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复方甘草片中可待因和吗啡的含量测定及分析杨丽蓉，隋海山，张筱，聂晓华，王悦（潍坊市检验检测中心，潍坊２６１１０１）摘要 目的：通过对５８批复方甘草片中可待因、吗啡的含量测定，对复方甘草片中阿片粉或罂粟果提取物粉原料进行整体评价。
方法：采用高效液相 串联四极杆质谱的多反应监测（ＭＲＭ）模式测定，并对其含量进行分析。
结果：５８批复方甘草片中的可待因、吗啡的含量均无显著差异。
结论：复方甘草片中的阿片粉或罂粟果提取物粉原料整体质量平稳。
关键词：复方甘草片；可待因；吗啡；含量中图分类号：Ｒ９２１ ２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００９－３６５６（２０２１）０１－００６７－０５ｄｏｉ：１０ １９７７８／ｊ ｃｈｐ ２０２１ ０１ ０１３ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎａｎｄａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｃｏｄｅｉｎｅａｎｄｍｏｒｐｈｉｎｅｉｎＣｏｍｐｏｕｎｄＬｉｑｕｏｒｉｃｅＴａｂｌｅｔｓＹＡＮＧＬｉｒｏｎｇ，ＳＵＩＨａｉｓｈａｎ，ＺＨＡＮＧＸｉａｏ，ＮＩＥＸｉａｏｈｕａ，ＷＡＮＧＹｕｅ（ＷｅｉｆａｎｇＩｎｓｐｅｃｔｉｏｎａｎｄＴｅｓｔｉｎｇＣｅｎｔｅｒ，Ｗｅｉｆａｎｇ２６１１０１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｏｐｉｏｉｄｐｏｗｄｅｒｏｒｐａｐａｖｅｒｓｏｍｎｉｆｅｒｕｍｅｘｔｒａｃｔｕｓｅｄｆｏｒＣｏｍｐｏｕｎｄＬｉｑｕｏｒｉｃｅＴａｂｌｅｔｓｂｙｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｃｏｄｅｉｎｅａｎｄｍｏｒｐｈｉｎｅｉｎ５８ｂａｔｃｈｅｓｏｆＣｏｍｐｏｕｎｄＬｉｑｕｏｒｉｃｅＴａｂ ｌｅｔｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｃｏｄｅｉｎｅａｎｄｍｏｒｐｈｉｎｅｉｎＣｏｍｐｏｕｎｄＬｉｑｕｏｒｉｃｅＴａｂｌｅｔｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｍｕｌｔｉｐｌｅｒｅａｃｔｉｏｎｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ（ＭＲＭ）ｍｏｄｅｏｆＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳ，ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｃｏｄｅｉｎｅａｎｄｍｏｒｐｈｉｎｅｉｎ５８ｂａｔｃｈｅｓｏｆＣｏｍｐｏｕｎｄＬｉｑｕｏｒｉｃｅＴａｂｌｅｔｓ Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＴｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｏｐｉａｔｅｐｏｗｄｅｒｏｒｐａｐａｖｅｒｓｏｍｎｉｆｅｒｕｍｅｘｔｒａｃｔｕｓｅｄｆｏｒｉｎＣｏｍｐｏｕｎｄＬｉｑｕｏｒｉｃｅＴａｂｌｅｔｓｗａｓｓｔａｂｌｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＣｏｍｐｏｕｎｄＬｉｑｕｏｒｉｃｅＴａｂｌｅｔｓ；ｃｏｄｅｉｎｅ；ｍｏｒｐｈｉｎｅ；ｃｏｎｔｅｎｔ 复方甘草片是常用的镇咳祛痰药物，主要含有甘草浸膏粉，阿片粉或罂粟果提取物、八角茴香油、樟脑和苯甲酸钠，作为基本药物收录在《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）２０１５年版中［１ ５］，其中阿片粉或罂粟果提取物是其重要组成部分，且成分复杂。
目的：规范复方甘草片中间产品、成品的检验操作，保证检验结果的准确性。
范围：复方甘草片中间产品、成品责任：质检员程序：1性状取供试品10片铺于洁净白纸上，观察其色泽及片型厚薄的均一性；鼻嗅口尝其气味。
