肝细胞生长因子的生物学应用实验研究进展(1)

生长因子的生物学功能与应用生长因子是细胞的生长、增殖和发育不可或缺的信号传递分子。

在人体内，生长因子分布广泛，影响多个器官和组织的发育、修复和再生。

生长因子也成为人类健康领域研究热点之一，目前已经有许多生长因子在医学、农业等领域得到应用。

本文将主要介绍生长因子的生物学功能和应用。

一、生长因子的生物学功能1.1 促进细胞增殖生长因子可以直接作用于细胞表面受体，促进细胞增殖和分裂。

例如，表皮生长因子（EGF）可以刺激表皮细胞的增殖，加速伤口愈合。

由此，EGF被广泛地用于皮肤创伤和烧伤的治疗。

1.2 促进细胞分化生长因子还可以促进细胞分化成特定的细胞类型。

例如神经生长因子（NGF）可以促进神经元的生长和发育；骨形态发生蛋白（BMP）可以促进骨细胞的分化，形成新的骨组织。

这种特定的细胞分化作用被广泛应用于神经系统和骨科领域的治疗中。

1.3 促进器官发育生长因子也可以参与整个器官的发育过程。

例如，多种细胞因子参与心肌细胞的发育。

缺乏心肌细胞的生长因子或者信号通路异常都可能导致先天性心脏病的发生。

二、生长因子的应用2.1 医药领域生长因子在医药领域中的应用主要是为了促进人体组织的生长和修复。

生长因子在愈合创伤、手术和器官移植等方面得到了广泛地应用。

例如，FGF、G-CSF等生长因子可以刺激血管和免疫细胞的增殖，加速损伤部位的修复。

利用生长因子进行组织工程也是在发展中的一种新型治疗方法，在心血管、肝、神经系统和造血等领域中有较好的应用前景。

2.2 农业领域在农业领域中，生长因子主要用于促进植物的生长和产量。

植物生长因子与动物生长因子有着相同的作用原理：可以直接增加植物的细胞分裂和伸长，推进植物的成长。

目前，植物生长因子种类也越来越多，应用的范围也在扩大。

例如植物生长素可以促进植物开花、结实，还可以防止落叶、促进果实的舒缓。

2.3 航空、航天领域在航空、航天领域，生长因子也得到了广泛的应用。

例如，在太空船上，航天人员由于长期处于严重缺乏重力环境下，身体免疫、肌肉萎缩、骨质疏松等问题频发。

肝细胞生长因子(HGF)诱导肝癌Huh7细胞发生上皮间质转化(EMT)后细胞膜表面糖蛋白糖谱的变化莫翠菊;秦雪;康晓楠;彭契六;江凯;卢宇;隋靖喆;翟励敏;刘银坤【摘要】目的应用凝集素芯片技术寻找肝癌细胞表面转移相关的特征性糖谱.方法应用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)诱导建立肝癌上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)细胞模型.通过凝集素芯片比较诱导前后细胞膜的糖谱改变,采用凝集素印迹和荧光细胞凝集素免疫组化方法验证芯片结果.结果诱导后细胞对凝集素ACL、BPL、JAC、MPL、PHA-E、SBA和SNA 的亲和作用减弱,而对凝集素AAL、ConA、DBA、GSLⅡ、ECL、HAL、LCA、LTL、NML、NPL、PHA-L、PTLⅡ和WFL的亲和作用增强.提示诱导后肝癌细胞表面出现了黏蛋白T/Tn抗原、平分型N-乙酰葡萄糖胺、α2,6唾液酸和末端a或β连接的N-乙酰半乳糖胺结构减少;而末端和核心岩藻糖、高甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺p 1,6分支和复杂型寡糖分支结构增多.结论肝癌细胞发生EMT过程中细胞膜表面糖链结构改变,提示糖链结构与肝癌的转移密切相关,为有效控制肝癌转移、改善预后提供了新思路.【期刊名称】《复旦学报（医学版）》【年(卷),期】2014(041)002【总页数】7页(P198-204)【关键词】凝集素芯片;糖谱;肝癌(HCC);上皮间质转化(EMT);肝细胞生长因子(HGF)【作者】莫翠菊;秦雪;康晓楠;彭契六;江凯;卢宇;隋靖喆;翟励敏;刘银坤【作者单位】广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;复旦大学生物医学研究院上海200032;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032;复旦大学生物医学研究院上海200032;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;广西医科大学第一附属医院检验科南宁530021;复旦大学附属中山医院肝癌研究所上海200032;复旦大学生物医学研究院上海200032【正文语种】中文【中图分类】R392.12蛋白质糖基化是翻译时一种重要的共修饰方式，蛋白质糖基化修饰伴随多种肿瘤的发生和侵袭转移，并会随着病情而改变[1]。

生长因子的作用机制和治疗应用生长因子是一类具有生物活性的蛋白质，它们能够刺激细胞增殖、分化、成熟和功能发挥。

人类体内存在多种生长因子，这些生长因子的功能不同，作用于不同的细胞类型和组织器官。

生长因子对于调控机体的生命活动、维持健康具有重要作用，因此，生长因子的研究和应用十分重要。

生长因子的作用机制生长因子首先与相应的受体结合，通过受体的激活和信号传递，调控下游的多个生物学过程，包括基因表达、细胞增殖、分化、成熟和功能发挥等。

以表皮生长因子为例，它与表皮生长因子受体结合后，激活下游的信号通路，促进细胞的增殖和分化，并参与了皮肤修复和再生的过程。

生长因子的作用机制十分复杂，包括多种信号通路的交汇，其中有些信号通路相互作用、交叉调控，进一步增加了生长因子对生命系统的调控。

生长因子的治疗应用生长因子为多种疾病的治疗提供了新的思路和方法。

目前已经有多种生长因子被应用于临床治疗，包括单独应用或与其他治疗手段联合应用。

以下是几个典型的临床应用案例：1. 血小板衍生生长因子（PDGF）和纤维连接蛋白（FGF）等生长因子可用于促进组织修复和再生。

例如，在骨折和牙槽骨缺损等情况下，通过向患者注射这些生长因子，可促进骨头和牙槽骨的再生，缩短治疗时间。

2. 表皮生长因子（EGF）和角质细胞生长因子（KGF）等生长因子可用于治疗皮肤损伤和失真等问题。

例如，在烧伤、切割伤和手术切口愈合等情况下，通过外敷含有这些生长因子的药物，可促进皮肤细胞的增殖和修复，加速皮肤的愈合。

3. 肝生长因子（HGF）等生长因子可用于治疗肝病和心血管疾病等问题。

例如，在肝病患者中，通过向患者注射肝生长因子或使用基因治疗的方式，可促进肝细胞的增殖和修复，维持肝功能。

需要注意的是，生长因子虽然在治疗上具有广泛的应用前景，但也存在一些问题需要解决。

首先，由于生长因子作用机制的复杂性，其治疗效果难以预测和控制；其次，生长因子在大剂量应用时可能出现毒副作用，需谨慎调控；此外，生长因子治疗的经济成本较高，需要进一步优化和降低。

生长因子及其受体在肝癌中的作用探究肝癌是一种以肝细胞为起源的癌症，它是全球第四大癌症死因。

肝癌的预后通常很差，因此，研究肝癌的发病机制以及探究潜在的治疗方法变得至关重要。

生长因子及其受体在肝癌中的作用是一个研究的热点，下面将对其进行深入探讨。

一、生长因子及其受体简介生长因子是一类内源性蛋白质分子，它们在细胞增殖和分化中起关键作用。

生长因子分泌到周围的细胞或直接与受体结合，调控细胞的生物学行为，如增殖、分化、凋亡等。

目前已知的生长因子有很多种，例如表皮生长因子（EGF）、胰岛素样生长因子（IGF）等。

生长因子的作用是通过结合相应的受体来实现的。

受体是负责接受生长因子信号的膜蛋白。

它们属于跨膜受体家族，通过膜内外的区域进行信号传递。

感受到生长因子的受体会成为激活状态，从而引发生物学反应。

二、生长因子及其受体在肝癌中的作用生长因子及其受体在肝癌中发挥着重要的作用。

从肝癌细胞的角度来看，它们的表达经常异常增加，这一现象与肝癌的发生和进展有关。

目前研究发现，EGF、FGF、HGF、IGF等多种生长因子及其受体在肝癌中发挥着重要的作用。

1. EGF及其受体在肝癌中的作用EGF作为一种重要的生长因子，与EGF受体结合后，可以引起多种细胞信号通路的激活，从而促进肝癌的增殖和转移。

研究表明，EGF及其受体（EGFR）在肝癌中的表达量与肝癌的发生、病程、转移等密切相关。

因此EGFR被视为肝癌表面标志物和治疗靶点。

2. FGF及其受体在肝癌中的作用FGF是另一种常见的生长因子，它的受体与制动肝癌细胞增殖、促进血管生成、调控肝癌转移等。

研究表明，FGF和其受体（FGFR）信号通路在肝癌的发生和发展中起着至关重要的作用。

3. HGF及其受体在肝癌中的作用HGF是一种重要的生长因子，可以通过与肝细胞生长因子受体（c-met）结合，促进肝癌的增殖和转移。

研究表明，c-met是一种重要的促进肝癌增殖和转移的信号通路，是新一代抗肿瘤药物的潜在治疗靶点。

肝细胞生物学的研究和应用肝是人体内最大的内脏器官，其主要功能是合成、调节和储存重要代谢产物。

肝脏还参与许多重要生物过程，如血糖调节、脂肪代谢、胆固醇合成、激素合成和解毒。

肝细胞是肝脏的主要细胞类型，其特殊结构和功能使其成为了许多生物学研究、药物研发和临床应用的理想模型。

肝细胞的结构和功能肝细胞是一个六面体细胞，在外观上有羊角状突起。

肝细胞是功能复杂的细胞，有许多细胞器和分子机制参与合成、代谢和分泌。

肝细胞的主要功能包括蛋白质、核酸和脂类的合成，代谢有机物和无机物，然后将代谢产物转移到周围组织或循环系统中。

肝细胞在人体中起着很重要的作用，主要涉及以下四方面：1. 代谢：肝细胞参与碳水化合物、脂肪、蛋白质代谢过程，可以通过无氧代谢将乳酸和糖原转化为能量源供给其他组织和器官。

