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常用的消毒灭菌操作方法附录4一、干热灭菌的操作方法1.装入待灭菌的物品将待灭菌的物品，如塞上棉塞的试管、锥形瓶、培养皿、吸管等玻璃仪器，用牛皮纸或干净的报纸包裹严密后，放人干热灭菌箱。
注意，物品不要摆得太挤，以免妨碍热空气流通。
同时，灭菌物品也不要与干热灭菌箱内壁的铁板接触，以防包装纸烤焦起火。
2.灭菌关好干热灭菌箱的箱门，旋动恒温调节器，设定温度为160~170℃。
当温度升到150℃左右时，保持此温度3~4h。
由于干热灭菌温度较高，操作时要注意防止烫伤。
3.降温关掉电源，自然降温。
4.开箱取物等温度降到70℃以下后，打开箱门，取出灭菌物品。
注意温度未降到70℃以前，切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。
二、高压灭菌的操作方法1.首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架平齐。
2.放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。
注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
锥形瓶与试管口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞。
3.加盖，并将盖上的排气软管插人内层灭菌桶的排气槽内。
拧紧固定盖子的螺栓，注意要同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，不漏气。
4.加热灭菌锅，打开排气阀，使水沸腾，排除锅内的冷空气。
等冷空气完全排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐步上升。
当锅内压力升到所需压力时，控制热源，按照灭菌所要求的时间，维持压力。
5.到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。
如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内的液体会冲出容器，造成污染。
三、紫外线灭菌的操作方法紫外线只适用于表面灭菌和空气灭菌。
以面积为10 m2的普通小型接种室为例，在工作台上方距地面2m处悬挂1~2只30 W紫外灯，每次开灯照射30 min，就能达到室内空气灭菌的目的。
照射前，适量喷洒石炭酸等化学抑菌剂，可以加强灭菌效果。
微生物实验常用的灭菌、消毒方法及效果监测因为微生物广泛存在于环境中，从预防交错污染的角度动身，微生物试验必需遵循无菌操作的原则，采纳多种物理、化学或是生物的办法，确保全部的物品和工作环境符合用法要求。
常用以下术语表示杀灭微生物的程度。
消毒：杀灭或(和)清除致病微生物，使其数量削减到不再能引起人发病。
用于消毒的化学药品称为消毒剂。
灭菌：将全部微生物所有杀灭或(和)清除掉，包括细菌芽孢和非致病微生物。
灭菌比消毒更彻底。
无菌：不含活菌，是灭菌的结果。
防止细菌进入人体或其他物品的操作技术称为无菌操作。
(一)常用的灭菌、消毒办法常用的灭菌或消毒办法分为4类：热力灭菌法、化学消毒法、辐射法和过滤除菌法。
普通按照物品的种类和污染后的危害程度来挑选消毒、灭菌办法。
消毒首选物理办法，不能用物理办法消毒的方可选化学办法。
1.热力灭菌法高温对微生物具有显然的杀伤作用，这是因为热能可变性蛋白质、核酸及破坏细胞膜等。
热力灭菌法按照有无水蒸气的参加分为干热灭菌法和湿热灭菌法两种。
热力灭菌法的种类及用法范围详见表4-4。
表4-4 热力灭菌法的种类及用法范围 2.化学消毒法无数化学药物能够影响微生物的物理结构和生理活动，从而达到消毒的作用。
化学消毒剂普通都对人体组织有害，因此，只能外用或用于环境的消毒，常用化学消毒剂的种类、作用机理及用法范围见表4-5。
表4-5 化学消毒剂及用法范围 3.辐射法辐射法中紫外线杀菌最为常用。
紫外线的穿透能力很弱，简单被固形物汲取，不能透过一般玻璃，因此，它只适用于空气、水及物体表面的杀菌。
无菌室、超净工作台、生物平安柜内都装有紫外灯，用来举行空气消毒，消毒时光普通为30min。
应用紫外线杀菌时，必需防止紫外线对人体的挺直照耀，以免损害眼睛和灼伤皮肤。
4.过滤除菌法指将含菌的液体或气体通过一个称作细菌滤器的装置，使细菌受到机械的阻力而留在滤器或滤板上，从而达到除菌的目的。
此法常用于不宜加热灭菌的液体物质，如培养基添加剂、抗生素、血清等。
一、湿热灭菌法本法系指将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。
