一例犬布鲁氏菌病的诊断

动物布鲁氏菌病诊断技术GB/T18646—20021 范围本标准规定了动物布鲁氏菌病的诊断技术。

本标准规定的虎红平板凝集试验、乳牛全乳环状试验适用于家畜布病田间筛选试验和乳牛场布病的监测及诊断泌乳母牛布病的初筛试验；试管凝集试验和补体结合试验适用于诊断羊种、牛种和猪种布病感染的家畜。

本标准规定的试管凝集试验不适用于犬种和绵羊副睾种布病感染家畜的检疫。

2 虎红平板凝集试验2.1 材料准备2.1.1 抗原、标准阳性血清、阴性血清由制标单位提供，按说明书使用。

2.1.2 受检血清应新鲜，无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。

2.1.3 洁净的玻璃板，其上划分成4cm2的方格。

2.1.4 吸管或分装器，适于滴加0.03mL。

2.1.5 牙签或火柴杆，供搅拌用。

2.2 操作方法2.2.1 将玻璃板上各格标记受检血清号，然后加相应血清0.03mL。

2.2.2 在受检血清旁滴加抗原0.03mL。

2.2.3 用牙签类小棒搅动血清和抗原使之混合。

2.2.4 每次试验应设阴、阳性血清对照。

2.3 判定2.3.1 在阴、阳性血清对照成立的条件下，方可对被检血清进行判定。

2.3.2 受检血清在4min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性(+)，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性(—)。

3 乳牛布病全乳环状试验3.1 材料准备3.1.1 布病全乳环状抗原由制标单位提供，按说明书使用。

3.1.2 乳样3.1.2.1 受检乳样须为新鲜的全乳。

3.1.2.2 采乳样时应将母畜的乳房用温水洗净、擦干，然后将乳液挤入洁净的器皿中。

3.1.2.3 采集的乳样夏季时应于当日内检查；保存于2℃时，7d内仍可使用。

3.2 操作方法3.2.1 取乳样lml，加于灭菌凝集试验管内。

3.2.2 取充分振荡混合均匀的全乳环状抗原1滴(约50ul)加人乳样中充分混匀。

3.2.3 置37℃一38℃水浴中60min。

3.2.4 加温后取出试管勿使振荡，立即进行判定。

养殖与饲料2015年第10期青海省门源县牧羊犬布鲁氏杆菌病调查包守泰青海省门源县畜牧兽医站，青海门源810399摘要应用布鲁氏杆菌平板凝集反应实验，对来自青海省门源县大滩地区的120只牧羊犬血清样品进行抽样监测，结果检出牧羊犬阳性血型1份，阳性率为0.83%，说明该地区的牧羊犬群中存在着布鲁氏杆菌病感染的风险。

关键词门源县；牧羊犬；布鲁氏杆菌病；调查布鲁氏杆菌病是由布鲁氏杆菌所引起的一种人兽共患传染病，犬多呈隐性感染。

少数出现症状，主要以流产、生殖器发炎及各种组织出现局部病灶为特征。

布鲁氏杆菌有6个种，其中流产布鲁氏杆菌、马耳他布鲁氏杆菌、猪布鲁氏杆菌及犬布鲁氏杆菌能够感染犬。

布鲁氏杆菌有较强的抵抗力，在奶汁、尿液、水和潮湿的土壤中可存活120d。

病犬和带菌犬是主要的感染源。

受感染的妊娠母犬在分娩或流产时，大量布鲁氏杆菌随胎儿、胎水、胎衣等排出体外，并且其阴道分泌物及乳汁中均含有布鲁氏杆菌。

本病主要经消化道感染，易感犬摄取了被污染的饲料及饮水而感染。

另外布鲁氏杆菌也可经皮肤、黏膜入侵犬体，并且可垂直传播。

为摸清门源县大滩地区牧羊犬布鲁氏杆菌病的流行情况及疫病发展规律，切实加强预报能力，根据门源县动物疫病预防控制中心的安排部署，2014年4月在门源县大滩地区范围内抽样调查了牧羊犬布鲁氏杆菌病感染情况，现将结果报告如下。

