小鼠髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)

小鼠过氧化氢酶（CAT）ELISA检测试剂盒使用说明书小鼠过氧化氢酶（CAT）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被过氧化氢酶（CAT）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最后的黄色。

颜色的深浅和样品中的过氧化氢酶（CAT）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品活性。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避开任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：假如样本收集后不适时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避开反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

试验中不用的板条应立刻放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白；依照说明书操作时样本已经稀释5倍，最结束果乘以5才是样本实际浓度。

严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。

全部液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒构成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无停止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0S5）浓度依次为：0、5、10、20、40、80U/ml 试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

髓过氧化物酶（MPO）测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）适用范围：该产品用于体外定量测定人血清或血浆中髓过氧化物酶浓度。

1.1 产品规格1.2 组成成分1.2.1试剂组成:液体双试剂。

1.2.2校准品的组成五个水平的冻干校准品，在磷酸盐缓冲液(50mM)中添加髓过氧化物酶纯品。

定值范围：(50-100)ng/mL；(100-180) ng/mL；（200-500）ng/mL；（550-800）ng/mL；（800-1400）ng/mL。

1.2.3质控品的组成两个水平的冻干质控品，在牛血清(20g/L)中添加髓过氧化物酶纯品。

定值范围：（30-150）ng/mL；（500-1000）ng/mL。

2.1 外观液体双试剂：试剂1：无色至淡黄色澄清液体，试剂2：乳白色液体。

校准品：冻干品，复溶后为无色至淡黄色澄清液体。

质控品：冻干品，复溶后为无色至淡黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度应在0.3-2.0之间。

2.4 分析灵敏度浓度为120ng/mL时，吸光度变化范围应大于0.01。

2.5 线性测试血清或血浆样本，试剂线性在(0,1000]ng/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.990；在(0,200]ng/mL范围内绝对偏差不超过20ng/mL，在（200,1000]ng/mL范围内的相对偏差不超过±10%。

2.6 批内重复性试剂盒测试项目重复性CV≤10%。

2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应≤15%。

2.8 准确度：回收试验：回收率应在90%-110%之间。

2.9 质控品赋值有效性测定值在质控靶值范围内。

2.10 批内瓶间差校准品批内瓶间差瓶间重复性CV≤5%质控品批内瓶间差CV≤5%。

2.11校准品溯源性根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供髓过氧化物酶校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。

专利名称：髓过氧化物酶抗体(MPO-Ab)定量测定试剂盒及其检测方法
专利类型：发明专利
发明人：于大为,杨晓勇
申请号：CN201410136534.7
申请日：20140405
公开号：CN104459107A
公开日：
20150325
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明属于临床免疫学检测技术领域，公开了一种髓过氧化物酶抗体(MPO-Ab)定量测定试剂盒，包括磁分离试剂、酶标记试剂、校准品、清洗浓缩液、底物溶液以及稳定剂。

本发明还公开了上述试剂盒的制备方法。

本发明还公开了上述试剂盒的检测方法。

本发明制备的试剂盒精确度、灵敏度以及稳定性较好，并且成本低廉，操作简单，具备广阔的应用前景。

申请人：北京中航赛维生物科技有限公司
地址：100049 北京市大兴区经济技术开发区经海二路29号院8号楼二层
国籍：CN
代理机构：北京富天文博兴知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：刘寿椿
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小鼠红细胞生成素（EPO）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：1.56ng/ml-100ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠EPO，且与其他相关蛋白无交叉反应。

有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中EPO 含量。

说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。

2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。

3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。

4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗EPO抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗EPO抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的EPO呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。

2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。

3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9.浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。

