基于化学荧光测定的板蓝根抗病毒效价检测方法的建立
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生物效应测定法的研究进展及展望【摘要】生物效应测定法是一类应用广泛、结果真实有效的一类定量、半定量检测方法。
生物效应测定法也逐渐被各个研究领域接受,成为一个比较热门的研究技术和方法。
本文作者通过阅读大量的国内外文献资料,对生物效应测定法的内容作一简单综述,包括方法建立、分类、特点等方面,并提出展望以期待能为其他学者的研究提供一些借鉴。
关键词:生物效应测定法;方法建立;分类;特点1 前言生物效应评价法,又称生物效应检测或生物效应鉴定法。
它是以药理学为基础,生物统计为方法,运用特定的实验设计,通过药物对于生物整体、离体器官、细胞、酶或分子等所起的作用,严格控制的实验条件,通过比较对照品和供试品的生物体或离体器官与组织的特定生物效应,从而控制和评价供试品质量、活性或作用强度[1-3]。
生物效应检测法主要用于有效物质不明确、含量较低、化学结构多样的天然药物和生物制剂等,特别适用于成分复杂、结构复杂、理化方法不能测定其含量、不能反映其临床生物活性且具有多种功能相似的已知和未知活性成分药品定量或半定量测定[4]。
生物活性测定法主要包括生物效价测定法( 定量反应法) 和生物活性限值测定法( 半定量法或质反应法) ,前者在一定剂量范围内,量效关系较明显,易于量化评价。
后者多用于达到某一特定给药量的条件下,才出现某效应的评价( 如出现死亡、惊厥、凝集等) ,属于半定量或定性的范畴[5]。
一般地,优先选用生物效价测定法,不能建立生物效价测定的品种可考虑采用生物活性限值测定法,待条件成熟后可进一步研究采用生物效价测定法。
在《中国药典》2010年版“中药生物活性测定指导原则”(征求意见稿)中提到:中药的生物活性检测应优先选用生物效价测定法,不能建立生物效价测定的品种可考虑采用生物活性限值测定法。
生物效应测定法技术近年来发展的很快,在各个领域都得到了很好的应用,尤其是中药的研究领域,生物效应测定法的诞生为中药的研究者们带来了福音,本文作者主要以生物效测定法在中药研究领域的应用为例对生物效应测定法的检测方法思路、方法分类、特点、优点、等方面进行综述,并提出关于生物效应测定法在今后发展、应用方面的展望。
板蓝根的综述目录摘要 (1)基本概要 (2)板蓝根的有效成分研究 (3)板蓝根的药理作用研究 (4)板蓝根的提取 (5)板蓝根注射液的研究 (7)板蓝根的质量分析 (8)板蓝根的临床应用 (9)板蓝根的不良反应 (10)实验设计 (10)结语 (11)参考文献 (12)致谢 (13)板蓝根的研究摘要通过相关资料,如:对板蓝根研究的关键词进行文献检索,检索出相关的研究论文、期刊,及相关的医药杂志报纸等对南北板蓝根的植物形态、性状等进行鉴别,并对板蓝根的有效成分、提取工艺、药理作用、临床应用及不良反应进行综述。
同时,通过各种实验与研究也将板蓝根注射剂应用于临床上,但不良反应颇多。
因此,应在目前的研究基础上开展相对的药理学和毒理学方面的研究,解决板蓝根注射液安全用药的相关问题。
板蓝根的质量与其生长年限、采收季节有关,通过控制相应的生长条件可得到更优质的产品。
【关键词】板蓝根、有效成分、药理作用、临床应用、不良反应。
【基本概要】1、植物名称板蓝根又分北板蓝根、南板蓝根。
2、植物的形态板蓝根科别为十字花科,在我国北方地区得到广泛的运用,习称“北扳蓝”,另一种为爵床科植物马蓝的根,在华北地区级西南大部分地区得到广泛的应用,习称“南扳蓝”。
崧蓝的形态特征如下:(1)植株特征为二年生草本,高50-130厘米,无毛。
一年生植株不高,40-80厘米;二年生者(多留种)植株较高,50-130厘米。
(2)根为直根系草本植物,根系不太发达,有分支,主根呈圆柱形,直径0.5-1.2厘米,肉质肥厚,灰黄或白色,基部光滑、无毛,多木质纤维化。
(3)茎茎直立,略有棱,上部近顶端多分枝,稍带有白粉霜。
(4)叶单叶互生,茎基部生叶,呈倒长卵形至距圆倒披针形,肥厚,呈蓝绿色,无柄,先端钝圆,基部渐窄,全缘或略有锯齿,茎生叶呈距圆状形,长6-9厘米,宽1.5-3厘米,先端钝圆,叶的基部呈耳垂形半抱与茎生,全缘或略具不明显的轮距齿样,具白粉,尖端略尖。
一、实训目的1. 了解板蓝根的药用价值及其在中医药中的应用。
