2012-9-12 减数分裂标本的制备和观察1
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减数分裂观察实验注意事项减数分裂是细胞分裂过程中的重要一步,它在生物学研究中有着重要的应用价值。
对于减数分裂的观察实验中,我们需要注意以下几个方面:1. 实验材料的准备:选择适合的实验材料进行减数分裂观察。
比较常用的实验材料有酵母菌、果蝇、线虫、水蛭等。
根据自己的实验目的和研究对象,选择合适的实验模型。
2. 适当处理样本:要对实验材料进行适当的样本处理。
比如使用适当的培养基,控制培养条件,使得实验材料处于最佳状态,以便观察其减数分裂现象。
3. 选择合适的观察方法:根据实验材料的特点和实验目的,选择合适的观察方法。
减数分裂通常使用显微镜观察,可以使用普通显微镜或者荧光显微镜。
对于不同的实验材料,有时还需要使用特殊的染色技术来观察减数分裂过程。
4. 基本的观察过程:进行减数分裂观察时,首先需要找到合适的细胞进行观察。
可以根据细胞的特征,如大小、形状等进行初步筛选。
然后,使用显微镜对选定的细胞进行细致的观察和记录。
可以观察细胞的形态变化、细胞核的形态变化、染色体的核型变化等。
5. 数据分析和结果呈现:观察实验完成后,需要对所得的数据进行分析。
可以根据实验目的,比较不同组的观察结果,寻找规律和差异。
同时,需要合理地呈现实验结果,可以使用图表、图片等形式将结果展示给他人。
6. 注意实验的准确性和可重复性:在进行减数分裂观察实验时,需要注意实验的准确性和可重复性。
要进行多次观察,确保所得结果的可靠性。
同时,要对实验过程中的可能误差进行有效的控制,提高数据的可信度。
7. 注意安全问题:在进行实验时,要注意实验安全。
根据实验材料和操作的要求,采取相应的安全措施,确保自己和他人的安全。
8. 扩展实验内容:减数分裂是一个非常重要的细胞分裂过程,可以从不同的角度来进行研究。
可以探究减数分裂的调控机制、减数分裂异常的影响等方面,进行进一步的实验。
总之,减数分裂观察实验是生物学研究中的重要环节。
在实验过程中,我们需要注意实验材料的准备、适当处理样本、选择合适的观察方法、基本的观察过程等方面。
减数分裂装片制作与观察1 引言减数分裂是有性生殖的生物形成配子时进行的一种特殊的细胞分裂形式。
减数分裂后产生的配子染色体数为体细胞的一半,称作单倍体(haploid)细胞。
有性生殖过程中雌雄配子的结合使得合子细胞的染色体数目与正常体细胞相同,从而保证了子代与亲代染色体数目的稳定。
而另一方面,减数分裂过程中,染色体配对时非姊妹染色单体发生交换,使得染色体上的基因得以重组,因而后代的表型更具多样性。
减数分裂相与又是分裂之间存在较大的差异。
减数分裂可划分为减数第一次分裂和减数第二次分裂。
减数第一次分裂具有较长的前期,可划分为细线期、偶线期、粗线期、双线期和浓缩期(终变期)。
在该时期中发生同源染色体的联会和非姊妹染色单体的交换。
2 实验材料及器材雄性蝗虫一只(每组一只)、显微镜、解剖针、解剖剪、载玻片、盖玻片、平皿、改良苯酚-品红染液、生理盐水、吸水纸3 实验步骤1.取材取雄性蝗虫,从尾部两侧剪开体壁,直至双翅基部,掀开背板露出内部器官。
可见一对淡黄色的精巢位于消化管背面。
用镊子取出精巢置于平皿中,滴数滴生理盐水以保持湿润。
用镊子或解剖针将精巢分离开,可见大量细条状的精细小管。
2.制作装片从盒中取出载玻片,尽量擦干。
用镊子夹取1-2条精细小管置于载玻片上,用吸水纸将水小心地吸干,注意不要将精细小管吸走。