2鉴别2.1取供试品2片，研细，加水约7ml混匀，加10%无水碳酸钠水溶液至pH值约为9，用氯仿-异丙醇（3：1）提取2次，每次20ml，合并提取液，用少量氨试液洗涤，再用少量水洗，然后浓缩蒸干，加甲醇0.3ml使溶解，作为供试品溶液；另取吗啡对照品2mg，精密称定，加甲醇溶解稀释至1ml，摇匀，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录V B）试验，吸取上述两种溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲醇-浓氨溶液（35：10：5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液使显色，观察供试品色谱与吗啡对照品色谱中斑点色泽和位置的对应情况。
2.2取供试品1片，研细，加水3ml使溶解，滤过，取滤液少量加稀硫酸1-2滴，观察反应现象，加浓氨溶液，观察反应现象。
3. 检查3.1水分用快速水分仪检验3.2重量差异按“重量差异检查标准操作程序”检验。
3.3微生物限度按“微生物检验操作程序”检验。
3.4脆碎度按“片剂脆碎度检查标准操作程序”检验。
4. 含量测定照高效液相色谱法（附录V D）测定。
4.1色谱条件与系统适用性试验填充剂：辛烷基硅烷键合硅胶流动相：0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-0.0025mol/L庚烷磺酸钠水溶液-乙腈（5：5：2）检测波长：220nm理论板数：≥1000（按吗啡峰计算）4.2对照品溶液的制备精密称取105℃干燥1小时的吗啡对照品，加含2%甲醇的5%醋酸溶液溶解并稀释，分别制成每1ml约含吗啡0.01mg、每1ml约含吗啡0.05mg的溶液。
4.3固相萃取柱系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶填充物；以测定法中相同的处理条件和洗脱条件试验。
精密量取浓度为每1ml含0.05mg的吗啡对照品溶液1ml，置处理后的固相萃取柱上，同法洗脱，用5ml量瓶收集洗脱液至刻度，摇匀。
HPLC法测定复方甘草片中吗啡与甘草酸的含量目的：研究探讨采用高效液相色谱仪测定复方甘草片中吗啡与甘草酸含量的临床应用价值。
方法：选择Inertsil-Cl8柱作为色谱柱，规格为4.6 mm×150mm，5μm，设置流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾溶液，在流速1.0mL/min、柱温为35℃条件下，分别在220nm和254nm的波长下对复方甘草片中的吗啡、甘草酸含量进行检测。
结果：吗啡、甘草酸浓度与峰面积的线性关系良好，r分别是0.999947和0.999929，P＜0.05。
吗啡、甘草酸精密度试验RSD 分别为0.67%、0.22 % ，稳定性试验RSD 分别为0.72%和0.63%，平均回收率分别为98.34%和99.47%，不同批次含量测定范围分别为0.39mg/片-0.40mg/片、7.6mg/片-7.9mg/片。
结论：通过高效液相色谱仪可以对复方甘草片中的吗啡、甘草酸等含量进行准确定量，且操作简单、方便，可重复性高，值得推广应用。
标签：高效液相色谱仪；复方甘草片；吗啡；甘草酸复方甘草片是临床上最为常见的镇咳祛痰类复方制剂之一，其由甘草浸膏粉、阿片粉、八角茴香油、罂粟果提取物、樟脑以及苯甲酸钠等物质共同组成[1]。
传统检测方法具有操作过程复杂、检测周期长、误差较大的特点。
目前，通过高效液相色谱仪对复方甘草片中的甘草酸、吗啡等含量进行检测也有了相关报道。
本文其具体操作方法、检测结果等情况进行分析。
具体报告如下。
1资料与方法1.1一般资料仪器：选择日本岛津仪器生产的LC-10A高效液相色谱仪（主要组成部分包括：微体积串联双柱塞、柱温箱CTO-10ASVP Plus、紫外可见双波长检测器SPD-10A VP Plus 、超声波提取器HS 3120、中文化LC工作站LCsolution Lite）、Mettler Toledo 公司生产的XS105电子分析天平和pH SG2精密pH计、超声波清洗器等。
