10基因工程抗体

抗体制备技术的发展及其医学应用抗体是在对抗原刺激的免疫应答中，B淋巴细胞产生的一类糖蛋白。

它是能与相应抗原特异的结合、产生各种免疫效应（生理效应）的球蛋白。

国际卫生组织将具有抗体活性及化学结构与抗体相似的一类蛋白统一命名为免疫球蛋白，它与抗体都是指同一类蛋白质。

抗体的2条重链和2条轻链根据氨基酸序列变化程度分为V区和C区，其抗原结合特异性主要由V区中高度变异的超变区决定，3 个超变区共同形成1个抗原决定簇互补的表面，故又称为互补决定区( comp lementarity determining region，CDR)。

常规的抗体制备是通过动物免疫并采集抗血清的方法产生的，因而抗血清通常含有针对其他无关抗原的抗体和血清中其他蛋白质成分。

一般的抗原分子大多含有多个不同的抗原决定簇，所以常规抗体也是针对多个不同抗原决定簇抗体的混合物。

即使是针对同一抗原决定簇的常规血清抗体，仍是由不同B细胞克隆产生的异质的抗体组成。

因而，常规血清抗体又称多克隆抗体（polyclonal antibody，PcAb），简称多抗。

多克隆抗体是由多克隆B细胞群产生的、针对多种抗原决定簇的混合抗体。

因为天然抗原是由多种抗原分子组成的，每种抗原分子又含有许多抗原决定簇，每一种抗原决定簇可激活相应的B细胞克隆，进而分化、成熟并合成相应的抗体。

由于常规抗体的多克隆性质，加之不同批次的抗体制剂质量差异很大，使它在免疫化学试验等使用中带来许多麻烦。

因此，制备针对预定抗原的特异性均质的且能保证无限量供应的抗体是免疫化学家长期梦寐以求的目标。

随着杂交瘤技术的诞生，这一目标得以实现。

1 抗体的发展抗体的研究过程经历了免疫血清学研究、单克隆抗体研究和基因工程抗体研究3个不同阶段。

1.1 免疫血清学研究阶段免疫动物产生的抗体是多种抗体的混合物，所以早期制备的抗体是多克隆抗体. 多克隆抗体是人类有目的地利用抗体的第1步，其在生物医学等方面的应用已有上百年的发展历史. 但多克隆抗体具有不均一性，特异性差且动物抗体注入人体会产生严重的过敏反应等特性，限制了其在疾病诊断和治疗中的应用。

基因工程抗体的例子
基因工程抗体是通过基因重组技术将特定抗体基因导入至其他生物细胞中，使其具备产生抗体的能力，从而实现大规模生产高效、高纯度的抗体。

以下是一些基因工程抗体的例子：
1. 重组抗体药物：例如，重组人源单克隆抗体药物，如阿达木单抗（Adalimumab）和帕尼单抗（Panitumumab），用于治疗自身免疫疾病和某些癌症。

2. 基因工程抗体治疗疫苗：例如，COVID-19疫苗中使用的mRNA 疫苗，通过基因工程技术将病毒的抗原编码序列导入到人体细胞中，诱导免疫系统产生抗体来抵抗病毒感染。

3. 重组抗体诊断试剂：例如，基因工程技术可用于生产特定病原体抗体，如新冠病毒SARS-CoV-2抗体，用于开发快速诊断试剂盒，帮助早期检测和诊断疾病。

4. 基因工程抗体治疗：例如，CAR-T细胞疗法，通过基因工程技术将患者自身T细胞中的受体基因改造，使其能够识别和杀死癌细胞，用于治疗某些血液恶性肿瘤。

5. 基因工程抗体生产：基因工程技术可用于大规模生产特定抗体，如重组人源单克隆抗体，用于研究和治疗领域。

这些基因工程抗体的例子说明了基因工程技术在抗体研究、生产和
应用中的重要性和广泛应用性。

免疫学名词解释1、免疫（Immunity）：免疫是指机体识别和清除一切抗原异物以保持自身稳定的生理反应，如果免疫系统失调，免疫反应过强、过弱或对自身成分发生免疫应答都将对机体造成损害。

2、免疫防御（immunologic defense）：免疫防御指防止外界病原体入侵和清除已入侵病原体及有害的生物性分子，此功能就是机体的抗感染免疫。

但异常情况下，免疫反应过强可引起超敏反应，而免疫功能过低则表现为易受感染或免疫缺陷病等。

3、免疫自稳：（immune homeostasis）：免疫自稳指机体对自身成分的耐受，对自身衰老和损伤细胞的清除，阻止外来异物入侵并通过免疫调节达到维持机体内环境稳定的功能。

4、免疫监视（immunologic surveillance）：免疫监视是指监督机体内环境出现的突变细胞及早期肿瘤，并予以清除。

若此功能失调，体内突变细胞失控，可导致肿瘤发生，若病毒感染不能及时被清除，而出现病毒持续性感染状态。

5、淋巴细胞归巢(lymphocyte homing )：成熟淋巴细胞离开中枢淋巴器官后，经血液循环趋向性迁移并定居在外周淋巴器官或组织的特定区域，称为淋巴细胞归巢。

