水分和盐胁迫下平邑甜茶根系细胞程序性死亡研究

水分胁迫对柑橘叶片和根系细胞超微结构的影响作者：王蓓蕾来源：《科学与财富》2015年第13期摘要：随着我国现代经济的不断发展，果树养殖业也在快速发展过程中。

但是由于我国版图较大，各地区的气候条件存在较大差异，对于果树的繁殖和生长具有着较大的影响，其中北方和西北地区土质水分较为稀少，产生的水分胁迫情况较为严重。

本文即是对水分胁迫对柑橘叶片和根系细胞超微结构的影响进行分析，分别选择枳橙、山下红、沙田柚这三种柑橘品种作为样品。

分别在水分含量60%、40%以及20%的情况下对其叶片和根系进行水分胁迫处理，了解在不同水分含量情况下水分胁迫对柑橘叶片和根系细胞造成的损伤程度，以期能为相关工作提供参考。

关键词：柑橘；叶片细胞；根系细胞；水分胁迫；超微结构水分胁迫是一种植物本身水分散失超过水分吸收的情况，当植物的细胞内水分流失量逐渐加大时，其细胞内的代谢功能就会受到影响，甚至会导致细胞结构遭到破坏，甚至导致气孔关闭，叶绿体和线粒体破裂等情况，对植物细胞的威胁性较大。

1、实验材料本次研究当中所选用的实验材料主要为三种柑橘，分别是枳橙、山下红和沙田柚。

2、实验方法在实验开始前，首先要对实验用的土壤进行配置。

选取普通的河沙、棉籽壳，将其与普通的果园土壤按照比例进行混合，并且将其放入设定为70℃的烘干箱内进行烘干，一般烘干时间为7天。

然后取容量为1升的培养钵，在其中装入已经干燥后的培养土质，并且在每一个培养钵当中植入一株幼苗，并称量其重量。

随后对幼苗进行充分的浇灌，直至培养钵中的土壤吸饱水分之后再对其进行称取，将培养钵的干重和浇灌后的重量进行对比，得出培养土壤能够达到的最大持水量。

第三，将浇灌后的植株转移入温室当中进行培养，待其完全成活之后，将其再次转移到恒温箱当中进行培养，恒温箱温度设定为30℃，在此过程中禁止对植株进行浇灌，并对其进行水分胁迫处理。

在培养的7天当中，每隔两天称量培养钵的重量，并将其与浇灌后重量相比，得出的数值再与原有持水量进行对比就能够得出土壤当中的含水比率。

盐碱胁迫对果树的危害及其分子机理研究进展作者：郝兰兰李小兰王鸿来源：《甘肃农业科技》2022年第03期摘要：盐碱胁迫是影响果树生长发育最严重的限制因子之一。

果树受盐碱胁迫后根系生长受阻、叶片变小、发育迟缓，造成植株矮化、早衰甚至死亡。

从细胞膜透性、POD、SOD等生理特性方面分析了果树对盐碱复合胁迫的响应机制，多角度分析了果树抗盐碱的分子机理。

关键词：果树;盐碱胁迫;生理特性;分子机理中图分类号：S156.4 文献标志码：A 文章编号：1001-1463（2022）03-0001-05doi：10.3969/j.issn.1001-1463.2022.03.001Research Progress on Response Mechanism of Fruit Trees Under SalineAlkali StressHAO Lanlan 1，2， LI Xiaolan 1，2， WANG Hong 1，2（1. Institute of Fruit and Floriculture Research， Gansu Academy of Agricultural Sciences，Lanzhou Gansu 730070， China; 2. College of Horticulture， Gansu Agricultural University，Lanzhou Gansu 730070， China）Abstract：Salt-alkali stress is one of the most serious limiting factors affecting the growth and development of fruit trees. The root growth of fruit trees under salt-alkali stress was blocked， leaves became smaller， growth retarded， resulting in plant dwarfing， premature senility and even death. In this paper， the response mechanism of plants to salt-alkali combined stress was analyzed from the aspects of osmotic regulation， cell membrane permeability、 POD、 SOD、 etc. And the molecular mechanism of salt-alkali resistance of fruit trees was summarized from various angles.Key words：Fruit tree;Salt and alkali stress;Physiological characteristic;Molecular mechanism果树是重要的经济树种，中国是世界上水果种植面积和产量均居首位的国家，果树产业产值居种植业的第3位[1 ]。

