生物样品储存方法概述-冷冻保存

生物实验中的样本处理和保存技巧在生物学研究中，样本处理和保存是非常重要的环节。

正确的样本处理和保存技巧可以确保实验结果的准确性和可靠性。

本文将介绍一些常用的样本处理和保存技巧，帮助研究人员在实验中取得更好的结果。

一、样本处理技巧1. 采样时的注意事项在采集样本时，要注意避免污染和损伤。

使用无菌手套和工具，以避免细菌和其他污染物的引入。

此外，样本应该尽快采集并尽量避免长时间的暴露在环境中，以减少样本的降解。

2. 样本预处理在进行实验之前，需要对样本进行预处理。

对于液体样本，可以通过离心来去除固体颗粒和细胞。

对于固体样本，可以使用切割或研磨的方法将其打碎，以便后续的实验操作。

3. 样本保存液的选择为了保持样本的完整性和稳定性，选择适当的保存液是至关重要的。

常用的保存液包括缓冲液、甘油溶液和冷冻保护剂等。

选择保存液时，要根据不同的实验目的和样本类型进行选择。

4. 样本的冷冻和解冻对于需要长期保存的样本，冷冻是常用的方法。

在冷冻之前，应将样本放入冷冻管中，并将其迅速放入液氮或低温冰箱中。

解冻时，应将样本放置在冰上缓慢解冻，以避免样本的损伤。

二、样本保存技巧1. 长期保存的样本对于需要长期保存的样本，如细胞系、DNA和蛋白质等，应选择适当的保存温度和保存容器。

一般来说，低温冰箱或液氮罐是常用的保存设备。

同时，选择耐高温和耐腐蚀的保存容器，如冻存管或冻存盒。

2. 样本标签和记录为了避免样本的混淆和丢失，样本的标签和记录非常重要。

在保存样本时，应在保存容器上标注清楚样本的编号、名称和保存日期等信息。

同时，建立样本记录表格，记录每个样本的详细信息，以便后续的查询和使用。

3. 定期检查和维护保存样本的设备和容器需要定期检查和维护，以确保其正常运行和保存效果。

定期检查温度计和液氮水平计等设备的准确性，并及时更换老化的保存容器，以避免样本的损失。

4. 分享和交流在保存样本的同时，研究人员也应该与同行进行分享和交流。

建立样本库和数据库，将样本信息和实验结果共享给其他研究人员，以促进科学研究的进展和合作。

"TNGS"样本通常指的是用于肿瘤基因突变的下一代测序（Next-Generation Sequencing, NGS）的样本。

这些样本通常是肿瘤组织或细胞，用于检测基因突变、拷贝数变异、基因表达分析等。

正确保存TNGS样本对于保证测序质量和后续分析至关重要。

以下是一些常见的TNGS样本保存方法：
1. 液氮冷冻保存：
- 将样本迅速放入液氮中冷冻，并保持在-196°C的温度下。

这种方法适用于长期保存，因为液氮可以有效地防止DNA降解。

2. 冷冻保存：
- 将样本放入含有适量冷冻保护剂的容器中，然后在-80°C或-20°C的冰箱中冷冻保存。

常用的冷冻保护剂包括10%的二甲基亚砜（DMSO）和90%的胎牛血清。

3. 石蜡包埋：
- 将样本固定在适当的缓冲液中，然后进行石蜡包埋。

这种方法适用于保存组织切片，但可能不适用于DNA提取。

4. 酒精固定：
- 将样本放入70%的乙醇中固定，这种方法适用于保存组织样本，但不适用于DNA提取。

5. 室温保存：
- 对于某些对温度敏感的样本，可以在适当的缓冲液中在4°C的条件下保存，但应尽快处理以避免DNA降解。

在保存TNGS样本时，应考虑以下因素：
- 样本类型：组织、细胞或DNA提取物有不同的保存要求。

- 保存时间：长期保存可能需要更低的温度和不同的保存介质。

- DNA提取：如果样本后续需要DNA提取，应选择不会影响DNA质量的保存方法。

在处理和保存TNGS样本时，应遵循实验室的最佳实践和标准操作程序，以确保样本的质量和安全。

第1篇一、实验目的1. 了解生物冷冻技术的原理和方法。

2. 掌握生物样本冷冻保存的操作步骤。

3. 评估冷冻保存对生物样本的影响。

