梅毒的实验室检查

一、梅毒分类诊断标准（一）一期梅毒的诊断标准。

1、病史：有性接触史或性伴感染史。

2、临床表现：具有符合相应特征的硬下疳、腹股沟淋巴结肿大。

3、实验室检查：硬下疳组织渗出液或淋巴结节穿刺液：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性和TPPA（或TPHA或TP-ELISA）阳性。

同时符合1、2、3为确诊病例。

同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA或TP暗视野检查）或结果为阴性的为疑似病例。

（二）二期梅毒的诊断标准1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史。

2、临床表现：病期2年内，多为无症状性、暗红色、符合相应特征的多形性皮损，尤其掌趾部位的暗红斑或鳞屑性丘疹，也可出现其它损害（关节、眼、内脏等）。

3、实验室检查：皮损如扁平湿疣、湿丘疹、粘膜斑等：TP暗视野检查阳性；或RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA （或TPHA或TP-ELISA）阳性。

同时符合1、2、3为确诊病例。

同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）的为疑似病例。

（三）三期梅毒的诊断标准。

1、病史：有性接触史或性伴感染史或输血史或一、二期梅毒史。

2、临床表现：病期2年以上。

有如下特征中的任一项表现，包括皮肤黏膜损害如结节梅毒疹、树胶肿，上腭、鼻中隔等穿孔性损害；骨、眼损害，其它内脏损害；神经梅毒；心血管梅毒。

3、实验室检查：RPR（或TRUST）阳性，同时TPPA （或TPHA或TP-ELISA）阳性；或脑脊液检查：WBC≥10×106/L，蛋白>500mg/L，并排除其它引起这些异常的原因。

或三期梅毒组织病理变化。

同时符合1、2、3为确诊病例。

同时符合1、2，以及实验室检查RPR（或TRUST）阳性，未做TPPA（或TPHA或TP-ELISA）脑脊液检查或组织病理检查的为疑似病例。

（四）隐性梅毒的诊断标准。

目的：规范的梅毒螺旋体检验操作，确保检测结果准确。

适用范围：性病实验室工作人员责任人：实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。

1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性，医务人员应戴手套谨慎操作。

1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法，各期梅毒的检测方法及部位见下表。

1.2.1血液1.2.1.1血清标本根据需要，用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml，室温静置1-2小时（或37℃静置30分钟），待血液凝固、血块收缩后，3000r/min离心10-15分钟，分离新鲜血清，备用。

也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。

溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。

1.2.1.2血浆标本根据需要，用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml，轻轻颠倒混匀8-10次，3000r/min离心10-15分钟，分离血浆，备用。

血库血浆以及EDTA 抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验（一般仅用于RPR实验，），但易出现假阳性反应（需用血清复试），如用其他抗凝剂应首先评价后再用。

1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂，1岁以下儿童采用足跟部）。

一次性采血针刺破皮肤，用无菌棉签擦掉第一滴血。

收集滴出的血液，立即用于检测。

1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测，或取渗出液直接涂片，用于镀银染色试验。

1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，刮取渗出液，加入有DNA保存液（1ml/管）的标本管中，备用。

1.2.3淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结，注入0.3ml无菌生理盐水并反复抽吸2-3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。

梅毒的实验室检查与技术规范概述梅毒（syphilis）是一种由螺旋体梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的性传播疾病。

梅毒的及时检测和确诊对于治疗及防止梅毒的传播至关重要。

本文将探讨梅毒的实验室检查方法和相关的技术规范。

实验室检查方法血清学检测血清学检测是梅毒的首选检测方法，常用的血清学检测方法包括非梅毒螺旋体凝集试验（non-treponemal tests）和梅毒螺旋体特异性试验（treponemal tests）。