1调查方法1）调查时间和范围。

2014年4月，在门源县大滩地区范围进行了牧羊犬的抽样监测工作。

2）采样方法和数量。

以在历史上发生过和疑似发病的区域为主。

本次抽样监测了大滩地区120只牧羊犬的血清120份。

3）监测方法。

参照《青海省2011年动物疫病监测实施方案》进行，所需各种诊断液均由青海省动物疫病预防控制中心提供。

应用布鲁氏杆菌平板凝集反应实验，按照各相关文献和部分规程，进行了操作及判定。

2调查结果2014年4月，在青海省门源县大滩地区，共检测牧羊犬血清120份，检出阳性血清1份，其阳性率为0.83%。

山东畜牧兽医2020年第41卷40 宠物犬的犬种布鲁氏菌病的诊断和治疗方法探讨 黄迪海①②郝文娟①②徐怀英①盛晓丹①②秦卓明①②①*①山东省健牧生物药业有限公司济南250100 ②济南市动物生物药品工程技术研究中心济南③山东省农业科学院家禽研究所济南）中图分类号：S858.292 文献标识码：B 文章编号：1007-1733(2020)09-0040-02布鲁氏菌病(Brucellosis)是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患的常见传染病。

犬种布鲁氏菌(B. canis)是布鲁氏菌属的一个种，其危害程度略低于羊、牛和猪种布鲁氏菌，主要感染犬，也可以感染猪、牛、羊等动物，对人的感染鲜有报道，但国内1980~1996年曾有人感染的案例[1,2,3]，潜在的公共卫生意义较大。

伴随着人民生活水平的提高，城镇家庭饲养宠物犬已十分普遍。

但是，在养犬过程中，人们对布鲁氏菌病的危害认知明显不足，众多基层兽医诊疗机构也缺乏布鲁氏菌病相关的诊断，导致该病难以确诊。

为正确应对犬种布鲁氏菌病，确保饲养人和宠物犬的健康，防患于未然，特提出如下针对性的处置方案。

1 犬种布鲁氏菌病的确诊1.1 病犬的临床特征（1）公犬常表现为附睾炎、阴囊水肿、前列腺炎和睾丸炎，甚至出现精子异常和不孕。

母犬常见妊娠期45~55d流产、持续排出棕色至黄色阴道分泌物、早期孕体吸收或产出死胎。

（2）椎间盘炎、关节炎、眼内炎、反复发热、乏力等共性特征应引起重视。

潜伏期或慢性稳定期的病症不明显。

组织学检查可见脾、淋巴结、肝、肾、睾丸等器官形成特征性肉芽肿。

1.2 血清学诊断采集犬血清，应用犬种布鲁氏菌抗原、标准阳性和阴性血清，或配套试剂盒进行检测。

一般先利用虎红平板凝集试验(RBT)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)或竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)进行初筛；然后，再应用试管凝集试验(SAT)或补体结合试验等方法进一步确诊。

如果出现血清学阳性结果，则怀疑宠物犬发生感染。

畜 牧 兽 医2021年第11期新农民动物感染布鲁氏杆菌病的实验室检测诊断方法宁 霞（甘肃省陇南市两当县畜牧兽医站，甘肃 两当 742400）摘要：布鲁氏杆菌病是一种流行性动物疾病，具有一定的传染性和危害性。

这就需要相关人员结合布鲁氏杆菌的病原特点、病理特征等进行分析与研究，采用科学合理的实验室检测诊断方法进行诊断，进而制定出针对性的预防措施，最大程度上降低动物布鲁氏杆菌病的发病。