2. 分泌：肝细胞产生和分泌许多生物活性分子，如胆汁酸、胆固醇、脂蛋白、维生素D代谢物和红细胞生长因子等，这些物质对身体健康和生命活动具有重要影响。

3. 解毒：肝细胞是人体内的主要解毒器官，可分解或排出体内各种有害物质，如酒精、药物和多种毒素。

4. 肝脏再生和修复：肝细胞具有再生能力，可以快速增殖以修复受损的肝脏组织。

肝细胞生物学的研究方法肝细胞生物学研究是大量基础研究的基础，也是促进肝脏疾病诊断、治疗和预防的关键。

现在，人们可以使用多种技术研究肝细胞的结构、功能和生物学行为。

以下是一些常见的肝细胞研究技术。

1. 细胞培养模型：细胞培养模型是最基本的肝细胞研究技术。

使用这种方法，人们可以将肝细胞培养在人工培养基中，还可以添加特定的细胞因子和分子，以模拟体内的肝脏环境。

这种方法可以研究肝细胞的基本生物学行为和代谢过程，也可以用于研究新药物的毒理学特性和作用机制。

2. 基因敲除技术：基因敲除技术是一种修改肝细胞基因表达的方法，可以研究肝细胞功能和基因调节的机制。

使用该技术可以探讨细胞内信号传导的作用，还可以分析细胞分化和细胞再生的机制。

c-met是一种由c-met原癌基因编码的蛋白产物，为肝细胞生长因子受体，具有酪氨酸激酶活性，与多种癌基因产物和调节蛋白相关，参与细胞信息传导、细胞骨架重排的调控，是细胞增殖、分化和运动的重要因素。

目前认为，c-met与多种癌的发生和转移密切相关，研究表明，许多肿瘤病人在其肿瘤的发生和转移过程中均有c-met过度表达和基因扩增。

本文就c-met在大肠肿瘤中的作用作一综述。

1 c-met基因的结构和功能1984年Cooper在研究人骨肉瘤Hos细胞系时，克隆出了一个具有转化活性的片段，定名为c-met ［1］。

c-met位于人类7号染色体长臂（7q31）。

c-met基因大小约110kb，包括21个外显子。

启动子区域有许多调控序列，如IL-6和HGF等［2］。

在不同组织和细胞系中c-met的转录产物有多种。

如9.0、7.0、6.0、5和3.5的mRNA，这可能是由于转录的启始位点及剪切的方式不同造成的。

各种转录产物的功能尚不清楚，但某些转录产物只在特定的癌组织中出现，因此，这些转录产物可能与特定组织的癌变有关。

9.0kb转录产物较普遍存在，是编码正常膜受体的转录产物。

其前体蛋白分子量为140KD，经糖基化作用产生170KD的糖蛋白。

进而切割成5 0KD的α亚基和145kD的β亚基，两个亚基以二硫键相连形成190kD的成熟受体蛋白。

成熟的受体蛋白位于细胞膜上。

β亚基有胞外区、跨膜区和胞内区。

α亚基只有胞外部分，借助于二硫键附于β亚基上。

α亚基和β亚基的胞外区是配体识别部位，而胞内部分具有酪氨酸激酶活性。

c-met受体的配体是肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF），也称为离散因子（scatter facˉtor）。

由于c-met在不同细胞、不同分化阶段作用的底物不同，使其在特定的条件下表现出多种功能:（1）促进肝细胞、内皮细胞和黑色素细胞的分裂;（2）引起上皮细胞的分散，在胚胎发育过程中控制细胞的移动;（3）诱导细胞形态变化［3］。

c-met是一种由c-met原癌基因编码的蛋白产物，为肝细胞生长因子受体，具有酪氨酸激酶活性，与多种癌基因产物和调节蛋白相关，参与细胞信息传导、细胞骨架重排的调控，是细胞增殖、分化和运动的重要因素。

目前认为，c-met与多种癌的发生和转移密切相关，研究表明，许多肿瘤病人在其肿瘤的发生和转移过程中均有c-met过度表达和基因扩增。

本文就c-met在大肠肿瘤中的作用作一综述。

1 c-met基因的结构和功能1984年Cooper在研究人骨肉瘤Hos细胞系时，克隆出了一个具有转化活性的片段，定名为c-met ［1］。

c-met位于人类7号染色体长臂（7q31）。

c-met基因大小约110kb，包括21个外显子。

启动子区域有许多调控序列，如IL-6和HGF等［2］。

在不同组织和细胞系中c-met的转录产物有多种。

如9.0、7.0、6.0、5和3.5的mRNA，这可能是由于转录的启始位点及剪切的方式不同造成的。

各种转录产物的功能尚不清楚，但某些转录产物只在特定的癌组织中出现，因此，这些转录产物可能与特定组织的癌变有关。

9.0kb转录产物较普遍存在，是编码正常膜受体的转录产物。

其前体蛋白分子量为140KD，经糖基化作用产生170KD的糖蛋白。

进而切割成5 0KD的α亚基和145kD的β亚基，两个亚基以二硫键相连形成190kD的成熟受体蛋白。

成熟的受体蛋白位于细胞膜上。

β亚基有胞外区、跨膜区和胞内区。

α亚基只有胞外部分，借助于二硫键附于β亚基上。

α亚基和β亚基的胞外区是配体识别部位，而胞内部分具有酪氨酸激酶活性。

c-met受体的配体是肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF），也称为离散因子（scatter facˉtor）。

由于c-met在不同细胞、不同分化阶段作用的底物不同，使其在特定的条件下表现出多种功能:（1）促进肝细胞、内皮细胞和黑色素细胞的分裂;（2）引起上皮细胞的分散，在胚胎发育过程中控制细胞的移动;（3）诱导细胞形态变化［3］。