二、实验原理生物冷冻技术是一种利用低温环境减缓生物样本内细胞和分子活动的技术，从而实现生物样本长时间保存的技术。

主要方法包括液氮冷冻、干冰冷冻、低温冰箱保存等。

低温环境可以降低生物分子的代谢速率，减缓细胞衰老和死亡，保持生物样本的活力、功能和完整性。

三、实验材料1. 生物样本：细菌、细胞、组织等。

2. 冷冻设备：液氮罐、干冰、低温冰箱等。

3. 试剂：固定液、解冻液、无菌水等。

4. 实验器具：冷冻管、离心管、移液器、显微镜等。

四、实验步骤1. 准备工作（1）将生物样本置于无菌环境中，避免污染。

（2）将所需试剂和器具准备齐全。

2. 生物样本冷冻保存（1）液氮冷冻：将生物样本置于液氮中，使其快速冷冻至-196℃。

（2）干冰冷冻：将生物样本置于干冰中，使其缓慢冷冻至-78℃。

（3）低温冰箱保存：将生物样本置于低温冰箱中，使其缓慢冷冻至-20℃。

3. 生物样本解冻（1）液氮冷冻样本：将样本从液氮中取出，立即置于37℃水浴中解冻。

（2）干冰冷冻样本：将样本从干冰中取出，置于室温下自然解冻。

（3）低温冰箱保存样本：将样本从低温冰箱中取出，置于室温下自然解冻。

4. 评估冷冻保存对生物样本的影响（1）观察样本外观，记录细胞形态、活力等变化。

（2）进行显微镜观察，记录细胞核、细胞质等结构变化。

（3）进行生化实验，检测细胞内酶活性、蛋白质表达等指标。

五、实验结果与分析1. 外观观察：冷冻保存后的生物样本，细胞形态基本完整，活力较高。

2. 显微镜观察：冷冻保存后的生物样本，细胞核、细胞质等结构基本完好，未出现明显损伤。

3. 生化实验：冷冻保存后的生物样本，酶活性、蛋白质表达等指标基本正常。

六、实验结论1. 生物冷冻技术可以有效保存生物样本的活力、功能和完整性。

2. 液氮冷冻、干冰冷冻、低温冰箱保存等不同冷冻方法对生物样本的影响较小，可根据实际情况选择合适的冷冻保存方法。

生物样本冷冻储存技术1 储存温度生物样本的长期储存通常使用尽可能低的温度来降低样本内的生化反应提高样本内各种成分的稳定性。

生物大分子、细胞、组织和器官的常用储存温度有-800C(超低温冰箱), -1400C(液氮气相或深冷冰箱)以及-1960C(液氮液相)，温度越低样本的稳定保存时间越长。

0～-600C是水的结晶温度，容易对细胞和组织的微观结构造成伤害，一般不使用这一温度来保存组织和细胞。

部分经过提纯的生物大分子可以在0～-600C稳定保存一定时间，但在组织样本内生物大分子受到细胞组织内多种因素的影响，稳定性有可能明显降低，所以通常样本库不使用0～-600C作为储存温度。

-800C样本储存-800C低于危害性较大的水的结晶温度范围，也是常用设备超低温冰箱能达到的温度，基于操作简便性、储存量和成本等因素来考量，这一温度也是目前保存样本中生物大分子活性的常用温度。

但对不同的生物大分子活性这一温度下能保持多久仍无定论。

组织中DNA的稳定性可以在-800C下可以保持数年或更长时间。

但对RNA来说，则容易被广泛分布于细胞和各种组织里的RNA酶逐渐降解，在不同的细胞和组织中，RNA稳定储存的时间长短也有较大的区别，但一般不超过5年，在一些敏感实验内，RNA在-800C下不到一年就发生了测得出的降解，所以为长期保存RNA活性，建议使用更低的温度，或者利用小部分样本提取RNA与剩余样本同步储存。

其他样本内的蛋白质和脂类等生物大分子在样本内在-800C下也能保存，但时间长短不一，稳定性逐渐衰减。

如果为保护样本里已知的特定生物大分子，也可加入该分子的稳定剂。

如果样本里要保存的生物大分子未定，建议使用更低的温度储存。

另外目前常见的大型自动化样本存取设备只能和-800C超低温设备配套使用，尚不能够和液氮设备配套使用。

英国的UK Biobank则是把一部分样本的拷贝(～950万)储存在-800C做工作样本，使用自动化设备存;另一部分拷贝(～550万)在另外一个地方储存在液氮气相中做安全备份，样本手动存取。