髓过氧化物酶（MPO）在ACS的诊断价值98?MedicalLaboratoryScienceandClinics,2010,V ol2t.N0.5医学检验与临床2010年第2l卷第5期方观点,但该文件在世界范围内已成为广泛应用的指南性文件:目前临床应用的心脏标志物大致分为三大类.一类是主要反映心肌组织损伤的标志物,如CK—tClB,肌红蛋白(Mb藏MYO),心肌肌钙蛋白T和I(cTn!",cTnI);第二类是了解心脏功能的标志物,如B型尿钠肽(BNP;第三大类是作为心血管炎症疾病的标志物,如翅敏C反应蛋白(I-I~一CRP),髓过氧化物酶(MPO).其中eTnl,,eTnT被美国和欧洲心脏病协会一致坪为是诊断急性心肌梗死的高特异性和高敏感性的确诊标志物;由美国和欧杪H心脏病协会推荐使用的B型尿钠肽(B—typebrainnatrittreticpepti~,BNP)是目前唯一一个最好的用于评价心力衰竭的实验室检测指标,在欧洲心脏协会(Euro.peanSoeie~ofCardiolo~,ESC)2001年的心衰诊断指南中心.已将其作为实验室检测项目中的唯一指标;欧美等发达国家已将hs—ClIP作为预防心血管疾病的相对独立的一个新的筛查指标.NACB的I.~PG推荐将MPO,hs—CIIP,IL一6等指标作为心血管炎性的生物标志物,并指出"/VIPO是已经证明具有可能用于ACS患者危险分层的新的标志物,并有可能hs—cRP联合甚或取代l1s—cRP"【3J.3MPO一一种新的,独立的预测ACS和危险性分层的炎症生物标志物急性冠状动脉综台征(AcuteCoronarySyndrome,ACS)是指在冠状动脉粥样硬化基础上,斑块破裂,表面出现裂纹,溃疡.继而血管痉挛,血小板黏附聚集,并继发血栓形成,引起完全或不完全堵塞性血栓的急性血管病变.MPO促进As病变形成.并影响粥样斑块的稳定性,通过增大氧化应激而引起AC$.目前的研究表明,MPO是预测ACS患者发生不良心血管事件的一个新的预测因子,特别是在肌钙蛋白T(c'rnT)水平较低的患者,MPO能够识别那些将来发生心血管事件危险性较高的患者{.2003年.德国学者Baldus等ⅢJ选择1090例ACS患者,测量血浆MPO水平并进行6个月的随访. 记录患者的心肌梗死和死亡情况.结果显示,患者血浆MP0水平与血浆eTnT,可溶性CD40受体,C反应蛋白(cRP)水平以及sT段的改变无关.但随着I~IPO水平升高(>350L, 31.3%),心血管发病风险明显升高.对判断cTnT水平低的AcS患者的危险性意义更大.MPO表达和活性增加先于cT. nT和CK—MB.甚至在患者发生胸痛的2h内,其水平明显升高,所以对胸痛患者而言,用MPO预测其是否发生AcS将有更重要的临床意义.关于MPO参与ACS的主要作用机制是MPO及其催化产生的氧化产物对LDL的氧化作用以及对内皮细胞的腐蚀和破坏.总结MPO与ACS发病的机制有两大类:MPO/N一系统和I~IPO/o2/CI一系统.MPO/NO,一系统:(1)促进低密度脂蛋白(LDL)的氧化:MPO能通过NO诱导的氧化剂把具有保护作用的NO作为反应底物,分离出活性的氮基,促进LDL氧化.暴露于NO2一一LDL的巨噬细胞会加速胆固醇酯的形成,从而加速细胞内胆固醇和胆固酵酯的沉积及泡沫细胞的形成.(2)消耗NO:上述过程在氧化LDL的同时消耗了NO,导致NO7J:平降低,从而引起不正常的血管收缩反应J,导致冠状动脉痉挛,参与ACS的发病.MPo/~()'/C!一系统:(1)促进低密度脂至自(LDL)的襄化:NPO催化H2一2和C1一形成HOCI,HOCI能催化LDL,生成氧化型LDL(OX—LDL).即Cl+H,O2HOC1;LDLOX—LI)I Ox—LDL,巨噬细胞,中性粒细胞以及MPO存在于ACS的痫毽组织中,且血浆OX—LDL水平与ACS的严重程度呈正相关J (2)生成次氯酸:Sugiyama等【9j的研究发现.活化的I~IPO雨性的巨噬细胞或者外源性的HOC1能促进内皮细胞从皮基质分离I-IOCI以浓度依赖的方式引起内皮细胞死亡.当HOC!的浓度为20—50umol/ml时可迅速诱导内皮细胞皱缩和细胞核的浓缩以及内皮细胞单层的破裂;然而HOC1浓度灰于lOOumol/ml时能够立即导致内皮细胞胞浆内气泡形成,而不出现细胞的皱缩;当HOC1浓度在30—50umol/ml时能够诱导c一pase一3的活I化及多聚ADP聚台酶的降解,说明HOC1能够刺激内皮细胞的凋亡性死亡.部分是通过对线粒体的损伤而导致内皮细胞死亡.