该法灭菌能力强，为热力灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌方法。
药品、容器、培养基、无菌衣、胶塞以及其他遇高温和潮湿不发生变化或损坏的物品，均可采用本法灭菌。
流通蒸汽不能完全杀灭细菌孢子，一般可作为不耐热无菌产品的辅助灭菌手段。
湿热灭菌条件通常采用121℃*15min、121℃*30min、或116℃*40min的程序，也可采用其他温度和时间参数，但必须保证物品灭菌后的SAL《10-6。
对热稳定的物品，可采用过度杀灭法，其SAL应《10-12。
热稳定性较差产品的标准灭菌时间F0［指灭菌温度为121℃，生物指示菌的耐热参数D值为1分，灭菌温度系数Z值为10.0℃时的标准灭菌时间（121℃下计算的微生物等效灭活率）］一般不低于8min。
如产品的热稳定性很差时，可允许湿热灭菌的F0低于8，此情况下，应在生产全过程中，对产品中污染的微生物严加监控，并采取各种措施降低微生物污染水平，确保被灭菌产品达到无菌保证要求。
采用湿热灭菌时，被灭菌物品有适当的装载方式，不能排列过密，以保证灭菌的有效性和均一性。
湿热灭菌法应确认灭菌柜在不同装载时可能存在的冷点。
当用生物指示剂进一步确认灭菌效果时，应将其置于冷点处。
本法生物指示剂为嗜热脂肪芽孢杆菌孢子（spores of Bacillus stearothermophilus）。
二、干热灭菌法本法系指将物品置于干热灭菌柜、隧道灭菌器等设备中，利用干热空气达到杀灭微生物或消除热原物质的方法。
适用于耐高温但不宜用湿热灭菌法灭菌的物品灭菌，如玻璃器具、金属材质容器、纤维制品、固体试药、液状石蜡等均可采用本法灭菌。
干热灭菌条件一般为160~170℃*120min以上、170~180℃*60min以上或250℃*45min以上，也可采用其他温度和时间参数。
应保证物品灭菌后的SAL《10-6。
一、概述在医疗机构的临床科室中，常用物品消毒灭菌是保障患者安全的重要环节。
科学、规范的消毒灭菌工作能有效预防医院感染，减少交叉感染的发生，保障医疗质量和患者安全。
本文将围绕科室中常用物品的消毒灭菌方法进行详细介绍，以期为临床工作者提供参考和借鉴。
二、常用消毒灭菌方法1. 高温高压灭菌高温高压灭菌是指利用高压蒸汽对物品进行灭菌处理的方法。
它是目前医疗机构最常用的物品灭菌方法之一。
此方法操作简便，灭菌效果好，可以有效杀灭细菌、真菌、病毒等病原体。
常见的高温高压灭菌设备有压力蒸汽灭菌器、高温高压灭菌器等。
2. 化学灭菌化学灭菌是利用化学药剂对物品进行消毒灭菌的方法。
常见的化学灭菌药剂有过氧化氢、乙醛等。
化学灭菌可以对一些不耐高温、高压的物品进行灭菌处理，灭菌效果可靠。
不过，需要严格控制浓度和时间，避免残留物对患者造成不良影响。
3. 紫外线消毒紫外线消毒是利用紫外线对物品进行杀菌消毒的方法。
它适用于对一些较为平整、不易受潮湿污染的物品进行消毒。
但紫外线只能杀灭空气和物体表面的病原体，对于物件内部的细菌和病毒杀灭效果较差。
4. 过滤灭菌过滤灭菌是将含有微生物的液体通过灭菌滤器进行过滤，以达到杀灭微生物的目的。
该方法适用于一些对高温、高压敏感的溶液或液体药剂等的消毒处理。
5. 辐射灭菌辐射灭菌是利用辐射对物品进行灭菌处理的方法，其常见的辐射源有γ射线、X射线等。
这种方法适用于对一些耐受辐射的医疗器械和物品进行灭菌处理。
三、消毒灭菌注意事项1. 选择合适的消毒灭菌方法在选择消毒灭菌方法时，应根据物品的特性、形态和材质进行选择，合理灭菌处理，确保消毒效果。
2. 严格控制消毒时间和浓度无论是高温高压灭菌、化学灭菌还是其他方法，都需要严格控制消毒时间和浓度，避免消毒不彻底或药剂残留。
3. 确保设备设施的运行状态对于高温高压灭菌设备、紫外线消毒设备等，需要定期进行维护和检测，确保设备设施的运行状态良好。
4. 对不同材质物品采用不同消毒方法不同材质的医疗器械和物品，应根据其耐受性差异，选择不同的消毒灭菌方法。
实验室13种常用消毒灭菌的方法汇总1、热力消毒灭菌高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。
在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。
2、干热消毒灭菌干热是指相对湿度在20％以下的高热。
干热消毒灭菌是由空气导热，传热效果较慢。
一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞需160－170℃经2小时方可杀死。
燃烧法：是一种简单、迅速、彻底的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。
烧灼法：一些耐高温的器械（金属、搪瓷类），在急用或无条件用其他方法消毒时可采用此法。
将器械放在火焰上烧灼1－2分钟。