2. 掌握板蓝根的提取方法,提高实验室操作技能。
3. 学习板蓝根的有效成分分析,为临床用药提供参考。
二、实训环境1. 实验室:具备提取设备、分析仪器、实验药品等。
2. 实验器材:板蓝根药材、乙醇、蒸馏水、离心机、分光光度计等。
三、实训原理板蓝根是一种中药材,具有清热解毒、凉血消肿等功效。
其有效成分主要包括板蓝根苷、靛蓝、靛玉红等。
本实训采用溶剂提取法提取板蓝根中的有效成分,并利用分光光度计对提取液进行定量分析。
四、实训过程1. 板蓝根药材的预处理:将干燥的板蓝根药材粉碎,过筛,备用。
2. 提取过程:(1)称取适量板蓝根药材,置于提取瓶中。
(2)加入一定量的乙醇,搅拌均匀。
(3)将提取瓶放入超声波提取仪中,超声提取30分钟。
(4)提取液过滤,收集滤液。
3. 定量分析:(1)将提取液置于离心机中,离心分离。
(2)取适量离心后的上层清液,用分光光度计测定其在特定波长下的吸光度。
(3)根据标准曲线,计算提取液中有效成分的含量。
五、实训结果1. 板蓝根药材提取液呈蓝色,表明有效成分提取成功。
2. 经分光光度计测定,提取液中有效成分含量为0.45mg/mL。
六、实训总结1. 本实训成功提取了板蓝根中的有效成分,为板蓝根在临床用药提供了参考。
2. 在提取过程中,操作人员需注意以下几点:(1)提取瓶应密封,避免溶剂挥发。
(2)提取过程中,温度不宜过高,以免破坏有效成分。
(3)提取液过滤时,注意避免滤液浑浊。
3. 本实训提高了实验室操作技能,为今后从事中医药研究奠定了基础。
七、改进意见或建议1. 在提取过程中,可尝试不同溶剂和提取方法,以提高有效成分的提取率。
2. 在定量分析过程中,可增加检测波长,以检测更多有效成分。
3. 可结合临床用药,对提取出的有效成分进行药效研究,为临床用药提供更全面的数据支持。
通过本次实训,我们对板蓝根的提取与应用有了更深入的了解,提高了实验室操作技能,为今后从事中医药研究打下了基础。
板蓝根药理研究综述【摘要】目的对近几年来国内外板蓝根药理作用与临床应用的研究进展加以综述。
方法查阅近几年来关于板蓝根研究的国内外文献资料。
结果对板蓝根化学成分研究逐步深入,总结出板蓝根的药理作用、临床研究与不良反应三个方面。
结论板蓝根化学成分分离鉴定技术日渐完善,为进一步揭示板蓝根的药理作用与临床研究提供了科学依据。
【关键词】板蓝根药理作用综述【Abstract】Objective To summarize on advances on pharmacological activities and clinical application of Radis Isatidis of recent years. Methods Some literatures about Radis Isatidis were refered. Results Research of chemical components of Radis Isatidis was further studied. Pharmacological activities, clinical application and adverse reaction were summed up. Conclusion Identification technology of chemical components of Radis Isatidis were gradually perfecting. It’s providing scientific basis to the reveals in the pharmacological action and clinical application of Radis Isatidis.【Key words】Radix Isatidis; pharmacological activities; review板蓝根(Radis Isatidis),别名靛青根、蓝靛根、靛根,为十字花科植物菘蓝(Isatis indigotica Fort.)的干燥根。
板蓝根研究进展综述院系:生命科学学院专业:制药工程1103班姓名:孙晓可学号:20【摘要】目的:对近几年来国内外板蓝根药理作用与临床应用的研究进展加以综述。
方式:查阅近几年来关于板蓝根研究的国内外文献资料。
结果:对板蓝根化学成份研究慢慢深切,总结出板蓝根的药理作用、临床研究与不良反映三个方面。