6、淋巴细胞再循环(lymphocyte recirculation)：定居在外周淋巴器官的淋巴细胞，可由输出淋巴管经淋巴干、胸导管或右淋巴导管进入血液循环，淋巴细胞随血液循环到达外周免疫器官后，可穿越HEV，并重新分布于全身淋巴器官和组织。

淋巴细胞在血液、淋巴液、淋巴器官或组织间反复循环的过程称为淋巴细胞再循环。

7、抗原（Antigen，Ag）：是一类能刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答,并能与相应的免疫应答产物在体内或体外发生特异性结合的物质。

免疫原性(Immunogenicity):是指抗原能刺激特定的免疫细胞（克隆）,使之活化、增殖、分化,产生免疫效应物质(抗体和致敏淋巴细胞)的特性.免疫反应性(Immunoreactivity)；也称抗原性(Antigenicity):是指抗原与相应的免疫效应物质(抗体或/和致敏淋巴细胞）,在体内体外发生特异性结合的特性.8、半抗原（hapten）：仅有免疫反应性而无免疫原性的物质。

医师三基基本理论微生物学与免疫学（抗原一抗体反应、单克隆抗体的制备、沉淀反应）模拟试卷1(题后含答案及解析) 题型有：1. 简答题 2. A1型题1．试述抗原抗体反应的基本原理。

正确答案：抗原抗体反应是抗原和相应抗体之间的特异性结合反应，这种特异性结合是基于抗原决定簇(表位)与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，即两者分子构型高度互补，而且抗原表位与抗体超变区必须紧密接触，才可能有足够的结合力。

涉及知识点：抗原一抗体反应2．简述单克隆抗体制备的原理。

正确答案：(1)淋巴细胞产生抗体的克隆选择学说，即一个克隆产生一种抗体。

(2)将免疫B细胞与骨髓瘤细胞杂交，产生杂交瘤细胞，保持双方亲代细胞产生抗体与无限繁殖的特性。

(3)利用代谢缺陷补救机制筛选出杂交瘤细胞，经有限稀释法，并进行克隆化，然后大量培养增殖，制备所需的各种单克隆抗体。

涉及知识点：单克隆抗体的制备3．什么是基因工程抗体?正确答案：基因工程抗体又称基因重组抗体，即在充分认识Ig的基因结构和功能基础上，应用DNA重组和蛋白质工程技术，按需要在基因水平上对编码Ig分子的基因进行切割、拼接与修饰等，并导入受体细胞，使之表达出新型抗体分子。