3.药品生产厂家：国药集团工业有限公司生产批号：202010规格：100片/瓶（二）操作步骤1.性状取复方甘草片一瓶，倒出几片，用肉眼看应为灰棕色、棕色或棕褐色，外面有一层薄膜包衣，去除外层包衣后，为棕色或棕褐色；放鼻前闻，有特殊气味；有吸潮性。
结果记录：2.鉴别（1）准备一瓶包装完好的复方甘草片，旋开盖子，瓶身侧至35°，用手腕轻轻震摇，倒出2片。
将研钵和钵杵用水清洗干净，晾干，用研钵将药物捣碎，研至粉末，置于锥形瓶中。
往里加水到7ml，清洗玻璃棒后，用玻璃棒搅拌混液，使其混匀。
用胶头滴管继续往内加10%的无水碳酸钠溶液，边加用玻璃棒蘸取试液至pH试纸上，至PH值约为9。
供试品试液制备：取一支分液漏斗，洗净晾干，找出三氯甲烷和异丙醇试剂，按3:1的比例混合，提取溶液2次，每次各20ml，合并的提取液用少许氨试液洗涤，再用少许水冲洗，等蒸干后，用胶头滴管滴加甲醇溶液0.3ml溶解。
对照品试液的制备：另取吗啡对照品适量，加甲醇溶液，用玻璃棒不断搅拌，待稀释后，即得每1ml中约含2mg的溶液。
点样：吸取供试品溶液与对照品溶液各10μl，用毛细管将它们分别点于同一硅胶G薄层板上。
展开剂：乙酸乙酯-甲醇-浓氨溶液，按35:10:5的比例混合，配置好展开剂倒入展开缸中，盖过缸底即可，预饱和10分钟，再把硅胶板放入展开缸，密闭观察，待爬至离点样处3cm左右取出，待干后，喷上碘化铋钾试液，在日光灯下观察颜色。
在供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，找出显相同颜色的斑点。
结果记录：温度：湿度：硅胶板：展开时间：展距：供试品点样量：对照品点样量：显色方式：检视：图1 复方甘草片图2 PH试纸图3 电子天平图4 高效液相色谱仪。
复方甘草片为常用复方制剂，其成分包括甘草浸膏粉、阿片粉、樟脑、八角茴香油、苯甲酸钠等，属于镇咳祛痰类非处方药品[1]。
UPLC-MS/MS具有较好的选择性和灵敏度，特别适用于复杂样品的分析。
事实上，其测得结果只是被测量的估计值，而完整的测量结果还应包括被测量的估计值及不确定度[7，8]。
因此，本文在建立UPLC-MS/MS法[2]测定复方甘草片中甘草酸含量的基础上，根据相关的规范和指南[3，4]并参考相关文献[5，6]对实验结果进行不确定度评定，以期为UPLC-MS/ MS法测定复方甘草片中甘草酸的含量提供科学依据。
1 材料与方法1.1 仪器与试剂1290高效液相色谱仪，美国安捷伦公司；G6460三重串联四级杆质谱仪，美国安捷伦公司；S1-T256涡旋混合器；CPX5800H-C超声波清洗机，美国必能信上海科导仪器有限公司；XA205DU万分之一电子天平，上海梅特勒-托利多仪器有限公司。
甘草酸对照品（批号：G-004-170414）供实验室药品检验用，成都瑞芬思生物科技有限公司；复方甘草片（批号：190202）为市售品；色谱甲醇、色谱甲酸，Thermo；超纯水为Milipore 制备。
1.2 供试品溶液的制备取复方甘草片20片，精密称定，研细后称取约1片量，置于100mL量瓶中，然后加入适量甲醇-水（1︰1），超声提取处理（300W，250KHZ）30min，取出后放冷；用甲醇-UPLC-MS/MS法测定复方甘草片中甘草酸含量不确定度评定□ 陈高健 周日秀 汤丽昌（通讯作者） 北海市食品药品检验所摘 要：本文的目的是对超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）测定复方甘草片中甘草酸的含量进行不确定度评定，通过建立不确定度评估的数学模型来对不确定度的各主要分量进行分析计算，得出合成不确定度及扩展不确定度。
结果显示，当复方甘草片中甘草酸的测定结果为49.90mg/g时，在95%的置信区间下，其扩展不确定度为7.8mg/g，k=2。
年度产品质量回顾分析报告产品名称:复方甘草片规格：100片/瓶×15瓶/盒×20盒/箱50片×300瓶/箱24片×2板/盒×10盒/收缩膜×30条/箱1概要：复方甘草片是我厂常年生产品种，产量大，工艺成熟，质量稳定，根据《年度产品质量回顾分析管理规程》的规定，质量保证部于20XX年10月对我厂生产的复方甘草片进行了年度产品质量回顾分析。
本报告重点对该品种的两种主要有效成分甘草酸和无水吗啡的含量进行了统计和趋势分析。
通过分析，确定现行工艺对产品质量的影响程度，将影响产品质量的关键参数进行风险评估，将影响因素降到最低。