由人类冠状动脉粥样硬化的内皮下的单核细胞或MPO阳性的巨噬细胞产生的珏OC1可以通过促进斑头的腐蚀和增加血栓的形成参与AcS的发病.tdPO既可作为血管的炎性介质,又可作为血管炎症的标志.AC5是一组冠状动脉粥样硬化斑块破裂,血栓形成或血管痉挛而致急性或亚急性心肌缺血的临床综合症.Biasueei等【4]研究发现冠心病(CoronaryHeartDisease,CHD)人白细胞内MPO含量显着升高,ACS患者循环中的巨噬细胞经脱颗粒释放MPO.Zhang等_l..的早期临床研究发现,白细胞的I~IPO表达水平与AC5有着密切关系,其机制是:①MPO作为一种炎症介质参与了ACs的炎症反应过程,同时形成一个正反应回路,进一步促进中性粒细胞活化,导致MPO释放增多,从而不断加强炎症反应;②MPO在体内能产生一系列可扩散的强氧化剂.氧化低密度脂蛋白使其更容易被巨噬细胞吞噬.氧化HDL—C使其参与的臣噬细胞内胆固醇外流受阻.促进胆固醇在巨噬细胞内沉积和泡沫细胞形成;③MPO产生的次氯酸能抑制金属蛋白酶组织抑制因子一1的活性.从而激活动脉壁基质金属蛋白酶(MMP),使基质蛋白聚糖降孵从而损伤血管内膜;④MPO可以通过诱导血管内皮细胞P选择素和组织园子的表达.促使血小板聚集以及降解内度源性舒张田子.使一氧化碳活性降低,弓{起冠状动脉痉挛.Brennan等研究发现:血浆MPO水平可以预测发生心肌梗死的危险,甚至在cTnT阴性(<0.1.g/m1)的患者(P<0.001).MPO水平也可以预测CHD患者30d,6个月心血管事件的发生危险(P<0.001).同样Baldus等…j报告:与eTnT,ClIP等指标一样,MPO水平可以独立预测ACS患者心血管事件自≈发兰危险并认为血浆MPO水平可以在不考虑CRP及其它炎症标志钇的情况下独立预测心血管疾病的危险性,尤其是当c保东平时,MPO比CRP更能反映冠脉病变的程度和推测心血管事件发生的危险性MPO作为一种新的预测Acs的炎茳标物,其表达和话性升高是ACS发生的原因.即促进A筌发生,医学检验与临床2010年第21卷第5期Medjc81Laborato~'ScienceandClihie::竺: 发展;而cTnT,CK—MB等指标则是心肌发生实质性坏死后才升高,是ACS发生的结果.MPO表达和活性的升高先于eTnT,CK—MB,甚至在患者发生胸痛的2h内,MPO水平即明显升高.所以对胸痈患者而言,MPO预测其是否发生ACS将有更重要的临床意义.综上所述,MPO作为一种新的预测ACS的炎症标志物,其表达和活性升高是ACS发生的原因.即促进ACS发生,发展:而肌钙蛋白T,CKMB等指标则是心肌发生实质性坏死后才升高,是ACS发生的结果.MPO表达和活性的升高先予CnT,CKMB,甚至在患者发生胸痛的2h内,MPO水平即明显升高.所以对胸痛患者而言.MPO预测其是否发生ACS将有更重要的临床意义.参考文献[1]MoriT.TownT.TanJ.eta1.Modulationofastrooyticactivationby arundicacid(ONO一2506)mitigatesdetrimenta1.effectsofthe apolipoproteinE4isoformafterpermanentfocalischemiainapolipoprotein E"knock—insice[J:.JCerebBloodFlowMetab.2005,25(6):748—762.[2]张宗彬.鲍杰.心肌标志物的实验室检测及临床应用研究进展[Jj.中国医药指南.2008.6(15):76—78.[3]郁盛恺.美国临床生化科学院检验医学实践指南:急性冠状动脉综合症和心力衰竭的生物标志物[J:.临床检验杂志.2OO9,27(5):附l～附5l[4]BiasucciLM,D.OnofrioG.LiuzzoG,eta1.1ntraccliularneutrophli myelopercxidsseisreducedinunstableanginaandaeLlI~myocardialitLfare—finn.butitsreductionisnotrelated∞ischemia[Jj.AmCellCardio1.1996:27:611—6.[5]ZhangR,BrennanML.FuX.AvilesIL1.PearceGL.PennMS.ela1.As一elationbetweenmyeloperoxidaselevelsandriskofcorona~.-art,s,diseⅡs[J].JAMA.2001.286(17)?:2136—142.[6]苏淑红.刘志强.严松彪.等.髓过氧化物酶与急性冠厨:综台歪[Jj.北京医学,2007,29(4):235—237.