若为搪瓷容器，可倒少量95％乙醇，慢慢转动容器，使乙醇分布均匀，点火燃烧至熄灭约1－2分钟。
采集作细菌培养的标本时，在留取标本前后（即启盖后，闭盖前）都应将试管（瓶）口和盖子置于火焰上烧灼，来回旋转2－3次。
燃烧时要注意安全，须远离易燃易爆物品，如氧气、汽油、乙醚等。
燃烧过程不得添加乙醇，以免引起火焰上窜而致灼伤或火灾。
锐利刀剪为保护刀锋，不宜用燃烧灭菌法。
焚烧某些特殊感染，如破伤风、气性坏疽、绿脓杆菌感染的敷料，以及其它已污染且无保留价值的物品，如污纸、垃圾等，应放入焚烧炉内焚烧，使之炭化。
3、电热培养箱利用培养箱的热空气消毒灭菌。
培养箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体。
一般繁殖体在干热80－100℃中经1小时可以杀死，芽胞、病毒需160－170℃经2小时方可杀死。
热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂等。
灭菌后待箱内温度降至50－40℃以下才能开启柜门，以防炸裂。
4、微波消毒微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速升高；一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。
目前已广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告。
消毒灭菌标准操作程序一、消毒、灭菌基本原则1、基本要求（1）重复使用的诊疗器械、器具和物品，使用后应先清洁，再进行消毒或灭菌。
（2）被朊病毒、气性坏疽及突发不明原因的传染病病原体污染的诊疗器械、器具和物品，应执行本规范第11章的规定。
（3）耐热、耐湿的手术器械，应首选压力蒸汽灭菌，不应采用化学消毒剂浸泡灭菌。
（4）环境与物体表面，一般情况下先清洁，再消毒；当受到患者的血液、体液等污染时，先去除污染物，再清洁与消毒。
（5）医疗机构消毒工作中使用的消毒产品应经卫生行政部门批准或符合相应标准技术规范，并应遵循批准使用的范围、方法和注意事项。
二、消毒、灭菌方法的选择原则1、根据物品污染后导致感染风险高低选择相应的消毒或灭菌方法：（1）高度危险性物品，应采用灭菌方法处理；（2）中度危险性物品，应采用达到中水平消毒以上效果的消毒方法；（3）低度危险性物品，宜采用低水平消毒方法，或做清洁处理；遇有病原微生物污染时，针对所污染病原微生物的种类选择有效的消毒方法。
2、根据物品上污染微生物的种类、数量选择消毒或灭菌方法：（1）对受到致病菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌和经血传播病原体（乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒等）污染的物品，应采用高水平消毒或灭菌；（2）对受到真菌、亲水病毒、螺旋体、支原体、衣原体等病原微生物污染的物品，应采用中水平以上的消毒方法；（3）对受到一般细菌和亲脂病毒等污染的物品，应采用达到中水平或低水平的消毒方法；（4）杀灭被有机物保护的微生物时，应加大消毒剂的使用剂量和（或）延长消毒时间。
3、根据消毒物品的性质选择消毒或灭菌方法：（1）耐热、耐湿的诊疗器械、器具和物品，应道选压力蒸汽灭菌；耐热的油剂类和干粉类等应采用干热灭菌；（2）不耐热、不耐湿的物品，宜采用低温灭菌方法如环氧乙烷灭菌、过氧化氢低温等离子体灭菌或低温甲醛蒸汽灭菌等；（3）物体表面消毒，宜考虑表面性质，光滑表面宜选择合适的消毒剂擦试或紫外线消毒器近距离照射；多孔材料表面宜采用浸泡或喷雾消毒法4、职业防护（1）应根据不同的消毒与灭菌方法，采取适宜的职业防护措施。
常用的基本操作技术（一）消毒和灭菌技术消毒（disinfection）与灭菌（sterilization）两者的意义有所不同。
消毒一般是指利用物理或化学方法消灭病原菌或有害微生物的营养体，而灭菌则是指利用强烈的物理或化学方法杀灭一切微生物的营养体、芽孢和孢子。
但日常生活中两者常常通用。
灭菌的方法很多，一般可分为物理灭菌和化学灭菌两大类。
1. 物理灭菌物理灭菌是最常用的灭菌方法。
主要包括热力学灭菌、过滤除菌和紫外线灭菌等。
（1）热力学灭菌又可分为干热灭菌和湿热灭菌两大类。
①干热灭菌干热灭菌是利用高温使微生物的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
细胞内的蛋白质的凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快；含水量越小，凝固减慢。
因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度更高（160~170℃），时间更长（1~2h）。