非梅毒螺旋体凝集试验包括梅毒螺旋体血清检测（VDRL）和荧光梅毒螺旋体抗体吸附试验（FTA-ABS）。

这些试验通过检测抗体反应来判断是否感染梅毒，并可评估感染程度。

梅毒螺旋体特异性试验主要包括T. pallidum颗粒凝集试验（TP-PA）和ELISA试验。

这些试验可以进一步证实梅毒感染，并对阳性样本进行确认。

分子生物学检测分子生物学检测方法可以直接检测梅毒螺旋体的基因组或其特异性基因片段。

常见的分子生物学检测方法包括聚合酶链式反应（PCR）和DNA杂交试验。

PCR技术可在早期感染时检测到梅毒螺旋体的DNA，具有高度敏感性和特异性。

DNA杂交试验主要用于检测神经梅毒，可检测到T. pallidum在脑脊髓液中的存在。

细菌学检测细菌学检测是直接观察样本中是否存在活动的梅毒螺旋体。

常用的细菌学检测方法有暗视野显微镜检查、苏木精-伊红染色和螺旋体培养。

在显微镜下观察暗视野试验时，活动的梅毒螺旋体会显示出旋转的运动。

苏木精-伊红染色可以染出梅毒螺旋体的形态。

螺旋体培养可以将梅毒螺旋体培养出来，但是需要较长的培养周期，并且并非常规检测方法。

技术规范为确保梅毒实验室检查结果的准确性和可靠性，以下是一些常见的技术规范：1.实验室人员需接受充分的培训，熟悉各项检测方法和技术操作流程，并按照操作规程执行。

2.所有试剂和材料必须符合质量管理规范，并保持良好的保存和标识。

3.实验室必须建立完善的质量控制体系，包括使用标准品进行日常质控、参加外部质控项目以及进行内部质量评估。

梅毒螺旋体实验室检查说明
梅毒诊断标准根据卫生部卫生行业标准《梅毒诊断标准》(WS273－2007)。

梅毒诊断分为一期、二期、三期、隐性和胎传梅毒。

梅毒诊断原则应根据流行病学史、临床表现及实验室检查等进行综合分析。

对实验室检查部分作出如下解释说明:无论一期、二期、三期，要诊断现症梅毒需要梅毒螺体抗体血清试验阳性，非梅毒螺旋体抗体阳性。

一定要以上两个检查同时出现阳性即双阳性。

梅毒螺体抗体的检测方法有： TPPA、TP-ELISA、TP-TR
非梅毒螺旋体抗体的检测方法有：RPR、TRUST、VDRL
我院实验室梅毒螺体抗体的检测方法选取TP-ELISA，报告单显示为：梅毒螺体特异性抗体（ELISA）。

我院实验室非梅毒螺体特异性抗体的检测方法选取TRUST，报告单显示为：非梅毒螺体特异性抗（TRUST）
检验报告说明：输血前已包括梅毒螺体特异性抗体（ELISA）和非梅毒螺体特异性抗（TRUST）。

单独的需要查梅毒的病人请开：梅毒两项！。

梅毒确诊诊断标准
梅毒的确诊诊断通常根据以下标准：
1. 医疗历史和症状：患者可能有接触梅毒性接触源的途径，如性传播、母婴传播等，以及梅毒感染的常见症状，如无痛性潮红、溃疡、疹子等。

2. 实验室检测：常用的实验室检测方法包括暗视野显微镜检查（Dark-field microscopy）、血清特异性抗体检测（如血浆透
明法或酶联免疫吸附试验ELISA法）以及血液检查等，这些
检查可帮助确认体内是否存在梅毒螺旋体。

3. 阴道分泌物和尿液检查：这些检查通常用于检测女性生殖道是否感染，通过检查分泌物或尿液中的梅毒螺旋体来诊断梅毒。

4. 组织检查：在一些病例中，可能需要进行皮肤或黏膜活体活检或切片来确定梅毒的确诊。

请注意，这些标准仅供参考，实际的诊断应由医生根据患者的病史、症状和实验室检查结果综合判断。

梅毒实验室诊断金标准
梅毒是一种由螺旋体属细菌梅毒螺旋体（Treponema pallidum）引起的性传播疾病。

实验室诊断梅毒的金标准包括以下几种方法：
1. 直接检测：通过显微镜观察梅毒螺旋体的存在。

常用的方法包括暗视场显微镜检查（dark-field microscopy）和免疫荧光染
色（immunofluorescence staining）。

2. 血清学检测：主要包括非特异性反应和特异性反应两个层次的检测。

- 非特异性反应：通过检测体液中的非特异性抗体来提供梅
毒感染的线索。

最常用的是非梅毒螺旋体抗原卡（Non-Treponemal Antigen Test），主要有梅毒假阳性试验（Rapid Plasma Reagin，RPR）和梅毒螺旋体试验（Venereal Disease Research Laboratory，VDRL）等。

- 特异性反应：通过检测体液中的特异性抗体来确认梅毒感
染的诊断。

最常用的是梅毒螺旋体抗原检测（Treponemal Antigen Test），主要有梅毒螺旋体颗粒血清试验（Treponema Pallidum Particle Agglutination Assay，TPPA）和梅毒螺旋体酶
联免疫吸附试验（Treponema Pallidum Enzyme Immunoassay，TP-EIA）等。