确保了产品质量，并为今后复方甘草片的稳定生产提供了参考。
2回顾期限20XX年07月01日－20XX年07月30日3制造情况：本回顾年度共生产复方甘草片228批，总产量为89451万片（单位），总收率为98.73%.4产品描述：4.1 产品工艺4.1.1 产品名称、剂型、规格：4.1.1.1. 产品名称：复方甘草片4.1.1.2. 本品每片中含无水吗啡（C17H19NO3）应为0.36～0.44mg；含甘草酸（C42H62O16）不得少于7.3mg。
4.1.1.3. 剂型：片剂4.1.1.4. 规格：复方4.1.1.5. 有效期：48个月4.1.1.6. 批准文号：国药准字H620XXXX34.1.1.7. 批量：400万片4.1.2. 处方和依据：4.1.2.1. 处方：原辅料名称单位用量(1000片)甘草浸膏粉g 112.5阿片粉g 4苯甲酸钠g 2樟脑g 2八角茴香油g 2氧化镁g 5滑石粉g 5乙醇ml 20*含吗啡按无水吗啡（C17H19NO3）计算，应为9.5%～10.5%。
按干燥品计算，含甘草苷（C21H22O9）不得少于0.5%，甘草酸（C42H62O16）不得少于7.0%。
4.1.2.2. 依据：《中国药典》20XX年版二部P575、报批的复方甘草片甘肃省药品生产申报审批书以及20XX版药品生产质量管理规范（GMP）。
复方甘草片中吗啡含量测定方法的改进
谢淼;张国栋
【期刊名称】《化学医药工业信息》
【年(卷),期】1992(000)005
【总页数】4页(P35-38)
【作者】谢淼;张国栋
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.固相萃取柱高效液相色谱法测定复方甘草含片中吗啡的含量
2.HPLC法测定复方甘草片中吗啡的含量
3.毛细管区带电泳法测定复方甘草片中的甘草酸、甘草次酸、吗啡和苯甲酸钠
4.复方甘草片中甘草酸含量测定方法的改进
5.液相质谱联用法同
时测定复方甘草片中甘草酸和吗啡
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复方甘草搽剂中甘草酸含量的高效液相色谱法分析摘要】目的建立复方甘草搽剂中甘草酸含量测定方法，为今后的质量控制工作提供可靠的理论依据。
方法采取高效液相色谱法，色谱条件：CosmosilC18柱，流动相甲醇-0.2mol/l醋酸铵-冰醋酸（65:35:1），流速1ml/min，波长为241nm，柱温为30℃。
结果甘草酸质量浓度在10.38-1040.60ug/ml范围内与峰面积存在良好的线性关系，平均回收率为101.462%，RSD值为1.25%。
结论建立方法具有准确性、精密度、重现性、稳定性良好等优势，可作为复方甘草搽剂的质量控制方法。
【关键词】复方甘草搽剂质量标准甘草酸含量高效液相色谱法【中图分类号】R932 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）14-0394-01复方甘草搽剂为外用中药医院制剂，主要功效为消炎止痒，用于皮肤干燥、瘙痒等症。
研究证实，高浓度的干草流浸膏具有显著地抗真菌作用，为处方的有效成分之一。
本次研究中出于对复方甘草搽剂进行质量控制的目的，建立了如下含量测定方法，详见下文。
1 仪器与试药Dionex Ultimate 300型高效液相色谱仪，配备低压四元梯度泵，多波长紫外检测器，自动进样器，柱温箱；UP5200H超声清洗机，电子分析天平，甲醇为色谱纯，水为超纯水；复方甘草搽剂，院内制剂室生产，批号为20120303，甘草酸对照品，中国食品药品检定研究院，批号：110731-201217。
2 方法与结果2.1色谱条件[1]色谱柱为：CosmosilC18柱，(250mm×4.6mm，5um)，流动相为：甲醇-0.2mol/l醋酸铵-冰醋酸(65:35:1)，流速为1ml/min，检测波长为241nm，进样量为10ul，柱温为30℃。
理论板数以甘草酸峰计应不低于5500。
2.2溶液制备2.2.1对照品溶液制备精密称定甘草酸对照品57.0mg，放置在50ml容量瓶中经甲醇稀释至刻度，制成对照品储备液，精密吸取甘草酸对照品储备液2ml，移至10ml容量瓶中经甲醇稀释至刻度，得对照品溶液。