进行干热灭菌时最高温度不能超过180℃，否则，包扎器皿的纸或棉塞就会被烤焦，甚至引起燃烧。
通常所说的干热灭菌是指利用干燥箱（或称烘箱）进行灭菌，主要用于玻璃器皿如培养皿、移液管和接种工具等的灭菌。
灭菌时将被灭菌的物体用双层报纸包好或装入特制的灭菌筒内，装入箱中，不要摆的太挤，以免妨碍热空气流通。
逐渐加温，使温度上升至160～170℃后保持2h。
灭菌结束后，切断电源，自然降温，待箱内温度降至70℃以下后，才能打开箱门，取出灭菌物品。
注意在温度降至70℃以前切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。
另外，灼烧灭菌也属于干热灭菌。
在进行无菌操作时，接种工具如接种环、接种钩、接种铲、镊子等要在酒精灯火焰上充分灼烧，试管口、菌种瓶口在火焰上作短暂灼烧灭菌等。
②湿热灭菌a.高压蒸汽灭菌此法是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度，导致菌体蛋白质凝固变性达到灭菌的目的。
常用灭菌方法在医疗、食品生产、实验室等领域，灭菌是一项非常重要的工作。
灭菌的目的是杀死或去除所有微生物，包括细菌、真菌、病毒和孢子。
只有在彻底灭菌的情况下，我们才能确保产品的安全性和质量。
因此，选择合适的灭菌方法对于各行各业都至关重要。
本文将介绍一些常用的灭菌方法，以供参考。
首先，我们来介绍高温灭菌方法。
高温灭菌是一种常用的灭菌方法，其原理是利用高温杀死微生物。
常见的高温灭菌方法包括干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌是利用高温干燥的环境，通常在160°C以上进行，可以有效地杀灭微生物。
湿热灭菌则是利用高温和湿度，常见的方法包括蒸汽灭菌和沸水灭菌。
这些方法都能够有效地灭菌，但需要注意的是，不同的物品和设备可能需要不同的温度和时间参数，因此在进行高温灭菌时需要根据具体情况进行调整。
其次，化学灭菌方法也是常用的灭菌手段。
化学灭菌是利用化学药剂杀灭微生物的方法。
常见的化学灭菌方法包括使用乙醛、过氧化氢、氯气等化学药剂。
这些药剂可以通过氧化、蛋白质变性等方式杀灭微生物，具有一定的灭菌效果。
化学灭菌方法通常适用于一些对热敏感的物品，但需要注意的是，化学药剂的选择和使用需要谨慎，以免对人体和环境造成危害。
另外，辐射灭菌也是一种常用的灭菌方法。
辐射灭菌是利用辐射杀灭微生物的方法，常见的辐射包括紫外线辐射和γ射线辐射。
紫外线辐射主要适用于空气、水和一些表面的灭菌，其杀菌效果取决于辐射的剂量和时间。
γ射线辐射则可以穿透物体，对内部微生物也具有一定的杀灭效果。
辐射灭菌方法具有快速、高效的特点，但需要注意的是，辐射对人体和环境也具有一定的危害性，因此在使用时需要谨慎。
除了上述常用的灭菌方法外，还有一些新型的灭菌技术正在不断发展和应用，例如等离子体灭菌、超临界二氧化碳灭菌等。
这些新技术具有一定的优势，如温和、无化学残留等，但也需要进一步的研究和验证。
总的来说，灭菌是确保产品安全的重要环节，选择合适的灭菌方法对于各行各业都至关重要。
实验室常用的器材一般包括玻璃器材、金属器械、橡胶制品及塑料制品等，每类器材的处理及消毒措施都有不同。
严格的消毒灭菌工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。
目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法(消毒剂、抗生素)两大类。
1、湿热灭菌法湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
分为三种:（1）流通蒸气灭菌法：是指在常压条件下，采用100摄氏度流通蒸气加热杀灭微生物的方法，灭菌时间通常为30-60分钟。
该法适用于消毒以及不耐高热制剂的灭菌，但不能保证杀灭所有芽孢，是非可靠的灭菌方法。
（2）间歇蒸汽灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽加热，杀灭所有微生物，包括芽胞。
方法同流通蒸汽灭菌法，但要重复3次以上，每次间歇是将要灭菌的物体放到37℃孵箱过夜，目的是使芽胞发育成繁殖体。
若被灭菌物不耐100℃高温，可将温度降至75℃～80℃，加热延长为30～60分钟，并增加次数。
适用于不耐高热的含糖或牛奶的培养基。
（3）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3℃，维持15-20分钟。
2、干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120ºC～150ºC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
