达肝素作用机制

乙酰肝素酶在呼吸道合胞病毒触发微小病变型肾病发病机制中的作用

目的：微小病变型肾病（MCNS）发病机制至今仍不明确。呼吸道病毒感染是MCNS主要的触发因素之一。

乙酰肝素酶（Hpa）是目前发现的哺乳动物细胞中唯一能降解肾小球基底膜（GBM）硫酸乙酰肝素（HS）侧链的D-葡萄糖醛酸内切酶。Hpa表达增加或活性增强将使HS侧链分解变短，导致GBM电荷屏障破坏和蛋白尿的发生。

本研究从触发MCNS最常见的呼吸道病毒——呼吸道合胞病毒（RSV）着手，以Hpa为切入点，从活体内、活体外两个方面探讨Hpa在RSV触发MCNS发病机制中的作用，为进一步阐明呼吸道病毒触发MCNS发病机理提供新思路。方法：1、以6x106PFU RSV接种SD大鼠，建立RSV致大鼠肾病变模型。

接种RSV 4d、8d、14d、28d、56d和84d(RSV4、RSV8、RSV14、RSV28、RSV56和RSV84)后，在观察肾组织病理、尿蛋白定量、血生化指标、肾和肺组织RSV mRNA表达的基础上，采用PEI染色检测GBM阴离子位点，免疫组化和实时荧光定量RT-PCR检测肾组织Hpa表达，分析肾组织Hpa表达与尿蛋白和GBM阴离子位点之间的相关性。2、在接种RSV之前、同时和之后给大鼠腹腔注射肝素500IU／kg（即试验组A、试验组B、试验组C），以仅接种RSV（试验组D）和未接种RSV（正常对照组）为对照，14d后处死大鼠，观察肝素对RSV致大鼠肾病变模型肾组织Hpa表达、GBM阴离子位点、肾组织RSV mRNA表达以及尿蛋白的影响。

3、原代培养及鉴定GEC。6×1O1PFU RSV体外感染大鼠肾小球上皮细胞（GEC）、大鼠系膜细胞株（HBZY-1细胞）和大鼠近端肾小管上皮细胞株（NRK52E细胞），采用MTT法检测HBZY-1和NRK52E细胞活性，原位杂交检测GEC、HBZY-1和NRK52E细胞RSV mRNA表达，以及透射电镜观察GEC、HBZY-1和NRK52E细胞的细胞病变和病毒颗粒；从而研究RSV对大鼠GEC、系膜细胞和肾小管上皮细胞的致细胞病变效应（CPE）。

国际消化病杂志２００８年４月　第２８卷第２期Ｉｎｔ　Ｊ　Ｄｉｇ　Ｄｉｓ，Ａｐｒｉｌ　２５，２００８，ｇｏ１．２８，Ｎｏ．２　

修饰性肝素抗消化道肿瘤作用机制的研究进展　

陈明祥洪静陈金联　・１　５９・　

・综述・　

摘要：普通肝素用化学方法处理后，可得到修饰性肝素。其抗肿瘤作用机制包括抑制类肝素酶活性及　

细胞黏附分子Ｐ、Ｌ选择素、抗凝、抗血管生成、对免疫系统的调控等。因此，该类药物在抗肿瘤方面的应用　

将有非常广泛的前景。此文对修饰性肝素抗肿瘤作用机制方面的研究作一综述。　

关键词：修饰性肝素；消化道肿瘤；抗肿瘤作用机制　

Ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｈｅｐａｒｉｎ　ｉｎ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｔｕｍｏｒｓ　ＣＨＥＮ　Ｍｉｎｇ＝ｘｉａｎｇ，ＨＯＮＧ　Ｊｉｎｇ，ＣＨＥＮ　Ｊｉｎ—ｌｉａｎ．Ｄｅ—　

ｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｓｉｘｔｈ　Ｐｅｏｐｌｅ＇ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｊｉａｏｔｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓ＾ｎ”ｇ＾ｎ　（２００２３３），Ｃｈｉｎａ　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ａｆｔｅｒ　ｈｅｐａｒｉｎ　ｉｓ　ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ　ｔｒｅａｔｅｄ，ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｈｅｐａｒｉｎ　ｉｓ　ａｃｑｕｉｒｅｄ．Ｔｈｅ　ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　ａｇｅｎｔｓ　ｉｎｃｌｕｄｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐａｒａｎａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｐ，Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　ａｄｈｅｓｉｏｎ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ，ａｎｔｉａｎ—　

ｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｓｙｓｔｅｍ．Ｔｈｕｓ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｈｅｐａｒｉｎ　ｈａｓ　ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ　ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ．　

Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎａ　Ｐｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　Ｄｒｕｇ　Ｖｏ１．１２　Ｎｏ．１０　达肝素钠对糖尿病大鼠肾脏的作用及机制研究　｛　・实验研究・ｌ　１１３　李国舜　，李成玲　，张瑞斌３高庆贞　，任万军　（１山东省临胸县人民医院肾内科，山东潍坊２６２６９９；２山东省临朐县人民医院检验科，山东潍坊２６２６９９；　３山东大学附属济南市中心医院肾脏病／血液净化中心，山东济南２５００１３）　【摘要】目的观察达肝素钠对糖尿病大鼠。肾脏的保护作用及其机制。方法Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，随机选１Ｏ只为对照组（Ａ组），随机选３０只大鼠　采用腹腔注射链脲佐菌素（ＳＴＺ）构建大鼠糖尿病模型并随机分为糖尿病组（Ｂ组）、低剂量（１００　Ｕ／ｋｇ）达肝素钠组（ｃ组）和高剂量（５００　Ｕ／ｋｇ）达肝　素钠组（Ｄ组），每组１Ｏ只。分别于第８周及第ｌ２周检测各组大鼠的空腹血糖（ＦＰＧ）、２４　ｈ尿白蛋白、血肌酐（Ｓｅｒ）及尿肌酐，并计算内生肌酐清除　率（Ｃｃｒ）；制备肾匀浆，并检测血清及肾匀浆丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）。结果①Ｂ、Ｃ、Ｄ组大鼠ＦＰＧ均高于Ａ组　＜０．０５）。Ｂ、Ｃ、　Ｄ组的２４　ｈ尿白蛋白量及Ｓｅｒ均高于Ａ组，Ｃｃｒ均低于Ａ组　均＜０．０５）；②各组大鼠血清及肾匀浆ＭＤＡ、ＳＯＤ的差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。　Ｂ组ＭＤＡ含量高于Ａ组　＜０．０５），ＳＯＤ低于Ａ组　＜０．０５）。给予达肝素钠可显著降低糖尿病（ＤＭ）大鼠ＭＤＡ，升高ＳＯＤ的活性，且Ｄ组更　显著（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论①达肝素钠对糖尿病大鼠具有肾脏保护作用，其机制可能与降低糖尿病大鼠ＭＤＡ，升高ＳＯＤ表达，降低尿蛋白等因素有关。　②达肝素钠对糖尿病大鼠的肾脏保护作用可能与剂量有关。　【关键词】达肝素钠；糖尿病。肾病；链脲佐菌素糖尿病模型；丙二醛；超氧化物歧化酶　糖尿病肾病（ｄｉａｂｅｔｉｃ　ｋｉｄｎｅｙ　ｄｉｓｅａｓｅ，ＤＫＤ）最终可导致尿毒　症，是糖尿病的严重并发症之一。氧化应激增强及抗氧化系统失　衡在糖尿病肾病进展中受到越来越多的关注，近年来达肝素钠的　抗氧化作用受到重视Ⅲ。达肝素钠是治疗肾脏病的常用药物，但　达肝素钠对糖尿病肾病保护作用机制，目前研究较少。为此，本　研究建立大鼠糖尿病模型，观察达肝素钠对糖尿病肾病的影响，　探讨达肝素钠在抗糖尿病肾病发生发展过程中的作用机制。　１材料与方法　１．１材料与试剂　１．１．１实验动物　雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠５０只（健康ＳＰＦ级），２月龄左右，体质量　２００～２２０　ｇ，购自山东大学实验动物中心。　１．１．２主要试剂　达肝素钠购自华润赛科药业有限公司，链脲佐菌素（ＳＴＺ）　购自Ｓｉｇｍａ公司，丙二醛（ＭＤＡ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）试剂　盒购自南京建成生物工程研究所。　１．２方法　１．２．１实验模型的构建及分组　大鼠适应性喂养１周，禁食１２　ｈ后，将ＳＴＺ溶于０．１　ｍｍｏｌ／Ｌ、　ｐＨ４．５的枸橼酸缓冲液，单次腹腔注射ＳＴＺ（６Ｏｍｇ／ｋｇ），每日检测　空腹血糖、尿糖，连续３　ｄ血糖＞１６．７　ｍｍｏｌ／Ｌ，尿糖阳性为造模　成功。随机选取３Ｏ只造模成功的糖尿病大鼠随机分为糖尿病　组（Ｂ组）、低剂量（１００　Ｕ／ｋｇ）达肝素钠组（Ｃ组）和高剂量（５００　Ｕ／ｋｇ）达肝素钠组（Ｄ组），每组１０只，同时设同批次正常大鼠　１０只为空白对照组（Ａ组）。Ｃ组大鼠每日皮下注射达肝素钠　１００　Ｕ／ｋｇ，Ｄ组大鼠每日皮下注射达肝素钠５００　Ｕ／ｋｇ，Ａ组及Ｂ　组每日皮下注射等量生理盐水，连续１２周。所有大鼠在１２周　实验期间均标准饮食，不使用胰岛素。　１．２．２标本收集　各组大鼠均分为两批于第８周、１２周处理，取各组大鼠尿　液、血液并保存，制备肾组织匀浆并保存。标本的获取及保存方　法均采用本实验组前期实验所用的方法。　１．２．３检测指标　葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖（ＦＰＧ）。血、尿肌酐由　ＢｅｃｋｍａｎＣＸ一５全自动生化分析仪进行检测，并依据公式计算　Ｃｃｒ（ｍＬ／ｍｉｎ）＝尿肌酐／血肌酐／２４　ｈ（１　４４０　ｍｉｎ）×２４　ｈ尿　量，以体质量校正。考马斯亮兰法检测２４　ｈ尿白蛋白量及肾匀　浆组织蛋白量。按照试剂盒说明书测定血清及肾匀浆ＭＤＡ、　ＳＯＤ含量，。肾匀浆中ＭＤＡ、ＳＯＤ含量用肾组织蛋白浓度校正。　１．３统计学处理　应用ＳＰＳＳ１３．０统计软件，正态分布计量资料以表示，组间　差异性比较采用最小显著差（ＬＳＤ）　检验及单因素方差分析，　以Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。　２结果　２．１各实验组ＦＰＧ、２４　ｈ尿白蛋白量、Ｓｃｒ及Ｃｃｒ的比较　在第８周及第１２周，糖尿病组（Ｂ组）、低剂量达肝素钠组　（Ｃ组）及高剂量达肝素钠组（Ｄ组）大鼠ＦＰＧ均高于空白对照　组（Ｐ＜０．０５），但Ｂ、Ｃ、Ｄ组的ＦＢＧ差异无统计学意义（Ｐ＞　０．０５）。Ｂ、Ｃ、Ｄ组的２４　ｈ尿白蛋白量及Ｓｃｒ均高于Ａ组，Ｃｃｒ均　低于Ａ组（Ｐ均＜０．０５）。见表１。　表１：各组大鼠ＦＢＧ、２４　ｈ尿白蛋白量、Ｓｃｒ及Ｃｃｒ的变化（又±Ｓ）　