本文对此进行了简要介绍，希望在动物布鲁氏杆菌病的诊断与预防方面起到一定的帮助。

关键词：动物布鲁氏杆菌病；检测；诊断动物布鲁氏杆菌病是一种常见的二类动物疫病，主要是由布鲁氏杆菌引发，这种病具有较强的潜伏期和高度的传染性。

尤其是羊、牛等家畜类，对于布鲁氏杆菌病具有较差的抗病机能。

该病的临床表现主要体现在母畜易流产、易发生子宫内膜炎、睾丸炎、久配不孕等。

随着畜牧业的不断发展，动物布鲁氏菌病的发病几率显著增加。

这就需要相关人员加强检测诊断，积极预防，避免布鲁氏杆菌病的大范围传播。

1 布鲁氏杆菌病的发病特点布鲁氏杆菌是一种革兰氏阴性菌，其菌种主要包括六种，即羊、牛、猪、鼠、绵阳及犬布氏杆菌。

但是动物布鲁氏杆菌病主要以羊、牛、猪较为普遍，在这三种疾病中，以羊布鲁氏杆菌病最为常见[1]。

布鲁氏杆菌病具有较强的潜伏性，不仅能够在土壤、水、皮毛等存活，而且还能够存活于部分食品中。

但是高温或者消毒剂能够在一定程度上杀死布鲁氏杆菌。

常见的消毒剂有福尔马林、生石灰水等。

布鲁氏杆菌病的发生与季节变化无关，而是呈现出局域性的传染流行。

一旦牛、羊等感染布鲁氏杆菌，其流产胎儿、胎衣、羊水、粪便、精液等都会存在大量的病菌，这些病菌可以通过消化道、呼吸道等进行直接性的接触传感，也会进一步将所接触到的饲料、土壤或者水源等加以污染，进而传染给其它的动物群体。

布鲁氏杆菌的潜伏期或长或短，长则达到半年，短则表现为十几天。

大部分动物的感染均为隐性感染，其明显症状就是流产。

家畜布氏杆菌病的临床症状家畜布氏杆菌病的诊断及防制-蘑菇种植技术布氏杆菌病全称是布鲁氏杆菌病,临床中通常简称为"布病",属于人畜共患病,会严重威胁畜牧业生产和人畜健康,病原主要是布氏杆菌。

布病在牛、羊、鹿群中很多见,一般都表现为慢性经过。

患病牛羊会出现流产、睾丸炎、腱鞘炎和关节炎,特征性病理变化是全身呈弥漫性状内皮细胞增生并且可见形成肉芽肿结节。

在牛、羊布病流行的过程中也会将人感染,尤其是产羔期感染最容易。

下面一起来具体了解一下：家畜布氏杆菌病的临床症状家畜布氏杆菌病的诊断及防制。

1、病原介绍布鲁氏杆菌是细小的短杆状或球杆状，没有芽孢产生，革兰氏染色呈阴性。

布鲁氏杆菌对热很敏感，置于70℃环境中10分钟，即可死亡；或者是接受阳光直射1小时也会死亡；在腐败的病料中会迅速丧失活力；常用消毒药一般也都能将其很快杀死。

布病的传染源是带菌的患病牛羊，病菌主要存在于患病牛羊的体内，可以随乳汁、脓汁、流产胎儿、胎衣、生殖道分泌物等排出体外，被污染的饲料和饮水以及周围的环境，通过消化道、呼吸道、皮肤黏膜和眼结膜等对其他家畜进行传播，布病的传播媒介也可以是吸血昆虫。

技术人员在没有采取防护措施的前提下就进行接生或者是处理流产物，通过受伤的皮肤，病菌就有可能会入侵人体；或者是跟家畜亲密接触之后没有洗手就吃东西、吸烟、揉眼睛等，都会把布鲁氏杆菌带入人体而导致感染；人食用带菌且未煮熟的奶、肉等也能引发布病。

2、流行情况自然感染病例主要在牛、山羊、绵羊和猪群中可见。

母畜的易感性比公畜高，成年家畜的易感性比幼畜高。

布病的主要传染源是病畜，布鲁氏杆菌主要可见存在于流产胎儿、胎衣、羊水、流产母畜的阴道分泌物及公畜的精液内，通常会因为接触流产时的排出物以及乳汁或者是交配行为而传播疾病。