严格的消毒灭菌对细胞与胚胎工程研究与应用工作极为重要，直接影响着整个实验能否顺利进行。
(一)消毒灭菌方法目前常用的消毒灭菌方法多采用物理方法(如干热灭菌法、湿热灭菌法、过滤除菌法、射线杀菌法等)和化学方法（消毒剂、抗生素）两大类。
1．干热灭菌法是利用恒温干燥箱内120 ºC～150 ºC的高热，并保持90～120分钟，杀死细菌和芽孢，达到灭菌目的的一种方法。
主要适用于不便在压力蒸汽灭菌器中进行灭菌，且不易被高温损坏的玻璃器皿、金属器械以及不能和蒸汽接触的物品的灭菌。
用此方法灭菌的物品干燥，易于贮存。
酒精灯火焰烧灼灭菌法也是属于干热灭菌的方法之一，在进行动物细胞体外培养工作时，常须利用工作台面上的酒精灯火焰对金属器具及玻璃器皿口缘进行补充灭菌。
2．湿热灭菌法压力蒸汽湿热灭菌法是目前最常用的一种灭菌方法。
它利用高压蒸汽以及在蒸汽环境中存在的潜热作用和良好的穿透力，使菌体蛋白质凝固变性而使微生物死亡。
适合于布类工作衣、各种器皿、金属器械、胶塞、蒸馏水、棉塞、纸和某些培养液的灭菌。
高压蒸汽灭菌器的蒸汽压力一般调整为1.0～1.1 kg/cm2，维持20～30 min即可达到灭菌效果。
3．射线灭菌法利用紫外线灯进行照射灭菌的方法。
紫外线是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物。
紫外线的作用机制是通过对微生物的核酸及蛋白质等的破坏作用而使其灭活。
适合于实验室空气、地面、操作台面灭菌。
灭菌时间为30 min。
用紫外线杀菌时应注意，不能边照射边进行实验操作，因为紫外线不仅对人体皮肤有伤害，而且对培养物及一些试剂等也会产生不良影响。
4．过滤除菌法是将液体或气体通过有微孔的滤膜过滤，使大于滤膜孔径的细菌等微生物颗粒阻留，从而达到除菌的方法。
过滤除菌法大多用于遇热易发生分解、变性而失效的试剂、酶液、血清、培养液等。
目前，常用微孔滤膜金属滤器或塑料滤器正压过滤除菌，或用玻璃细菌滤器、滤球负压过滤除菌。
消毒和灭菌常用方法
一、物理方法
1.干热灭菌法：利用高温对微生物的杀灭作用，一般在160℃下持续1-2小
时，可以杀灭一切微生物，包括细菌、病毒、真菌和芽孢等。
此方法常用于玻璃器皿、金属器具等物品的灭菌。
2.湿热灭菌法：利用高温湿度的蒸汽对微生物的杀灭作用，通常在121℃下
持续30分钟，也可以杀灭一切微生物。
此方法适用于不耐高温的物品，如塑料、橡胶、玻璃器皿等。
3.过滤法：通过物理手段将微生物从空气中或液体中分离出来，主要用于空
气或液体中微生物的分离和去除。
二、化学方法
1.化学药剂灭菌法：利用化学药剂对微生物的杀灭作用，常用的化学药剂有
甲醛、乙醇、次氯酸钠等。
此方法适用于表面消毒、空气消毒等。
2.熏蒸法：将具有杀灭作用的化学气体导入密闭的空间，使其杀灭空间内的
微生物。
此方法常用于仓库、车厢等场所的消毒。
三、生物方法
生物方法主要是利用某些微生物本身具有的杀灭或抑制其他微生物生长的作用，如乳酸菌、霉菌等。
这些微生物可以分泌某些抗菌物质，对其他微生物的生长起到抑制作用。
生物方法常用于食品保存、生物防治等领域。
四、辐射方法
辐射方法主要包括紫外线照射和臭氧照射等方法，这些方法主要利用紫外线和臭氧具有杀菌作用，对细菌、病毒等微生物的生长起到抑制作用。
辐射方法常用于表面消毒、空气消毒等方面。
以上就是消毒和灭菌常用方法的简要介绍，不同的方法具有不同的适用范围和优缺点，在实际应用中需要根据具体情况选择合适的方法。
医院常用物品消毒灭菌方法类别消毒物品清洁消毒与灭菌方更换频率注意事项手术器械及物品手术器械及物品一般器械1、器械首选机械清洗2、精密和有机物污染较重器械应手工清洗3、有关节、缝隙、齿槽的器械，应尽量张开或拆卸到最小单位进行清洗。
4、手工清洗按照冲洗、洗涤、漂洗、终末漂洗步骤进行5、复杂及管腔器械使用超声清洗机、高压水枪清洗。
1、耐湿、耐热的物品压力蒸汽灭菌2、不耐高温、不耐湿热如电子仪器、光学仪器等物品低温灭菌3、耐热不耐湿的采用干热灭菌4、对不耐热、耐湿的首选低温灭菌，无条件的医疗机构可采用灭菌剂浸泡灭菌一用一灭菌应取消在手术室清洗，由供应室集中清洗锐利器械（含刀片、剪刀、穿刺针等）1、机械清洗或手工清洗2、穿刺针内腔用高压（气）水枪冲洗、超声波清洗1、压力蒸汽灭菌2、可选环氧乙烷、过氧化氢等离子体低温灭菌3、严禁戊二醛浸泡灭菌一用一灭菌镀铬器械、眼科精细器械不适宜采用超声波清洗。
腔镜及附件（腹腔镜、膀胱镜、关节镜、胸腔镜、脑室镜、宫腔镜、胆道镜等）1、所有腔镜都必须拆卸到最小单位进行清洗2、按照规范使用水枪、气枪对腔镜进行冲洗、酶洗、清洗、干燥；3、用超声清洗机清洗活检钳等附件1、压力蒸汽灭菌或过氧化氢等离子体灭菌或环氧乙烷灭菌2、2%戊二醛溶液浸泡10小时（将管腔内注满消毒液），使用前无菌水彻底冲洗干净包括内管腔，清除消毒剂残留一用一灭菌消毒剂保持有效性，定期更换。