生物技术进展２０２１年㊀第１１卷㊀第２期㊀１４８~１５４ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ㊀ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１进展评述Ｒｅｖｉｅｗｓ㊀收稿日期:２０２０￣１０￣１２ꎻ接受日期:２０２１￣０１￣１２㊀联系方式:肖金平Ｅ￣ｍａｉｌ:１５５８０８６５５７＠ｑｑ.ｃｏｍꎻ∗通信作者李程Ｅ￣ｍａｉｌ:５９６８１３７４＠ｑｑ.ｃｏｍ肝脏类器官的研究及应用进展肖金平ꎬ㊀曹云娣ꎬ㊀李程∗ꎬ㊀孙志坚浙江科途医学科技有限公司ꎬ浙江湖州３１３０００摘㊀要:肝脏疾病易感性差异大且个体间的肝脏细胞存在明显的异质性ꎬ因此开发体外能够长期存活并具有代谢功能的人体类肝组织细胞模型ꎬ对治疗终末期肝病㊁开展肝脏致病机理研究及药物筛选具有重要意义ꎮ过去十年中ꎬ体外三维类器官模型发展迅猛ꎬ为疾病模拟㊁精准化治疗领域的研究提供了新的工具ꎬ显示出巨大潜力ꎮ肝脏类器官具有患者的基因表达与突变特征ꎬ在体外能够较长时间地保持肝脏细胞功能ꎬ已被应用于疾病模拟及药物有效性研究ꎬ并具有进行原位或异位移植发挥治疗作用的应用潜能ꎮ就干细胞㊁肝脏原代细胞等不同来源的肝脏类器官的发展及近年的研究进展作了综述ꎬ以期为肝脏类器官在疾病建模㊁药物发现和器官移植领域的研究和应用提供新的思路ꎮ关键词:肝脏类器官ꎻ模型构建ꎻ药物研发ꎻ器官移植ＤＯＩ:１０.１９５８６/ｊ.２０９５￣２３４１.２０２０.０１２６中图分类号:Ｒ５７５ꎬＱ４８５㊀㊀㊀文献标识码:ＡＲｅｓｅａｒｃｈＰｒｏｇｒｅｓｓａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＬｉｖｅｒＯｒｇａｎｏｉｄｓＸＩＡＯＪｉｎｐｉｎｇꎬＣＡＯＹｕｎｄｉꎬＬＩＣｈｅｎｇ∗ꎬＳＵＮＺｈｉｊｉａｎＺｈｅｊｉａｎｇＫｅｔｕＭｅｄｉｃａｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ.ꎬＬｔｄ.ꎬＺｈｅｊｉａｎｇＨｕｚｈｏｕ３１３０００ꎬＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ:Ｔｈｅｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙｔｏｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅａｎｄｔｈｅｌｉｖｅｒｃｅｌｌｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙｉｓｈｉｇｈｌｙｖａｒｉａｂｌｅꎬｎｅｃｅｓｓｉｔａｔｉｎｇｉｎｖｉｔｒｏｐｅｒｓｏｎａｌｉｚｅｄｈｅｐａｔｉｃｍｏｄｅｌｓｙｓｔｅｍｔｏｗａｒｄｓｄｉｓｅａｓｅｍｏｄｅｌｉｎｇꎬｄｒｕｇｄｉｓｃｏｖｅｒｙꎬａｎｄｄｒｕｇｔｏｘｉｃｉｔｙｓｔｕｄｉｅｓ.Ｔｈｅｒｅｉｓｍｕｃｈａｄｖａｎｃｅｍｅｎｔｉｎｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆ３Ｄｉｎｖｉｔｒｏｍｏｄｅｌｓｉｎｔｈｅｐａｓｔｄｅｃａｄｅ.Ｔｈｅｙｐｒｏｖｉｄｅａｐｏｗｅｒｆｕｌｔｏｏｌｆｏｒｍｏｄｅｌｉｎｇｐａｔｉｅｎｔ￣ｓｐｅｃｉｆｉｃｄｉｓｅａｓｅａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｉｎｇｐｅｒｓｏｎａｌｉｚｅｄｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｐｐｒｏａｃｈｅｓ.Ｌｉｖｅｒｏｒｇａｎｏｉｄｓｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓｔｈｅｏｒｉｇｉｎａｌｐａｔｉｅｎｔ￣ｓｐｅｃｉｆｉｆｉｃｇｅｎｅｔｉｃｓｉｇｎａｔｕｒｅａｎｄｍｕｔａｔｉｏｎｓꎬａｎｄｍａｉｎｔａｉｎｌｉｖｅｒｃｅｌｌｓｆｕｎｃｔｉｏｎｓｉｎｖｉｔｒｏｆｏｒａｌｏｎｇｔｉｍｅ.Ｔｈｅｙｈａｖｅｂｅｅｎｕｓｅｄｔｏｍｉｍｉｃｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅꎬｔｅｓｔｄｒｕｇｅｆｆｉｃａｃｙａｎｄｔｏｘｉｃｉｔｙꎬｏｆｆｅｒｉｎｇｎｅｗｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓｉｎｏｒｇａｎｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ.Ｔｈｉｓｒｅｖｉｅｗｅｖａｌｕａｔｅｄｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓａｎｄｔｈｅｃｕｒｒｅｎｔａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｌｉｖｅｒｏｒｇａｎｏｉｄｓｆｒｏｍｓｔｅｍｃｅｌｌｓｏｒｐｒｉｍａｒｙｃｅｌｌｓｉｎｄｉｓｅａｓｅｍｏｄｅｌｌｉｎｇꎬｄｒｕｇｖａｌｉｄａｔｉｏｎａｎｄｔｏｘｉｃｉｔｙａｓｓｅｓｓｍｅｎｔꎬｗｈｉｃｈｗａｓｅｘｐｅｃｔｅｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅｎｅｗｉｄｅａｓｆｏｒｒｅｓｅａｒｃｈａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｌｉｖｅｒｏｒｇａｎｏｉｄｓｉｎｄｉｓｅａｓｅｍｏｄｅｌｉｎｇꎬｄｒｕｇｖａｌｉｄａｔｉｏｎꎬａｎｄｏｒｇａｎｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ｌｉｖｅｒｏｒｇａｎｏｉｄｓꎻｍｏｄｅｌｂｕｉｌｄｉｎｇꎻｄｒｕｇｖａｌｉｄａｔｉｏｎꎻｏｒｇａｎｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ㊀㊀类器官(ｏｒｇａｎｏｉｄｓ)是一种通过体外模拟器官微环境ꎬ由干细胞或其衍生而来的各种类型细胞经三维(３￣ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌꎬ３Ｄ)培养形成的器官特异性细胞集合[１]ꎮ作为体外形成的一种３Ｄ细胞簇ꎬ类器官不仅具有自我更新和自我组织的能力ꎬ并且能够重现器官的体内功能[２￣３]ꎮ近年来ꎬ类器官培养技术取得了重大进展ꎬ其中已报道的包括胰腺[４]㊁肠[５]㊁胃[６]㊁肺[７]和前列腺[８]等多种类器官的构建及应用ꎬ不仅在体外可连续传代ꎬ而且能保持相对稳定的遗传学特征和表型[９]ꎮ不同病因所致的肝病死亡已成为全球疾病死亡的主要原因之一ꎬ由于肝细胞在体外培养的增殖能力有限[１０]ꎻ同时ꎬ细胞株㊁细胞系㊁小鼠等构建的肝脏疾病模型在遗传代谢机制上和人具有较大差异ꎬ使其研究结果较难向临床转化ꎻ在体外肝细胞分子机制和药物疗效的研究中通常采用二维(２Ｄ)培养的肝细胞作为研究模型ꎬ但２Ｄ单层培养环境容易迫使肝细胞适应塑料表面环境ꎬ进而. All Rights Reserved.影响肝细胞的重要代谢途径ꎬ引起细胞骨架变化ꎬ使其失去细胞极性和酶活性ꎬ同时无法再现体内肝细胞的结构㊁生理和功能特征[１１￣１２]ꎮ而３Ｄ培养技术摆脱了上述条件的限制ꎬ在肝细胞疾病建模㊁肝脏移植及药物发现等方面具有较大的应用前景ꎮ１㊀肝脏类器官技术的发展长久以来ꎬ体外长期培养和扩增人源肝细胞一直是制约肝脏疾病基础和临床转化研究的瓶颈[１０￣１３]ꎮ目前人源肝脏类器官可由永生化细胞系㊁干细胞及肝脏原代细胞等多种来源的细胞ꎬ在体外通过悬浮球体培养㊁基质胶㊁支架等构建ꎮ本文着重对干细胞㊁成纤维细胞转分化和肝脏原代细胞此三种细胞来源的肝脏类器官进展进行探讨ꎮ１.１㊀干细胞来源的肝脏类器官干细胞是一种具有多种分化潜能的细胞群ꎬ是机体组织㊁器官再生的基础[１４]ꎮ干细胞来源的肝脏类器官主要由两种类型的干细胞产生:胚胎干细胞(ｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌꎬＥＳ细胞)和诱导多能干细胞(ｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓꎬｉＰＳＣ)ꎮ研究发现ꎬ通过诱导小鼠或人的ＥＳ细胞可定向分化形成类肝细胞ꎬ其分化效率高达７０％~８０％[１５]ꎮ据报道ꎬ通过ＥＳ细胞分化形成的类肝细胞具有上皮细胞样形态ꎬ能够实现糖原积累㊁分泌肝脏功能蛋白ＡＬＢＵＭＩＮ㊁转运ＩＣＧ等肝功能ꎬ部分具有ＣＹＰ４５０酶活性[１６￣１７]ꎮ该来源的类肝细胞可用于ＨＣＶ病毒感染ꎬ且可整合至ＣＣＬ４诱导㊁Ｆａｈ缺陷㊁ＤＰＰ４缺陷的小鼠肝损伤模型中[１８￣１９]ꎮＥＳ细胞虽然经过诱导后能获得ＣＹＰ４５０酶的一些特定的肝脏功能ꎬ但在药物代谢能力方面与原代肝脏细胞却相差很大ꎬ需要改进分化或培养条件才能达到研究所需要求ꎬ且该类细胞分化后一般会混杂未分化的细胞ꎬ很容易在移植时形成畸胎瘤ꎬ同时在异体细胞移植时易存在免疫排斥等问题[１５ꎬ２０￣２１]ꎮｉＰＳＣ来源的肝脏类器官主要通过逐步诱导分化的方式形成ꎮ研究发现利用特异性过表达转录因子对小鼠/人成体细胞诱导后利用重编程技术形成的ｉＰＳＣ细胞也具有上皮样细胞形态ꎬ能够实现糖原积累㊁分泌肝脏功能蛋白ＡＬＢＵＭＩＮ及吸收ＩＣＧ等功能[２２￣２３]ꎮ但２０１１年ꎬ有研究者将ｉＰＳＣ通过诱导分化形成数量较多的类肝实质细胞移植入由二甲基亚硝胺(ｄｉｍｅｔｈｙｌｎｉｔｒｏｓａｍｉｎｅꎬＤＭＮ)诱导的肝纤维化小鼠体内后ꎬ其整合效率仅为８％~１５％ꎬ且移植后的小鼠体内含人ＡＬＢＵＭＩＮ的浓度极低ꎬ表明通过此诱导方法形成的类肝实质细胞中大部分肝细胞并不具有成熟的肝功能[２４]ꎮ随后ꎬＴａｋｅｂｅ等[２５]于２０１３年将ｉＰＳＣ来源诱导的肝细胞和人静脉内皮细胞及间充干细胞于基质胶平板上共培养后形成了类似于肝芽组织的聚合物ꎬ该３Ｄ聚合物成为了最初由ｉＰＳＣ源性肝细胞类器官雏形ꎮ自此经过不断优化和改进ꎬ通过将ｉＰＳＣ逐步诱导形成终末内胚层ꎬ然后到前祖细胞ꎬ最后形成肝细胞后ꎮＯｇａｗａ等[２６]通过加入维甲酸㊁成纤维细胞生长因子１０㊁活化素Ａ等诱导ｉＰＳＣ向胆管细胞类器官分化ꎮＳａｍｐａｚｉｏｔｉｓ等[２７]通过添加抑瘤素Ｍ㊁肝细胞生长因子等使其向肝细胞类器官分化ꎮ２０１７年Ｗｕ等[２８]通过向ｉＰＳＣ来源的类器官经典培养基中添加２５％的ＭＴｅＳＲ(主要成分为维生素Ｃ㊁成纤维细胞生长因子２等)使其向内胚层及小部分中胚层分化ꎬ实现了肝细胞样细胞和胆管细胞样细胞的共分化ꎬ并在最后培养阶段加入胆固醇混合物显著促进了肝－胆类器官的形成与成熟ꎮ然而ꎬ多能干细胞在培养过程中需要添加多种生长因子进行诱导分化形成肝脏类器官和促进该类器官成熟ꎬ该过程耗时较长ꎬ且存在成本较高㊁诱导和培养过程中容易因人为因素造成前后形成的肝脏类器官结构不一致等问题ꎮ同时ꎬ人们发现多能干细胞形成的类器官在培养过程中存在生长停滞㊁组织特征表现异常的问题ꎬ使其在生物医学领域的应用受到了限制[２９￣３０]ꎮ２０２０年Ｊｅｒｅｍｙ等[３１]通过基因调控网络(ｇｅｎｅｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｎｅｔｗｏｒｋｓꎬＧＲＮ)系统技术和ＣＲＩＳＰＲ技术在体外１７ｄ内即可构建出具有血液系统和４种主要细胞类型(包括肝细胞㊁胆管细胞㊁内皮细胞和星状细胞群)的人肝脏类器官ꎬ且该类器官在能量储存㊁化学物质转运㊁脂肪积累㊁酶的活性及蛋白质产生方面与成年人体肝脏功能较为接近ꎬ但研究人员指出该方法形成的类器官并不能反映肝功能的所有特性ꎬ如ＣＹＰ２Ｃ１９活性和尿素合成ꎮ１.