黑色素染色法

结缔组织染色法Mallory三色染色法：胶原和网状纤维蓝色，软骨、淀粉样变物质淡蓝色，神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒红色，髓鞘和红细胞橘红色。

2.Masson三色染色法：胶原纤维绿色，肌纤维红色，红细胞橘红色。

鉴别胶原纤维和肌纤维最宜采用的方法。

3.三联染色法：胶原纤维红色，网状纤维黑色，弹性纤维绿色，肌肉和红细胞淡黄色。

二.胶原纤维染色1.Van Gieson（V.G）苦味酸-酸性品红法：胶原纤维鲜红色，肌纤维、细胞质和红细胞黄色，胞核蓝褐色。

与胶原纤维染色相比的缺点是：易褪色和对比度差。

2.天狼星红（Sirius Red）苦味酸染色法：胶原纤维红色，细胞核绿色，其他黄色。

在偏光显微镜下可见4种胶原纤维。

三.网状纤维染色：包括：Gomori和James。

Gomori银氨染色法：网状纤维黑色，胶原纤维红色。

鉴别诊断中的应用：1）癌和肉瘤的鉴别。

2)恶性淋巴瘤和组织细胞肉瘤。

3）血管内皮细胞瘤和外皮细胞瘤。

4）黏液纤维瘤和黏液肉瘤。

四.弹性纤维染色：效果最好的固定液是：甲醛生理盐水。

Gomori醛复红染色法：弹力纤维深紫色，黏液紫色（肥大细胞颗粒、胰腺B细胞颗粒、垂体B细胞均能同时着色），背景不同程度的黄色。

1）配制后需在室温静置1-2日。

2）是碱性品红加入三聚乙醛和盐酸配制而成。

3）醛复红所谓的成熟是颜色为深紫色。

3)可使胃主细胞着色。

5）应放置在冰箱内保存。

五.显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法：维多利亚蓝+丽春红S：弹性纤维蓝绿色，胶原纤维红色，背景淡黄色。

六.横纹肌组织染色：Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)：胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、横纹肌等均蓝色；胶原、网状纤维、骨基质及骨黄色或玫瑰红色。

1）要在室温下成熟。

2）可使用高锰酸钾促使PATH成熟。

3）乙醇分化时要保存一定的红色。

4）染色后用无水乙醇快速脱水，冷风稍干燥后封固。

七.糖类染色：过碘酸的作用是氧化。

过碘酸-Schiff（PAS）染色法：糖原及其他PAS反应阳性物质红色，细胞核蓝色。

规培考试笔记｜特殊染色技术总结【常用染色方法】•各类间叶组织染色1、结缔组织多色染色：Masson三色染色法。

2、胶原纤维染色：Van Gieson苦味酸酸性品红染色法。

3、网状纤维染色：醋酸氨银染色法。

4、弹力纤维染色：Verhoeff铁苏木素染色法。

5、横纹肌染色：Mallory磷钨酸-苏木素（PTAH）染色法。

•神经组织染色1、尼氏小体染色：硫堇染色法。

2、神经元和神经纤维染色：Bielschowsky改良法。

3、神经髓鞘染色：Weil染色法。

4、神经胶质细胞染色：Cajal神经胶质细胞染色。

5、能同时显示髓鞘和尼氏小体的染色方法是Luxolfastblue染色法。

•各类聚集物质染色1、脂类物质染色：苏丹Ⅲ染色法。

2、黏液物质染色：过碘酸雪夫染色（PAS染色），又称糖原染色。

3、黑色素染色：氨银染色法（Masson-Fontana染色法）。

4、淀粉样物质染色：刚果红特殊染色法。

•病原菌染色1、抗酸杆菌染色：改良的Ziehl-Neelsen染色法。

2、真菌染色：Grocott六胺银染色法。

3、螺旋体染色：Warthin-Starry染色法。

【染色结果及用途】•各类间叶组织染色1、结缔组织多色染色用苯胺蓝复染时，胶原纤维、软骨、黏液呈蓝色；用亮绿色复染时，胶原纤维、软骨、黏液呈绿色。

肌纤维、红细胞、神经胶质呈红色，胞核呈清晰的蓝黑色。

主要用于肝脏和肾脏穿刺病理的诊断和鉴别。

2、胶原纤维染色镜下胶原纤维呈鲜红色，肌纤维胞质、神经胶质及红细胞呈黄色。

主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别诊断。

3、网状纤维染色镜下网状纤维呈黑色。

在免疫组化开展前用于癌与肉瘤、血管内皮肿瘤与血管外皮肿瘤的鉴别诊断，目前用于观察病变组织纤维化程度。

4、弹力纤维染色镜下弹力纤维呈黑蓝色。

用于显示真皮弹力纤维增生和变性等多种皮肤疾病，观察心内膜和血管壁中弹力纤维增生程度，显示肿瘤组织中的弹力纤维等。

5、横纹肌染色横纹肌纤维呈紫蓝色，胶原纤维和网状纤维呈棕红色。

各种染色方法苏木精—伊红染色法（HE染色法）石蜡切片技术里常用的染色法之一。

苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色，软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色，粘液呈灰蓝色。