临床试验生物样本备份方法1. 样本备份是确保临床试验数据的可靠性和可重复性的重要步骤之一。

在临床试验中，常常需要对生物样本进行备份以保留原始样本，以便后续分析或验证。

2. 将生物样本分为不同的小份，每份包装在标有独立编号的容器中。

这样可以确保每个样本都有相应的备份，并可以轻松地找到和识别需要使用的样本。

3. 生物样本备份的最常用方法之一是冷冻保存。

将样本存放在低温条件下，例如-20°C或-80°C的冰箱或冻存库中，可以有效地保护样本的完整性和稳定性。

4. 在进行样本冷冻保存之前，应先选择适当的冻存液。

常用的冻存液包括低温保存缓冲液、甘油溶液等，这些冻存液可以保护样本的结构和功能。

5. 在样本冷冻保存时，可以选择使用冷冻盒或冻存管来存放样本。

冷冻盒能够提供额外的隔热保护，而冻存管则可以方便地进行分装和标记。

6. 临床试验样本备份中的重要一环是及时记录所有备份样本的信息。

包括样本类型、编号、存放位置、冷冻时间等，这些信息对于跟踪和管理样本非常重要。

7. 在实施样本备份过程中，应确保所有使用的器械和容器都是无菌的，以避免样本受到外部污染。

8. 对于液体样本，应确保在备份过程中将其徹底的混合均匀以保证样本的代表性。

9. 对于非液体样本，如组织样本或细胞样本，备份前应考虑相应的处理方法。

可以使用冻切技术将组织样本切片，并将每个切片存储在相应的容器中。

10. 样本备份的频率也需要根据具体情况进行合理的安排。

一般来说，备份频率应足够，以便在需要时能够提供足够的备份样本。

11. 样本备份过程中，应确保样本标识清晰可读，并采取措施避免标识的磨损或褪色。

12. 对于大规模临床试验，可以考虑使用自动化系统来进行样本备份。

这些系统可以提高效率、减少人为错误，并能够及时跟踪和管理备份样本的信息。

13. 样本备份过程中应注意防止样本中的氧气和水分接触以避免样本的氧化和降解。

14. 在生物样本备份中，应注意遵循伦理和法律规定，并确保样本的隐私和安全。

关于样品保存的方法四个字引言在科学研究和实验中，样品的保存是非常重要的一个环节。

样品的保存方法决定了样品的质量和稳定性，直接影响到后续实验结果的准确性和可靠性。

因此，科研工作者需要掌握一些有效的样品保存方法，以确保样品的长期存储和保持其原有特性。

本文将介绍四种关于样品保存的方法。

冷冻保存冷冻保存是一种常见且广泛应用的样品保存方法。

通过将样品置于低温环境中，可以减缓样品中生物化学反应的速率，从而延缓样品的衰老和变化。

一般来说，冷冻保存最常用的温度范围是-20C至-80C。

温度越低，样品保存的时间就越长。

冷冻保存时，将样品放入密封的冷冻管中，并确保完全冷冻后立即将其转移到冷冻设备中。

冷冻保存的样品应标明保存日期和样品的相关信息，以便日后使用时能够追踪。

干燥保存干燥保存是另一种常用的样品保存方法。

通过去除样品中的水分，可以防止微生物的生长和化学反应的发生。

干燥保存常用于有机物样品、植物标本等。

最常见的干燥方法是真空干燥和冷冻干燥。

真空干燥通常通过将样品置于低压环境下，利用气体扩散和挥发来去除水分。

冷冻干燥则是将样品冷冻后，利用低温下水分的升华来达到干燥的目的。

干燥保存时，样品应置于密封的容器中，并可以放置干燥剂来吸收残余水分。

防护保存防护保存是指将样品保存在一定的保护环境中，防止外来因素对样品造成损害。

这种方法主要适用于敏感性样品和易受污染的样品。

防护保存的方法主要有密封保存、惰性气体保护和防护剂保护等。

密封保存是将样品置于密封的容器中，以防空气中的氧气和湿气对样品的氧化和分解。

惰性气体保护是将样品置于惰性气体（如氮气或氩气）中，以防样品与空气中的氧气发生反应。

防护剂保护是将样品涂覆一层防护剂，以保持样品的原有特性。

高温保存高温保存主要适用于一些稳定性较高的样品，如无机物样品和金属样品等。

将样品置于高温环境中，可以加快样品中的化学反应速率，从而加速样品衰老和失去特性。

高温保存时，需要选择合适的温度和时间，并严格控制样品的暴露时间，以避免样品损坏或特性变化。

⽣物样品采集、冻存应注意的问题西域商城实验室⼯程师今天和⼤家探讨⼀下⽣物样品采集冻存应注意的问题。