[7]EiseriehJP,Balduss,BrennanML.eta1.Myeloperoxidase,a]eui:c~yte—derivedvascutarNOoxidase.Science.2002+296:239t一2394.f8]EharaS,UedaM,NarttkoT.eta1.Elevatedlevelsofoxidized]owdensl—qⅪansh州aN~itivetel矗t【蝎hipⅥ讣the郫e0facuC~I'O—n脚了syndromes.Circulation.2001-103:1955—1960.[9]SagiyamaS,KuyamaK,AikawaM.eta1.Hypochtomtr,acid.am~.phageproduct,inducesendothelia1.apoptosisandtissuefactorepressiominvolvementofmyeloperoxidase—mediatedoxidantlitplaque erosionandthrombogenesis.AnerioselerThrombV aseBio1.2{~d4-24: 13O9一l3l4.lO]BrennanML,PennMS,V an—LenteF,cta1.PrognosticvoJue myeloperoxldaseinpatientsthchestpain[J].NEnIMed.2003.349:1595—1604.11]Balduss,HeesehenCMeinertzT,eta1.Mydopemxldasesemmlevel predictriskinpatientswithacutecoronarysyudromes[.Circulation.2OO3.108:1440—1445.(上接102页)结核性腹膜炎和癌性腹水最为常见,这3种病因所激发的机体免疫功能变化是不同的.有研究采用流式细胞仪对腹水T淋巴细胞亚群进行测定,发现肝硬化腹水CD3,CIM,CD8,CIM/CD8较前两种腹水显着低下.且CD4/CD8明显倒置.3种腹水中CD3,CIM,CIM/CD8以结核性腹膜炎腹水最高.癌性腹水居中;而CD8则以癌性腹水最高.结核性腹膜炎腹水次之.腹水T淋巴细胞亚群反映了腹腔局部的免疫功能.某些研究提示:(1)肝硬化患者腹腔局部的免疫功能明显低下,这可能是患者易并发自发性腹膜炎的一个原因.(2)结核性腹膜炎患者腹膜腔局部免疫力增强,这种差异可能是基于这样的免疫和病理过程:当结核杆菌感染时,首先致敏T细胞,当机体再次受到结核杆菌感染时,首先致敏T细胞,当机体再次受到结核杆菌或抗原物质入侵时与致敏的T细胞互相作用.释放出一系列细胞因子(IL一1,TNF等)及黏附分子(P选择素等),使得淋巴细胞,单核细胞定向腹膜腔内募集.聚集于结核杆菌或抗原所在部位周围,在病理形态学上则是我们常见的淋巴细胞和单核细胞浸润.(3)癌性腹水中的CD8增高,多篇文献报道一致机体对肿瘤细胞的免疫监控过程中,抗原提呈细胞将肿瘤抗原有效地提呈给T淋巴细胞,激活肿瘤抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)是抗肿瘤免疫的关键环节.CD8增高致CIM/CD8降低,降低了患者局部对肿瘤的免疫力.可导致肿瘤细胞不断增殖与扩散.这是因为恶性肿瘤细胞能分泌免疫抑制因子.从而影响T淋巴细胞亚群的平衡状态.抑钮免疫细胞的抗肿瘤免疫应答,肿瘤细胞则逃避了免疫监视.因此,解除肿瘤细胞的免疫抑制作用,优化机体的特异性抗肿瘤免疫的微环境,提高患者机体自身的抗肿瘤免疫应答.是治疗恶性肿瘤的一个有效方法.T淋巴细胞亚群从免爱学角度反映了不同病因腹水的异常,而流式细胞仪检测又相当准确,快捷.本研究提示T淋巴细胞亚群在结核性腹膜炎,肝硬化及癌性腹水存在明显差异,表明版水T游巴细胞亚群检测可用于腹水的鉴别诊断.机体抗结核免疫力主要是T淋巴细胞介导的巨噬绍胞免疫反应.最初入侵的结核菌如在巨噬细胞肉得以繁疆,兰长.其抗原经溶酶体的处理或因笆噬细胞死:丽释出呈递给辅助性T淋巴细胞(CIM)表面特殊的roT淋巴细胞曼仁.使之致敏,并增殖形成单克隆细胞系.刘氏实验结表肺结核患者外局血T淋巴细胞CIM/CD8明显降低,造展期与稳定期,好转期相比变化更明显,说明T淋巴细肥亚誉耍化与病情有关.而本实验发现结核性胸水中巴绍肥比--CIMT淋巴细胞显着升高,此现象可能与结核疠患者钋嗣血.胸水中T淋巴细胞细胞因子(n一1,TNF),粘子一芝择素)表达增加.从而定向肺内募集有关.与癌性胸东相比.结核性胸水|中CIMT淋巴细胞亚群明显升高,蔓可能百量==r= 良,恶性胸水的鉴别。

