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光镜和电镜在病理诊断中的应用光学显微镜和电子显微镜是病理诊断中常用的两种显微镜。
光学显微镜（简称光镜）是一种基于光学原理工作的显微镜，能够提供高分辨率的图像，可用于观察组织和细胞的形态和结构。
而电子显微镜（简称电镜）则是一种利用电子束代替光束进行成像的显微镜，具有更高的分辨率和更大的倍率，可用于观察更微小的细胞和组织结构。
下面将分别介绍光镜和电镜在病理诊断中的应用。
光镜在病理诊断中的应用光镜广泛应用于组织学和细胞学的病理诊断中，主要有以下几个方面的应用：1.组织学检查：通过对组织样本进行染色和切片后，使用光镜观察组织的形态和结构，以检测异常变化。
在肿瘤的病理诊断中，光镜能够帮助鉴别肿瘤类型、判断肿瘤的恶性程度以及评估肿瘤的分级和分期。
2.细胞学检查：光镜也被用于观察和分析细胞的形态和结构，以判断细胞的异常变化。
例如，在涂片染色后，光镜可用于检测细胞的形态特征、细胞核的变化、细胞器的变化等。
细胞学检查对于早期癌症的早期诊断和病情监测具有重要意义。
3.免疫组织化学：光镜结合免疫染色技术可以检测组织和细胞中的特定抗原或标记物，以确定特定疾病的诊断和预后。
例如，在肿瘤诊断中，通过免疫组织化学可以检测特定肿瘤标记物的表达情况，有助于区分不同类型的肿瘤。
4.高分辨率成像：光镜的高分辨率成像能力可以提供详细的组织结构信息，帮助病理学家观察微小的病理变化。
这对于病理学家进行病变定位和病变性质评估非常重要，有助于制定最佳的治疗方案。
电镜在病理诊断中的应用相较于光镜，电镜具有更高的分辨率和更大的倍率，能够观察到更细微的结构细节，因此电镜在病理诊断中也发挥着重要作用：1.细胞超微结构的观察：电镜能够观察到细胞和组织的超微结构，如细胞器、细胞核内的核仁、线粒体、内质网等。
通过电镜观察，可以检测细胞内的超微结构变化，判断细胞的功能状态和异常变化。
2.病原微生物的观察：某些病原微生物的大小远小于光限的分辨率，因此光镜很难直接观察到它们。
读图术语：嗜锇性板层小体、酶原颗粒、腺腔、毛细血管、粗面内质网、肾小囊腔、基底膜、足细胞胞体、毛细血管、肾小囊壁层1、脱水：固定后的组织块含有游离水，不能与包埋剂混合，必须用中间介质（脱水剂）驱除水分，以利于包埋剂浸透渗入。
常用脱水剂为酒精或丙酮。
市售无水酒精和丙酮往往含有少量水分而纯度不够，可事先加入无水硫酸钠或硫酸铜等干燥剂吸去水分。
脱水的时间可根据样品的不同而适当延长或缩短。
2、基膜：上皮细胞基底面与深部编译组织之间的细胞间质形成的薄膜，包括透明层、基板、网版。
功能：支持、连接、固定。
3、质膜：亦称为细胞膜。
它是细胞与周围环境、细胞与细胞间进行物质交换和信息传递的重要通道。
细胞膜的厚度约为7-10nm ，在低倍tem 下观察质膜时，它呈一条致密的细线。
在高倍TEM 下，质膜呈现出“两暗一明”的三夹板式结构，称为单位膜。
4、景深：景深不是一种固定的数值，而是与放大倍数和分辨率有关的，用以表达纵深方向层次细节程度的度量。
扫描电镜景深大，图像立体感强。
扫描电镜的景深比光学显微镜大几百倍，比投射电镜大10 倍左右。
★线粒体：线粒体的形状多种多样，一般呈线状、粒状或短杆状。
光镜下，线粒体直径为0.5-1.0um ，长短不一。
电子显微镜下，线粒体由内外两层膜组成。
内、外膜之间的腔隙称线粒体外室，内膜围成的腔称线粒体内室。
线粒体内膜向内折叠形成[ 山脊] 膜之间的间隙称“[ 山脊] 间隙”，与外室想通。
★主要功能：是进行氧化磷酸化，合成ATP ，为细胞生命活动提供能量。
★病理：线粒体对有害因素敏感，易出现超微结构上的异常改变，且在一定范围内又是可逆的，故线粒体是电镜下观察细胞受损的重要形态指标，有人称之为“细胞病变指示器”，是分子细胞病理学检查的重要依据。
