描述乳糖操纵子的作用机理
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1、乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I。
2、阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。
所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。
3、CAP的正性调节:在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶。
4、协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调、互相制约。
5、在葡萄糖存在的情况下乳糖操纵子不表达,只有在葡萄糖不存在而乳糖存在的情况下表达。
色氨酸操纵子要点色氨酸操纵子负责色氨酸的生物合成,当培养基中有足够的色氨酸时,这个操纵子自动关闭,缺乏色氨酸时操纵子被打开,trp基因表达,色氨酸或与其代谢有关的某种物质在阻遏过程(而不是诱导过程)中起作用。
阻遏-操纵机制对色氨酸来说是一个一级开关,主管转录是否启动,相当于粗调开关。
trp操纵子中对应于色氨酸生物合成的还有另一个系统进行细调控,指示已经启动的转录是否继续下去。
这个细微调控是通过转录达到第一个结构基因之前的过早终止来实现的,由色氨酸的浓度来调节这种过早终止的频率。
当培养基中色氨酸的浓度很低时,前导区结构是2-3配对,不形成3-4配对的终止结构,所以转录可继续进行。
当培养基中色氨酸浓度较高时,核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子,3-4区自由配对形成基一环终止子结构,转录被终止,trp操纵子被关闭。
1.乳糖操纵子地正负调控机制⑴乳糖操纵子()是由调节基因()、启动子()、操纵基因()和结构基因(、、)组成地. 编码阻遏蛋白,、、分别编码β半乳糖苷酶,β半乳糖苷透性酶和β半乳糖苷转乙酰基酶.⑵阻遏蛋白地负性调控:当培养基中没有乳糖时,阻遏蛋白结合到操纵子中地操纵基因上,阻止了结构基因地表达;当培养基中有乳糖时,乳糖(真正是异乳糖)分子和阻遏蛋白结合,引起阻遏蛋白构象改变,不能结合到操纵基因上,使聚合酶能正常催化转录操纵子上地结构基因,即操纵子被诱导表达.⑶是一个重要地正调节物质,可以与操纵上地启动子区结合,启动基因转录.培养基中葡萄糖含量下降,合成增加,与形成复合物并与启动子结合,促进乳糖操纵子地表达.⑷协调调节:乳糖操纵子调节基因编码地阻遏蛋白地负调控与地正调控两种机制,互相协调,互相制约.2.详述大肠杆菌色氨酸操纵子地调控机理.答:大肠杆菌色氨酸操纵子地转录受阻遏和衰减两种机制地控制,前者通过阻遏蛋白和操纵基因地作用控制转录地起始,后者通过前导序列形成特殊地空间结构控制转录起始后是否进行下去.⑴色氨酸操纵子地可阻遏系统:在阻遏系统中,起负调控地调节基因地产物是一个无活性地阻遏蛋白,色氨酸是辅阻遏物;当色氨酸不足时,阻遏蛋白无活性,不能和操纵基因结合,色氨酸操纵子能够转录;当色氨酸充足时,阻遏蛋白和它结合而被激活,从而结合到操纵基因上,而色氨酸操纵子地操纵基因位于启动基因内,因此,活性阻遏物地结合排斥了聚合酶地结合,从而抑制了结构基因地表达.⑵色氨酸操纵子地衰减调控在色氨酸操纵子地操纵基因和第一个结构基因之间有一段前导序列,在前导序列上游部分有一个核糖体结合位点,后面是以起始密码开头地个氨基酸地编码区,编码区有两个紧密相连地色氨酸密码子,后面是一个终止密码子,在开放阅读框下游有一个不依赖ρ因子地终止子,是一段富含地回文序列,可以形成发夹结构,因此可以在此处终止转录.另外前导序列包含个能进行碱基互补配对地片断区、区、区和区.它们能以、和、或、地方式进行配对,从而使前导序列形成二级结构地变化.在细菌中,翻译与转录偶连,一旦聚合酶转录出中地前导肽编码区,核糖体便立即结合上去翻译这一序列.当细胞中缺乏色氨酸时,地浓度很低,核糖体翻译前导肽至两个连续地色氨酸密码子处就陷入停顿,这时核糖体只占据区,由聚合酶转录地区和区便可配对,区游离在外,这样就不能形成终止子结构,聚合酶就可以一直转录下去,最后完成全部结构基因地转录,得到完整地分子.当细胞中存在色氨酸时,就有一定浓度地,核糖体便能顺利通过两个连续地色氨酸密码子而翻译出整个前导肽,直到前导肽序列后面地终止密码子处停止.