髓过氧化物酶测定试剂盒产品技术要求万孚髓过氧化物酶测定试剂盒(化学发光免疫分析法)是一种用于测定体液
中髓过氧化物酶(MPO)浓度的试剂盒。

这种测定试剂盒在医疗诊断中具有
重要的应用价值，可以帮助医生及时发现和监测一些炎症性疾病和心血管
疾病的病情。

为了保证髓过氧化物酶测定试剂盒在实际使用中的准确性和灵敏度，
产品需要满足以下一些技术要求：
1. 灵敏度：可以测定微量水平下的髓过氧化物酶浓度，灵敏度应小
于20 ng/mL。

2. 线性范围：试剂盒需要具有较广的线性范围，可以测定不同浓度
范围内的髓过氧化物酶。

通常可以测定的线性范围应从10 ng/mL至500
ng/mL。

3.反应时间：试剂盒应具有快速的反应时间，可以在较短的时间内完
成髓过氧化物酶浓度的测定。

一般反应时间应控制在30分钟以内。

4.特异性：试剂盒应具有良好的特异性，可以区分髓过氧化物酶与其
他可能存在的干扰物质。

特异性可以通过进行交叉反应实验等方法来验证。

5.稳定性：试剂盒需要具有较好的稳定性，可以在存储和运输过程中
不降低其灵敏度和准确性。

通常应具有两年以上的长期稳定性。

6.操作简便性：试剂盒需要操作简便、易于使用，并且可以适用于各
种常见的化学发光免疫分析仪器。

7.技术支持：供应商需要提供详细的产品说明书，包括操作步骤、试剂的配制方法以及结果的解读方法。

同时还需要提供技术支持和问题解答服务。

以上是髓过氧化物酶测定试剂盒(化学发光免疫分析法)的一些基本技术要求，供参考使用。

实际产品的技术要求可能会根据具体厂家和产品而有所不同。

小鼠MIP-1α(CCL3)ELISA试剂盒Mouse MIP-1α(CCL3)ELISA kitCat#：EMC010a尊敬的客户，感谢您选用本公司QuantiCyto®ELISA系列产品。

本产品选用世界著名生产厂家的原料，采用专业体外诊断试剂生产技术制造，仅供科研使用。

本产品可检测血清、血浆、细胞培养上清液、灌洗液、尿液、羊水、腹水、脑脊液、胸腔积液、组织匀浆液等多种类型样本中天然和重组小鼠MIP-1α(CCL3)浓度，具体适用样本请咨询。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分。