２㊀成纤维细胞转分化形成的肝脏类器官转分化是由一种已分化的细胞类型转化为另一种已分化细胞类型的过程ꎬ通过此技术诱导形９４１肖金平ꎬ等:肝脏类器官的研究及应用进展. All Rights Reserved.成的细胞一般具有较为成熟的状态和特定个体的功能ꎬ其方法主要包括生长因子诱导㊁抑制剂处理㊁转录因子诱导等ꎮ已有研究证实可利用小鼠成纤维细胞成功转化为其他类型细胞ꎬ而人们普遍认为人类细胞对谱系重新编程具有抗性[３２]ꎮ２０１１年Ｗｅｒｎｉｇ实验室首次利用与诱导小鼠神经细胞不同的转录因子共同作用于人的胚胎成纤维细胞和新生儿成纤维细胞ꎬ经过转分化技术成功获得了人的神经细胞(ｉＮ细胞)ꎬ但其效率较低ꎬ且ｉＮ细胞的跨膜电位突触响应能力和去极化水平均较弱ꎬ表明形成的神经细胞并不属于成熟神经细胞[３３]ꎮ２０１４年惠利健团队[３４]采用过表达ＦＯＸＡ３㊁ＨＮＦｌＡ和ＨＮＦ４Ａ３种转录因子能在１４ｄ内诱导人成纤维细胞(早期)转分化为稳定的无增殖能力的肝实质细胞类似细胞(ｈｉＨｅｐ细胞)ꎬ并利用过表达ＳＶ４０ｌａｒｇｅＴａｎｔｉｇｅ的ＨＦＦｌ细胞可获得增殖性ｈｉＨｅｐＬＴ细胞ꎬ获得的细胞不仅具有和肝实质细胞相似的基因表达谱ꎬ还具有分泌血清白蛋白㊁积累肝糖原㊁代谢异源物质等肝细胞功能(肝细胞功能鉴定标准见表１)ꎬ且将其植入肝损伤小鼠肝脏后发现ꎬ该细胞不仅可整合至小鼠肝脏内ꎬ还能达到治疗肝损伤的功效ꎬ首次证实了转分化形成的细胞可在体内发挥功能ꎮ表１㊀肝细胞功能的鉴定方法[３５]Ｔａｂｌｅ１㊀Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｃｒｉｔｅｒｉａｏｆｌｉｖｅｒｃｅｌｌｑｕａｌｉｔｙ观察指标鉴定方法形态学上皮样细胞形态基因表达分泌性血清蛋白:Ａｌｂ㊁Ａａｔ㊁Ｔｌｒ等细胞骨架蛋白:ＣＫＳ㊁ｃＫ１８转录因子:Ｈｎｆ４ａ㊁Ｆｏｘａ２㊁Ｈｎｆｌａ等转运蛋白:ＢＳＥＰ㊁ＭＲＰ２等异种生物代谢:ＣｙｐＩａ２㊁Ｃｙｐ３ａ４等补体和凝血蛋白:Ｆｇａ㊁Ｃ３㊁Ｃ５㊁Ｆ７等氨基酸代谢:Ｔａｔ㊁Ｆａｈ等细胞间连接蛋白:ＣＤＨ１㊁Ｔｊｐ１㊁Ｃｌｄｎ２等糖原储存:Ｇ６Ｐ㊁Ｐｃｋｌ等体外功能糖原储存:ＰＡＳｓｔａｉｎｉｎｇＵｐｔａｋｅｏｆａｃ￣ＬＤＬ＆ＩＣＧ分泌血清蛋白:Ａｌｂｕｍｉｎꎬａ￣１￣ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎꎬ等功能转运蛋白:胆汁酸排泄指数药物代谢:ＣＹＰ４５０酶活力尿素合成:尿素的分泌体内功能细胞移植后肝病治疗动物模型动物肝脏移植１.３㊀肿瘤组织来源的类器官新鲜分离或组织保存液保存的原代肝组织可用于培养人肝脏类器官ꎬ培养的主要方法是通过筛选肝组织中的ＬＧＲ５＋细胞ꎬ然后在主要含有Ｒ￣ｓｐｏｎｄｉｎ㊁内皮细胞生长因子㊁肝细胞生长因子㊁烟酰胺和成纤维生长因子１０的肝脏类器官培养基中进行培养[３６]ꎮ随着研究的不断更新ꎬ通过加入ＣＡＭＰ信号通路激动剂ＦＳＫ和ＴＧＦβ受体抑制剂Ａ８３０１对培养基进行改良后ꎬ可提高肝癌类器官的扩增效率[３７]ꎮ自２０１７年日本ＴａｋａｈｉｒｏＯｃｈｉｙａ团队通过向培养中添加ＴＧＦβ抑制剂㊁ＧＳＫ３抑制剂和ＲＯＣＫ抑制剂的方法ꎬ将小鼠成熟肝实质细胞成功去分化形成能在体外长期培养的肝前体细胞后ꎬ鄢和新团队[３８]于２０１８年通过人肝实质细胞去分化形成了在体外扩增的肝脏干细胞ꎬ实现了原代肝细胞的扩增和逆转ꎬ成为肝病研制新细胞源ꎮ同年ꎬ惠利健团队通过对培养条件优化ꎬ利用去除培养基中的Ｒｓｐｏ１㊁Ｎｏｇｇｉｎ和ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ成分ꎬ并加入Ｗｎｔ３ａ等因子的方法ꎬ于２Ｄ培养技术下实现肝细胞扩增ꎬ再利用３Ｄ培养技术经诱导再分化成功构建出具有成熟肝细胞功能的肝细胞ꎬ且在体外能扩增至３~４代ꎬ在５％Ｏ２条件下可扩增至少８代ꎬ同时将其转移至肝衰竭小鼠体内发现ꎬ扩增的肝细胞与原代肝实质细胞具有类似的治疗肝衰竭小鼠的作用ꎬ其中超过７０％小鼠存活ꎬ而设置的对照组小鼠全部死亡[３９]ꎮ２０１８年ＨａｎｓＣｌｅｖｅｒｓ团队通过将组织消化的时间由１ｈ延长至２~５ｈ或１２ｈꎬ结果达到了降低非肿瘤细胞数量的目的ꎬ并通过改变组织的起始培养条件ꎬ使用去除了经典培养基[３７]中的Ｒ￣ｓｐｏｎｄｉｎ￣１㊁Ｎｏｇｇｉｎ和Ｗｎｔ３ａꎬ添加了地塞米松和Ｒｈｏｋｉｎａｓｅ抑制剂后ꎬ成功构建了８例不同原发性肝癌(ｐｒｉｍａｒｙｌｉｖｅｒｃａｎｃｅｒꎬＰＬＣ)患者的人ＰＬＣ衍生类器官ꎮ经检测后发现ꎬＰＬＣ衍生类器官不仅具有原组织结构和基因表达ꎬ且在相同的培养条件下不同的肿瘤组织和亚型亦能长期在体外扩增培养ꎮ同时ꎬ移植实验结果表明ＰＬＣ衍生的类器官在体内具有致瘤性ꎬ并保留了其组织学特征和转移特性ꎬ可用于生物标志物鉴定和药物筛选试验[４０]ꎮ２０１９年Ｌｉａｎｇ等[４１]研究发现人源肝癌类器官在同种培养基中长期培养后ꎬ可用于区分不同肿瘤组织及亚型ꎬ且能保留源组织的组织结构㊁基因图谱等ꎮ研究发现ꎬ原代组织来源的肝脏类０５１生物技术进展ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ. All Rights Reserved.器官与干细胞分化和成纤维细胞转分化诱导形成的类器官相比ꎬ在体外长期培养过程中拷贝数或其他基因组结构的变异机率较低ꎬ能够更好地反应和稳定维持原样本的遗传特性ꎬ在类器官的培养中可能更有优势[３６]ꎮ２㊀肝癌类器官的应用研究２.１㊀肝脏相关疾病模型的构建类器官可用于研究疾病的稳态㊁发展和作用机制ꎬ能够在疾病的诊断㊁治疗方面提供新方法ꎮ目前ꎬ已成功构建了不同种类肝脏疾病模型ꎬ为肝脏类疾病发生的分子机制和治疗方法提供了有效的研究平台ꎮｉＰＳＣ来源的肝脏类器官可用于模拟Ａｌａｇｉｌｌｅ综合症(ａｌａｇｉｌｌｅｓｙｎｄｒｏｍｅꎬＡＬＧＳ)㊁囊肿性纤维化(ｃｙｓｔｉｃｆｉｂｒｏｓｉｓꎬＣＦ)和传染性疾病三种肝脏疾病类型[４２￣４６]ꎮＡｌａｇｉｌｌｅ综合症是一种常染色体显性多系统疾病ꎬ伴有ＪＡＧ１或ＮＯＴＣＨ２突变ꎬ其主要特征之一是胆管异常引起的肝损伤[３ꎬ４７￣４８]ꎮＣＦ是由囊性纤维化跨膜电导调节因子基因突变引起的疾病ꎬ可引发肝脏内的小胆管堵塞ꎮ２０１５年Ｌｏｒｅｎｔ等[４２]采用ｂｉｏｌｉａｔｒｅｓｏｎｅ作用于鼠胆管细胞类器官后ꎬ发现类器官出现管腔变窄㊁细胞结构被破坏等现象ꎬ证实ｂｉｏｌｉａｔｒｅｓｏｎｅ可导致胆道闭锁ꎬ同时该类器官可用于构建胆道闭锁先天性肝脏类疾病模型ꎮｉＰＳＣ诱导后分化为胆管细胞ꎬ置于３Ｄ培养条件下ꎬ可形成具有胆管标志物表达和体内相似的胆管功能的胆管类器官ꎬ与实验对照组相比ꎬＡＬＧＳ患者的ｉＰＳＣ形成的类器官具有肝脏受损后的自我组装和再生能力[４３]ꎮ从ＣＦ患者的ｉＰＳＣｓ中产生的类器官具有ＣＦ的典型特征ꎬ如ＣＦＴＲ蛋白错折叠㊁氯离子通道和胆管细胞功能障碍[２６￣２７ꎬ４４]ꎮＢａｋｔａｓｈ等[４５]利用ＨＣＶ感染肝癌类器官ꎬ构建出的ＨＣＶ疾病模型不仅可表达ＨＣＶ定位相关因子ꎬ且可对其作用机制进行研究ꎮ此外可利用重编程技术ꎬ将不同类型疾病相关基因的突变导入至正常类器官中ꎬ为肿瘤病因及发病机理研究提供良好的人源肿瘤类器官模型[４６]ꎮ体外培养人原代肝细胞形成的类器官与体内肝脏的疾病状态最为相似[４９]ꎮ以α１￣抗胰蛋白酶缺乏症(ａｌｐｈａｌ￣ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙꎬＡＡＴＤ)为例ꎬ该遗传性疾病的特征是ＡＬＡＴ蛋白折叠异常ꎮ研究发现ꎬ从ＡＡＴＤ患者原代人肝细胞形成的肝脏类器官可以模拟体内肝脏病理状态ꎬ形成的类器官表现出ＡＬＡＴ蛋白聚集和内质网应激㊁细胞凋亡数增加等现象[３７ꎬ５０]ꎮ此外ꎬ从原代人肝细胞形成的肝脏类器官也可用于高血糖㊁非酒精性脂肪肝等体外代谢紊乱研究ꎬ如Ｏｕｃｈｉ等[５１]将培养形成的肝脏类器官置于游离脂肪酸中ꎬ发现脂质物质在类器官中存在堆积现象ꎬ且随着培养环境中脂质含量的增加ꎬ类器官脂肪变性程度不断加重ꎬ表现出纤维化和炎症反应等表型ꎬ证实该类器官可作为脂肪变性相关的代谢性疾病模型ꎮ２.２㊀肝癌类器官在药物研发中的应用在药物筛选和开发过程中ꎬ传统临床前试验主要采用细胞系培养和人源性肿瘤异种移植物(ＰＤＸ)模型ꎬ其中药物研发主要依赖永生化细胞系用于高通量筛选ꎮ但肝细胞是具有高度细胞极性和异质性的细胞ꎬ其细胞极性主要表现在肝细胞功能和形态等方面ꎬ而大多数２Ｄ培养的肝细胞在培养２~３天内便失去细胞极性ꎬ导致在２Ｄ培养的细胞系模型上无法得到准确真实的实验结果ꎮ另外ꎬ细胞系在人体对药物的反应性和耐受性等方面均具有显著差异ꎬ大部分药物即使在前期通过了临床前试验ꎬ当其进入人体试验时仍以失败而告终[５２￣５４]ꎻ人源性肿瘤异种移植物(ＰＤＸ)模型虽然能够模拟原代肿瘤基因组结构㊁组织病理学及药敏反应ꎬ但由于异种差异使其基因的表达图谱与原发灶肿瘤区别较大ꎬ肿瘤异位移植中导致肿瘤形成部位不同ꎬ同时存在建模周期长和成功率低等问题[５５]ꎮ因此迫切需要能重现原发患者肿瘤生理病理且可稳定扩增的体外模型用于临床前药物开发ꎮ肝癌类器官技术可从不同发病阶段的肝癌患者手术或活检组织中分离原代细胞ꎬ体外三维培养快速形成类器官ꎮ肝癌类器官不仅能重现原组织结构和其突变特征ꎬ而且能在体外长期培养时保持原组织的遗传稳定性ꎬ成为现有药物筛选模型的有益补充ꎮ因此ꎬ肝脏肿瘤类器官成为临床前药物筛选的有效模型ꎮ２０１７年Ｂｒｏｕｔｉｅｒ等[４０]揭示ꎬ不同类型的原发性肝癌的基因突变谱对于不同治疗药物的敏感性不同ꎬ如ＣＴＮＮＢ１突变的肝细胞癌类器官对ＬＧＫ９７４耐受ꎬ而胆管癌类器官对其较为敏感ꎮ据已有研究报告表明ꎬ通过利１５１肖金平ꎬ等:肝脏类器官的研究及应用进展. All Rights Reserved.