在精细小管上滴加一滴改良苯酚-品红染液,室温下染色10-15min。
盖上盖玻片,在盖玻片上垫1-2层吸水纸,一手稳住载玻片和盖玻片防止发生滑动,另一只手用解剖针柄敲击盖玻片以使精细小管中的细胞分散。
3.镜检先用4倍或10倍物镜观察,当找到良好视野后换40倍物镜或100倍物镜(需要使用镜油)。
寻找和识别减数分裂各个时期的细胞。
并选择两个典型的细胞分裂相进行手绘。
4 实验结果从显微镜下寻找到减数分裂各个时期的细胞。
前期Ⅰ细线期:染色体呈细纤维样,虽然已经完成复制,但看不到成双的染色体。
偶线期:同源染色体发生联会,但此时四分体的结构并不清晰可见。
小鼠细胞分裂标本的制备与观察一、实验目的a)掌握小鼠精巢染色体标本制作法。
b)观察减数分裂过程中不同时期的染色体。
c)观察腹水瘤细胞有丝分裂中不同时期的染色体形态。
二、实验原理a)减数分裂(Meiosis)是发生于生殖细胞的一种特殊的细胞分裂方式,DNA复制一次,而细胞连续分裂两次,形成单倍体的精子和卵子。
减数分裂远比有丝分裂复杂,经两次细胞分裂,分别称减数分裂Ⅰ、减数分裂Ⅱ,两次分裂间又一个较短的间期,这个间期DNA不复制。
b)雄性动物精子发生于睾丸曲精细管的生精上皮细胞,由其中的精原细胞经多次有丝分裂和生长,形成初级精母细胞,初级精母细胞经减数分裂形成次级精母细胞,次级精母细胞有丝分裂成精细胞,再经一系列变化成精子。
c)因此,通过分离曲细精管、剪碎并加入液体吹打,可使官腔各种细胞游离出来,然后经过低渗、固定、染色等过程就可制成包含减数分裂各期的标本。
三、实验试剂及仪器a)材料:成年雄性小白鼠b)用品:注射器、平皿、尖头镊子、剪刀(普通剪刀、眼科小剪刀)、吸管、离心管、离心机、玻片等。
c)试剂:1、100μg/ml秋水仙素。
2 、2%柠檬酸钠溶液3、 0.075M的KCI4、3:1甲醇:冰醋酸及1:1甲醇:冰醋酸(应现配)5、PH6.8,0.01M的PBS缓冲液6、Gimesa原液7、Gimesa工作液:1份Gimesa原液加9份PH6.8,0.01M的PBS缓冲液,混匀。
工作液应现用现稀释。
四、实验步骤a)细胞收集i.小鼠精巢细胞收集1.注射秋水仙素,增加中期分裂相。
(试验前4-5小时,小鼠腹腔注射秋水仙素0.5ml(100μg/ml)。
2.取睾丸并清洗。
断颈处死小鼠,剖开腹部,取出肾形睾丸,放入盛有4-5 ml2%柠檬酸钠溶液的平皿中,洗去污血,去掉胞外脂肪等物。
3.挑出曲细精管并剪碎。
弃污液,另加柠檬酸钠溶液1 ml,用尖头镊尖将曲细精管拉出,并用眼科剪尽量将其剪碎。
4.游离并收集细胞。
实验二减数分裂的制片与观察PB12210261 徐导中国科学技术大学生命科学学院【摘要】本实验选取玉米雄花作为实验材料,首先将已固定好雄花的花药剥离出来,然后通过对花粉母细胞进行解离、染色、压片来观察细胞减数分裂的全过程。
【关键词】减数分裂细线期偶线期粗线期双线期终变期【Abstract】In this experiment, we chose Zea mays as the material. We got a lot of cells in meiosis. Then we disposed the cells in order to observe the whole processes of the meiosis.【Key words】Meiosis leptonema zygonema pachynema diplonema diakineses【实验部分】一、实验目的1、了解植物生殖细胞的形成过程;2、熟悉减数分裂各时期的特点,加深对减数分裂的认识;3、掌握植物花粉母细胞的压片技术和方法。