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QuantiCyto ®EMC010a Mouse MIP-1α(CCL3)2试剂盒组成：名称48T 96T 抗体预包被酶标板8×68×12冻干标准品0.5ng /支×2支0.5ng /支×3支标准品&标本通用稀释液12ml×1瓶20ml×1瓶浓缩生物素化抗体1支（规格见标签）1支（规格见标签）生物素化抗体稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩酶结合物1支（规格见标签）1支（规格见标签）酶结合物稀释液10ml×1瓶16ml×1瓶浓缩洗涤液20×25ml×1瓶50ml×1瓶显色底物（TMB ）6ml×1瓶12ml×1瓶反应终止液具腐蚀性6ml×1瓶12ml×1瓶封板胶纸3张6张产品说明书1份1份储存条件：未开封完整试剂盒4℃保存，请在保质期内使用。

已开封试剂盒抗体包被板条未用完的板条放回带拉链铝箔袋，封好口。

4℃条件下可储存1个月左右。

标准品冻干粉-20℃可储存6个月左右。

稀释后的标准品使用后请丢弃。

髓过氧化物酶（MPO）测定试剂盒（荧光免疫层析法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清、血浆、全血中髓过氧化物酶（MPO）的含量。

1.1规格10人份/盒、20人份/盒、50人份/盒。

1.2主要组成成分注：1.质控品质控范围批特异，具体浓度详见标签。

2.1物理性能2.1.1外观检测卡应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染；材料附着牢固。

2.1.2膜条宽度膜条的宽度应不小于3mm。

2.1.3移行速度液体移行速度应不低于10mm/min。

2.2溯源性根据GB/T21415-2008的有关规定，提供所用校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，溯源至企业工作校准品，并与已上市产品比对赋值。

2.3空白限空白限应不高于5ng/mL。

2.4准确度回收率应在85%～115%之间。

2.5线性在线性范围［10，1000］ng/mL内，相关系数（r）应不低于0.99。

2.6重复性分别检测高值和低值两个样本，重复性（CV%）应不高于15.0%。

2.7批间差在三个批次产品之间，样本测定结果的变异系数（CV%）应不高于20.0%。

2.8特异性2.9质控品赋值有效性测定高值、低值浓度质控品，其结果均应在质控范围内。

2.10稳定性2.10.1效期稳定性10℃～30℃储存（质控品2℃～8℃），有效期12个月，效期后2个月内分别检测2.3～2.6，2.8，2.9项，其结果应符合各项要求。

2.10.2质控品复溶稳定性冻干粉试剂复溶后，－20℃以下储存，有效期1个月，分别检测2.6，2.9项，其结果应符合各项要求。

髓过氧化物酶指数在57例急性冠状动脉综合征患者的临床应用髓过氧化物酶(MPO)是由中性粒细胞、单核细胞和某些组织的巨噬细胞分泌的含血红素辅基的血红素蛋白酶，是血红素过氧化物酶超家族成员之一。

分子量为150KDa。

MPO基因位于人第17号染色体，其编码蛋白翻译修饰后形成2条轻链和2条重链，构成四聚体糖基化蛋白。

在早期由北京协和洛克和美国克利夫兰医院共同研究发现出来，它具有早期预警和提前筛查心脑血管疾病一个标记物。

另一方面血液中95%的MPO来源于多形核白细胞。

尽早明确急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)的诊断、危险分层及正确地评估个体近期发生ACS的危险性,对尽早干预治疗ACS至关重要。

有研究表明,血浆髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MP0)是早期诊断ACS的重要指标,与心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)联合应用更能增加ACS诊断的灵敏度[1]。

尤其是当cTnI正常时,血浆MPO升高可预测心脏事件的发生[2]。

但血浆MPO检测方法繁琐,目前无法自动化,临床应用受到限制。

Unionluck全自动血细胞分析仪是一种基于流式细胞分析原理的仪器,现在广泛应用于大中型医院实验室,在计数全血细胞的同时可根据细胞内MPO染色的情况得出中性粒细胞过氧化物酶活性指数(myeloperoxidase index,MPXI),用于评价炎症状况和白血病[3-4]。

现将本院分析MPXI在57例ACS患者的临床应用报道如下。

1资料与方法1.1一股资料选择2011年5~8月本院收治的ACS患者57例。

其中,不稳定型心绞痛(UAP)20例为UAP组,其中,男12例,女8例,年龄(70.00±10.10)岁。

非ST段抬高心肌梗死(NSTEMI)20例为NSTEMI组,其中,男12例,女8例,年龄(67.00±18.10)岁。

ST段抬高型心肌梗死(STEMI)17例为STEMI组,其中,男8例,女9例,年龄(69.90±15.20)岁。

髓过氧化物酶(mpo)蛋白定位
髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO) 是一种存在于中性粒细胞和单核细胞中的酶，它在细胞内的定位主要在嗜天青颗粒中。