布氏杆菌病通常呈地方性流行。

新发病的疫区通常会导致很多妊娠的母畜流产；老疫区母畜流产的情况逐渐减少，但是关节炎、子宫内膜炎、胎衣不下、屡配不孕、睾丸炎等情况却越来越多。

犬布鲁氏菌病的组织病理学观察及病原分布检测LI Ping;TU Rui;ZHU Zi-qi;LIU Xin;XIAO Qi-cheng;PENG Guang-neng;ZHONG Zhi-jun【摘要】布鲁氏菌病主要引起公犬的睾丸炎、附睾炎并造成不育.该文对一例患布病公犬各器官的组织进行了病理学以及抗原分布分析.结果表明,肝脏、脾脏、睾丸、淋巴结呈现广泛的炎性细胞浸润与实质细胞变性坏死,脾脏中观察到大量感染性肉芽肿.免疫组化结果表明,布鲁氏菌抗原主要分布于肝、脾、睾丸组织中的巨噬细胞和中性粒细胞胞浆中,与巨噬细胞的亲和力最强.【期刊名称】《南京晓庄学院学报》【年(卷),期】2018(034)006【总页数】5页(P1-5)【关键词】犬布鲁氏菌;组织病理学;免疫组化【作者】LI Ping;TU Rui;ZHU Zi-qi;LIU Xin;XIAO Qi-cheng;PENG Guang-neng;ZHONG Zhi-jun【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】S852.65布鲁氏菌病(简称布病)是一种严重的人畜共患传染病，主要危害动物及人的生殖系统[1].到目前为止，布鲁氏菌根据宿主特性分为10个种，其中以Brucellamelitensis(羊种布鲁氏菌)，Brucella abortus(牛种布鲁氏菌)，Brucella suis(猪种布鲁氏菌)和Brucella canis(犬种布鲁氏菌)[2]危害最严重.犬布病主要由犬种布鲁氏菌引起，虽然羊种布鲁氏菌和猪种布鲁氏菌也可感染犬，但只有犬种布鲁氏菌能导致典型的临床症状[3].不孕不育是犬布病带来的最大危害.公犬患病后常在急性期表现为睾丸炎、附睾炎，时间长久后睾丸萎缩、坏死[4]，怀孕母犬在妊娠早期出现胚胎吸收或晚期发生流产[5].在组织病理学上，主要表现为淋巴结网状内皮细胞异常增生，同时在肝脏、脾脏、睾丸等器官内形成肉芽肿[6-8].肉芽肿是本病的典型改变，其病灶中可见上皮样细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、网状内皮细胞以及浆细胞增生.肉芽肿进一步发生纤维化，最后导致组织器官硬化[9].犬布鲁氏菌靶向定居在皮质类甾醇依赖的组织，通常在患病公犬的前列腺、睾丸、附睾和母犬的子宫、胎盘及流产的胎儿内能检测到病原菌[6, 10].在当今社会，犬与人的关系十分密切，患布病犬是一种严重威胁人类健康及公共卫生安全的传染源.因此，应当加强对犬布病的防控.然而，犬布鲁氏菌病的研究起步较晚，国内有关犬布病组织病理学的研究报道较少，且很少有新的突破.本研究针对一例犬布鲁氏菌病进行组织病理学观察，了解其病理特征.再结合免疫组织化学技术(IHC)进行病原定位，揭示犬种布鲁氏菌的在组织中的分布情况及其组织嗜性，探讨组织病变与细菌分布之间的关系，为犬布鲁氏菌病的诊断以及发病机制的研究提供参考.1 材料与方法1.1 主要试剂PBS缓冲液(pH 7.4)、EDTA抗原修复液(pH 9.0)、苏木素染液、中性树脂：购自武汉谷歌生物科技有限公司；一抗(羊布病血清)、二抗(辣根过氧化物酶标记的兔-羊抗体)：中国兽药控制研究所；正常兔血清，购自Boster；DAB试剂盒，购自DAKO；无水乙醇、蒸馏水、石蜡、伊红、二甲苯、3%双氧水、盐酸、氨水等.1.2 