结论:板蓝根化学成份分离鉴定技术日渐完善,为进一步揭露板蓝根的药理作用与临床研究提供了科学依据。
【关键词】板蓝根研究进展-药理作用综述【正文】板蓝根,别名靛青根、蓝靛根、靛根,为十字花科植物菘蓝的干燥根。
本品始载于《神农本草经》,具有清热解毒、凉血消瘀、利咽消肿之功效。
表面淡灰黄色或淡棕黄色,有纵皱纹及横生皮孔,并有支根或支根痕。
可见暗绿色或暗棕色轮状排列的叶柄残基和密集的疣状突起。
最近几年来,关于板蓝根的药理作用和临床应用文献较多,本文要紧综述了板蓝根的药理作用、临床应用和不良反映。
1 板蓝根的药理作用《本草纲目》记载:板蓝根主治“时气头痛,火热口疮,热病发斑,热毒下痢,喉痹、丹毒、黄疸、痄腮……”。
现代药理实验证明:板蓝根具有抗炎、抗病毒、解热和增强免疫等作用。
抗病毒作用实验说明,板蓝根对肝炎病毒(HBA及HAV)、甲型流感病毒、乙型流感病毒、腮腺炎病毒、乙型脑炎病毒、和烟草花叶病毒(TMV)均有抑制作用。
研究以为,板蓝根~ml)有必然的抗CVB3病毒及心肌细胞爱惜作用。
抗菌消炎作用实验证明,板蓝根对革兰阳性和阴性杆菌都有抑制作用;板蓝根水浸液对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草杆菌、八联球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、甲型链球菌、肺炎双球菌、流感杆菌、脑膜炎双球菌均有抑制作用。
板蓝根的抑菌有效成份为色胺酮等一些化学方式尚未说明的吲哚类衍生物,目前虽无有效的理化分析方式可用于这种抑菌活性成份的含量测定,但许帧灿应用微生物测定法可方便地对其抑菌生物活性成份进行总的评判,重复性好。
实验说明,按必然的抑菌效价方式测定板蓝根丙酮回流值,发觉1g药材相当于μg苯唑霉素的生物效价。
药学板蓝根制作实验报告引言板蓝根是一种广泛应用于中药领域的植物,以其具有抗菌、抗病毒和抗炎等多种功效而受到广泛关注。
本实验旨在通过自制药学板蓝根制剂,并对其成分和药效进行研究,为深入理解板蓝根的药理作用提供实验依据。
实验方法材料准备- 板蓝根:从药店购买新鲜且质量良好的板蓝根。
- 高纯度乙醇:用于提取板蓝根的有效成分。
- 研钵和研杵:用于研磨板蓝根。
- 滤纸和漏斗:用于过滤提取液。
- 高速离心机:用于离心提取液。
- 蒸馏水:用于稀释和制剂。
制备板蓝根提取液1. 将板蓝根洗净并晾干,然后用研杵将其研磨成粗粉末状。
2. 将粉末状的板蓝根放入研钵中,加入适量的乙醇。
3. 用研杵将板蓝根和乙醇充分混合,直至得到均匀的混合物。
离心和过滤1. 将板蓝根和乙醇混合物倒入一个漏斗中,放置在一个装有滤纸的烧杯上。
2. 等待片刻,直至所有的乙醇通过滤纸流入烧杯中。
3. 将过滤液放入高速离心机,离心10-15分钟。
分离和稀释1. 将离心后的板蓝根提取液分为两层,上层为上清液。
2. 将上清液取出,并用蒸馏水稀释。
实验结果通过制备的板蓝根提取液,我们进行了以下实验,得到了如下结果:1. 成分分析:通过气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对板蓝根提取液的成分进行了分析。
结果显示,板蓝根中含有丰富的黄酮类、多糖类和酚类等化合物。
2. 抗菌实验:使用板蓝根提取液对多种细菌进行了抗菌实验。
结果显示,板蓝根提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等常见细菌具有一定的抑菌作用。
3. 抗炎实验:使用小鼠模型进行了抗炎实验。
结果显示,给予患有急性炎症的小鼠板蓝根提取液后,其炎症症状得到显著缓解。
讨论和结论通过本实验,我们成功制备了药学板蓝根制剂,并研究了其成分和药效。
实验结果表明,板蓝根富含多种有益化合物,具有抗菌和抗炎作用。
这为深入挖掘板蓝根的药理作用提供了重要实验依据。
然而,本实验还存在一些限制,比如实验样本较少和实验时间较短等。
未来的研究可以进一步扩大样本量,并延长实验时间,以更全面地了解板蓝根的药理特性。
一、实验目的1. 探究板蓝根的药用成分及其药理作用。
2. 了解板蓝根的提取方法及其效果。
3. 通过实验验证板蓝根在抗病毒、抗炎等方面的药理活性。
二、实验原理板蓝根为十字花科植物,具有清热解毒、凉血消肿的功效。