定期测试浓度并记录。
胆道镜不宜采用过氧化氢等离子灭菌方法蒸汽或气体不能穿透的物品（如油剂、粉剂等）干热灭菌包装一经打开，24小时更换油剂、粉剂灭菌时厚度0.6cm,凡士林纱布厚度﹤1.3cm，建议使用一次性灭菌小包装产品手术缝线压力蒸汽灭菌或环氧乙烷灭菌不应重复灭菌根据不同材质选择相应的灭菌方法严禁戊二醛浸泡灭菌植入性产品根据厂家提供要求进行器械清洗1、压力蒸汽灭菌2、根据厂家提供器械包装、灭菌方法和灭菌循环参数要求进行一次性使用1、植入性产品灭菌时必须同时生物监测，检测结果合格才能放行，2、紧急情况下灭菌植入型器械可在生物PCD中加用5类化学指示物，指示物合格可作为提前放行的标志，生物监测的结果及时通报使用部门。
常用无菌技术操作方法无菌技术是实验室中非常重要的操作技能，用于避免微生物污染，保证实验结果的可靠性及重复性。
无菌技术主要包括杀菌、灭菌、消毒和无菌操作等步骤。
下面我将重点介绍常见的无菌技术操作方法。
1. 杀菌技术杀菌是将菌体完全消灭或使其无法生长繁殖的技术。
常用的杀菌方法包括高温杀菌法、化学杀菌法和辐射杀菌法。
高温杀菌法：是指将待处理物料暴露在高温环境下，使其中的细菌、酵母、真菌等微生物遭受高温威胁而死亡。
常用的高温杀菌法包括干热灭菌和湿热灭菌。
化学杀菌法：是指使用化学物质杀灭微生物。
化学杀菌法的常用方法包括使用气态或液态消毒剂进行消毒。
辐射杀菌法：利用辐射的能量杀死细菌、真菌、病毒等微生物的方法。
辐射杀菌法主要包括紫外线辐射和电离辐射。
2. 灭菌技术灭菌是指完全摆脱细菌及其孢子等微生物的工艺。
常见的灭菌方法包括高温高压灭菌、过氧化氢灭菌和滤膜灭菌。
高温高压灭菌:也称蒸压灭菌，是指将待处理物料放入灭菌器内，应用饱和蒸汽及高压力共同作用于各种细菌及其孢子的灭活过程。
过氧化氢灭菌：过氧化氢可以在细胞内释放氧化剂自由基和有害化学物质杀死微生物,可通过刚刚说过的气态消毒剂蒸汽法灭菌、直接喷洒杀菌。
属于新一代灭菌技术的过氧化氢灭菌、虽然作用效果明显,但对灭菌器的密闭性要求很高,更为稳妥的办法是采用多个灭菌器进行更替实验器材。
滤膜灭菌：也称微滤灭菌，是指将待处理物料通过0.22微米或更小孔径的过滤器滤过。
小菌落处理，适于化学、生物分子学中细胞组分、基因工程、微生物孵化、试剂等对细菌污染严格要求的实验。
3. 消毒技术消毒是杀灭或清除微生物、细菌、病毒等病原菌的技术。
消毒用化合物的选择和实验器具的清洗都对最终实验结果产生影响，因此这个环节更是关键。
使用紫外线消毒：紫外线消毒是通过紫外线对于空气、表面等区域起到杀灭微生物的效果。
使用表面消毒剂：广泛应用于厨房、医院等场所及实验室中的消毒剂具有杀菌酵母的作用，是最常规的消毒方式。
（人教课标版）普通高中课程标准实验教科书《生物》目录（人教课标版）普通高中课程标准实验教科书《生物》目录必修1 分子与细胞科学家访谈探索生物大分子的奥秘第1章走近细胞第1节从生物圈到细胞第2节细胞的多样性和统一性科学前沿组装细胞第2章组成细胞的分子第1节细胞中的元素和化合物第2节生命活动的主要承担者——蛋白质科学史话世界上第一个人工合成蛋白质的诞生第3节遗传信息的携带者——核酸第4节细胞中的糖类和脂质第5节细胞中的无机物第3章细胞的基本结构第1节细胞膜——系统的边界第2节细胞器——系统内的分工合作科学家的故事细胞世界探微三例第3节细胞核——系统的控制中心第4章细胞的物质输入和输出第1节物质跨膜运输的实例第2节生物膜的流动镶嵌模型第3节物质跨膜运输的方式科学前沿授予诺贝尔化学奖的通道蛋白研究第5章细胞的能量供应和利用第1节降低化学反应活化能的酶一酶的作用和本质二酶的特性科学·技术·社会酶为生活添姿彩第2节细胞的能量“通货”——ATP第3节ATP的主要来源——细胞呼吸第4节能量之源——光与光合作用一捕获光能的色素和结构二光合作用的原理和应用第6章细胞的生命历程第1节细胞的增殖第2节细胞的分化第3节细胞的衰老和凋亡第4节细胞的癌变与生物学有关的职业医院里的检验师必修2 遗传与进化科学家访谈我赞叹生命的美丽第1章遗传因子的发现第1节孟德尔的豌豆杂交实验（一）第2节孟德尔的豌豆杂交实验（二）第2章基因和染色体的关系第1节减数分裂和受精作用一减数分裂二受精作用第2节基因在染色体上科学家的故事染色体遗传理论的奠基人第3节伴性遗传第3章基因的本质第1节DNA是主要的遗传物质第2节DNA分子的结构第3节DNA的复制第4节基因是有遗传效应的DNA片段科学·技术·社会DNA指纹技术第4章基因的表达第1节基因指导蛋白质的合成第2节基因对性状的控制科学前沿生物信息学第3节遗传密码的破译（选学）第5章基因突变及其他变异第1节基因突变和基因重组第2节染色体变异第3节人类遗传病科学·技术·社会基因治疗第6章从杂交育种到基因工程第1节杂交育种与诱变育种与生物学有关的职业育种工作者第2节基因工程及其应用与生物学有关的职业生物技术产业的研发人员第7章现代生物进化理论第1节现代生物进化理论的由来第2节现代生物进化理论的主要内容一种群基因频率的改变与生物进化二隔离与物种的形成与生物学有关的职业化石标本的制作三共同进化与生物多样性的形成科学·技术·社会理想的“地质时钟”必修3 