⽣命科学研究中组学技术的发展以及临床医疗领域新⼀代检测技术的进步，促进了对⽣物样品的需求，也促进了⽣物样品的采集、保存等环节的正规化、规模化。

⽣物样品的保存，不外常温和低温两种⽅式。

常温保存能耗少、环保，有时也⾮常⽅便，是⼀种有潜⼒的保存⽅式。

⼀些机构正在积极探索不同的常温保存技术。

上海伯豪⽣物也推出了RNAsafety?这种可⽤于组织的常温采集和保存的试剂。

⽣物样品的低温保存，则是⽬前较常⽤的⽣物样品保存⽅式。

⽣物和医学上的低温，是⼀个⽐较宽的温度范围。

从⼤多数酶的最适反应温度37℃以下到⼏个K（开尔⽂），都可以称为低温（绝对零度为-273.15℃即0K）。

本⽂从样品保存的⾓度，将低于常温（室温，25℃左右）的温度理解为低温。

低温能抑制⽣物体的⽣化活动，这是⾃然界固有的物理化学规律。

根据阿仑尼乌斯（Arrhenius）⽅程，温度越低，化学反应速度越慢，样品的保存时间越长。

因此，为了使⽣物样品在⼀定的时间内保持稳定，⼈们按不同需求将样品保存在4℃，-20℃，-80℃或温度更低的冰箱中，或者保存在液氮中。

本⽂谈谈⽣物样品低温保存尤其是冻存时需要注意的⼀些问题。

1. 长期保存的组织样品要尽快冻存样品贮存的温度对有效保存时间的影响很⼤。

选择合适的贮存⽅式和贮存温度很重要。

但为了保证实验结果的客观性，研究者也要充分注意样品在贮存或固定前的处置时间和⽅式。

样品从开始收获到固定或低温保存前这段时间，仍有⼀些⽣化过程在较快地进⾏。

这些⽣化反应的速度直到样品被固定或者低温保存时才显著降低。

这⼀段时间越短越好。

对于⼿术切除的组织，热缺⾎（warm ischemia）时间越短越好；对于实验动物，处死取样时挣扎时间越短越好。

这有助于防⽌因环境改变⽽导致基因表达⽔平或蛋⽩磷酸化状态产⽣较⼤变化。

⼀些较复杂的⼿术可能进⾏⼏个⼩时甚⾄整天，那么最先被切割但未被切离的那部分组织可能经历较长的热缺⾎时间，从⽽导致较⼤的⽣化变化。

生物实验样品保存方法引言在生物实验中，样品的保存是非常重要的环节。

正确的保存方法可以保证样品的稳定性和可靠性，并且能够保留样本中所需的各种生物活性分子。

本文将介绍一些常见生物实验样品的保存方法，以便研究人员能够正确地保存和使用这些样品。

DNA和RNA的保存方法DNA和RNA是生物实验中常用的核酸样品，合适的保存方法可以避免其降解和失活。

通常，DNA和RNA可通过以下方法保存：1. 冷冻保存：将DNA和RNA样本置于-80的低温环境中，避免长时间暴露在室温下。

在这种条件下，DNA和RNA可以保存多年而不会发生明显的降解。

保存前，可以将样本加入酶抑制剂（如RNase Inhibitor）或其他保护剂，以提高保存效果。

2. 真空干燥保存：将DNA和RNA样本在真空条件下干燥，可以有效地防止恶劣环境对核酸的影响。

这种保存方法对于长期保存有限制，但适用于实验室中对必要样本的普通保存。

3. 酒精沉淀保存：将DNA和RNA样本通过酒精沉淀的方式提纯后，可以更加稳定地保存。

这种方法适用于保存较小量的核酸样本，可以避免冷冻保存或真空干燥的冷冻仓库的使用。

蛋白质的保存方法蛋白质是生物实验中重要的功能分子，实验室中常常需要保存和提取蛋白质样品。

以下是一些常见的蛋白质保存方法：1. 冷冻保存：将蛋白质样品置于-20或更低的低温环境中，可以显著减缓蛋白质的降解速度。

保存前，应当将样品冷却至室温，并避免反复的冷冻和解冻过程。

在保存过程中，也可以考虑使用抗蛋白酶剂等保护剂，以减少蛋白质的降解。

2. 冷冻干燥保存：将蛋白质样品通过冷冻干燥的方式进行保存，可以有效地降低蛋白质的分解和细菌的污染风险。

冷冻干燥后的蛋白质样品可以在室温下长时间保存，并且方便携带和使用。

3. 溶液保存：某些蛋白质样品需要在特定溶液中保存，以维持其稳定性和功能性。

例如，一些酶类蛋白质需要在专门配制的缓冲液中保存，以保持其催化活性。

在保存过程中，应注意避免过高或过低的pH值，以及较高的温度。

生物样品的采集、储存和预处理的SOP1. 生物样品的采集：服药前取空白血样，服药后取样点应包括吸收相，分布相，消除相；药浓度峰值前至少有4个点，峰后取6个点或6个以上点，峰时间附近应有足够的取样点。