病料2016年四川农业大学教学动物医院临床病例，患病公犬布鲁氏菌病胶体金检测阳性，主人放弃治疗后进行安乐死，取其肝脏、脾脏、肺、肾、腹股沟淋巴结以及睾丸组织样本保存于4%多聚甲醛溶液.1.3 方法1.3.1 石蜡切片制作将固定好的组织块用蒸馏水充分冲洗后，梯度酒精脱水(70%、80%、95%、100%)，二甲苯透明两次，恒温箱内石蜡包埋，切片机切片，温水面上展片后裱于载玻片，68 ℃恒温箱内烤片2 h.然后用二甲苯脱蜡、梯度酒精(100%、95%、85%、75%)去除二甲苯，HE常规染色.再依次经过梯度酒精常规脱水、二甲苯透明，最后滴加中性树胶固定封片.镜检并采集图像信息.图1 肝、脾、睾丸的组织病理学变化(HE.)A：肝门管区大量炎症细胞浸润增生(*)，标尺=100 μm；B：肝实质细胞颗粒变性、空泡变性(↑)，炎症细胞灶性浸润(*)，标尺=50 μm；C：脾脏红髓区出现大量肉芽肿(↑)，标尺=100 μm；D:脾脏肉芽肿中心为坏死灶，周围被大量淋巴细胞、嗜中性粒细胞和少数巨噬细胞围绕，标尺=50 μm；E-F:睾丸各级生精细胞、支持细胞严重变性坏死(↑)，间质中炎症细胞局灶性浸润增生(*)，E：标尺=100 μm，F：标尺=50 μm.1.3.2 免疫组化技术将石蜡切片先用二甲苯脱蜡两次，每次15 min，再依次经过无水乙醇(两次)、85%酒精、75%酒精各5 min复水，蒸馏水缓慢冲洗；将切片浸在抗原修复缓冲液中，微波炉内抗原修复20 min，过程中防止干片，自然冷却后用PBS缓冲液在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5 min；将修复后的切片放入3%H2O2溶液，室温下避光孵育25 min，PBS晃动洗涤3次，每次5 min；用组化笔在组织周围画圈以免抗体流失，圈内滴加10%正常兔血清室温封闭30 min；轻轻甩掉兔血清(勿洗)，在组织上滴加50 μL一抗(羊布病血清，1∶50稀释).每种器官组织切片中有1张作为阴性对照(PBS代替一抗).湿盒内4 ℃孵育过夜；PBS晃动洗涤3次，稍甩干后在圈内滴加50 μL的兔抗羊二抗(1∶100稀释)，室温孵育50 min；PBS洗涤3次，DAB显色5～30 min(显微镜下观察控制)，自来水冲洗切片终止显色；Harris苏木素复染细胞核3 min后水洗，1%的盐酸酒精分化数秒，自来水冲洗，氨水返蓝，自来水冲洗；最后将切片依次放入梯度酒精(75%～100%)各6 min脱水，二甲苯透明两次各5 min，稍晾干后，中性树胶封片[11].显微镜镜检，图像采集分析.1.3.3 结果判定IHC试验中，苏木素染色细胞核为蓝色、DAB显色为棕黄色的为阳性结果.通过显微镜下阳性细胞的多少来判定抗原的分布数量[12]，其中“-”表示无抗原信号；“+”表示400倍下，偶可见抗原信号，为弱阳性；“++”表示400倍下，可见5-10个抗原信号，为阳性；“+++”表示400倍下，可见10个以上抗原信号，为强阳性.2 结果2.1 组织病理学图2 淋巴结、肺脏、肾脏的组织病理学变化(HE)A:淋巴结内网状内皮细胞增生，并伴随纤维蛋白物质的沉积(*)，标尺=50 μm； B：淋巴结内部分淋巴细胞变性坏死(↑)，标尺=50 μm；C-D：肺泡腔有均质红染的渗出液(*)，肺泡壁轻度充血、淋巴细胞灶性增生(↑)，C:标尺=100 μm，D：标尺=50 μm；E:肾小球旁淋巴细胞浸润增生(↑)，标尺=100 μm；F:部分肾小管上皮细胞变性坏死(↑)，标尺=50 μm.