此时,核糖体占据了区和区,结果区和区配对,形成转录终止子结构,使聚合酶终止转录.实现衰减调控地关键在于时间和空间上地巧妙安排.在空间上,两个色氨酸密码子地位置很重要,不可随意更改;在时间上,核糖体停顿于两个色氨酸密码子上时,序列应当还未转录出来.3.基因组文库与文库地区别:①材料不同.基因组文库以为材料,而文库以为材料.②基因结构不同.基因组文库中包含了所有地基因,而文库只包含需要表达地基因.对真核细胞来说,基因组文库中所含地是带有内含子和外显子地基因组基因,而文库中则是已剪接去除了内含子地.③文库内容不同.文库所包含地遗传信息远少于基因组文库,并且受细胞来源或发育时期地影响.④载体不同.构建基因组文库常用λ噬菌体和柯斯质粒等高容量克隆载体,而构建文库地载体选择要根据该文库地用途来确定.⑤使用范围不同.基因组文库常用于分离特定地基因片段、分析特定地基因结构以及研究基因表达调控等,而文库可用于某些病毒等地基因组结构研究及有关基因地克隆分离.。
乳糖操纵子调控机制结构基因表达一、引言乳糖操纵子是哺乳动物体内特有的一种基因调控元件,其在乳糖相关基因的表达调控中起着至关重要的作用。
通过对乳糖操纵子调控机制结构和功能的深入研究,可以更好地理解基因的转录和表达调控过程,为相关疾病的预防和治疗提供重要的理论基础和临床指导。
本文将从乳糖操纵子调控机制结构基因表达这一主题出发,深入探讨其相关内容,并共享个人观点和理解。
二、乳糖操纵子调控机制结构的概述乳糖操纵子是一种转录调控元件,存在于哺乳动物乳腺细胞中。
它的主要功能是调控乳糖代谢相关基因的表达,特别是在哺乳期间。
乳糖操纵子通常包含一个结构复杂的DNA序列,其中包括操纵子结构域和调控因子结合位点。
在特定的生理条件下,调控因子可以与乳糖操纵子结合,并启动或抑制相关基因的转录过程,从而调控乳糖代谢的正常进行。
三、乳糖操纵子调控机制结构的基因表达调控乳糖操纵子调控机制结构对基因表达的调控主要体现在以下几个方面:1. DNA结构变化:乳糖操纵子的DNA序列具有特定的结构和空间编排,在调控因子结合后会发生结构变化,进而影响基因的转录。
这种结构变化对于乳糖代谢相关基因的表达调控起着至关重要的作用。
2. 调控因子与操纵子的相互作用:乳糖操纵子中存在多个调控因子结合位点,不同调控因子的结合将在不同的生理条件下启动或抑制相关基因的表达,从而实现乳糖代谢的精细调控。
3. 表观遗传修饰:乳糖操纵子调控机制结构的DNA序列和相关蛋白质可能会受到表观遗传修饰的影响,如DNA甲基化和组蛋白修饰等,从而影响基因的转录和表达。
通过对乳糖操纵子调控机制结构基因表达调控的深入研究,可以更好地理解乳糖代谢调控的分子机制,为糖尿病等代谢性疾病的预防和治疗提供重要的理论指导。
四、个人观点和理解乳糖操纵子调控机制结构对基因表达的调控是一个极其复杂和精细的过程,其深层次的调控机制需要进一步的研究和探索。
我认为,通过对乳糖操纵子调控机制结构的深入理解,我们可以更好地解析基因的表达调控网络,揭示基因调控的规律和原理,为未来的基因治疗和药物研发提供更精准的靶点和策略。
课后思考题1. 试述乳糖操纵子的结构及调控原理?乳糖操纵子开放转录需要什么条件?(1)乳糖操纵子的结构:含Z、Y、A3个结构基因,分别编码乳糖代谢的3个酶;一个操纵序列O,一个启动序列P,一个CAP结合位点共同构成乳糖操纵子的调控区。
乳糖操纵子的上游还有一个调节基因I。
(2)阻遏蛋白的负性调节:I基因的表达产物为一种阻遏蛋白,在没有乳糖存在时,阻遏蛋白与O序列结合,阻碍RNA聚合酶与P序列结合,抑制转录启动,乳糖操作子处于阻遏状态;当有乳糖存在时,乳糖转变为半乳糖,后者结合阻遏蛋白,使构象变化,阻遏蛋白与O序列解离,在CAP蛋白协作下发生转录。
(3)CAP的正性调节:分解代谢基因激活蛋白(CAP)分子内存在DNA和cAMP结合位点。
当没有葡萄糖时,cAMP浓度较高,cAMP与CAP结合,cAMP-CAP结合于CAP结合位点,提高RNA转录活性;当有葡萄糖时,cAMP浓度降低,cAMP与CAP结合受阻,乳糖操纵子表达下降。
(4)协调调节:乳糖操纵子阻遏蛋白的负性调节和CAP的正性调节机制协调合作,CAP 不能激活被阻遏蛋白封闭基因的表达,但如果没有CAP存在来加强转录活性,即使阻遏蛋白从操纵序列上解离仍无转录活性。
因此,乳糖操纵子开放转录需要的条件是:1)诱导物乳糖存在,解除阻遏蛋白的负调节。
2)葡萄糖缺乏,CAP蛋白活化,启动正调节。
2.试述原核生物和真核生物基因表达调控特点的异同。