二、基本原理减数分裂(meiosis),又称成熟分裂(maturation division)是在性母细胞成熟时,配子形成过程中所发生的一种特殊方式的有丝分裂。
性母细胞(2n)连续进行两次核分裂(第一次分裂和第二次分裂),形成四个染色体数目减半的配子(n)。
经过受精,雌雄配子(n)融合为合子,又恢复了体细胞染色体数目(2n)。
确保了亲代与子代间染色体数目的恒定性,从而保证了物种相对的遗传稳定性。
在适当的时候采集植物的花蕾制备染色体标本就可在显微镜下观察到植物细胞的减数分裂。
整个减数分裂可分为下列各个时期:第一次分裂前期Ⅰ减数分裂的特点之一就是前期Ⅰ特别长,而且又较复杂。
通常根据细胞核内结构变化特征又将这一期分成五个时期,即细线期、偶线期、粗线期、双线期和终变期。
细线期(leptotene):这是减数分裂的开始时期,染色质开始浓缩为细而长的丝状,首尾不分,且细线局部可见到念珠状颗粒,即染色粒。
减数分裂试验观察注意事项减数分裂试验是生物学实验中常用的方法,用于研究细胞的有丝分裂过程。
在进行减数分裂试验时,需要注意以下几个方面:1. 细胞的选择:选择的细胞应当是已经分化的成熟细胞,例如根尖细胞、骨髓细胞等。
同时,细胞应当处于有丝分裂的活跃期,以便观察到分裂过程。
2. 细胞处理:将收集到的细胞组织放入含有适当培养基的离子溶液中,使细胞得到充分的营养和水分,保证细胞的正常生活。
3. 细胞染色:在进行减数分裂试验前,一般需要对细胞进行染色处理,以便在显微镜下更好地观察细胞的结构和行为。
常用的染色方法有吉姆萨染色法、姜黄素染色法等。
4. 显微镜观察:减数分裂试验需要使用显微镜对细胞进行观察,因此需要熟悉显微镜的使用方法,调整适当的放大倍数和焦距,以获得清晰的细胞图像。
5. 观察标记:在观察过程中,可以使用荧光标记技术对特定的细胞结构进行标记,例如使用荧光染料标记细胞核、细胞质等结构,以便更好地观察。
6. 数据记录与分析:观察到的细胞图像和其他实验数据需要及时记录下来,以备后续的数据分析和结果说明。
同时,要进行数据的统计和图表绘制,以便更好地展示实验结果。
7. 实验的重复与验证:为了增加实验结果的可信度,应该进行多次实验来验证观察到的现象,并进行统计分析。
多次实验的结果一致性较好,可以使实验结论更加可靠。
8. 安全措施:在进行实验过程中,需要注意个人和实验室的安全。
注意使用实验室的安全设施,佩戴实验室规定的防护用品,遵守实验室的操作规程,保证实验的顺利进行。
综上所述,进行减数分裂试验时需要注意细胞的选择和处理、染色处理、显微镜观察、荧光标记、数据记录与分析、实验重复与验证以及实验的安全等方面。
只有在严格遵守实验要求和注意事项的基础上,才能更好地进行减数分裂试验,并获得准确、可靠的实验结果。
制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤一、引言减数分裂是细胞分裂的一种形式,它发生在生物体生殖细胞中,用于产生具有遗传变异的配子。
为了研究减数分裂过程中的细胞结构和染色体行为,需要准备减数分裂细胞标本,并进行低渗处理。
本文将详细介绍制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤。