肝脏的组织病理学变化主要集中在门管区，表现为以淋巴细胞为主的炎性细胞浸润(图1A).除此之外，肝索排列紊乱，肝血窦增宽，肝细胞界限不清，呈现广泛的颗粒变性、空泡变性，部分区域肝细胞坏死(图1B).脾脏的红髓区可见大量的肉芽肿(图1C)，中心为干酪样坏死灶，外层被几种不同的细胞环绕，包括大量的淋巴细胞、中性粒细胞，偶见巨噬细胞(图1D).睾丸中各级生精细胞、支持细胞严重变性坏死、消失，曲精小管结构严重破坏，呈空虚状态.同时，睾丸结缔组织增生，伴有大量的淋巴细胞、中性粒细胞以及少量的上皮样细胞、巨噬细胞浸润(图1E, F).这与临床中表现典型的睾丸炎相吻合.淋巴结的病理变化主要是淋巴细胞、网状内皮细胞的增生，部分区域淋巴细胞变性坏死，并伴随纤维蛋白物质的沉积(图2A, B).此外，还观察到几处蓝染的细菌团块. 肺脏主要表现为弥漫性浆液性炎症，肺泡腔内有大量均质红染的渗出物，肺泡壁血管轻度充血，周围间质中淋巴细胞局灶性浸润(图2C, D).肾脏的病变表现在肾小体血管极附近大量淋巴细胞的浸润，肾小球轻度肿大，肾小囊囊腔变窄(图2E).此外，部分肾小管上皮细胞变性坏死，并伴随着炎症细胞浸润(图2F).2.2 免疫组化所有的器官免疫组化检测均呈阳性(阴性对照均未出现非特异性染色).犬布鲁氏菌的抗原分布情况如下(表2).表2 各组织器官中抗原数量分布情况部位肝脏脾睾丸肾腹股沟淋巴结肺染色结果++++++++++++++注：无抗原信号(-)；400倍下，偶可见抗原信号(+)；400倍下，可见5-10个抗原信号(++)；400倍下，可见10个以上抗原信号(+++)IHC结果显示，肝脏内的抗原阳性信号分布广泛，尤其在门管区分布最多.其中，巨噬细胞、嗜中性粒细胞及部分肝实质细胞的胞浆染色最强烈，呈深棕色(图3A). 脾脏中检测到了大量抗原信号(图3B)，尤其是红髓区的巨噬细胞，染色呈强阳性. 睾丸中的抗原呈灶性或多灶性分布，其中在精原细胞、支持细胞的胞质中以及间质内浸润的嗜中性粒细胞、巨噬细胞的胞浆和坏死的细胞碎屑中检测到了大量的抗原信号，染色强烈(图3C).肾脏的IHC检测也呈阳性，但抗原数量相比上述器官较少.其阳性信号大部分分布在肾小管、集合管上皮细胞以及肾小球毛细血管内皮细胞的胞浆内，少部分存在于肾间质浸润的巨噬细胞和嗜中性粒细胞中(图3D).腹股沟淋巴结中布鲁氏菌抗原阳性信号数量较少，呈弥散状分布在髓质区巨噬细胞胞浆内及一些坏死的细胞碎片中(图3E).肺泡腔脱落的上皮细胞及肺泡间隔浸润的少量炎症细胞胞浆中也检测到了抗原信号(图3F).图3 各组织器官免疫组化结果A：肝门管区巨噬细胞、嗜中性粒细胞以及附近的肝实质细胞胞浆中检测到大量抗原信号，标尺=100 μm；B:脾脏红髓区检测到大量强阳性抗原信号，标尺=100 μm；C：睾丸的生精细胞、支持细胞及浸润的嗜中性粒细胞中存在大量的抗原信号，标尺=100 μm；D：肾小管、集合管上皮细胞、肾小球毛细血管内皮细胞及间质中浸润的炎症细胞内检测到抗原信号，标尺=100 μm；E：淋巴结中少量的巨噬细胞内出现抗原信号，标尺=100 μm；F：肺泡上皮细胞及肺泡间隔少量的炎症细胞中检测到抗原信号，标尺=100 μm.3 讨论此例犬布鲁氏菌病的组织病理学变化主要体现在免疫器官、生殖器官以及肝脏，这与以往的报道相似[5-6,8-9].免疫器官是机体最主要的防御系统，因此也是犬布鲁氏菌的重要入侵器官之一.