细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色，胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。

胶原纤维呈淡粉红色，弹力纤维呈亮粉红色，红血球呈橘红色，蛋白性液体呈粉红色。

着色情况与组织或细胞的种类有关，也随其生活周期及病理变化而改变。

例如，很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱，当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。

胶原纤维在老化和出现透明变性时，伊红着色由浅变深。

活体染色活体染色是指一个获得动物或植物的细胞活组织被染色。

至于体外活体染色是指也获得动物或植物分离出来的一部分细胞活一部分组织被一种活体染色剂染色而不影响细胞活组织的生命。

活体染色与体外活体染色的主要区别：活体染色是在有机体内部，因此不在空气中而是在还原的环境中进行的，至于体外活体染色是在空气中，在氧化的环境中进行的。

所以一种真正的活体染色剂就是在一种生物的活细胞的某种构造上面的染料，但对于细胞、对于组织和对于生命本身不发生任何有害的作用。

活体染料多为碱性染料，如中性红、健那绿、次甲基蓝、甲苯胺蓝、亮焦油紫等，它们解离后带正电，其中有的染料与胞内某些结构有专一性接合。

例如，中性红染液泡系，健那绿染线粒体。

DNA-Feulgen染色方法是DNA定量测定的主要染色方法之一。

其具体反应原理是，标本经稀盐酸水解后，DNA 分子中的嘌呤碱基被解离，从而在核糖的一端出现了醛基。

Schiff试剂中的无色品红可与醛基反应，形成含有醌基的化合物分子, 因醌基为发色团，故可呈现出紫红色。

也就是说, DNA经稀酸水解后产生的醛基，具有还原作用，可与无色品红结合形成紫红色化合物，从而显示出DNA的分布。

Masson-Fontana 黑色素染色液简介：黑色素属于非血源性内生色素，是一组由黑色素母细胞产生的颜色从浅棕色到黑色的色素。

这种色素通常出现在皮肤表皮、眼睛、大脑的黑质和毛囊中。

黑色素有一个显著的物理性质，即完全不溶解于大多数有机溶剂——几乎可以肯定是由于黑素体中已形成的黑色素可与蛋白质紧密结合。

黑色素另一个物理性质是能够被强氧化剂漂白，尽管这个过程是缓慢的。

在病理情况下，这种色素也可出现在良性痣细胞瘤中和恶性黑色素瘤中。

在常规HE 染色中不呈黑色而是呈棕黄色或棕黑色。

许多方法可用于识别黑色素和黑色素生成细胞，如还原方法，如Masson-Fontana 银技术和Schmorl 三价铁-铁氰化钾还原实验；酶方法(如多巴反应)；荧光方法；免疫组织化学。

Leagene Masson-Fontana 黑色素染色利用黑色素具有将银氨溶液还原为金属银特性即嗜银反应原理来显示黑色素，染色后黑色素呈黑色，该法属于常用的黑色素特殊染色法，效果较其他染色理想。

组成：自备材料：1、 10%中性福尔马林固定液2、 温箱或水浴锅3、 蒸馏水操作步骤(仅供参考)：1、 固定: 10%中性福尔马林是最好的固定液，应当避免使用铬酸盐和氧化汞等固定液。

2、 切片: 所有类型的切片都可以处理，数值切片可能需要做一些调整。

3、 将实验切片及对照切片入蒸馏水中。

4、 入Fontana 氨银溶液，避光浸染或温箱孵育。

4、 蒸馏水多次洗净(5～6次)。

5、 入海波溶液处理切片。

6、 自来水处理。

7、 (可选)入中性红染色液，轻轻复染。

编号 名称DJ0021 3×50mlDJ0021 3×100mlStorage试剂(A): Fontana 氨银溶液 50ml 100ml 4℃ 避光 试剂(B): 海波溶液 50ml 100ml RT 试剂(C): 中性红染色液 50ml100ml RT 避光使用说明书1份8、蒸馏水冲洗。