CT AB法原理CTAB(hexadecyltrimethy lammonium bromide，十六皖基三甲基漠化住），是一种阳离子去污剂，具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚桔的特性。

在高高子强度的溶液中（＞O.7mol/L NaCl), CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。

通过有机溶剂抽提，去除蛋白，多糖，盼类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。

CTAB提取缓冲液的经典配方Tris-HCI (pH8. 0）提供一个缓冲环境，防止核酸被破坏；E D T A整合g2＋或n2＋离子，抑制DNase活性；NaCl提供一个高盐环境，使DNP充分溶解，在于液相中；CTAB溶解细胞膜，并结合核酸，使核酸便于分离；巳－就基乙醇是抗氧化剂，有效地防止盼氧化成醒，避免褐变，使盼容易去除PVP （聚乙烯P比咯烧嗣）是盼的络合物，能与多盼形成一种不溶的络合物质，有效去除多盼，减少D NA中盼的污染；同时它也能和多糖结合，有效去除多糖。

用盼抽提细胞DNA时，有什么作用？使蛋白质变性，同时抑制了DNas巳的降解作用。

用苯盼处理匀浆液时，由于蛋白与DNA联结键已断，蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯盼相似相溶．蛋白分子溶于盼相，而DNA溶于水相。

使用盼的优点：1.有效变性蛋白质；2抑制了DNase的降解作用。

缺点：1.能溶解10-15%的水，从而溶解一部分po ly(A)RNA.2.不能完全抑制RNase的活性＠氯仿的作用？氯仿：克服盼的缺点；加速有机相与液相分层。

最后用氯仿抽提：去除核酸溶液中的迹量盼．（盼易溶于氯仿中）用盼氯仿抽提细胞基因组DNA时，通常要在盼氯仿中力口少许异戌醇，为什么？异戊醇：减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。

异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。

另外，异戌辟有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定．用乙醇沉淀DNA时，为什么加入单价的阳离子？用乙醇沉淀DNA时，通常要在溶液中加入单价的阳离子，如Na Cl或NaAc,Na＋中和DNA分子上的负电荷，减少DNA分子之间的同性电荷相斥力，而易于聚集沉淀。

中国农业科学 2007,40(5):980-986 Scientia Agricultura Sinica收稿日期：2006-04-20；接受日期：2006-09-12基金项目：北京市重点实验室“果树逆境生理与分子生物学实验室”资助项目作者简介：谭冬梅（1972-），女，江苏常熟人，博士，研究方向为果树逆境生理与分子生物学。

E-mail ：dongmeitan@干旱胁迫对新疆野苹果及平邑甜茶生理生化特性的影响谭冬梅1，2（1中国农业大学园艺植物研究所，北京 100094；2潍坊学院生物工程学院，潍坊 261061）摘要：【目的】研究干旱胁迫能否诱导新疆野苹果和平邑甜茶发生细胞程序性死亡。

【方法】采用20%聚乙二醇（PEG6000）模拟干旱处理苹果属植物平邑甜茶（Malushupehensis pamp Reld.）和新疆野苹果（M. sieversii (Ledeb) Roem.）。

【结果】NBT 染色结果表明，平邑甜茶叶片在处理1 d 后开始有染色斑出现，4 d 后叶片几乎被全部染色；新疆野苹果叶片在处理3 d 后开始有染色斑出现，7 d 后叶片几乎被全部染色。

叶片萎蔫情况观察可以看出：平邑甜茶在处理3 d 后开始萎蔫， 4 d 后叶片干枯、整个植株死亡；新疆野苹果在处理6 d 后开始萎蔫，7 d 后整个植株死亡。

两个苹果种的叶片相对电导率随处理时间的延长逐渐上升；平邑甜茶在处理3.5 d 后相对电导率增幅明显加大，而新疆野苹果在处理6 d 后才明显增大。

平邑甜茶在处理后DNA 和RNA 含量就开始明显下降，而新疆野苹果下降速度缓慢。

【结论】0.1% NBT 染色、相对电导率测定、DNA 含量和RNA 含量测定等生理生化指标不仅可以作为鉴定苹果属植物在水分胁迫条件下发生细胞程序性死亡的指标，而且可以作为衡量苹果属植物抗旱性及衰老的参考指标。