涉及知识点：单克隆抗体的制备4．简述抗原一抗体反应的免疫学检测技术在临床试验诊断中的应用。

正确答案：(1)单向扩散试验：用于测定多种血浆蛋白(如IgG、IgA、IgM的定量测定)。

(2)双向扩散试验：可用于鉴定抗原或抗体的特征性(包括检测某种抗原，如AFP；检测某种抗体，如抗核抗体)，抗原半定量滴定抗体的效价等。

(3)直接凝集反应：用于抗原或抗体的定性或半定量的检测。

(4)间接凝集反应：用于各种抗体和可溶性抗原的检测。

(5)胶乳凝集试验：用于类风湿因子等的检测。

(6)免疫电泳：定性试验，主要应用于纯化抗原和抗体成分的分析及正常和异常免疫球蛋白的识别与鉴定。

(7)放射免疫与放射免疫分析：用于微量蛋白质、激涉及知识点：沉淀反应5．抗原抗体复合物吸引在一起依靠A．分子间吸引力B．流体静力吸引力C．电荷吸引力D．分子间吸引力、电荷吸引力E．分子间吸引力、流体静力吸引力、电荷吸引力正确答案：D 涉及知识点：抗原一抗体反应6．根据抗原抗体反应的特点，以下哪种说法是正确的A．抗原抗体结合牢固不易受环境影响B．解离后抗体不能再与抗原结合C．解离后抗体的活性和特异性保持不变D．解离后抗体结构活性改变E．解离后抗体的特异性改变正确答案：C 涉及知识点：抗原一抗体反应7．血清学实验的前带现象是指A．抗体过量B．抗原过量C．凝集明显D．沉淀物显著E．溶血明显正确答案：A 涉及知识点：抗原一抗体反应8．抗原抗体分子结合的最适比例称为最适比，此时A．上清中有少量游离抗体B．上清中有少量游离抗原C．上清中几乎无游离抗原或抗体存在D．出现沉淀物是肉眼看不见的E．上清中有少量的游离抗原抗体存在正确答案：C 涉及知识点：抗原一抗体反应9．抗原抗体反应中，抗体过剩时的沉淀反应称为A．前带B．后带C．带现象D．等价带E．前后带正确答案：A 涉及知识点：抗原一抗体反应10．血清学反应最适宜的pH为A．2．5～4．5B．5～6C．6～8D．7～9E．3～4正确答案：C 涉及知识点：抗原一抗体反应11．影响抗原抗体反应的因素有A．电解质、pH和反应体积B．抗原抗体的浓度、反应体积和温度C．电解质、pH和温度D．温度、pH和反应体积E．温度、反应体积和pH正确答案：C 涉及知识点：抗原一抗体反应12．风湿性心脏病的发病与下列哪项有关A．隐蔽抗原的释放B．交叉抗原的存在C．免疫调节功能缺陷D．自身抗原的改变E．隐蔽抗原的释放、自身抗原的改变正确答案：B 涉及知识点：抗原一抗体反应13．A群乙型溶血链球菌感染后引起肾炎是由于A．链球菌与肾小球基膜有共同的抗原B．促进隐蔽抗原的释放C．自身抗原的改变D．免疫调节功能异常E．促进隐蔽抗原的释放、自身抗原的改变正确答案：A 涉及知识点：抗原一抗体反应14．下述抗原抗体反应中，不属于沉淀反应的是A．单向免疫扩散试验B．双向免疫扩散试验C．抗球蛋白反应D．免疫比浊法E．火箭免疫电泳正确答案：C 涉及知识点：抗原一抗体反应15．能促进骨髓中多能造血干细胞定向分化与增殖的IL是A．IL一1B．IL一2C．IL一3D．IL一4E．1L一5正确答案：C 涉及知识点：单克隆抗体的制备16．单克隆与多克隆抗体的主要区别之一是A．与抗原结合牢固B．对热稳定C．高度特异性D．与之结合的抗原不同E．以上均不是正确答案：C 涉及知识点：单克隆抗体的制备17．基因工程中常用的载体有A．细菌B．病毒C．衣原体D．质粒和噬菌体E．支原体正确答案：D 涉及知识点：单克隆抗体的制备18．HAT培养基加入甲氨蝶呤的目的在于A．促进脾细胞的生长B．抑制融合细胞生长C．抑制骨髓瘤细胞生长D．抑制细菌生长E．促进融合细胞生长正确答案：C 涉及知识点：单克隆抗体的制备19．下列实验属于沉淀反应的是A．肥达反应B．外裴反应C．抗链球菌“0”实验D．Ascoli实验E．以上都不是正确答案：D 涉及知识点：沉淀反应20．关于“火箭电泳”，哪些叙述是正确的A．利用了“单向免疫扩散”的原理B．利用了“双向免疫扩散”的原理C．利用了“平板电泳”的原理D．由在“单向免疫扩散平板”两端加上电场而形成E．利用凝集反应的原理正确答案：D 涉及知识点：沉淀反应21．单向琼脂扩散法测定是A．定性实验，不能定量B．定量实验，不能定性C．可通过标准曲线求出待测样：本含量D．沉淀环大小可直接反映待测样本含量E．以上都不对正确答案：C 涉及知识点：沉淀反应22．单向琼脂扩散法检测时，沉淀环的大小与样品内抗原的含量呈A．反比关系B．对数关系C．直线关系D．正比关系E．函数关系正确答案：D 涉及知识点：沉淀反应23．下列哪一个试验不属于沉淀反应A．免疫比浊法B．双向免疫扩散法C．单向免疫扩散法D．Coomb试验E．环状沉淀反应正确答案：D 涉及知识点：沉淀反应24．散射免疫比浊法测定时，为了保证准确测定靶物质浓度，必须使A．检测抗原过量B．检测抗体过量C．充分稀释待测样品D．有足够强度的发射光E．B+D正确答案：B 涉及知识点：沉淀反应。

基因工程抗体的定义及种类
基因工程抗体是通过基因工程技术手段，将人工合成的抗体基因导入到生物体中，使其能够产生特定的抗体蛋白。

基因工程抗体具有高效、可定制、可扩展的特点，被广泛应用于生物研究、医学诊断和治疗等领域。

根据抗体来源的不同，基因工程抗体可以分为以下几类：
1. 全人源抗体：完全由人类基因编码的抗体，与人体内自然产生的抗体非常相似，因此具有较低的免疫原性和较高的亲和力，被广泛用于治疗人类疾病。

2. 人鼠嵌合抗体：将人源的可变区（variable region）基因与
小鼠的恒定区（constant region）基因组合，形成具有人源可
变区和小鼠源常变区的抗体。

这种抗体在结构上更接近于人体抗体，可以减少免疫反应。

3. 草鼠抗体：有时称为小鼠源抗体，是最早被研究和开发的基因工程抗体。

草鼠抗体的可变区与小鼠相同，常量区与人类相似。

尽管草鼠抗体具有较高的免疫原性，但其广泛用于研究和诊断领域。

4. 单特异性抗体：这是由单个抗体链变体或人工构建的抗体基因克隆产生的抗体。

与完整抗体相比，单特异性抗体更小，更便于制备和改造，广泛应用于研究和临床领域。

5. 二抗（二抗体）：由两种不同的单克隆抗体通过基因工程技
术合并而成，具有双重特异性。

这种抗体可用于治疗癌症、自身免疫性疾病等。

总的来说，基因工程抗体的种类非常丰富，每一种都具有特定的特点和应用价值。

随着基因工程技术的不断发展，未来还会有更多新型的基因工程抗体涌现。