电镜样品基本制备技术之负染色技术
- 格式:ppt
- 大小:72.00 KB
- 文档页数:15
负染色操作步骤-概述说明以及解释1. 引言概述部分的内容可以按如下方式编写:1.1 概述负染色是一种常用的细胞和组织样品处理技术,它常被应用于生物学和医学研究中,用于观察细胞和组织内部的结构和特征。
相比于传统的正染色方法,负染色操作具有一些独特的优势和特点。
在负染色过程中,样本被浸泡在一种特定的染料溶液中,这种染料溶液往往是一种与样品的成分不相溶的物质。
负染色的关键在于利用染料的物理和化学性质,使其与样品发生作用,从而使样品的细节和特征得以显示。
负染色的操作步骤相对简单,但需要一定的技巧和经验。
本文将详细介绍负染色的操作步骤要点,旨在帮助读者快速掌握负染色技术并正确应用于实验中。
负染色的具体步骤将在接下来的章节中进行介绍,主要包括:样品制备、染料选择、染色操作、观察和分析等环节。
通过正确的操作步骤,可以获得清晰、可靠的负染色结果,从而进一步推进相关研究领域的发展。
总之,负染色作为一种常用的细胞和组织样品处理技术,具有独特的优势和特点。
本文将深入介绍负染色的操作步骤要点,希望能够为读者提供一份实用的参考,帮助其在实验中正确应用负染色技术。
文章结构部分的内容应该是关于整篇文章的组织结构和章节安排的介绍。
可以按照以下方式编写:文章结构:本文将按照以下结构进行叙述:1. 引言1.1 概述1.2 文章结构1.3 目的2. 正文2.1 负染色操作步骤要点12.2 负染色操作步骤要点23. 结论3.1 总结3.2 展望在引言部分,我们将简要说明本文的主题和目的,以及为什么负染色操作步骤的了解对于某些特定应用领域的重要性。
接下来的正文部分将分为两个要点,分别介绍负染色操作的具体步骤,包括所需材料、实验条件等重要信息。
通过对每个步骤要点的详细描述,读者将能够理解负染色操作的基本原理和实施方法。
最后,在结论部分,我们将对整篇文章进行总结,回顾负染色操作的关键步骤和要点,并展望未来在该领域的进一步研究和应用方向。
通过以上的文章结构安排,读者将能够清晰地了解整篇文章的内容组织和章节间的逻辑关系,从而更好地理解和掌握负染色操作步骤的相关知识。
透射电镜样品制备流程由于透射电镜能观察的样品必须很薄(60~70nm),所以透射电镜的样品准备要求很严格,方法也很单一,仅有一下两种方法:一.负染色技术负染色技术简单快速,可以显示生物大分子、细菌、分离的细胞器以及蛋白晶体等样品的形态、结构、大小以及表面结构的特征。
尤其在病毒学中,负染色技术有着广泛的应用。
样品要求:①样品悬液的纯度不要求很纯,但是如果杂质太多,如大量的细胞碎片,培养基残渣,糖类以及各种盐类结晶的存在都会干扰染色反应和电镜的观察。
尤其是不能有过多的糖类,因为在电子束的轰击下,糖类容易碳化而有碍观察,因此样品要适当提纯。
②样品悬液的浓度要适中,太稀在电镜下很难找到样品,太浓样品堆积影响观察。
操作流程:吸取样品悬液滴到有膜的铜网上,静置数分钟,然后用滤纸吸去多余的液体,滴上负染色液,染色1~2min后滤纸吸去负染色液,待干后用于电镜观察。
二、超薄切片技术超薄切片技术是为透射电镜观察提供薄样品的专门技术,是生物学中研究细胞超微结构最常用的技术。
广泛应用于生物体的各种细胞的超微结构观察。
一般厚度在10~100nm的切片称为超薄切片,制作这种切片的技术叫做超薄切片技术。
超薄切片制作的过程包括取材、固定、脱水、渗透、包埋、聚合、切片和染色等几个环节,和一般光学显微镜的石蜡切片过程相似。
但是,超薄切片切片过程更为细致与复杂,要求更严格,而且所用的试剂比较昂贵、配制复杂、强致癌。
具体操作步骤、注意事项如下:1.取材和前固定:快速的切取大小为0.5~1.0mm3的样品块,一分钟内把组织(样品)块浸入2.5%戊二醛(进口品质)溶液(取样前来平台领取),每个离心管内装20个以上的样品块,作为一个样送到平台。
要求:①取材前一定要和工作人员取得电话联系!②取材选择部位要准确可靠,确保每块材料都是要观察的部位。
③所有植物样品一定要抽真空,能够沉底的样品也抽真空15mins,不能沉底的样品一定要抽真空致沉底!④细菌、散在细胞等不能成块的样品,加戊二醛固定液,离心沉淀后送到平台,由平台工作人员处理。