总取样点不少于11个，取样应持续到3 ～ 5个半衰的1/10 ～1/20。

具体可依据文献报道及预试验结果确定具体采血时期，或Cmax间点。

于服药前（0 h）和各时间点，取前臂静脉血5mL，处理后，离心10 min ( 3000r.p.m)，分离血浆或血清样品置试管中。

2. 生物样品的储存:血浆、血清样品，尽快分离（24h内），冷冻保存；短期内分析，可置4℃冰箱内冷藏。

长期分析，于－ 20℃冰箱内冷冻保存。

3. 生物样品的预处理:依据药物的理化性质，其酸碱性（pKa）、分子的亲脂性、挥发性、稳定性及可能的生物转化途径，制定相应的预处理方法。

a. 沉淀蛋白法生成不溶性沉淀:酸性试剂（三氯醋酸、高氯酸、钨酸、焦磷酸）重金属盐类（锌盐、铜盐、银盐、汞盐）盐析、脱水:硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等中性盐。

甲醇、乙腈、丙酮等可与水混溶的有机试剂。

各种沉淀试剂使用情况表b. 液-液萃取法水相pH：碱性药物最佳pH应高于其p Ka 2 ～ 3个单位酸性药物最佳pH应低于其p Ka 2 ～ 3个单位常用的有机溶剂：正己烷、异辛烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、乙醚、苯、1，2-二氯乙烷、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯（极性由依次小至大）。

有机溶剂与水相容积比一般为 1：1或2：1。

选择提取溶剂的原则：对被测物有较大的亲和力；与水不互溶，极性较小；沸点适宜；不影响紫外检测；价廉、无毒、不易燃烧；化学性质稳定。

生物长期保存的方法# 生物长期保存的方法## 引言生物的长期保存是一项重要的科学技术，对于保护物种多样性、研究基因组和遗传特性、应对生物灾害等方面都具有重要意义。

随着科学技术的不断发展，人们探索出了多种生物长期保存的方法，本文将对其中的几种方法进行介绍和分析。

## 核心内容### 1. 冷冻冷藏冷冻冷藏是最常见的生物保存方法之一，它通过将生物样本置于低温环境中，减缓细胞活动并保持DNA的稳定性。

在冷冻冷藏的过程中，常用的保存介质包括液氮和低温冷冻器。

液氮是一种极低温的液体，常用于保存动物胚胎、种子和细胞系等。

将生物样本浸泡在液氮中，可以有效地防止生物物质的降解和损伤，保持样本的完整性和生物学活性。

然而，液氮的使用需要特殊的设备和操作技术，存在一定的风险和成本。

低温冷冻器是一种常用的冷冻冷藏设备，可以在-20或更低的温度下保存生物样本。

这主要适用于保存溶液、细胞培养物和微生物等。

与液氮相比，低温冷冻器具有更便捷、更安全的特点，但同时也存在保存时间有限和设备成本较高的问题。

### 2. 冷冻干燥冷冻干燥（Lyophilization）是一种将生物样本在低温下冷冻并脱水的方法。

通过冷冻干燥，水分从生物样本中去除，从而防止细胞损伤和化学反应的发生。

冷冻干燥可以有效地保存细胞、细菌、真菌、酵母和病毒等微生物，同时还可以保存动植物种子、血清和药物等。

冷冻干燥的原理是利用低温下水分的直接转化为气体的特性，即直接从冰态蒸发而不经过液态。

在冷冻干燥的过程中，生物样本首先被快速冷冻，然后在真空条件下进行脱水，最后通过加热将水分从固态蒸发为气体。

这样可以在保持生物样本的完整性和稳定性的同时，去除水分并延长样品的保存时间。

### 3. 冷冻存储冷冻存储是一种将生物样本置于低温环境中进行保存的方法，与冷冻冷藏不同，冷冻存储更加注重长期保存的稳定性和安全性。

常见的冷冻存储方法包括冷冻存储罐和冷冻存储库。

冷冻存储罐是一种专门设计用于存储生物样本的设备，通常采用气冷或液冷的方式来冷却，确保存储物品在恒定的低温环境中。