关键词：苹果属植物；干旱胁迫；细胞程序性死亡；生理生化指标The Physiology and Biochemistry of Programmed Malus siversii andM. hupehensis Cell Death under Drought StressTAN Dong-mei 1,2(1Institute for Horticultural Plants ，China Agricultural University, Beijing 100094; 2Department of Agriculture and Engineering, Weifang University, Weifang 261061)Abstract : 【Objective 】 The object of the study was to observe the relationship between drought stress and programmed cell death. 【Method 】 Twenty percent of polyethylene glycol(PEG6000) was used to simulate drought stress to treat the seedlings of Malus sieversii and M. hupehensis . 【Result 】 NBT dyed reaction showed that M. sieversii leaves began appearing dyed spots 1 day after being treated. Its area expanded 4 days later, but these occurred in M. hupehensis at 1st and 7th day after the treatment, respectively. The seedlings of M. sieversii started to wilt at the 3rd day after treatment and died after 4 days. Seedlings of M. hupehensis began to wilt after 6 days treatment and died on the 7th day. The contents of DNA and RNA in leaves of M. hupehensis decreased rapidly after treatment, but it only happened in M. sieversii, 7 days after being treated. 【Conclusion 】Physiology and biochemistry indexes could not only identify Malus’ programmed cell death. Instead, they measured the plants sensitivity to drought stress as well as reflected the plant resistance to drought stress and senescence in Malus.Key words : Malus ; Drought stress; Programmed cell death; Physiology and biochemistry parameters0 引言【研究意义】细胞程序性死亡存在于植物的根、茎、叶、花、果实之中，并伴随植物生长发育的始终，植物的程序性死亡是从近十几年才开始研究的。