嗜天青颗粒是一种特殊的细胞器，位于中性粒细胞和单核细胞的细胞质中。

MPO 作为嗜天青颗粒的主要成分之一，与其他蛋白质和酶一起被包裹在嗜天青颗粒内。

当细胞受到刺激时，如病原体入侵或炎症反应，嗜天青颗粒会与细胞膜融合，释放出其中的内容物，包括MPO。

MPO 随后可以参与细胞的呼吸爆发过程，产生大量的活性氧物种(ROS)，如过氧化氢(H2O2) 和次氯酸(HClO)，以帮助杀死病原体。

此外，MPO 还可以在细胞外释放，并与其他蛋白质形成复合物，参与炎症反应和免疫防御过程。

MPO 蛋白主要定位在中性粒细胞和单核细胞的嗜天青颗粒中，当细胞受到刺激时，它会被释放出来参与细胞的呼吸爆发和免疫防御过程。

髓过氧化物酶（MPO）测定试剂盒
（化学发光法）
2. 性能指标
2.1外观
2.1.1分装盒中试剂条各组分应齐全、完整、无泄漏，试剂盒（瓶）上包装标签应清晰、无磨损。

2.1.2试剂条中的磁微粒试剂摇匀后，应为均匀悬浊液，无明显凝集；其他液体试剂溶液组分应澄清，无悬浮物、无沉淀物、无絮状物。

2.1.3校准品、质控品为冻干品，呈粉末或块状固体，不起泡、不塌陷；复溶后应为清澈透明液体，无沉淀，无悬浮物，无絮状物。

2.2准确度
相对偏差应在±10%范围内。

2.3空白限
应不大于5 ng/mL 。

2.4重复性
批内变异系数CV应不大于10%。

2.5线性范围
试剂盒线性范围（50~800）ng/mL ，在此线性范围内，相关系数r应≥0.9900。

2.6批间差
批间变异系数CV应不大于15%。

2.7 校准品、质控品均一性
瓶内均一性≤8.0%，瓶间均一性≤5.0%。

2.8 校准品赋值准确性
相对偏差应在±10%范围内。

2.9 质控品赋值准确性
质控品测值在参考范围内。

髓过氧化物酶（MPO）测定试剂盒（酶联免疫吸附法）
适用范围：用于体外定量测定人血浆中髓过氧化物酶（MPO）的含量。

1.1产品规格：24人份/盒、48人份/盒、96人份/盒、192人份/盒1.2主要组成成分
注：校准品具有批特异性，每批靶值详见瓶签；质控品质控范围靶值批特异详见：质量控制检验单
2.1外观
试剂盒各组份应齐全、完整，液体组分无渗漏，标识清晰易识别。