用植物性多空水凝胶制造形成的合成型３Ｄ支架生长细胞ꎬ其尺寸仅为１００μｍꎬ可轻松将其用于９６孔板中进行高通量药物筛选和检测ꎬ该方法可产生数十至数百个特殊支架ꎬ并可将其与原始肝脏肿瘤的异质性和遗传特性结合用于肝癌药物的研发[５６]ꎮ在一项药物研发实验中ꎬ研究者利用收集的２３００种药物制剂作为ＳＰＥＣＴＲＵＭ药物文库处理来源于ＰＳＣ的肝脏类器官时ꎬ结果筛选出能够降低肝脏细胞中ＡｐｏＢ水平的９种强心苷制剂ꎬ可用于降低家族性高胆固醇血症患者体内低蛋白胆固醇水平和心力衰竭的治疗ꎬ该研究成果有效推动了他汀类药物替代制剂的研发[２９]ꎮ２.３㊀肝脏类器官在器官移植中的应用目前肝脏类器官在小鼠模型上实现的细胞移植应用研究ꎬ显示出一定的治疗效果ꎮ如Ｔａｋｅｂｅ等[２５]研究人员通过细胞共培养的方式获得ｉＰＳＣ来源的类器官后ꎬ将其植入急性肝损伤的小鼠体内后ꎬ发现形成的类器官可在小鼠肝脏内迅速填充ꎬ并且小鼠的存活时间和存活率均提高ꎮ同时ꎬ将肝脏类器官植入Ⅰ型酪氨酸血症小鼠体内后ꎬ肝脏类器官亦可迅速增殖并在小鼠肝脏受损部位具有显著的填充效果[５７]ꎮ另有研究发现ꎬ将肝外胆管类器官植入到不同的生物支架上ꎬ可获得相似的肝外胆管㊁胆囊壁的生物工程组织ꎬ并可成功修复胆囊受损小鼠胆囊壁及其胆外管损伤[５８]ꎮ此外ꎬ有研究发现通过ＣＲＩＳＰＲ技术将来自于人源干细胞的肝组织转化为肝脏类器官后ꎬ将其移植入具有肝损伤的小鼠体内ꎬ发现经移植后在动物血液中能够检测到人白蛋白ꎬ并可延长小鼠寿命[３１]ꎮ３㊀展望肝脏类器官在体外保留了源组织的组织学特性和基因表达特征ꎬ同时与源组织高度相似的特性使其成为细胞系及动物模型的有益补充ꎮ肝脏类器官的构建不仅解决了肝脏肿瘤研究领域中肝实质细胞无法在体外长期培养和扩增的障碍ꎬ其在疾病模型构建㊁药物研发和细胞移植等方面均具有良好的应用前景ꎮ特别是对于肝癌这类具有强异质性的疾病ꎬ肝癌类器官未来有望实现针对个人的精准化医疗检测㊁取代试验动物进行药物毒理测试ꎬ并向着体外培养可用于临床㊁可移植㊁可改造器官的目标不断前行ꎮ然而ꎬ目前肝脏类器官在培养体系上仍存在成功率较低㊁培养成本高昂㊁组织细胞类型尚未健全㊁部分功能尚未具备等问题ꎮ例如缺少肝脏独特的免疫特征ꎬ包括高密度的免疫细胞浸润㊁较强的免疫原性和多种免疫微环境等ꎮ目前还无法在肝脏类器官模型中探究免疫药物在患者中的作用ꎮ未来通过技术的不断发展ꎬ实现肝脏类器官与神经㊁血管㊁间质细胞及免疫细胞等多种细胞的体外三维共培养ꎬ有可能利用肝脏类器官模型探究其与各组织间的相互作用ꎬ实现肝脏类器官技术在药物开发㊁疾病模型及个性化治疗领域更为广泛的应用与临床转化ꎮ参㊀考㊀文㊀献[１]㊀ＬＡＮＣＡＳＴＥＲＭＡꎬＫＮＯＢＬＩＣＨＪＡ.Ｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎａｄｉｓｈ:ｍｏｄｅｌｉｎｇｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｄｉｓｅａｓｅｕｓｉｎｇｏｒｇａｎｏｉｄｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ[Ｊ].Ｓｃｉｅｎｃｅꎬ２０１４ꎬ３４５(６１９４):１２４７１２５.[２]㊀ＨＵＣＨＭꎬＫＯＯＢＫ.Ｍｏｄｅｌｉｎｇｍｏｕｓｅａｎｄｈｕｍａｎｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｕｓｉｎｇｏｒｇａｎｏｉｄｃｕｌｔｕｒｅｓ[Ｊ].Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬ２０１５ꎬ１４２(１８):３１１３－３１２５.[３]㊀ＰＲＩＯＲＮꎬＩＮＡＣＩＯＰꎬＨＵＣＨＭ.Ｌｉｖｅｒｏｒｇａｎｏｉｄｓ:ｆｒｏｍｂａｓｉｃｒｅｓｅａｒｃｈｔｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ[Ｊ].ＢＭＪＯｐｅｎＡｃｃｅｓｓꎬ２０１９ꎬ６８(１２):２２２８－２２３７.[４]㊀ＢＲＯＵＴＩＥＲＬꎬＬＡＵＲＡＡＲꎬＡＮＤＥＲＳＳＯＮ￣ＲＯＬＦꎬｅｔａｌ..Ｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆｓｅｌｆ￣ｒｅｎｅｗｉｎｇｈｕｍａｎａｎｄｍｏｕｓｅａ￣ｄｕｌｔｌｉｖｅｒａｎｄｐａｎｃｒｅａｓ３Ｄｏｒｇａｎｏｉｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｇｅｎｅｔｉｃｍａｎｉｐｕ￣ｌａｔｉｏｎ[Ｊ].ＮａｔｕｒｅＰｒｏｔ.ꎬ２０１６ꎬ１１(９):１７２４－１７４３. [５]㊀ＰＥＴＥＲＳＥＮＮꎬＲＥＩＭＡＮＮＦꎬＢＡＲＴＦＥＬＤＳꎬｅｔａｌ..ＧｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆＬｃｅｌｌｓｉｎｍｏｕｓｅａｎｄｈｕｍａｎｓｍａｌｌｉｎｔｅｓｔｉｎｅｏｒ￣ｇａｎｏｉｄｓ[Ｊ].Ｄｉａｂｅｔｅｓꎬ２０１４ꎬ６３(２):４１０－４２０. [６]㊀ＳＩＮＡＢꎬＨＡＮＳＣ.Ｏｒｇａｎｏｉｄｓａｓｍｏｄｅｌｆｏｒｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｄｉｓｅａｓｅｓ:ｃｕｌｔｕｒｅｏｆｈｕｍａｎａｎｄｍｕｒｉｎｅｓｔｏｍａｃｈｏｒｇａｎｏｉｄｓａｎｄｍｉｃｒｏｉｎｊｅｃ￣ｔｉｏｎｏｆＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ[Ｊ].Ｊ.Ｖｉｓｕａｌ.Ｅｘｐｅｒ.ꎬ２０１５ꎬ２０１５(１０５):８１６－８１８.[７]㊀ＲＯＨＡＮＲＮꎬＳＯＵＭＥＹＡＡꎬＪＯＮＡＴＨＡＮＳＤ.Ｏｒｇａｎｏｉｄｓａｓａｍｏｄｅｌｓｙｓｔｅｍｆｏｒｓｔｕｄｙｉｎｇｈｕｍａｎｌｕｎｇｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｂｉｏｐｈｙｓ.Ｒｅｓ.Ｃｏｍｍｕｎ.ꎬ２０１５ꎬ４７３(３):６７５－６８２.[８]㊀ＣＨＥＥＷＣꎬＭＡＨＯＳꎬＭＩＮＧＬꎬｅｔａｌ..Ｓｉｎｇｌｅｌｕｍｉｎａｌｅｐｉｔｈｅ￣ｌｉａｌｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓｃａｎｇｅｎｅｒａｔｅｐｒｏｓｔａｔｅｏｒｇａｎｏｉｄｓｉｎｃｕｌｔｕｒｅ[Ｊ].ＮａｔｕｒｅＣｅｌｌＢｉｏｌ.ꎬ２０１４ꎬ１６(１０):９５１－９６１. [９]㊀ＬＩＭꎬＩＺＰＩＳＵＡＢＪＣ.Ｏｒｇａｎｏｉｄｓ￣ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌｍｏｄｅｌｓｏｆｈｕｍａｎｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].Ｎ.Ｅｎｇｌ.Ｊ.Ｍｅｄ.ꎬ２０１９ꎬ３８０(６):５６９－５７９. [１０]㊀ＭＩＴＡＫＡＴ.Ｔｈｅｃｕｒｒｅｎｔｓｔａｔｕｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｃｕｌｔｕｒｅ[Ｊ].Ｅｘｐ.Ｐａｔｈｏｌ.ꎬ１９９８ꎬ７９:３９３－４０９.[１１]㊀ＬＩＵＬＰ.Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｌｉｖｅｒｏｒｇａｎｏｉｄｓａｎｄｔｈｅｉｒｐｏｔｅｎｔｉａｌａｐｐｌｉ￣ｃａｔｉｏｎｓ[Ｊ/ＯＬ].ＳｔｅｍＣｅｌｌｓＣａｎｃｅｒＨｅｐａｔｏｌ.ꎬ２０１８ꎬ１１５－１４４[２０２１－０１－２８].ｈｔｔｐｓ://ｄｏｉ.ｏｒｇ/１０.１０１６/Ｂ９７８－０－１２－８１２３０１－０.００００７－４.２５１生物技术进展ＣｕｒｒｅｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ. All Rights Reserved.[１２]㊀ＲＡＭＡＩＡＨＧＡＲＩＳＣꎬＤＥＮＢＲＡＶＥＲＭＷꎬＨＥＲＰＥＲＳＢꎬｅｔａｌ..Ａ３ＤｉｎｖｉｔｒｏｍｏｄｅｌｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄＨｅｐＧ２ｃｅｌｌｓｐｈｅ￣ｒｏｉｄｓｗｉｔｈｉｍｐｒｏｖｅｄｌｉｖｅｒ￣ｌｉｋｅｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｆｏｒｒｅｐｅａｔｅｄｄｏｓｅｈｉｇｈ￣ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔｔｏｘｉｃｉｔｙｓｔｕｄｉｅｓ[Ｊ].Ａｒｃｈ.Ｔｏｘｉｃｏｌ.ꎬ２０１４ꎬ８８(５):１０８３－１０９５.[１３]㊀ＢＨＡＴＩＡＳＮꎬＵＮＤＥＲＨＩＬＬＧＨꎬＺＡＲＥＴＫＳꎬｅｔａｌ..Ｃｅｌｌａｎｄｔｉｓｓｕｅｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｆｏｒｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ/ＯＬ].Ｓｃｉ.Ｔｒａｎｓｌ.Ｍｅｄ.ꎬ２０１４(６):２４５ｓｒ２[２０２１－０１－２８].ｈｔｔｐｓ://ｄｏｉ.ｏｒｇ/１０.１１２６/ｓｃｉｔｒａｎｓｌｍｅｄ.３００５９７５.[１４]㊀ＡＬＩＳＯＮＭＲꎬＰＯＵＬＳＯＭＲꎬＪＥＦＦＥＲＹＲꎬｅｔａｌ..Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｆｒｏｍｎｏｎ￣ｈｅｐａｔｉｃａｄｕｌｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ[Ｊ/ＯＬ].Ｎａｔｕｒｅꎬ２０００ꎬ４０６(６７９３):２５７[２０２１－０１－２８].ｈｔｔｐｓ://ｄｏｉ.ｏｒｇ/１０.１０３８/３５０１８６４２.[１５]㊀ＡＧＡＲＷＡＬＳꎬＨＯＬＴＯＮＫＬꎬＬＡＮＺＡＲ.Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａ￣ｔｉｏｎｏｆｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｆｒｏｍｈｕｍａｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＳｔｅｍＣｅｌｌｓꎬ２００８ꎬ２６(５):１１１７－１１２７.[１６]㊀ＪＩＳＹꎬＺＨＡＮＧＬＤꎬＨＵＩＬＪ.Ｃｅｌｌｆａｔｅｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ.Ｄｉｒｅｃｔｉｎ￣ｄｕｃｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｌｉｋｅｃｅｌｌｓｆｒｏｍｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ[Ｊ].Ｊ.Ｃｅｌｌ.Ｂｉｏｃｈｅｍ.ꎬ２０１３ꎬ１１４(２):２５６－２６５.[１７]㊀ＢＡＳＭＡＨꎬＡＬＥＪＡＮＤＲＯＳꎬＹＡＮＮＡＭＧＲꎬｅｔａｌ..Ｄｉｆｆｅｒｅｎ￣ｔｉａｔｉｏｎａｎｄｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌ￣ｄｅｒｉｖｅｄｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ[Ｊ].Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙꎬ２００９ꎬ１３６(３):９９０－９９９.[１８]㊀ＷＵＸꎬＲＯＢＯＴＨＡＭＪＭꎬＬＥＥＥꎬｅｔａｌ..ＰｒｏｄｕｃｔｉｖｅｈｅｐａｔｉｔＣｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｏｆｓｔｅｍｃｅｌｌ ｄｅｒｉｖｅｄｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｒｅｖｅａｌｓａｃｒｉｔｉｃａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｔｏｖｉｒａｌｐｅｒｍｉｓｓｉｖｅｎｅｓｓｄｕｒｉｎｇｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ[Ｊ/ＯＬ].ＰＬｏＳＰａｔｈｏｇ.ꎬ２０１２ꎬ８(４):１００２６１７[２０２１－０１－２８].ｈｔｔｐｓ://ｄｏｉ.ｏｒｇ/１０.１３７１/ｊｏｕｒｎａｌ.ｐｐａｔ.１００２６１７.[１９]㊀ＬＩＦꎬＬＩＵＰꎬＬＩＵＣꎬｅｔａｌ..Ｈｅｐａｔｏｂｌａｓｔ￣ｌｉｋｅｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｃｅｌｌｓｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓｃａｎｒｅｐｏｐｕｌａｔｅｌｉｖｅｒｓｏｆｍｉｃｅ[Ｊ].Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙꎬ２０１０ꎬ１３９(６):２１５８－２１６９. [２０]㊀ＤｉｐｅｎＶꎬＰｅｄｒｏＭＢꎬｅｔａｌ..Ｓｅｌｆ￣ａｓｓｅｍｂｌｅｄｌｉｖｅｒｏｒｇａｎｏｉｄｓｒｅ￣ｃａｐｉｔｕｌａｔｅｈｅｐａｔｏｂｉｌｉａｒｙｏｒｇａｎｏｇｅｎｅｓｉｓｉｎｖｉｔｒｏ[Ｊ/ＯＬ].Ｈｅｐａｔｏｌ￣ｏｇｙꎬ２０１８ꎬｄｏｉ:１０.１００２/ｈｅｐ.２９４８３[２０２１－０１－２８].ｈｔｔｐｓ://ｄｏｉ.ｏｒｇ/１０.１００２/ｈｅｐ.２９４８３.[２１]㊀ＣＡＩＪꎬＺＨＡＯＹꎬＬＩＵＹꎬｅｔａｌ..Ｄｉｒｅｃｔｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕ￣ｍａｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎｔｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｈｅｐａｔｉｃｃｅｌｌｓ[Ｊ].Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙꎬ２００７ꎬ４５(５):１２２９－１２３９.[２２]㊀ＳＯＮＧＺꎬＣＡＩＪꎬＬＩＵＹꎬｅｔａｌ..Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏ￣ｃｙｔｅ ｌｉｋｅｃｅｌｌｓｆｒｏｍｈｕｍａｎｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＲｅｓ.ꎬ２００９ꎬ１９(１１):１２３３－１３４２.[２３]㊀ＳＩＴＡＹＥＢＫꎬＮＯＴＯＦＫꎬＮＡＧＡＯＫＡＭꎬｅｔａｌ..Ｈｉｇｈｌｙｅｆｆｉ￣ｃｉｅｎｔｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｌｉｋｅｃｅｌｌｓｆｒｏｍｉｎｄｕｃｅｄ￣ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ[Ｊ].Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙꎬ２０１０ꎬ５１(１):２９７－３０５.[２４]㊀ＬＩＵＨꎬＳＨＡＲＫＩＳＳꎬＭＡＳＡＴＯＮꎬｅｔａｌ..Ｉｎｖｉｖｏｌｉｖｅｒｒｅｇｅｎ￣ｅｒａｔｉｏｎｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｈｕｍａｎｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｉｌｓｆｒｏｍｄｉｖｅｒｓｅｏｒｉｇｉｎｓ[Ｊ/ＯＬ].Ｓｃｉ.Ｔｒａｎｓｌ.Ｍｅｄ.ꎬ２０１１ꎬ３(８２):８２ｒａ３９[２０２１－０１－２８].ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ.ｃｏｍ/ｃａｔａｌｏｇ/ｐａｐｅｒｓ/１９９９８２７４.[２５]㊀ＴＡＫＥＢＥＴꎬＳＥＫＩＮＥＫꎬＥＮＯＭＵＲＡＭ.ＶａｓｃｕｌａｒｉｚｅｄａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｈｕｍａｎｌｉｖｅｒｆｒｏｍａｎｉＰＳＣ￣ｄｅｒｉｖｅｄｏｒｇａｎｂｕｄｔｒａｎｓ￣ｐｌａｎｔ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅꎬ２０１３ꎬ４９９(７４５９):４８１－４８４.[２６]㊀ＯＧＡＷＡＭꎬＯＧＡＷＡＳꎬＢＥＡＲＣＥꎬｅｔａｌ..Ｄｉｒｅｃｔｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎ￣ｔｉａｔｉｏｎｏｆｃｈｏｌａｎｇｉｏｃｙｔｅｓｆｒｏｍｈｕｍａｎｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ[Ｊ/ＯＬ].ＮａｔｕｒｅＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ.ꎬ２０１５ꎬｄｏｉ:１０.１０３８/ｎｂｔ.３２９４[２０２１－０１－２８].ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ.ｃｏｍ/ｃａｔａｌｏｇ/ｐａｐｅｒｓ/１９９９８２７４.[２７]㊀ＳＡＭＰＡＺＩＯＴＩＳＦꎬＭＩＧＵＥＬＣＤＢꎬＭＡＤＲＩＧＡＬＰꎬｅｔａｌ..Ｃｈｏｌａｎｇｉｏｃｙｔｅｓｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｈｕｍａｎｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｏｒｄｉｓｅａｓｅｍｏｄｅｌｉｎｇａｎｄｄｒｕｇｖａｌｉｄａｔｉｏｎ[Ｊ].ＮａｔｕｒｅＢｉｏ￣ｔｅｃｈｎｏｌ.ꎬ２０１５ꎬ３３(８):８４５－８５２.[２８]㊀ＷＵＦꎬＷＵＤꎬＲＥＮＹꎬｅｔａｌ..Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏ￣ｂｉｌｉａｒｙｏｒｇａｎｏｉｄｓｆｒｏｍｈｕｍａｎｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ[Ｊ].Ｊ.Ｈｅｐ￣ｔａｌ.ꎬ２０１９ꎬ７０(６):１１４５－１１５８.[２９]㊀ＣＬＥＶＥＲＳＨ.Ｍｏｄｅｌｉｎｇｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｄｉｓｅａｓｅｗｉｔｈｏｒｇａｎｏｉｄｓ[Ｊ].Ｃｅｌｌꎬ２０１６ꎬ１６５(７):１５８６－１５９７.[３０]㊀ＤＯＳＳＯＡＤꎬＵＲＥＮＤＡＪＰꎬＮＧＵＹＥＮＴꎬｅｔａｌ..Ｕｐｇｒａｄｉｎｇｔｈｅｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｒｅｌｅｖａｎｃｅｏｆｈｕｍａｎｂｒａｉｎｏｒｇａｎｏｉｄｓ[Ｊ].Ｎｅｕ￣ｒｏｎꎬ２０２０ꎬ１０７(６):１０１４－１０２８.[３１]㊀ＪＥＲＥＭＹＪＶꎬＲＹＡＮＬꎬＦＡＲＺＡＮＥＨＭꎬｅｔａｌ..Ｇｅｎｅｒｅｇｕｌａ￣ｔｏｒｙｎｅｔｗｏｒｋａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｄｉｒｅｃｔｓｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎｏｆｍｕｌｔｉｌｉｎｅａｇｅｈｕｍａｎｌｉｖｅｒｏｒｇａｎｏｉｄｓ[Ｊ/ＯＬ].