1. 肿胀，有室内肿胀和室外肿胀；2. 肥大及增生；3. 巨大线粒体及环形、杯形线粒体；4. 线粒体间疝形成；5. 包含物；6 线粒体固缩；7. 急支颗粒增多、增大。
细胞超微结构及基本病变——细胞核核膜：由内外两层平行排列的膜性结构组成，核周间隙宽20-30nm。
核孔是核膜上的特殊结构，直径70nm，于核孔处有单层隔膜覆盖，中央留一微孔，mRNA通过此处进入胞质。
作用：将核质围在一个相对稳定的环境中，并控制与胞质的物质交换。
染色质：为细胞内的遗传物质，主要成分是DNA、组蛋白、非组蛋白和少量RNA。
1.异染色质：深色颗粒状或小块状，电子致密度高。
有三类：周围染色质、分散染色质、核仁旁染色质。
一般不参与RNA及蛋白质的合成代谢活动。
2.常染色质：间期核处于伸展状态的染色质，为极纤细的丝状物，直径3nm，核内呈浅亮的区域，控制分裂间期细胞的代谢活动。
核仁：电镜下，似一团高电子密度、无膜包裹、裸露于核质内的海绵状结构。
分纤维部，颗粒部，核仁相随染色质，无定形部。
功能：合成rRNA少数细胞无核仁，如中性粒细胞；蛋白质合成旺盛的细胞，核仁较大；蛋白质合成不旺盛的细胞，核仁较小。
除核仁大小、数目可随细胞功能而变化外，其位置变化也有意义。
如蛋白质合成旺盛的肝细胞，核仁较大且靠近核膜，肿瘤细胞中也较多见，这种现象称为核仁边集，这可能更有利于合成的RNA自胞核输至胞质。
核质：又称核基质，无定形物组成，含水、无机盐、蛋白质（包括各种酶），是核内其他成分完成其功能的内环境。
染色质间颗粒：位于常染色质区内，直径15-50nm。
染色质周围颗粒：位于异染色质区周围，直径30-50nm，颗粒周围有晕。
细胞核的超微病变核外形的改变：病理情况下，由于核被膜内陷，胞核可出现明显不规则1、裂核：核表面有1-2个很深的凹陷，常见于B淋巴细胞淋巴瘤、卵巢粒层细胞瘤2、曲核：核表面凹陷浅而多，常见于T淋巴细胞淋巴瘤3、脑回核：核表面有多个深浅不一的凹陷，核十分畸形，似脑回，常见于T淋巴细胞淋巴瘤核膜的变化：1、内陷：可致核外形异常2、增厚、增生、复层化：常见于病毒感染3、核膜膨出或大泡形成：核膜向外膨出，常见于培养细胞4、核内板层、小管、液泡的形成：起源于内核膜5、核突：核膜向表面突起所致，呈锤状、结节状、棒状，可附有蒂，外围为核膜，内容为核质6、核袋：核膜内陷，内容可为胞质的一部分，亦可仅为核质，核袋外侧绕以染色质带，多见于恶性淋巴瘤、淋巴细胞白血病7、核纤维板层：紧贴于核膜的纤细的中等电子密度物质，呈片层状，见于修复组织细胞、肿瘤细胞染色质的变化：1、染色质结块：染色质聚集成大小不等的团块，可复性2、染色质边集：染色质浓集，位于核内膜内侧，其它部位的染色质则趋于消失3、染色质均匀化：核内呈均匀中等电子密度，核皱缩呈锯齿状不规则外观4、常染色质增多，染色质周围颗粒、染色质间颗粒增多核仁的变化：1、核仁增大：常见于增生活跃的细胞2、核仁形状不规则、数目增多：见于肿瘤或增生活跃的细胞3、核仁边集：核仁一般位于中间，当细胞处于蛋白质合成增加的状态时，核仁移向周边，紧靠核膜或核膜凹陷附近，有利于核仁物质与胞质的交换，见于肿瘤、再生的肝细胞4、核仁退形性变：核仁空泡化、环形核仁（核仁形成环形，中间为电子密度低的核质，此种改变可能是核蛋白合成受阻，使核仁物质减少）、核仁分离（核仁纤维成分和颗粒成分分开，出现明显界限，核仁上形成一新月体、半球形或帽状团块）核内包涵体：核内出现正常成分以外的物质1、假包涵体：由核膜内陷，进而内陷处的核膜紧靠并逐渐融合而成。
实验二细胞的超微结构—透射电镜下的细胞器实验目的：通过使用透射电子显微镜观察和研究细胞的超微结构，了解细胞器的形态和组织，以及其在细胞功能中的作用。
实验原理：透射电子显微镜是一种利用电子束通过样品的原理进行显微观察的仪器。
相比传统光学显微镜，透射电子显微镜具有更高的分辨率和放大倍数。