组织病理学的结果表明，犬布鲁氏菌在侵入机体后，刺激脾脏、淋巴结等免疫器官，使其淋巴细胞、巨噬细胞增生.睾丸作为布鲁氏菌的主要靶器官，其生精细胞被严重破坏，造成公犬的不育，对犬的繁殖带来的重大危害.相关研究表明，布病犬的组织学变化存在性别差异，除生殖系统外，公犬脾脏的病变与母犬相比要轻微许多，一般不明显[13].然而在本次试验中的公犬病例中，脾脏的损害却十分严重，出现了大量肉芽肿.除性别差异外，流产胎儿与成年犬的病变器官也有所不同.此次研究中肺部仅呈现浆液性炎症，与其它器官相比组织损伤并不明显，这与其它成年布病犬的研究结果一致[9].以往大量的研究表明流产胎儿的病变主要体现在肺组织(如化脓性肺炎)而其它器官变化不明显，造成这种结果的原因可能与胎儿和子宫及阴道内携带大量病原菌的液体密切接触有关[13-14].此外，以往的文献表明，大部分患布病的公犬还表现出典型的前列腺炎[13]，少数病例可观察到葡萄膜炎、椎间盘脊椎炎以及轻微的脑膜炎[10]，但由于试验样品来源的限制，本研究未能全面探讨该布病犬所有组织器官的病变.本试验还采取了免疫组化方法来检测布鲁氏菌抗原在各组织器官内的分布，并通过阳性信号的强弱来判断犬布鲁氏菌对各类细胞的亲和程度.以往的研究表明，免疫组化在布鲁氏菌的定位分析应用中敏感性、特异性均良好[12-17].IHC结果显示布鲁氏菌抗原在肝脏、脾脏、睾丸中的分布最广泛、数量最多，而在病变明显的淋巴结中检测到的抗原数量较少，表明犬布鲁氏菌病的组织病理学损伤与器官中载菌数量之间不存在显著的相关性.Nurrul等在公羊感染布鲁氏菌的研究中也发现了类似的情况，推测这种结果可能与感染时间有关[16].然而本次试验仅针对单一病例，且淋巴结样本只取了腹股沟淋巴结，试验结果可能存在偏差.从各类阳性细胞的着色深浅情况来看，犬布鲁氏菌对巨噬细胞的亲和力最强，这与以往研究得出的结论一致[15-16].根据布鲁氏菌的致病机理可知，布鲁氏菌可以感染的细胞分为专业吞噬细胞(如巨噬细胞、单核细胞)和非专业吞噬细胞(如肾小管上皮细胞)，且与专业吞噬细胞的结合力更强[12, 18].布鲁氏菌在侵入巨噬细胞后，巨噬细胞内的吞噬体能迅速酸化使布鲁氏菌能够在其内存活和复制，因此巨噬细胞内的吞噬体对布鲁氏菌有保护作用，最终使布鲁氏菌达到一定数量，引起宿主细胞的死亡，释放出更多的细菌从而扩散，造成多脏器病变[19].在本试验中，肝、肾的病变分别主要体现在门管区和肾小球，且布鲁氏菌抗原也在上述区域被集中发现，一定程度上也体现了布鲁氏菌在体内依靠血源性侵染途径.此外，泌尿生殖系统、呼吸系统内阳性抗原的少量存在，提示了布病犬在一定时间内可能通过泌尿生殖道、呼吸道向外界排菌，造成传播.本试验通过对布病犬的组织病理学观察，发现肝脏、脾脏、睾丸、腹股沟淋巴结有显著的病理变化，表现为炎症细胞浸润增生，实质细胞变性坏死，脾脏出现肉芽肿样病变，肺和肾脏病变较轻.免疫组化技术显示了犬布鲁氏菌抗原的分布以及组织嗜性，结果表明布鲁氏菌抗原在肝脏、脾脏、睾丸中分布最广泛，且与巨噬细胞亲和力最强.【相关文献】[1]孙涛,赵宝,冉红志,等.布鲁氏菌病病原学研究进展[J].家畜生态学报,2014,35(1):85-87.[2]钟志军,徐杰,于爽,等.不同种型布鲁菌标准株的比较基因组学研究[J].中国兽医学报,2013,33(12):1783-1791.[3]Olsen SC, Palmer MV. 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