稳态与环境科学家访谈生物与环境是统一的整体第1章人体的内环境与稳态第1节细胞生活的环境第2节内环境稳态的重要性科学史话稳态概念的提出和发展第2章动物和人体生命活动的调节第1节通过神经系统的调节与生物学有关的职业神经外科医生第2节通过激素的调节科学·技术·社会评价应用激素类药物的利与弊第3节神经调节与体液调节的关系科学·技术·社会拒绝毒品，慎用心理药物第4节免疫调节科学·技术·社会艾滋病——威胁人类的免疫缺陷病第1节植物生长素的发现第2节生长素的生理力作用第3节其他植物激素第4章种群和群落第1节种群的特征科学家的故事从治蝗专家到生态学巨匠第2节种群数量的变化与生物学有关的职业植保员第3节群落的结构科学·技术·社会立体农业第4节群落的演替与生物学有关的职业林业工程师第5章生态系统及其稳定性第1节生态系统的结构第2节生态系统的能量流动科学·技术·社会生态农业第3节生态系统的物质循环第4节生态系统的信息传递第5节生态系统的稳定性第6章生态环境的保护第1节人口增长对生态环境的影响第2节保护我们共同的家园选修1 生物技术实践走近生物技术专题1 传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋的制作课题2 腐乳的制作课题3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量专题2 微生物的培养与应用课题1 微生物的实验室培养课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课题3 分解纤维素的微生物的分离专题3 植物的组织培养技术课题1 菊花的组织培养课题2 月季的花药培养专题4 酶的研究与应用课题1 果胶酶在果汁生产中的作用课题2 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果课题3 酵母细胞的固定化专题5 DNA和蛋白质技术课题1 DNA的粗提取与鉴定课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段课题3 血红蛋白的提取和分离专题6 植物有效成分的提取课题1 植物芳香油的提取课题2 胡萝卜素的提取附录1 生物学实验室的基本安全规则附录2 生物学实验室中常用的国际单位附录3 常用培养基配方附录4 常用的消毒灭菌操作方法附录5 常用化学抑菌剂选修2 生物科学与社会致同学们生物科学技术推动社会进步第1章生物科学与健康科技发展之窗现代医学的发展第1节抗生素的合理使用第2节基因诊断与基因治疗拓展视野基因芯片技术与新药的开发第3节人体的器官移植拓展视野生长因子的发现推动了组织工程的发展第4节生殖健康拓展视野《人类辅助生殖技术规范》简介第2章生物科学与农业科技发展之窗农业的绿色革命第1节农业生产中繁殖控制技术第2节现代生物技术在育种上的应用拓展视野转基因生物的安全性第3节植物病虫害的防治原理和方法第4节动物疫病的控制拓展视野国家动物疫情测报体系简介第5节绿色食品的生产第6节设施农业第3章生物科学与工业科技发展之窗生物技术产业的兴起第1节微生物发酵及其应用第2节酶在工业生产中的应用第3节生物技术药物与疫苗拓展视野单克隆抗体药物的制备第4章生物科学与环境保护科技发展之窗生物科技与可持续发展第1节生物性污染及其预防第2节生物净化的原理及其应用第3节关注生物资源的合理利用第4节倡导绿色消费拓展视野绿色产品的分类选修3 现代生物科技专题专题1 基因工程科技探索之路基础理论和技术的发展催生了基因工程1.1 DNA重组技术的基本工具1.2 基因工程的基本操作程序拓展视野历史不能忘记中国对PCR的贡献1.3 基因工程的应用拓展视野神奇的基因芯片1.4 蛋白质工程的崛起专题2 细胞工程科技探索之路细胞工程的发展历程2.1 植物细胞工程2.1.1 植物细胞工程的基本技术2.1.2 植物细胞工程的实际应用2.2 动物细胞工程2.2.1 动物细胞培养和核移植技术拓展视野核移植技术发展简史2.2.2 动物细胞融合与单体克隆抗体拓展视野多利羊猜想科技探索之路胚胎工程的建立3.1 体内受精和早期胚胎发育3.2 体外受精和早期胚胎培养3.3 胚胎工程的应用及前景拓展视野话说哺乳动物的性别控制专题4 生物技术的安全性和伦理性问题科技探索之路生物技术引发的社会争论4.1 转基因生物的安全性4.2 关注生物技术的伦理问题拓展视野是研究合作，还是基因资源掠夺4.3 禁止生物武器专题5 生态工程科技探索之路生态工程的兴起5.1 生态工程的基本原理拓展视野前景广阔的沼气工程5.2 生态工程的实例和发展前景。