(1)相同点:转录起始是基因表达调控的关键环节。
(2)不同点:1)原核生物基因表达调控主要包括转录和翻译水平;真核基因表达调控包括染色质活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工多个层次。
2)原核基因表达调控主要为负调节;真核生物基因表达调控主要为正调节。
3)原核转录起始不需要转录因子,RNA聚合酶直接结合启动子,由σ因子决定基因表达的特异性;真核转录起始需要基础、特异两类转录因子,依赖DNA-蛋白质、蛋白质-蛋白质相互作用,调控转录激活。
葡萄糖抑制乳糖操纵子原理 -回复葡萄糖抑制乳糖操纵子(glucose represses lactose operon)是一种在大肠杆菌中发现的基因调控机制。
乳糖操纵子指的是一组与乳糖代谢相关的基因,包括乳糖酶基因(lacZ)、乳糖转运蛋白基因(lacY)和乳糖代谢辅助蛋白基因(lacA)。
在葡萄糖存在的情况下,乳糖操纵子处于被抑制状态,不会被转录和翻译成蛋白质。
这是因为葡萄糖在大肠杆菌中是优先代谢的糖源,当葡萄糖存在时,细菌会选择利用葡萄糖进行能量产生,而不会转向乳糖的代谢。
葡萄糖抑制乳糖操纵子的机制是通过两种方式实现的。
首先,葡萄糖会通过特定的转运蛋白(如PtsG)进入细菌内部,被代谢成葡萄糖-6-磷酸,并结合着磷酸(P)和受体蛋白(CcpA)形成复合物。
该复合物会结合到乳糖操纵子区域上,阻碍RNA聚合酶的结合和基因的转录。
其次,葡萄糖还能通过两种辅助机制来抑制乳糖操纵子。
一种是cAMP-CRP系统,即腺苷酸环化酶(adenylate cyclase)产生cAMP,进一步与细菌细胞内的CRP(cAMP receptor protein)结合形成复合物。
该复合物与乳糖操纵子特定的结合位点相互作用,通过改变DNA的构象或与RNA聚合酶相互作用,抑制乳糖操纵子的转录。
另一种是阻遏复合物(roadblock),是由RNA聚合酶在乳糖操纵子区域上停滞引起的。
这种停滞会阻碍乳糖操纵子的转录,并被葡萄糖进一步加强。
综上所述,葡萄糖通过多种机制,包括结合相关蛋白质、修改DNA构象和RNA聚合酶的停滞等,抑制乳糖操纵子的转录和翻译,以确保在葡萄糖存在的情况下优先利用葡萄糖进行代谢。
描述乳糖操纵子的作用机理?
1.针对大肠杆菌利用乳糖的适应现象,法国的Jacob和Monod等人做了一系列遗传学和生化学研究实验,于1961年提出乳糖操纵元(lac operon)学说,如图19-3所示。
图19-3中z、a和b型是大肠杆菌编码利用乳糖所需酶类的基因,p是转录z、a、b所需要的启动子,调控基因i编码合成调控蛋白R,R能与o结合而阻碍从p开始的基因转录,所以o就是调节基因开放的操纵序列,乳糖能改变R结构使其不能与o结合,因而乳糖浓度增高时基因就开放,转录合成所编码的酶类,这样大肠杆菌就能适应外界乳糖供应的变化而改变利用乳糖的状况,这个模型是人们在科学实验的基础上第一次开始认识基因表达调控的分子机理。
2.操纵子(operator)是指能被调控蛋白特异性结合的一段DNA序列,常与启动子邻近或与启动子序列重叠,当调控蛋白结合在操纵子序列上,会影响其下游基因转录的强弱。
以前许多书中将操纵子称为操纵基因(operator gene)。
但现在基因定义是为蛋白质编码的核酸序列,而操纵序列并不是编码蛋白质的基因,却是起着调控基因表达强弱的作用,正如启动序列不叫启动基因而称为启动子一样,操纵序列就可称为操纵子。
以前将operon译为操纵子则可改译为操纵元,即基因表达操纵的单元之意。
举乳糖操纵元中的操纵子为例,如图19-5所示,其操纵子(o)序列位于启动子(p)与被调控的基因之间,部分序列与启动子序列重叠。
仔细分析该操纵子序列,可见这段双链DNA具有回文(palindrome)样的对称性一级结构,能形成十字形的茎环(stem loop)构造。
不少操纵子都具有类似的对称性序列,可能与特定蛋白质的结合相关。
阻遏蛋白与操纵子结合,就妨碍了RNA聚合酶与启动子的结合及其后β-半乳糖苷酶等基因的转录起始,从而阻遏了这群基因的表达。
最早只把与阻遏蛋白结合、起阻遏作用的序列
称为操纵子,但其后发现有的操纵元中同一操纵序列与不同构像的蛋白质结合,可以分别起阻遏或激活基因表达的作用,阿拉伯糖操纵元中的序列就是典型的例子。
因而凡能与调控蛋白特异性结合、从而影响基因转录强弱的序列,不论其对基因转录的作用是减弱、阻止或增强、开放,都可称为操纵子。