定糖分析,以葡萄糖为标准,以相同稀释倍数的酶液作为空白对照.1.5蛋白质测定采用Bradford法进行蛋白质质量分数的测定,以牛血清白蛋白为标准.1.6酶活测定和比酶活()的计算(1)C酶活测定.取1.0mL一定pH值的酶液,加入(25.0=1:0.5)mg脱脂棉于试管中密封,在45℃下酶解20h后定糖.酶活力单位U(u?mLI1)为每小时由底物产生还原糖(以葡萄糖计)的微摩尔数.(2)C酶活测定.取酶液0.25mL,加入0.25mIpH值相同的质量分数为0.005的羧甲基纤维素钠溶液,于65℃酶解30min后定糖,酶活力单位同c的酶活力单位.(3)BG酶活测定.酶解底物为质量分数0.005的水杨素溶液,酶解方法与c酶活测定相同,酶活力单位同c-的酶活力单位.(4)比酶活u.(u-mg)的计算.Uo=u/w,式中为蛋白质质量分数.2结果与分析2.1黑曲霉纤维素酶系各组分最适作用条件分析以基础培养基发酵制得的酶液作为实验材料,通过两因素(pH值和温度口)五水平正交实验进行分析.酶活结果(本文仅列出3组具有高酶活的条件组合),如表1所示.Cl酶最适作用表1黑曲霉3.316纤维煮酶系各组分最适酶解条件组合分析条件组合为pH5.0和45℃及pH5.5和45℃.其最适pH值范围为4.5～5.5,最适温度范围为45~55℃.C酶最适作用条件组合为pH3.5和65℃及pH3.0和65℃,最适pH值范围为4.0～4.5,最适温度范围为60b65℃.第1期戴四发等:黑曲霉产纤维索酶系各组分特性及酶解条件672.2碳酸钙对黑曲霉产纤维素酶系特性的影响碳酸钙质量分数()对酶系各组分最高酶活,比酶活及其形成时间(f)的影响,如表2所示.表2中各组分最高酶活形成时间不变.当质量分数为0.003时,各组分最高酶活均最高,其对C酶明显,对C酶无影响,而对于G酶则明显降低.各组分酶活均随质量分数增高而大幅度降低,c.和c比酶活只有在质量分数低于0.005时才有提高,G酶均降低明显表2碳酸钙对黑曲霉产纤维索酶系各组分最高酶活及其形成时间和比酶活的影响碳酸钙对酶系各组分酶活变化规律的影响,如图l所示.将图l与图2比较表明,质量分蓄图1碳酸钙对黑曲霉产纤维煮酶系图2纤维素粉和麦麸对黑曲霉产钎维素酶系各组分变化规律的影响各组分变化规律的影响数为0.005的碳酸钙使c酶活第二峰值大幅度地高于第一峰值.它缩短了卢G酶的峰值急剧增长期,并较为稳定,而对c影响不大.2.3蛋白胨对黑曲霉产纤维素酶系特性的影响表3为蛋白胨质量分数()对纤维素酶系各组分最高酶活,比酶活及其形成时间的影响.由表3可知,各组分酶最高酶活形成时间均未改变.c-和G酶的最高酶活基本上随质量表3蛋白胨对黑曲霉产纤维素酶系各组分最高酶活及其形成时间和比酶活的影响68华侨大学(自然科学版)2ooi年分数的增加而降低,且均在质量分数小于0.003时有促进作用,C酶则无明显变化.各组分比酶活都有所降低,且随质量分数增加而降低更明显.蛋白胨对酶系各组分酶活变化规律的影响,如图3所示(以蛋白胨质量分数0.002为例).图3与图1比较可知,蛋白胨对纤维素酶各图3蛋白胨对黑曲霉产纤维素酶系各组分变化规律的影响组分酶的分泌变化规律均无明显影响,仅有酶活值上的改变.3讨论有关真菌产纤维素酶系特性等方面,人们主要是以绿色木霉为研究对象,而极少有黑曲霉方面的报道(Jl一般都限定在固体发酵条件下.).因此,这样很不利于现代化大规模的流水线生产.不同培养时期,黑曲霉纤维素酶系各组分酶问的均衡性很不一致,为一个动态变化的复合酶体系.同一培养基形成的不同组分酶的分泌规律间有较大的差别,且形成高峰值的时问常常不一致.这可能与纤维素在不同分解时期所形成的各种产物及其质量分数,对不同酶组分所起的不同反馈作用(诱导或阻遏)有关.不同物质对纤维素酶系各组分的影响不一.同种物质不同质量分数,同样有不同的影响效果,即使同种质量分数的同样物质,其对酶系不同组分的影响也会有较大区别.一些物质具有促进某一组分酶的大量分泌,但却抑制其它组分的性质.因此,可以通过培养基的改变,有目的地提高单一组分酶(特别是G酶的产量较高,与绿色木霉酶系形成互补)的产量.从比酶活看,虽然某些物质可以提高酶活值和酶产量(以可溶性蛋白为准,本文未列出),但其比酶活却明显下降.即此种酶的纯度更差,这不利于发酵工程的下游提纯过程.从各组分酶分泌规律分析看,使用不同的影响物质,c酶具有最大的稳定性,其次为c酶,pG酶则相对容易变化.其根本原因,还须进行研究.第1期戴四发等:黑曲霉产纤维素酶系各组分特性及酶解条件69参考文献1StenbergK,GalbeM,ZacchiG.TheinfluenceoflacticacidformationOnthesti muhane0ussaccharifa—cationandfermantationofsoftwoodtoethanol—usingsaecharomycescerevisi aeandbeta—glucosidaseandcellulase—mediatedhydrolysis[J].EnzymeMicrob.Techno1.,1990,26(1):7 1～792GilliganW,ReeseET.Evidenceformultiplecomponentsinmicrobialcellulas eⅡ].Can.J.Microbia1.,1954.1:90～1073赵小立t周红军,费承伟等.黑曲霉HD9478纤维素酶固体发酵条件的研究[J]粮食与饲料工业,1997,5:21～234亲晓斌,李骁华,丁建琴.黑曲霉产纤维素酶舶研究rJ].生物技术,1997,7(4):13~155曲音波,高墙基,王祖农-青霉的纤维素酶抗降解物阻遏突变株的选育[阳.真菌,1984,3(4):2382438中山大学生物系微生物学教研ona]test,theoptimelenzymolylsconditionforrespectivecomponentofcellase systemfromAspergillus|Ⅳr3.316inducedliquidfermentationarefoundtohepH5.0,45℃forenzymeCl,andpH35,65℃forenzymeCandpH4.5,65℃forenzyme.Undertheconditionofliquidstarefermentation,theadditionofCaCO3inaconcentrationof0.3leadstothehighest enzymeactivityofvariORScomponents.InwhichthatofC-obviouslyincreases,thatofCisalmostunaf fected,whilethatof船obviouslydecreases.TheenzymeactivityratioofCLandCincreasesonlyifCaC Okeepsinaconcentrationbelow0.5,whileCshowsnosignificantchange.Theadditionofpeptoneleadstot hehighestemymeactivityofCtandofCaCO3keepsnaconcentrationbelow0.3whileitleadstoinsign ibicantchangeofC. TheformationtimeofhighestenzymeactivityOfrespectiveIomponentareunef fectedbyCaCO3andpeptone. RegardingtotheruleofenzymesecretionofrespectivecomponenttonlyCaCOl showsacerta[neffectonC1and∞.KeywordsAspergillusNigertcellutasesystem,enzymecomponent,liquidfer mentation,enzymolysiscon.d{tinn。