2.2检测限
不大于25ng/ml。

2.3准确度
回收率为85%～115％。

2.4线性
试剂盒的线性范围为[50，800]ng/ml，相关系数r不小于0.9900。

2.5重复性
用高、低2个浓度水平的样本各重复检测10次，其变异系数（CV）不大于13%。

2.6特异性
白蛋白ALB50g/L、高密度脂蛋白HDL浓度1.6g/L做交叉反应，MPO浓度与本底的差值应不大于25ng/ml。

2.7校准品溯源性
生产企业应根据GB/T21415-2008及有关规定提供所用校准品的来源，赋值过程以及不确定度等内容，溯源至企业一级校准品。

2.8可接受区间
分别取高、低两个浓度，检测其浓度值，每个测试值均应在所示的质控范围内。

2.9批间差
用3个批号试剂盒检测同一份样本，变异系数（CV）应不大于15%。

2.10稳定性
试剂盒在2℃～8℃储存有效期为12个月，取到效期后产品进行检测，检测结果应符合2.1～2.6、2.8项要求。

2．性能指标
2.1外观和性状
试剂盒各组分应齐全、完整，液体无渗漏；中文包装标签应清晰、明确、牢固，无划破或缺失部分。

2.2各组份净含量
各组份应不低于装量瓶标签标示的装量要求。

2.3试剂盒校准品均一性
瓶间重复性CV值应≤10%。

2.4准确度
检测浓度与理论浓度的偏差应在±10%范围内。

2.5试剂盒最低检测限
应不大于20 ng/ml。

2.6线性范围及线性要求
试剂盒线性范围在50 ng/ml~800 ng/ml之间，在该范围内试剂盒的相关系数r值应≥0.9900。

2.7精密度
试剂盒批内变异系数应≤10%，批间变异系数应≤15%。

2.8分析特异性：血红蛋白5 mg/ml、甘油三酯10 mg/ml、胆红素0.2 mg/ml、促红细胞生
成素（EPO）50 IU/ml时，用于本试剂盒的干扰实验检测，均无非特异性反应，干扰样本检测浓度与对照样本检测浓度的相对偏差应在±15%范围内。

1。

髓过氧化物酶（MPO）测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中髓过氧化物酶（MPO）的浓度。

1.1试剂盒包装规格试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×54ml，试剂2：2×18ml；试剂1：3×39ml，试剂2：3×13ml；试剂1：4×54ml，试剂2：4×18ml；试剂1：2×300ml，试剂2：1×200ml；试剂1：2×30ml，试剂2：2×10ml。

校准品（选配，冻干品）：5×1ml（五水平）。

质控品（选配，冻干品）：1×1ml；1×2ml。

1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：乳白色悬浊液体。

校准品：冻干品，复溶后为无色至浅黄色液体。

质控品：冻干品，复溶后为无色至浅黄色液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白吸光度在37℃、600nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于2.0。

2.4 分析灵敏度测定浓度为200ng/ml样本时，吸光度变化值（ΔA）应在（0.02，0.25）范围内。

2.5 线性范围在（25，1300）ng/ml线性范围内，线性相关系数r应不小于0.990。

在（25，150]ng/ml范围内测定结果的线性绝对偏差应不大于±15ng/ml；在（150，1300）ng/ml范围内测定结果的线性相对偏差应不大于±10%。

2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于10%。

2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。

2.8 准确度回收试验：回收率应在85%～115%。

2.9 质控品赋值有效性测定结果在靶值范围内。

2.10 瓶间差（均一性）校准品和质控品的瓶间变异系数（CV%）应不大于5%。

小鼠单克隆抗体MPOAPC简介
共轭APC
抗原MPO
克隆8/9
同型IgG2b、k
应用领域FC
反应性人类
主持人老鼠
克隆性单克隆
小学/中学基本的
格式0.09%叠氮HUA钠、0.2%BSA（w/v）、PBSpH7.2
贮存28℃
StatusRUO
粒细胞门控RBC裂解的WBC细胞内用抗MPO（8/9）APC（RED）
染色；粒细胞门控RBC裂解WBC用作FMO对比（蓝色）。

描述：克隆8/9是一种小鼠单克隆抗体，选择性地与髓过氧化物酶（MPO）结合，髓过氧化物酶是一种存在于骨髓细胞颗粒中的糖蛋白。

MPO对于骨髓细胞的最佳氧倚靠性杀菌活性至关紧要。

MPO通常显现
在骨髓细胞分化的成髓细胞阶段。

它是骨髓细胞最常见的功能蛋白，参加骨髓细胞介导的炎症免疫反应过程。

MPO的初级翻译产物经过
糖基化，产生89kDa无血红素的阿扑原MPO形式，然后掺入血红素
并转化为具有酶活性的原MPO形式。

随后，proMPO靶向嗜天青颗粒，在颗粒中进行最后加工，产生由5964kDaMPOα链和14kDaMPOβ链
构成的成熟二聚体MPO。

MPO基因表达可作为急性白血病亚分类的附
加标记，并可用于识别在骨髓分化途径早期阶段停滞的白血病细胞。

大鼠髓过氧化物酶(MPO)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：48T8 IU/L -200 IU/L使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中髓过氧化物酶(MPO)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠髓过氧化物酶(MPO)水平。

用纯化的大鼠髓过氧化物酶(MPO)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加髓过氧化物酶(MPO)，再与HRP标记的髓过氧化物酶(MPO)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的髓过氧化物酶(MPO)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠髓过氧化物酶(MPO)浓度。

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。