盐胁迫下植物水分平衡调节机制的研究盐胁迫是指土壤中盐分过高，超过植物正常需求的情况，会导致植物生长受到极大影响，甚至死亡。

盐胁迫是全球干旱地区普遍面临的问题，也是限制植物生产力和农业发展的重要因素之一。

为了解决这一问题，对盐胁迫下植物水分平衡调节机制的研究显得尤为重要。

植物对盐胁迫的响应植物在盐胁迫下的响应可以归纳为两类：生理响应和形态响应。

生理响应是指植物在盐胁迫下调整内部环境，维持正常的生理过程，这些过程包括渗透调节、离子调节、抗氧化和调节生长物质的合成等等。

形态响应是指植物在盐胁迫下改变植株外形和结构，减轻盐分影响，这些形态响应包括根系结构调整、叶片改变和数量变化、根系和地上部分的分配比例调整等等。

植物水分平衡调节机制植物水分平衡调节机制是指植物在盐胁迫下调整内部渗透、离子平衡、蒸腾降温等一系列生理过程，以维持正常的生长和发育。

具体来说，包括以下几个方面：1. 细胞渗透调节植物在水分不足的情况下，细胞内水分含量降低，细胞体积缩小，细胞质浓缩，这时渗透压会升高。

通过细胞膜的渗透调节，植物可以保持细胞水分平衡和离子平衡。

在盐胁迫下，植物通过积累不同的有机溶质来调节渗透压，从而维持细胞渗透压平衡。

2. 离子调节盐胁迫会导致土壤中钠、氯、镁等离子积累，从而改变植物细胞内部离子平衡。

植物通过大量积累钾、钙等对植物有益的离子，并减少对盐分吸收，来维持植物细胞内部离子平衡。

3. 蒸腾平衡植物在盐胁迫下，由于水分不足，为了减轻水分流失，植物需要减少蒸腾和增加水分利用效率，从而调节蒸腾平衡。

植物通过关闭气孔、生长新的根系等方式，来有效减少蒸腾流失。

4. 抗氧化盐胁迫下，会导致植物细胞受到氧化应激的影响，从而损害细胞内部结构和功能。

植物通过合成抗氧化物质，如谷胱甘肽、超氧化物歧化酶等，来减轻氧化应激的影响，保护细胞内部结构和功能的完整性。

结语盐胁迫是植物生长中普遍面临的问题，深入研究盐胁迫下植物水分平衡调节机制，可以为植物的抗盐性提高和农业生产做出重要贡献。

细胞程序性死亡的调控机制研究在人类身体内，细胞不断地进行着增殖和死亡。

然而，对于一些具有病毒感染或DNA损伤等异常情况的细胞，如果不及时清除，就会对身体造成损害。

为了维护机体内环境的稳定性，我们需要一种能够引导异常细胞自我消亡的机制，这就是细胞程序性死亡（apoptosis）。

细胞程序性死亡是一种高度调控的生物学过程。

当细胞体检测到DNA损伤或者其它的异常状态时，就会激发一个信号通路，从而使得这个细胞开启自毁程序。

这个信号通路中包含了许多的分子，这些分子共同协作完成细胞程序性死亡的任务。

在这个过程中，一些重要的细胞器官如粒细胞和核糖体等也会发生改变。

最早研究细胞程序性死亡的学者是英国的约翰·康妮(Robert Horvitz)和新加坡的霍普金斯(Andrew Fire)。

他们在1993年发现了一些有关线虫-apoptosis的基因，并因此获得了诺贝尔奖。

现在，我们已经知道了很多关于细胞程序性死亡的机制。

我们知道，在不同的生物中，涉及到调控细胞程序性死亡的分子也各不相同。

但是，不管在哪个生物中，一个典型的细胞程序性死亡过程中，大部分都可以分为三个不同的阶段：初始激活、执行程序性死亡命令和细胞坏死。

在初始激活阶段，细胞体内的一些分子将会受到特定的信号刺激。

这些信号会高度特异性地与细胞表面的对应受体结合。

这些受体大多是一些跨膜蛋白，然而，在接受到这些信号的过程中，这些跨膜蛋白会经历一些构象改变，使得它们会在细胞外面活化一些酶，这些酶也被称为半胱氨酸蛋白酶(caspases)。

在第二阶段，这些活化的半胱氨酸蛋白酶将细胞完全销毁。

它们会侵袭细胞的一些重要结构，如蛋白质骨架和核糖体，并摧毁大部分细胞DNA。

随着这些酶的进一步攻击，最终会导致整个细胞溃散成一个由碎片构成的积木状结构，这个过程称为细胞凋亡。

然而，在某些特定情况下，比如细胞受到太大的损害，其程序性死亡会变成一种不可逆的先天的反应，这种现象称为受损性细胞死亡(necrosis)。

盐胁迫诱导水稻根尖细胞程序性死亡过程中的核酸内切酶的开题报告一、研究背景和意义水稻是全球最重要的粮食作物之一，在我国的粮食经济中占有重要地位。

然而，因为不断恶化的土地和水资源环境，水稻的生产也受到了很大的影响。

其中，高盐胁迫是导致水稻生长受到限制的重要因素之一。

因此，研究高盐胁迫对水稻生长和发育的影响，对于提高水稻的耐盐性和产量至关重要。

目前已有很多研究表明，盐胁迫对植物的生长和发育都会产生负面影响，并且可能导致植物程序性细胞死亡 (PCD) 的产生。

PCD 是植物内在调节生长和发育的重要过程之一，也是因环境胁迫而导致植物死亡的主要方式之一。

具体来说，PCD 是由于内部或外部胁迫因素导致细胞发生典型的死亡过程，包括核酸内切、细胞壁分解和色素体破坏等现象。

因此，研究盐胁迫诱导水稻根尖细胞程序性死亡的过程，对于加深对水稻耐盐性的认识，提高水稻产量具有十分重要的意义。

二、研究内容和目标本研究将以水稻作为研究对象，构建高盐胁迫处理实验，观察处理后根尖细胞是否产生了程序性死亡现象，并探究其中可能涉及的核酸内切酶的作用。

具体研究内容包括：1. 构建高盐胁迫处理实验。

我们将使用不同浓度的NaCl 溶液来处理水稻幼苗，以获得不同程度的盐胁迫情况下的根尖细胞样本。

2. 观察盐胁迫诱导下的水稻根尖细胞是否发生程序性死亡。

通过细胞形态学方法观察细胞死亡和染色体断裂等现象，验证盐胁迫是否能诱导水稻程序性死亡。

3. 探究核酸内切酶在盐胁迫诱导水稻根尖细胞程序性死亡中的作用。

通过RNAi技术和克隆制备方法来研究内切酶的功能和表达特点，并探究其在程序性死亡调控中的作用。

本研究的主要目标是通过上述实验，从遗传学、细胞生物学等角度深入研究高盐胁迫对水稻根尖细胞程序性死亡的影响，进一步探究相关分子机制，从而为提高水稻的耐盐性和增加产量提供有力的理论支持。

三、研究方法本研究的主要实验方法包括：1. 植物材料处理：使用第一代水稻品种“丰收65”作为研究材料，从种植后的幼苗中挑选处于生长稳定期的样本进行处理。