实验步骤：1.准备样品：使用透射电子显微镜需要制备薄片样品。
将细胞或组织固定、切片和上染色剂等。
2.调整放大倍数：根据需要观察的细胞器，调整透射电子显微镜的放大倍数。
3.开始观察：将样品放入透射电子显微镜中，调整焦距和对比度，开始观察细胞超微结构。
4.记录结果：使用电子显微镜拍摄或记录所见到的细胞器的图像和形态。
根据观察结果，对细胞器的结构和功能进行分析和讨论。
实验结果：观察细胞的超微结构可以看到许多细胞器，如细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等。
细胞核是细胞的控制中心，一般位于细胞的中央。
在透射电镜下观察，可以看到核膜（由内核膜和外核膜组成）、核孔、核仁等结构。
核膜通过核孔与细胞质相连，核仁是RNA合成的地方。
线粒体是细胞的能量中心，通过细胞呼吸产生ATP。
在透射电镜下观察，线粒体呈棒状或梭形，内部含有许多内膜，并形成一系列被称为嵴（cristae）的褶层。
嵴上含有许多氧化酶，参与细胞呼吸。
内质网是细胞的重要细胞器之一，两个片层之间的空腔称为内质网腔。
内质网膜上覆盖着许多小颗粒，称为核糖体。
内质网分为粗面内质网和平滑内质网，前者存在核糖体，用于蛋白质合成，后者没有核糖体，参与脂质代谢和钙离子存储。
高尔基体是细胞的分泌细胞器，具有分泌蛋白质、糖蛋白质和磷脂等功能。
高尔基体由多个平面被膜囊构成，形成一系列被称为囊泡的结构。
在透射电镜下可以看到高尔基体具有一层由囊泡组成的堆叠结构。
溶酶体是细胞的消化系统，其内部含有多种水解酶。
溶酶体呈球状或椭圆形，在透射电镜下可以看到其内部含有酶泡。
溶酶体参与细胞内的废物降解和吞噬体的形成。
内质网病变的超微结构观察徐娇等摘要：电镜技术的应用使人们对细胞的超微结构有了更深入的了解。
各种细胞器的结构以及其病理状况时发生的改变为人们判断疾病的发生提供了直观科学的依据。
本文主要概述了投射电镜观察下内质网的各种超微病理变化。
关键词：电镜；内质网；病理变化20世纪30年代，德国的RUSKA第一次发现了电子显微镜，随后利用刚刚形成的电子显微镜技术第一次看到了烟草花叶病毒[1]。
随着电子显微镜技术的不断完善和发展，电镜的应用使人们对细胞的研究逐步深入到亚细胞结构，各种细胞器的结构也不断被人们认知。
同时，在医学科研和诊断疾病中做出了重要贡献。
例如，Gyorkey[2]等在2000例肿瘤诊断中8%要靠电镜帮助诊断。
Kuzela[3]等对49例肿瘤的诊断结果分析，11例电镜可进一步提供明确的诊断，占22%，纠正6%的错误诊断，确诊率28%。
国内周晓军[4]报道223例肿瘤电镜诊断，电镜确诊135例，占60%，纠正原病例诊断11例，占5%。
有诊断价值者占65%。
有由此可见，电镜技术在诊断疾病中的应用价值。
电镜分为扫描电镜和投射电镜。
由于其分辨率高，放大倍数大，而且使用较为方便，电镜已经成为研究细胞微观结构最有效的方法之一[5]。
本文所的总结的内质网超微结构变化主要通过投射电镜来观察。
1 内质网的超微结构及生理功能内质网（endoplasmic reticulum），ERKR. Porter、A. Claude 和EF. Fullam等人于1945年发现，是细胞质内由膜组成的一系列片状的囊腔和管状的腔，彼此相通形成一个隔离于细胞基质的管道系统，为细胞中的重要细胞器。
它实际上是一个连续的膜囊和膜管网，可分为粗面内质网（RER，Rough Endoplasmic Reticulum）和滑面内质网（SER，Smooth Endoplasmic Reticulum）两大部分。
粗面内质网上附着有大量核糖体，合成膜蛋白和分泌蛋白；滑面内质网上无核糖体。
内质网是哺乳细胞中一种重要的亚细胞器。
膜分泌性蛋白、氨基多糖、磷脂、胆固醇及钙信号等的代谢均与内质网功能直接相关，例如分泌性蛋白的合成与空间折叠、蛋白质糖基化修饰、蛋白质分泌等均在内质网内发生。
