菊花的植物组织培养共38页

菊花的组织培养实验报告单班级：____________ 实验日期：______________指导教师：___________ 学生姓名：_____________ 小组成员有：_____________实验原理1.植物细胞表现出全能性需要经历脱分化和再分化过程。

2.细胞分裂素和生长素是启动细胞分裂、影响脱分化和再分化的关键激素，激素浓度和比例会影响植物细胞发育的方向。

目的要求1.了解植物组织培养的基本原理。

2.了解生长素和细胞分裂素的浓度、用量的比例对菊花愈伤组织形成和分化的影响。

3.尝试进行植物组织培养。

材料用具1.材料：幼嫩的菊花茎段、培养基、体积分数为70%的酒精、质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液和无菌水等。

各种培养基的配制参见本书附录1。

2.用具：50mL锥形瓶（或植物组织培养瓶）、烧杯、酒精灯、超净工作台（或接种箱）、高压蒸汽灭菌锅、培养箱、封口膜、滤纸、标签、消毒用酒精棉球、培养皿、解剖刀和镊子等。

方法步骤1.外植体消毒酒精擦拭双手和超净工作台台面。

将流水充分冲洗后的外植体用酒精消毒30 s，然后立即用无菌水清洗2~3次；再用次氯酸钠溶液处理30 min后，立即用无菌水清洗2~3次。

2.外植体的接种将消过毒的外植体置于无菌的培养皿中，用无菌滤纸吸去表面水分。

用解剖刀将外植体切成0.5~1cm长的小段。

在酒精灯火焰旁，将外植体的1/3~1/2插入诱导愈伤组织的培养基中。

用封口膜或瓶盖封盖瓶口，并做好标记。

3.愈伤组织培养将接种外植体的锥形瓶或植物组织培养瓶置于18～22℃的培养箱中培养。

培养过程中，定期观察和记录愈伤组织的生长情况。

4．生芽、生根培养培养15～20d后，将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上。

长出芽后，再将其转移到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗。

5．炼苗、移栽移栽前先打开封口膜或瓶盖，让试管苗在培养箱内生长几日。

用流水清洗掉根部的培养基后，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长大后再移栽入土。

实验十二菊花的组织培养背景知识1. 植物组织培养，即利用植物细胞的全能性，在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞或原生质体进行培养，获得再生的完整植株或生产相关产品的技术。

植物组织培养广泛应用于植物快速繁殖、脱毒（脱除植物病毒）、种质资源保存、单倍体或多倍体育种、杂交、诱变等方面，也是遗传学、分子生物学等其他生物学科研究的一种基本技术。

2. 菊花，菊科菊属多年生草本，高60-150厘米。

茎直立，分枝或不分枝，被柔毛。

叶卵形至披针形，长5-15厘米，羽状浅裂或半裂，有短柄，叶下面被白色短柔毛。

头状花序直径2.5-20厘米，大小不一。

总苞片多层，外层外面被柔毛。

舌状花颜色各种。

管状花黄色。

对菊花进行组织培养，既可快速繁殖，又可使其脱毒而提高产量和品质。

活动目标1．基本目标（1）理解植物组织培养的原理。

（2）叙述组织培养过程中，植物从外植体发育到完整植株的变化过程。

（3）建立无菌概念，学习无菌技术。

（4）学习并尝试植物组织培养的技术与方法。

2．发展目标（1）体验严谨细致的生物学实验操作。

（2）感受科学技术在生产实践中的重要价值。

（3）通过审视自己动手操作的过程，总结分析实验成败原因。

实验准备1．实验原理（1）离体的植物器官、组织、细胞或原生质体，在无菌和人工控制的环境条件下，处于适当的培养基中，可以经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化，形成完整植物体。

在植物组织培养的各个阶段中，植物激素的种类、用量、比例需进行适当调整已达成不同培养目标。

（2）无菌技术。

凡是暴露在（未经处理的）空气中的物体，曾经接触过自然水源的物体都是有菌的。

培养所用的培养基含有植物细胞生长所必需的各类营养物质，也使各种细菌、真菌易于滋生繁殖。

组织培养必须采用无菌技术，在取材、接种、培养的整个过程中，必须严格进行培养基和培养材料的灭菌，同时，严格进行无菌操作，防止污染。

2．材料、试剂、器具（1）材料：菊花，可进行生根培养的菊花试管苗。