ＣｅｌｌＳｙｓｔｅｍｓꎬ２０２０[２０２１－０１－２８].ｈｔｔｐｓ://ｗｗｗ.ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ.ｃｏｍ/ｃａｔａｌｏｇ/ｐａｐｅｒｓ/１９９９８２７４.[３２]㊀ＮＡＭＹＪꎬＳＯＮＧＫꎬＬＵＯＸꎬｅｔａｌ..Ｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇｏｆｈｕｍａｎｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｔｏｗａｒｄａｃａｒｄｉａｃｆａｔｅ[Ｊ].Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡꎬ２０１３ꎬ１１０(１４):５５８８－５５９３.[３３]㊀ＰＡＮＧＺ.Ｉｎｄｕｃｏｎｏｆｈｕｍａｎｎｅｕｒｏｎａｌｃｅｌｌｓｂｙｄｅｆｉｎｅｄｔｒａｎ￣ｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｓ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅꎬ２０１１ꎬ４７６(７３５９):２２０－２２３. [３４]㊀ＨＵＡＮＧＰꎬＺＨＡＮＧＬꎬＧＡＯＹꎬｅｔａｌ..Ｄｉｒｅｃｔｒｅｐｒｏｇｒａｍｍｉｎｇｏｆｈｕｍａｎｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｔｏｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎｄｅｘｐａｎｄａｂｌｅｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＳｔｅｍＣｅｌｌꎬ２０１４ꎬ１４(３):３７０－３８４.[３５]㊀ＩＳＨＩＩＭꎬＫＩＮＯＪꎬＩＣＨＩＮＯＨＥＮꎬｅｔａｌ..Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｉｃｐａｒｅｎｔａｌｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｃｅｌｌｓｏｆｒａｔｓｍａｌｌｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｍａｉｎｔａｉｎｓｅｌｆ￣ｒｅｎｅｗａｌｃａｐａｂｉｌｉｔｙａｆｔｅｒｌｏｎｇ￣ｔｅｒｍｃｕｌｔｕｒｅ[Ｊ].Ｓｃｉ.Ｒｅｐ.ꎬ２０１７ꎬ７:４６１７７[２０２０－０１－２８].ｈｔｔｐｓ:ｄｏｉ.ｏｒｇ/１０.１０３８/ｓｒｅｐ４６１７７. [３６]㊀ＨＵＣＨＭꎬＤＯＲＲＥＬＬＣꎬＢＯＪＳＦꎬｅｔａｌ..ＩｎｖｉｔｒｏｅｘｐａｎｓｉｏｎｏｆｓｉｎｇｌｅＬｇｒ５(＋)ｌｉｖｅｒｓｔｅｍｃｅｌｌｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙＷｎｔ￣ｄｒｉｖｅｎｒｅｇｅｎｅｒ￣ａｔｉｏｎ[Ｊ].Ｎａｔｕｒｅꎬ２０１３ꎬ４９４(７４３６):２４７－２５０.[３７]㊀ＨＵＣＨＭꎬＧＥＨＡＲＴＨꎬＶＡＮＢＯＸＴＥＬＲꎬｅｔａｌ..Ｌｏｎｇ￣ｔｅｒｍｃｕｌｔｕｒｅｏｆｇｅｎｏｍｅ￣ｓｔａｂｌｅｂｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓｆｒｏｍａｄｕｌｔｈｕｍａｎｌｉｖｅｒ[Ｊ].Ｃｅｌｌꎬ２０１５ꎬ１６０(１－２):２９９－３１２.[３８]㊀ＦＵＧＢ.Ｅｘｐａｎｓｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ￣ｄｅ￣ｒｉｖｅｄｌｉｖｅｒｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ￣ｌｉｋｅｃｅｌｌｓａｎｄｔｈｅｉｒｕｓｅｆｏｒｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｈｅｐａｔｏｔｒｏｐｉｃｐａｔｈｏｇｅｎｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＲｅｓ.ꎬ２０１９ꎬ２９(１):８－２２. 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All Rights Reserved.[４３]㊀ＧＵＡＮＹꎬＸＵＤꎬＧＡＲＦＩＮＰＭꎬｅｔａｌ..Ｈｕｍａｎｈｅｐａｔｉｃｏｒ￣ｇａｎｏｉｄｓｆｏｒｔｈｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｈｕｍａｎｇｅｎｅｔｉｃｄｉｓｅａｓｅｓ[Ｊ].ＪＣＩＩｎ￣ｓｉｇｈｔꎬ２０１７ꎬ２(１７):１－１７.[４４]㊀ＡＫＢＡＲＩＳꎬＡＲＳＬＡＮＮꎬＳＥＮＴＵＲＫＳ.Ｎｅｘｔ￣ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｌｉｖｅｒｍｅｄｉｃｉｎｅｕｓｉｎｇｏｒｇａｎｏｉｄｍｏｄｅｌｓ[Ｊ].Ｆｒｏｎｔ.ＣｅｌｌＤｅｖ.Ｂｉｏｌ.ꎬ２０１９ꎬ７:３４５－３４５.[４５]㊀ＢＡＫＴＡＳＨＹꎬＭＡＤＨＡＶＡꎬＣＯＬＬＥＲＫＥꎬｅｔａｌ..Ｓｉｎｇｌｅｐａｒ￣ｔｉｃｌｅｉｍａｇｉｎｇｏｆｐｏｌａｒｉｚｅｄｈｅｐａｔｏｍａｏｒｇａｎｏｉｄｓｕｐｏｎｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎｒｅｖｅａｌｓａｎｏｒｄｅｒｅｄａｎｄｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｅｎｔｒｙｐｒｏｃｅｓｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＨｏｓｔＭｉｃｒｏｂｅ.ꎬ２０１８ꎬ２３(３):３８２－３９４. [４６]㊀ＳＣＨＷＡＮＫＧꎬＫＯＯＢＫꎬＳＡＳＳＥＬＬＩＶꎬｅｔａｌ..Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｒｅ￣ｐａｉｒｏｆＣＦＴＲｂｙＣＲＩＳＰＲ/Ｃａｓ９ｉｎｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｏｒｇａｎｏｉｄｓｏｆｃｙｓｔｉｃｆｉｂｒｏｓｉｓｐａｔｉｅｎｔｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＳｔｅｍＣｅｌｌꎬ２０１３ꎬ１３(６):６５３－６５８.[４７]㊀ＦＩＯＲＯＴＴＯＲꎬＡＭＥＮＤＵＮＩＭꎬＭＡＲＩＯＴＴＩＶꎬｅｔａｌ..Ｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓｉｎｔｈｅｄｉｓｈ:ｉＰＳＣａｎｄｏｒｇａｎｏｉｄｓａｓａｎｅｗａｐｐｒｏａｃｈｔｏｍｏｄｅｌｉｎｇｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｓ[Ｊ].Ｂｉｏｃｈｉｍ.Ｂｉｏｐｈｙｓ.ＡｃｔａＭｏｌ.ＢａｓｉｓＤｉｓｅａｓｅꎬ２０１８ꎬ８(３８):１－９.[４８]㊀ＬＩＵＣꎬＯＩＫＯＮＯＭＯＰＯＵＬＯＳＡꎬＳＡＹＥＤＮꎬｅｔａｌ..Ｍｏｄｅｌｉｎｇｈｕｍａｎｄｉｓｅａｓｅｓｗｉｔｈｉｎｄｕｃｅｄｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓ:ｆｒｏｍ２Ｄｔｏ３Ｄａｎｄｂｅｙｏｎｄ[Ｊ].Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬ２０１８ꎬ１４５(５):１５６１６６. [４９]㊀ＺＥＩＬＩＮＧＥＲＫꎬＦＲＥＹＥＲＮꎬＤＡＭＭＧꎬｅｔａｌ..Ｃｅｌｌｓｏｕｒｃｅｓｆｏｒｉｎｖｉｔｒｏｈｕｍａｎｌｉｖｅｒｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅｍｏｄｅｌｓ[Ｊ].Ｅｘｐ.Ｂｉｏｌ.Ｍｅｄ.ꎬ２０１６ꎬ２４１:１６８４－１６９８.[５０]㊀ＧＥＭＡＧＭꎬＭＡＴＡＭＡＬＡＮꎬＳＥＬＥＮＥＭꎬｅｔａｌ..Ｌｉｖｅｒｏｒ￣ｇａｎｏｉｄｓｒｅｐｒｏｄｕｃｅａｌｐｈａ￣１ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ￣ｒｅｌａｔｅｄｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅ[Ｊ].Ｈｅｐａｔｏｌ.Ｉｎｔ.ꎬ２０１９ꎬ１４(１):１－１１.[５１]㊀ＯＵＣＨＩＲꎬＴＯＧＯＳꎬＫＩＮＹＲＡＭꎬｅｔａｌ..Ｍｏｄｅｌｉｎｇｓｔｅａｔｏｈｅｐ￣ａｔｉｔｉｓｉｎｈｕｍａｎｓｗｉｔｈｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌ￣ｄｅｒｉｖｅｄｏｒｇａｎｏｉｄｓ[Ｊ].ＣｅｌｌＭｅｔａｂ.ꎬ２０１９ꎬ３０(２):３７４－３８４.[５２]㊀ＷＥＥＢＥＲＦꎬＯＯＦＴＳＮꎬＤＩＪＫＳＴＲＡＫＫꎬｅｔａｌ..ＴｕｍｏｒＯｒ￣ｇａｎｏｉｄｓａｓａｐｒｅ￣ｃｌｉｎｉｃａｌｃａｎｃｅｒｍｏｄｅｌｆｏｒｄｒｕｇｄｉｓｃｏｖｅｒｙ[Ｊ].ＣｅｌｌＣｈｅｍ.Ｂｉｏｌ.ꎬ２０１７ꎬ２４(９):１０９２－１１００.[５３]㊀ＺＥＩＧＥＲＥＲＡꎬＷＵＴＴＫＥＡꎬＭＡＲＳＩＣＯＧꎬｅｔａｌ..Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓｉｎｖｉｔｒｏａｒｅｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈｃｅｌｌｐｏｌａｒｉｔｙｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ[Ｊ].Ｅｘｐ.ＣｅｌｌＲｅｓ.ꎬ２０１７ꎬ３５０(１):２４２－２５２. 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肝脏再生研究进展肝脏是人体最重要的器官之一，具有重要的代谢、排毒和合成功能。