目前研究认为，胰腺细胞、心肌细胞、神经元细胞等内质网功能障碍可能分别是糖尿病、心脑组织缺血梗塞、退行性神经疾病等发生的重要原因[6-8]。
真核细胞的内质网具有四个主要的生理功能：合成膜蛋白和分泌蛋白；折叠形成蛋白质正确的三维空间构象；储存Ca2+；参与脂质和胆固醇的生物合成[9]。
2 内质网的病理性变化形态观察2.1内质网增多内质网的多少可以反应细胞病变状况。
例如在蛋白质合成及分泌活性高的细胞（如浆细胞、胰腺腺泡细胞、肝细胞等）以及细胞再生和病毒感染时，粗面内质网有增多现象。
李颖智[10]等研究了脊髓损伤后继发骨质疏松的骨组织超微结构，发现进行手术后第11w，胫骨成骨骨细胞核空化，粗面内质网增多。
熊娟[11]等观察了锯缘青蟹病毒感染的超微病理变化，发现其胃细胞中粗面内质网肿胀增多。
2.2内质网减少和水祥[12]等用秋水仙素灌大鼠慢性肝损伤大鼠，用电镜观察细胞，发现胞浆内内质网减少。
谢学军[13]等研究了糖尿病大鼠视觉系统三级神经元的病理变化，发现糖尿病大鼠视皮质，神经细胞胞浆中，粗面内质网减少且变形。
山羊冰川棘豆中毒[14]，缺血[15，16]等也可导致细胞内粗面内质网减少。
2.3内质网增生张洁[17]等用分离到的鹅副粘病毒毒株进行人工发病实验，并取实验结束时存活鹅的大脑进行电镜观察，发现粗面内质网有增生扩张现象。
张瑞祥[18]等在慢性迁延性乙肝病毒性肝炎的电镜检查中可以看到细胞内滑面内质网增生现象。
2.4内质网扩张及囊泡化内质网扩张和囊泡变（dilaftation and vesiculation ofendoplasmic reticulum）是细胞损伤最常见的内质网病变之一。
内质网扩张是指内质网口径增大，但仍保持原有结构并具有网状外形。
囊泡变是指内质网扩张成大小不等的囊泡。
缺氧、中毒、感染、营养不良和放射线照射均可引起内质网扩张和囊泡病变。
李艳飞[19]等用人工复制的脑软化症雏鸡摸型.研究其主要免疫器官病理解剖学变化、病理组织学变化以及超微结构的变化。
其中脾脏的粗面内质网扩张呈池状。
李颖智[10]等研究了脊髓损伤后继发骨质疏松的骨组织超微结构，发现进行手术后第11w，可以观察到明显的病变，周肱骨骨细胞，粗面内质网空化。
人工感染鸡卡氏住白细胞原虫病引起心、肝、脾、肺、肾、肠、胰等组织的核染色质内出现内质网扩张肿胀现象[20]。
引起组织细胞内内质网扩张的病症还有：急性酒精肝损伤[21]，家兔主动脉粥样硬化[22]，高胆固醇饮食引起动脉内皮细胞变性[23]，急性有机磷农药中毒[24]，猪生殖-呼吸综合征[25]，海洛因成瘾[26]等。
2.5粗面内质网脱颗粒当细胞受损时，粗面内质网上的核蛋白体往往脱落于胞浆内，粗面内质网的蛋白合成乃下降或消失；当损伤恢复时，其蛋白合成也随之恢复。
帖利军[27]等研究甲状腺机能减退大鼠脑发育临界期神经元超微结构变化，实验大鼠顶叶皮质神经元在电镜下可见内质网变性、扩张，核蛋白体脱落、游离。
李任飞[28]观察经胃左动脉热灌注化疗药物对照正常胃组织超微结构，其中56℃组胃小弯上皮细胞胞质内，内质网扩张脱颗粒。
2.6同心性小体宋福林[29]等对纤维组织细胞性脑膜瘤的临床病理进行了病理学观察，发现纤维组织细胞细胞胞质内的粗面内质网成板层状或扩张成池分别，可见同心性小体分布。
2.7池内隔离郑晓刚[30]等在软骨样脊索瘤的超诶病理对比研究中观察到普通的脊索瘤瘤细胞内的粗面内质网扩张呈大泡。
内质网正常的生理功能维持着细胞以及组织器官的正常运作，因此，通过观察内质网发生不同形式的形态异常，可以判断组织器官出现的病理情况。
了解和熟悉细胞内个细胞器的正常形态和病理形态，能够帮助我们更好的判断疾病，深入探讨疾病的致病机理。
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