氯吡格雷联合低分子肝素在治疗进展性脑梗塞中的应用

摘要】 目的：探讨氯吡格雷联合低分子肝素在治疗进展性脑梗塞过程中的临床效果。方法：将62例进展性脑梗塞患者随机分为观察组和对照组各31例。对照组在一般对症处理同时予氯吡格雷（75mg/d，口服）治疗，观察组在对照组的基础上加用低分子肝素治疗（5000U/d，皮下注射）。结果：观察组临床治疗总有效率明显高于对照组，差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：氯吡格雷联合低分子肝素治疗进展性脑梗塞，可以阻止病情的进一步恶化、改善预后，值得在临床上推广。

【关键词】氯吡格雷；低分子肝素；进展性脑梗塞；

我院神经内科自2013年1月～2015年1月，对62例急性脑梗死患者进行了一项氯吡格雷联合低分子肝素治疗的对比研究，探讨联合用药的疗效，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

62例随机分为观察组和对照组各31例。观察组中，男19例，女12例，平均年龄(63.9±5.8)岁；对照组中，男性18例，女性13例，平均年龄(64.1±6.5)岁。所有患者均在发病后72小时内入住神经科，两组患者的年龄、性别比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 方法

对照组患者在入院后给予一般对症治疗同时予口服氯吡格雷（75mg/片，赛诺菲公司生产，生产批号：4A815）治疗，治疗的剂量为75mg/d。观察组在对照组治疗方案的基础上加用低分子肝素（达肝素钠，5000U/支，辉瑞公司生产，生产批号：10000342-05）5000U皮下注射/d。

1.3 观察指标

详细记录对照组和观察组两组患者的临床治疗显效率、有效率及无效率，以便我们进行统计学分析。

1.4 统计学分析

使用SPSS 17.0统计软件进行统计分析：数据资料以率（％）表示，采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。