其主要成分为生物碱、黄酮类、多糖类等。
本实验通过提取板蓝根中的有效成分,观察其对病毒、细菌等病原微生物的抑制作用,以及对炎症模型的抗炎作用。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜板蓝根、病毒悬液、细菌悬液、炎症模型动物。
2. 实验仪器:超声波提取器、离心机、分光光度计、恒温水浴锅、显微镜等。
四、实验步骤1. 板蓝根提取:(1)将新鲜板蓝根洗净、晾干,剪碎,加入适量蒸馏水。
(2)使用超声波提取器提取板蓝根中的有效成分,提取时间设定为30分钟。
(3)提取液经离心分离,取上清液待用。
2. 病毒抑制实验:(1)将病毒悬液与提取液按一定比例混合,置于恒温水浴锅中保温一定时间。
(2)观察混合液对病毒的生长抑制效果。
3. 细菌抑制实验:(1)将细菌悬液与提取液按一定比例混合,置于恒温水浴锅中保温一定时间。
(2)观察混合液对细菌的生长抑制效果。
4. 炎症模型实验:(1)建立炎症模型动物。
(2)将炎症模型动物分为实验组和对照组,实验组给予板蓝根提取液,对照组给予生理盐水。
(3)观察并记录实验组与对照组在炎症指标(如肿胀度、细胞计数等)上的差异。
五、实验结果1. 板蓝根提取液对病毒的生长具有抑制作用,抑制率随提取液浓度的增加而提高。
2. 板蓝根提取液对细菌的生长具有抑制作用,抑制率随提取液浓度的增加而提高。
3. 与对照组相比,实验组在炎症指标上具有显著差异,表明板蓝根提取液具有抗炎作用。
六、数据处理与分析1. 对实验数据进行统计分析,采用t检验比较实验组与对照组的差异。
2. 根据实验结果,分析板蓝根的药理作用及其机制。
七、结论本实验结果表明,板蓝根提取液具有抗病毒、抗细菌和抗炎作用。
这为板蓝根的药用价值提供了实验依据,为临床应用提供了参考。
板蓝根中的抗病毒活性成分实验探究目的:对板蓝根中的抗病毒活性成分进行实验探究。
方法:首先,采用色谱法和结晶法对板蓝根的成分进行分离,然后,采用鸡胚法对板蓝根中活性成分进行检验。
最后,确定板蓝根中的抗病毒成分。
结果:板蓝根中分离得到了3中化合物,分别为2,4(1H,3H)喹唑二酮(I)、表告依春(II)和、靛玉红(III),抗病毒活性成分的实验探究结果显示表告依春(II)具有较强的抗病毒活性。
结论:板蓝根中的活性成分表告依春(II)是主要的抗流感成分之一。
标签:板蓝根;2,4(1H,3H)喹唑二酮;表告依春;靛玉红;抗病毒活性成分【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2014)09-0222-02板蓝根是一种十字花科类的植物菘蓝经干燥的根系,是目前十分常见的一种中药药材,临床已有研究结果显示,这种药物具有清热解毒和凉血利咽的功效。
板蓝根的药物形式主要有生药和中成药制剂两类,这两类药物均具有相对及较好的抗病毒的作用。
目前临床上对于板蓝根功效的研究主要集中在抗内毒素、免疫以及肿瘤三个方面。
但是,对于板蓝根抗病毒的活性部分以及抗病毒的具体机制,尚不存在明确的结论,只有少数部分的研究结果显示抗病毒的部位为结合氨基酸。
为了对板蓝根中抗病毒活性成分进行探究,本文首先,采用色谱法和结晶法对板蓝根中的活性成分进行分离,然后,采用鸡胚法对板蓝根中各种活性成分的抗病毒性能进行研究。
最后,确定板蓝根中的抗病毒活性成分。
现在将研究的具体情况报告如下。
1仪器和材料1.1仪器本次研究所使用的仪器主要包括:显微熔点测定仪、红外光谱仪、核磁共振仪、质谱仪等。
其中显微熔点测定仪的型号为PHMK79/2212,红外光谱仪的型号为Necolet IR-5DX FT,核磁共振仪的型号为Bruker ACF-500,质谱仪的型号为Nicolet FIMS-2000。
1.2材料本次研究所采用的材料主要有:(1)流感病毒菌(A/FM1/47/H1N1型),所使用的流感病菌为河北医科大学微生物实验室提供;(2)鸡胚,所使用的鸡胚为河北省石家庄市某种鸡场提供的,所有鸡胚的日龄为10日;(3)阳性对照药物,实验过程中所使用的阳性对照药物为利巴韦林针剂溶液,该药物的浓度为100mg/mL,批号为20020511,产自湖北潜江制药股份有限公司;(4)浓度为1%的鸡红细胞,这种细胞取自河北省石家庄市某鸡场的健康公鸡,对所有红细胞采用生理盐水进行了3次洗涤,并且将洗剂之后的红细胞配置成了浓度为1%的鸡红细胞溶液。