下载文档原格式
反相高效液相色谱法测定苹果酸发酵液中的有机酸黄慧敏;张伟国【摘要】Reversed phase HPLC method was applied to determine organic acid in malic acid fermentation liquor in this paper. The chromatographic conditions are finally conformed to apply to all kinds of organic acid content deter-mination in the fermentation. The conditions are as follows：COSMOSIL 5C18 - PAQ column （4.6 mm I.D. × 250 mm） was used at 23℃. UV detection wavelength was 210 nm. Solution containing 1% acetonitrile and 20mmol/L KH2PO4 at pH 2.8 was used as mobile phase with flow rate of 0.5 mL/min. The seven organic acids in malic acid fermentation liquor were preferably separated under these conditions. The recovery ratio was 94.2% - 102.7% and the method had good accuracy and precision.%采用反相高效液相色谱法分析测定苹果酸发酵液中的有机酸，最终确定了适用于发酵液中各种有机酸含量测定的色谱条件，色谱柱：COSMOSIL5C18-PAQ（4．6mmI．D．×250mm）；紫外检测波长：210nm；流动相：1％乙腈-20mmol／L KH2PO4溶液（pH2．8）；流速：O．5mL／min；柱温：23℃。
反相高效液相色谱法测定夏枯草中两种三萜酸的含量[ 08-05-28 16:45:00 ] 作者：邹盛勤，蒋柏泉，陈武编辑：studa20【关键词】夏枯草；,,乌索酸；,,齐墩果酸；,,反相高效液相色谱法摘要：目的建立同时测定夏枯草中乌索酸及齐墩果酸含量的方法。
方法采用反相高效液相色谱法。
色谱柱为 Nucleodur C18柱(4.6 mm×250 mm，5μm)，流动相为甲醇:水（86∶14），流速为0.8 ml/min，检测波长为210 nm，柱温25 ℃。
结果乌索酸进样量在0.425 2 ～3.826 8 μg，齐墩果酸进样量在0.127 2 ～1.144 8 μg范围内，线性关系良好，乌索酸、齐墩果酸的加样平均回收率分别为98.0 %和98.7 %，RSD分别为1.0 %和1.4 %。
结论方法简单准确，重现性好，适用于夏枯草药材的质量控制。
关键词：夏枯草；乌索酸；齐墩果酸；反相高效液相色谱法Determination of Two Triterpene Acids in Prunella vulgaris L. by RP-HPLCAbstract：ObjectiveTo develop a new method for simultaneous determination of ursolic acid and oleanolic acid in Prunella vulgaris L．MethodsThe high performance liquid chromatography was used．The column was Nucleodur C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm) column，the mobile phase consisted of methanol - water (86∶14) , the flow rate was 0.8 ml/min and the detection wavelength was set at 210 nm. ResultsThe linear range with good linearity of ursolic acid was between 0.4252 ～3.826 8 μg and with the oleanolic acid was between 0.127 2 ～1.144 8 μg．The average recovery of ursolic acid was 98.0 % with relative standard deviation (RSD )of 1.0 % and the oleanolic acid was 98.7 % with RSD of 1.4 %.ConclusionThe method is simple, accurate, reliable and can be used for quality control of Prunella vulgaris L．Key words：Prunella vulgaris L; Ursolic acid; Oleanolic acid; RP-HPLC夏枯草Prunella vulgaris L.是唇形科夏枯草属植物，为中医临床常用中药，始载于《神农本草经》，主产于河南、安徽、江苏、浙江等地，以干燥果穗或全草入药，味辛苦、性寒，具有清肝、明目、散结、消肿、止痛之功效，用于目赤肿痛、羞明流泪、头痛眩晕、瘰疬、瘿瘤、乳痈肿痛等［1］。