常用的消毒与灭菌的方法八年级生物第五单元第四章消毒杀灭病原微生物的方法。
用以消毒的药物称为消毒剂。
一般消毒剂在常用浓度下，只对细菌繁殖体有效。
对于芽胞则需要提高消毒剂的浓度和延长作用的时间。
灭菌：杀灭物体上所有的微生物（包括病原体和非病原体的繁殖体和芽胞）的方法。
因此，灭菌比消毒的要求高；但在日常生活中，消毒和灭菌这两个术语往往通用。
无菌：物体上或容器内无活菌存在的意思。
无菌操作是防止微生物进入机体或其他物品的操作技术。
例如，进行外科手术或微生物学实验时，须注意无菌操作。
防腐：防止或抑制微生物生长繁殖的方法。
用于防腐的化学药物称为防腐剂。
许多药物在低浓度时只有抑菌作用，浓度增高或延长作用时间，则有杀菌作用。
消毒与灭菌技术的选择，取决于多种因素。
在实际工作中应根据消毒灭菌的对象和目的要求不同，以及条件的不同，选择不同的合适方法。
（一）热力灭菌高温对细菌有明显的致死作用。
热力灭菌时最可靠而普遍应用的灭菌法，包括湿热灭菌和干热灭菌法。
1．湿热灭菌法包括有：（1）煮沸法：煮沸100℃，5分钟，能杀死一般细菌的繁殖体。
许多芽胞需经煮潮5～6小时才死亡。
水中加入2%碳酸钠，可提高其沸点达105℃。
既可促进芽胞的杀灭，又能防止金属器皿生锈。
煮沸法可用于饮水和一般器械（刀剪、注射器等）的消毒。
（2）流通蒸汽灭菌法：利用100℃左右的水蒸汽进行消毒，一般采用流通蒸汽灭菌器（其原理相当于我国的蒸笼），加热15到39分钟，可杀死细菌繁殖体。
消毒物品的包装不宜过大、过紧以利于蒸汽穿透。
（3）间歇灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽，以达到灭菌的目的。
一般用流通蒸汽灭菌器，100℃加热15～30分钟，可杀死其中的繁殖体；但芽胞尚有残存。
取出后放37℃孵箱过夜，使芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次，如此连续三次以上。
本法适用于不耐高温的营养物（如血清培养基）的灭菌。
（4）巴氏消毒法：利用热力杀死液体中的病原菌或一般的杂菌，同时不致严重损害其质量的消耗方法。
常用的消毒灭菌操作方法附录 4
一、干热灭菌的操作方法
1.装入待灭菌的物品
将待灭菌的物品，如塞上棉塞的试管、锥形瓶、培养皿、吸管等玻璃仪器，用牛皮纸或干净的报纸
包裹严密后，放人干热灭菌箱。
注意，物品不要摆得太挤，以免妨碍热空气流通。
同时，灭菌物品也不
要与干热灭菌箱内壁的铁板接触，以防包装纸烤焦起火。
2.灭菌
关好干热灭菌箱的箱门，旋动恒温调节器，设定温度为160~170℃。
当温度升到150℃左右时，保持
此温度3~4h。
由于干热灭菌温度较高，操作时要注意防止烫伤。
3.降温
关掉电源，自然降温。
4.开箱取物
等温度降到70℃以下后，打开箱门，取出灭菌物品。
注意温度未降到70℃以前，切勿打开箱门，以
免玻璃器皿炸裂。
二、高压灭菌的操作方法
1.首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架平齐。
2.放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。
注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。
锥形瓶
与试管口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹瓶口的纸而透入棉塞。
3.加盖，并将盖上的排气软管插人内层灭菌桶的排气槽内。
拧紧固定盖子的螺栓，注意要同时旋紧相
对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，不漏气。
4.加热灭菌锅，打开排气阀，使水沸腾，排除锅内的冷空气。
等冷空气完全排尽后，关上排气阀，让
锅内的温度随蒸汽压力增加而逐步上升。
当锅内压力升到所需压力时，控制热源，按照灭菌所要求的时
间，维持压力。
5.到灭菌时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降到零时，打开排气阀，旋
松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。
如果提前打开排气阀，锅内压力突然下降，灭菌容器内的液体会冲
出容器，造成污染。
三、紫外线灭菌的操作方法
紫外线只适用于表面灭菌和空气灭菌。
以面积为10 m2的普通小型接种室为例，在工作台上方距地面
2m 处悬挂1~2 只30 W 紫外灯，每次开灯照射30 min ，就能达到室内空气灭菌的目的。
照射前，适量喷
洒石炭酸等化学抑菌剂，可以加强灭菌效果。