这些实验室诊断方法可以互相配合，提供梅毒感染的准确诊断
结果。

综合上述的非特异性反应和特异性反应的检测结果，并结合临床表现和流行病学史，可以得出梅毒的确诊结论。

梅毒螺旋体的几种实验室检测方法摘要] 梅毒是一种严重危害人类健康的性传播疾病，临床上主要依靠实验室检测进行诊断。

当前，有多种实验室检测方法被使用。

本文主要对直接检测法、血清学检测法及PCR检测法进行综述。

[关键词] 梅毒；检测方法；血清学；分子生物学梅毒（Syphilis）是由苍白螺旋体（又称为梅毒螺旋体）引起的慢性、系统性性传播疾病。

它主要通过性途径传播，临床上表现为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和先天梅毒（胎传梅毒）等[1]。

本文综述了目前应用于梅毒实验室检测的三类方法，一是病原体直接检测，二是血清学方法，三是分子生物学技术。

1. 病原体直接检测梅毒螺旋体直接检测适用于一期梅毒。

一期梅毒仅在接触部位发病，主要表现为皮肤黏膜的损害，标志性特征为硬下疳。

此时血清中抗原抗体还未达到可测水平，因此梅毒螺旋体检测对梅毒的早期诊断尤为重要。

1.1 暗视野显微镜检查（DFM）可直接观察病灶分泌物中的梅毒螺旋体，是诊断早期梅毒的主要方法。

用暗视野显微镜观察，可根据典型的形态、大小和运动方式，结合临床症状进行诊断，特异性较高。

但由于病程、取材、实验人员计术水平等多种因素的影响，敏感性较低。

1.2 镀银染色法（Warthin-starry）由于梅毒螺旋体具有亲银性，镀银染色法能将梅毒螺旋体染成棕褐色或黑褐色，形态清晰易辨，且标本可永久保存。

缺点是镀银染液需新鲜配制，且存在其他类似的干扰物质，故临床应用较少。

1.3 直接免疫荧光抗体染色（DFAT）用荧光素标记的抗梅毒螺旋体抗体直接染色标本，利用抗原抗体特异性反应，通过暗视野显微镜观察，从免疫学和形态学两方面检测梅毒螺旋体，敏感性和特异性均较高。

但同时，对显微镜设备和技术条件要求也较高，目前还没有被实验室广泛使用。

1.4 多功能显微镜诊断仪（MDI）是美国科学家布拉德福博士历经20年发明的一种屏幕线性放大40-20000倍的高清晰度显微镜，集现代光学、光电学、电子学、医学影像和多媒体计算机技术于一体的医学显微设备。

目的：规范的梅毒螺旋体检验操作，确保检测结果准确。

适用范围：性病实验室工作人员责任人：实验操作者1、标本的采集与处理1.1标本采集的基本要求1.1.1操作应规范化。

1.1.2所有标本都应当被视为具有传染性，医务人员应戴手套谨慎操作。

1.2梅毒标本采集梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清学检测方法，各期梅毒的检测方法及部位见下表。

1.2.1血液1.2.1.1血清标本根据需要，用一次性真空采血针与促凝采血管抽取静脉血2-5 ml，室温静置1-2小时（或37℃静置30分钟），待血液凝固、血块收缩后，3000r/min离心10-15分钟，分离新鲜血清，备用。

也可采用保存于2-8℃或-20℃的血清。

溶血、脂血或污染的标本可影响试验结果。

1.2.1.2血浆标本根据需要，用一次性真空采血针与抗凝采血管抽取静脉血2-5 ml，轻轻颠倒混匀8-10次，3000r/min离心10-15分钟，分离血浆，备用。

血库血浆以及EDTA 抗凝血浆同样可以用于梅毒血清学实验（一般仅用于RPR实验，），但易出现假阳性反应（需用血清复试），如用其他抗凝剂应首先评价后再用。

1.2.1.3末梢全血消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择手指或耳垂，1岁以下儿童采用足跟部）。

一次性采血针刺破皮肤，用无菌棉签擦掉第一滴血。

收集滴出的血液，立即用于检测。

1.2.2皮损部位组织液1.2.2.1用于病原学检查用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片立即用于暗视野显微镜检测，或取渗出液直接涂片，用于镀银染色试验。

1.2.2.2用于核酸检测用无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物，钝刀/刮勺轻刮、挤压皮损部位，刮取渗出液，加入有DNA保存液（1ml/管）的标本管中，备用。

1.2.3淋巴液无菌操作下穿刺腹股沟淋巴结，注入0.3ml无菌生理盐水并反复抽吸2-3次，取少量的淋巴液直接滴于载玻片上，加盖玻片后立即进行暗视野镜检或备用。