第32卷2004年10月 分析化学(FENXI HUAXU E ) 研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry 第10期1368～1370反相高效液相色谱法测定o 2烯丙基苯酚和p/o 2丁酰基苯酚在番茄中的残留量胡继业1 张文吉2 李建中311(中国科学院生态环境研究中心,北京100085) 2(中国农业大学理学院,北京100094)摘 要 建立了o 2烯丙基苯酚、p/o 2丁酰基苯酚在番茄中残留量的反相高效液相色谱分析方法。
样品前处理过程简便,方法准确可靠,灵敏度和准确度达到了农药残留检测的要求。
o 2烯丙基苯酚、p/o 2丁酰基苯酚在番茄中的最低检测浓度为0.01mg/kg ;方法的添加回收率(0.05～1.00mg/kg )在87.7%～95.1%之间。
关键词 o 2烯丙基苯酚,p/o 2丁酰基苯酚,反相高效液相色谱法,残留分析 2003209212收稿;2004205224接受1 引 言o 2烯丙基苯酚(商品名称绿帝)和p/o 2丁酰基苯酚(商品名称银泰,为p 2丁酰基苯酚和o 2丁酰基苯酚的混合物,在原药中所占比例约为7∶3)是山东省农业仿生应用工程研究中心开发研制的两个新型仿生农用杀菌剂,已获得了国家发明专利和农药临时登记(防治番茄灰霉病),现已批量生产。
它们是以银杏外种皮中的杀菌、抑菌活性化合物的化学结构为模板,经过结构简化,通过人工模拟化学合成得到。
田间药效实验证明,o 2烯丙基苯酚可有效的防治苹果腐烂病、番茄灰霉病、玉米大斑病等病害1;p/o 2丁酰基苯酚对苹果腐烂病、苹果轮纹病、番茄轮纹病、玉米大斑病及小麦纹枯病具有良好的防治效果2,3。
目前这两种农药的残留分析方法,国内外没有文献报道。
作者研究了这两种杀菌剂在番茄中残留的提取、净化方法以及高效液相色谱检测方法,为番茄田中的残留实验、正式注册登记和推广应用奠定基础。
2 实验部分2.1 仪器和试剂Waters 高效液相色谱仪及色谱工作站(美国Waters 公司);RE 252旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);SHB 2Ⅲ循环式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司);20PR 2520高速冷却离心机(日本日立公司);8782B 多功能粉碎机(深圳天南公司);WX 22无油真空泵抽滤器(临海市精工真空设备厂);HZQ 2C空气浴振荡器(哈尔滨东联电子公司);电子天平(Sartorious 公司)。
高效液相色谱在食品质量检测中的应用 施雪 孙敬涛 黑龙江省肇东市质量技术监督检验检测中心现代社会食品安全问题已经成为社会各界关注的焦点。
然而非常规安全威胁因素出现在现实的食品安全领域，让食品安全形势变得极为复杂，食品添加剂、化学污染、加工工艺都会对食品安全产生广泛而深远的影响。
因此如何全面而科学地检测食品质量成为焦点问题，高效液相色谱在食品检测中的应用解决了这一问题。
HPLC法的优点从食品安全检测的角度来看，高效液相色谱法具有适用范围广、分离效率高、速度快、流动相可选择范围广的特点，在具体的检测活动中HPLC基本能够适应当前食品安全检测的全部内容，同时因为检测过程中采取的分离和液相处理技术都是在现代生物学和网络信息技术的支持下实现的，所以绝大部分检测工作并不需要过多的预处理和处理步骤，检测过程整体表现为快、准、稳，能够准确快速地提供检测结果。
在挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物的检测中尤其有利。
高效液相色谱法在食品检测中的应用在实际的食品安全检测中，高效液相色谱法更加适应对沸点高、热稳定性较差、分子量较高物体的测试。
近年来随着食品安全问题的逐渐严峻以及食品安全威胁因素的复杂、众多，高效液相色谱法的应用范围和应用数量不断扩大，与传统的测定方法相比高效液相色谱法具有较大的优势，以下将借助五种重要的有害物质的食品安全测定对其先进性进行辅证：N-亚硝胺的测定。
在腊肉等腌制食品中，生产主体经常会添加硝酸盐或者亚硝酸盐作为腌制食品的发色剂，硝酸盐本身并不存在严重的危害，但是如果其添加的量过大，在还原作用的影响下肉制品中会生成N-亚硝胺，而N-亚硝胺对人体的危害较大，长期摄入会导致肝癌和结肠癌等恶性疾病。
针对N-亚硝胺的传统测量方法是气相色谱法，这种方法只能对被测物体中挥发性的N-亚硝胺进行测量，测量的精度不高，而且测量过程中仅色谱测定这一环节就需要一个多小时的时间，而采用高效液相色谱法全过程只需要13分钟。
反相高效液相色谱法同时测定发酵液中的阿魏酸、香草酸和香草醛李永红 郑志强 孙志浩3(江南大学生物工程学院生物催化研究室,工业生物技术教育部重点实验室,无锡214036)2002212220收稿;2003206210接受1 引 言香草醛(Vanillin ,Vin )是食品、饮料等工业应用最广泛的香料之一,还可作为保鲜剂及医药等工业的原材料。
香草醛目前主要由化学方法制备,但化学合成制得的香草醛不属于天然香料。