然而，在某些疾病或外伤等情况下，肝脏的功能可能会受到损害。

因此，研究肝脏再生的机制是非常重要的。

肝脏再生是指在肝脏损伤或细胞死亡的情况下，其细胞可以通过分裂、增殖和再生来重新建立起肝脏的功能。

近年来，对肝脏再生机制的研究取得了很大进展。

肝细胞增殖是肝脏再生的关键过程之一。

研究发现，在肝损伤后，肝细胞立即进入细胞周期的G0期，并在3-7天内开始分裂增殖。

这主要是通过细胞因子和生长调节因子的作用来触发的。

其中，肝细胞生长因子（HGF）和表皮生长因子（EGF）是最为重要的因子之一。

这些因子可以刺激肝细胞从G0期转移到DNA合成期，并进一步刺激细胞分裂。

另外，研究还发现，肝脏再生的过程中，非肝细胞也可以参与其中。

这些细胞包括肝星状细胞、血管内皮细胞、间充质干细胞等。

例如，肝星状细胞能够分泌促进肝再生的生长因子，血管内皮细胞可以为肝脏提供充足的血液供应，间充质干细胞则可以分化为肝细胞，参与肝再生过程。

此外，肝脏再生还与一些许多信号通路有关。

例如，Wnt/β-catenin、Notch、Hippo 和TGF-β等信号通路在肝脏再生中起着重要作用。

在肝损伤后，这些信号通路会被激活，进而调节肝细胞增殖、分化和生长。

随着研究的不断深入，肝脏再生已经成为治疗肝病的一个重要方向。

一些手段已经被开发出来，用于促进肝脏再生。

例如，通过注射肝细胞生长因子、植入干细胞等方法，可以有效地促进肝细胞的增殖和再生。

这些方法已经被广泛应用于临床治疗中。

总之，肝脏再生是一项复杂的生物学过程，其机制还有待深入研究。

未来，我们可以利用这些机制，开发更加有效的治疗方法，为治疗肝病提供新的思路和方向。