二、准备实验材料•细胞培养基•细胞培养器•10% 碘酒溶液•70% 乙醇•石蜡刀片三、操作步骤1. 细胞培养1.1 在细胞培养器中加入适量的细胞培养基,注意保持培养基温度为37摄氏度并含5% CO2。
1.2 将待处理的细胞加入培养基中,并保持培养器内的环境稳定。
2. 收集细胞标本2.1 选取准备标本的适当时刻,确保细胞正处于减数分裂的染色体凝聚阶段。
2.2 小心倒掉培养基,注意不要损坏细胞。
3. 固定细胞标本3.1 加入10% 碘酒溶液,覆盖整个细胞标本。
3.2 将细胞标本在10% 碘酒溶液中固定4-6小时。
4. 脱水处理4.1 从固定的标本中小心倒去碘酒溶液。
4.2 加入70% 乙醇至细胞标本完全覆盖。
4.3 静置标本30分钟,以确保细胞充分脱水。
5. 石蜡渗透5.1 石蜡刀片预热至50-60摄氏度。
5.2 用滤纸吸去乙醇,保持细胞标本表面干燥。
5.3 将细胞标本放置在石蜡刀片上。
5.4 将热的石蜡滴在细胞标本上,使其完全浸润。
5.5 快速冷却,使石蜡迅速凝固。
6. 制备玻片6.1 用石蜡刀片切取凝固的细胞标本,制备成薄片。
6.2 将薄片转移到预先烘烤的玻片上。
7. 染色7.1 根据需要选择合适的染色方法进行染色处理。
7.2 标本染色后根据染色方法进行洗涤,以去除多余染色剂。
8. 覆盖玻片8.1 取一张准备好的玻片,放置在相应位置。
8.2 使用透明胶布将玻片牢固地固定在载玻片上。
9. 结语通过以上步骤,我们可以成功制备减数分裂细胞标本,并进行了低渗处理。
这些标本可以用于进一步研究减数分裂过程中的细胞结构和染色体行为,有助于对生物体遗传变异的理解和探索。
制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤引言:减数分裂是生物体繁殖中一种重要的细胞分裂方式,用于有性生殖的过程中。
为了研究减数分裂的机制和过程,科学家需要制备高质量的减数分裂细胞标本。
在制备减数分裂细胞标本时,低渗处理是一个关键步骤,它可以帮助保持细胞形态和结构的完整性。
下面将详细介绍制备减数分裂细胞标本低渗处理的操作步骤。
一、材料准备1. 细胞培养基:根据实验需要选择适当的培养基,如DMEM或RPMI-1640等。
2. 10% PBS:将PBS溶液稀释至10%浓度。
3. 磷酸缓冲液(PB):配制1M磷酸二氢钾(KH2PO4)和1M磷酸二氢钠(Na2HPO4)溶液,并按比例混合得到pH为7.4的PB缓冲液。
4. 0.25% 吡啶蓝溶液:将0.25g吡啶蓝溶解在100ml PB缓冲液中。
5. 2% 钾氯化铷(KCl)溶液:将2g KCl溶解在100ml去离子水中。
二、细胞处理1. 细胞收集:将培养皿中的细胞用PBS洗涤一次,然后加入足够的PBS悬浮细胞。
2. 离心:将细胞悬液转移到离心管中,并以1000rpm的速度离心5分钟,倒掉上清液。
3. 固定:用10% PBS缓冲液固定细胞,将固定液滴加到细胞沉淀上,轻轻混匀,静置15分钟。
4. 再次离心:以相同的速度和时间离心,倒掉上清液。
三、低渗处理1. 加入低渗处理缓冲液:向沉淀中加入足够的0.25% 吡啶蓝溶液,使其完全浸泡细胞沉淀。
2. 低渗处理时间:根据实验需要和样本类型确定低渗处理时间。
通常情况下,10-30分钟的低渗处理时间足够保持细胞形态和结构的完整性。
3. 再次离心:以相同的速度和时间离心,倒掉上清液。
四、细胞固定1. 加入固定液:向沉淀中加入足够的2% KCl溶液,使其完全浸泡细胞沉淀。
2. 固定时间:根据实验需要和样本类型确定固定时间。
通常情况下,10-30分钟的固定时间足够保持细胞形态和结构的完整性。