天然香草醛可以从香子兰的花荚中提取,得到的香草醛量少且价高。
根据美国和欧盟的规定,合成香草醛在食品添加剂中的使用会引起法律方面的争议,由此促进了用生物技术方法生产香草醛的研究。
生物转化法生产香草醛多采用阿魏酸(Ferulicacid ,FA )作为前体物质,转化过程中会产生香草酸(Vanillic acid ,VA )等中间产物。
曾报道过薄层色谱法(TLC )能同时测定阿魏酸、香草酸和香草醛,该方法是对发醇过程进行快速监测的行之有效的方法,但其缺点是定量欠准确,层析时板与板之间重现性较差。
因此,研究了能同时测定发酵或生物转化液中阿魏酸、香草酸和香草醛的RP 2HPLC 方法,该方法的重现性好,准确、可靠。
国外已有文献报道在生物转化中采用HPLC 方法测定香吞草醛,但未见同时测定阿魏酸、香草酸和香单醛的报道。
2 实验部分2.1 仪器与试剂 HP 21100型高效液相色谱仪;微量进样器,微膜过滤器。
阿魏酸(Sigma 公司),香草酸(Sigma 公司),硅胶G (中国青岛海洋化工集团公司);甲醇(色谱纯)、香草醛及其它试剂均为分析纯。
2.2 色谱条件 色谱柱:Lichrospher 100RP 218柱(250mm ×4mm i.d.,5μm ),流动相为:A =0.01%冰醋酸水溶液,B =甲醇;时间程序:开始时20%B ,保持4min ,到24min 时增加至40%,到27min 时增加至100%并保持2min ,到30min 时又降至20%,并以这种比例使柱子平衡至少5min ;流速为1mL/min 。
反相高效液相色谱法测定人血清中奥卡西平活性代谢产物的浓度目的建立反相高效液相色谱法测定人血清中奥卡西平（OXC）活性代谢产物MHD的浓度。
方法收集血清样品经甲醇沉淀蛋白后，采用InertSustain C18（5 μm，4.6×150 mm）色谱柱，流动相为甲醇-水（35：65），流速：0.8 mL/min，检测波长：210 nm，柱温：40℃，进样体积：20 μL。
结果血清中内源性物质对样品测定无干扰，MHD 在 4.8～38.4 μg/mL线性关系良好，回归方程为：A=13968.3C-13730.7，r=0.9990。
MHD的低、中、高3种浓度平均回收率均>95%，日内、间RSD 均95%，and intra-and inter-day RSDs were 95%，日内、日间RSD均35 μg/mL占0。
结果显示OXC在按常规剂量给药的情况下，存在部分患者血药浓度在有效浓度范围外，因此，需要在血药浓度监测下调整给药剂量，本方法能够满足临床血药浓度监测，也能用于患者过量服药情况下的中毒药物浓度监测，从而为患者制定个体化用药方案。
3 讨论从奥卡西平的药动学特征来看，口服OXC后，其活性代谢产物MHD一般在2～3 d内达到稳态血药浓度。
本文对癫痫患者口服OXC片后进行TDM，在给药前采集血样测定人血清中MHD稳态谷浓度水平。
MHD在人血清中的血药浓度测定方法已有文献报道，通常采用LC-MS/MS法[7]和HPLC法[8-16]。
LC-MS/MS专属性强、灵敏度高，但由于成本昂贵，不适用于常规检测。
目前国内关于MHD药物浓度测定的HPLC法大多采用内标法进行测定[9-11，16]，操作较为繁琐，本文采用外标法进行测定，实验结果表明该方法简便快捷，也能准确地测定MHD的血药浓度。
MHD结构中有两个苯环，具有明显的紫外吸收。
本实验在200～360 nm的波长范围内进行紫外扫描，发现检测波长为210 nm时，基线平稳，吸收值较大，灵敏度较高，因此选取210 nm作为检测波长。
8种食品添加剂的反相高效液相色谱法测定
刘素娟;邵艳秋;崔术新;盛琦
【期刊名称】《中国调味品》
【年(卷),期】2015(000)005
【摘要】建立了同时检测8种食品添加剂含量的反相高效液相色谱法。
采用Ultimate XB-C18（250 mm×4．6 mm，5μm）为分离柱，以乙酸铵缓冲溶液-乙腈为流动相，梯度洗脱。
方法的相对标准偏差为1．1％～2．6％；回收率为94．7％～101．6％；各种添加剂的线性相关系数≥0．9991，方法具有较高的准确度和精密度，可用于实际样品测定，结果满意。
【总页数】4页(P73-75,81)
【作者】刘素娟;邵艳秋;崔术新;盛琦
【作者单位】牡丹江师范学院化学化工学院，黑龙江牡丹江 157011;牡丹江师范学院化学化工学院，黑龙江牡丹江 157011;牡丹江师范学院化学化工学院，黑龙江牡丹江 157011;牡丹江师范学院化学化工学院，黑龙江牡丹江 157011
【正文语种】中文
【中图分类】TS207.3
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法同时测定九种食品添加剂 [J], 吴光斌;吕禹泽;陈发河
2.反相高效液相色谱法测定食品添加剂乳铁蛋白 [J], 张林田;陈小雪;魏建华;张冬辉;陈建伟
3.反相高效液相色谱法对果蔬汁饮料中14种常见食品添加剂的快速测定 [J], 汪辉;曹小彦;李林;胡朝晖;沈腊三;解晓红
4.反相高效液相色谱法同时快速测定食品中常见的8种食品添加剂 [J], 张秀尧
5.反相高效液相色谱法直接同时测定五种食品添加剂 [J], 杨元;南波康朗;谷屋良典因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
