花生油黄曲霉毒素检测标准

黄曲霉毒素（《中国药典2015版第四部》通则2351）

第一法

本法系用高效液相色谱法（通则0512)测定药材、饮片及制剂中的黄曲霉毒素（黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2总量计），除另有规定外，按下列方法测定。

仪器与设备：反相色谱柱、高效液相色谱仪、进样针、容量瓶、电子天平、离心机、移液枪、微孔滤膜（0.45µm)、二号筛、均质瓶。

试剂：十八烷基硅烷键合硅胶、甲醇、乙腈、水、碘、黄曲霉毒素混合对照品（黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2）溶液、氯化钠。

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水（40：18:42)为流动相；采用柱后衍生法检测，①碘衍生法：衍生溶液为0.05%的碘溶液(取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀释至1000ml制成），衍生化泵流速每分钟0.3ml，衍生化温度70℃：②光化学衍生法：光化学衍生器（254nm)；以荧光检测器检测，激发波长λex=360nm(或365nm)，发射波长λex=450nm。两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。混合对照品溶液的制备精密量取黄曲霉毒素混合对照品溶液（黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2标示浓度分别为1.0µg/ml、0.3µg/ml、1.0µg/ml、0.3µg/ml）0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，作为贮备溶液。精密量取贮备溶液lml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，即得。

供试品溶液的制备：取供试品粉末约5g(过二号筛），精密称定，置于均质瓶中，加人氯化钠3g，精密加入70%甲醇溶液75ml，高速搅拌1分钟（搅拌速度大于11000转/分钟），离心5分钟（离心速度2500转/分钟>，精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45µm)滤过，量取续滤液20.0ml，通过免疫亲合柱，流速每分钟3ml，用水20ml洗脱，洗脱液弃去，使空气进入柱子，将水挤出柱子，再用适量甲醇洗脱，收集洗脱液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。

黄曲霉毒素M1最近算是成大明星了，准备写个黄曲霉毒素M1分析方法总结，和大家一起探讨（持续更新）！

1、结构及理化性质

不管三七二十一，还是先上个图：

先开个头，吃个饭回来写……

为什么说黄曲霉毒素M1，都出现在与动物相关的产品中？

黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1在动物组织内的代谢产物，并能够进入乳汁（牛奶？），因此大家看到的检测黄曲霉毒素M1都是检的“动物组织：如肝肾、乳腺”以及乳及其制品等”。

再来一个黄曲霉毒素B1代谢途径图，黄曲霉毒素B1在体内羟化形成黄曲霉毒素M1（左上，相机不好，照的效果不太好，大家见谅，有空补一个好点的图）。新图如下：

2、黄曲霉毒素M1的相关限量标准

食品中的限量标准以GB 2761—2011为准：

规定如下：

注：上述限量的检测方法：婴幼儿配方食品按GB 5009.24 规定的方法测定，乳及乳制品按GB 5413.37（GB 541337-2010 食品安全国家标准 乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定）规定的方法测定。

3、分析方法

黄曲霉毒素M1的分析方法主要包括：薄层色谱法；酶联免疫吸附法，免疫亲和柱净化荧光光度法，液相色谱法，液质联用法等。

3.1 薄层色谱法：

GB 5009.24-2010 食品安全国家标准 食品中黄曲霉毒素M1和B1的测定（用于替代“GB/T

5009.24-2003 食品中黄曲霉毒素M1与B1的测定”）为薄层色谱法：

适用范围：牛乳及其制品、奶油及新鲜猪组织（肝、肾、血及瘦肉）等食品中黄曲霉毒素M1 与B1 的测定。

原理：样品经提取、浓缩、薄层分离后，黄曲霉毒素M1 与B1 在紫外光（波长365nm）下产生蓝紫色荧光，根据其在薄层上显示荧光的最低检出量来测定含量。

3.2 酶联免疫吸附法ELISA

适用范围：ELISA适用于乳，乳粉和乳酪中黄曲霉毒素M1含量的测定。

原理：黄曲霉毒素M1偶联物包被在酶标板的小孔中，将含有黄曲霉毒素M1的样品或标准液和抗M1的抗体加入到小孔中，此事固相包被的黄曲霉毒素M1和样品、标准品中游离的黄曲霉毒素M1竞争性地与抗体进行反应。反应完全之后，用稀释过的清洗液洗小孔，将未反应的物质冲掉。再在小孔中加入过氧化物酶，温育后再次清洗，加入底物溶液，温育后产生蓝色，加入停止液，终止颜色反应，颜色变为黄色，用酶标仪在450nm处测定颜色的强度，黄曲霉毒素M1的浓度与颜色强度成反比关系。

中国食物与营养２０１３，１９（６）：５３—５７　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ　

花生油中黄曲霉毒素辐照去除技术　

陈相艳　，王世清　

（青岛农业大学食品科学与工程学院，山东青岛２６６１０９；　山东省农业科学院农产品研究所，济南２５０１００）　

摘要：考察了钴一６０不同辐照剂量（０、１．５、３、５、１０、１５　ｋＧｙ）所产生的　射线对花生油中黄曲霉素Ｂ　

（ＡＦＢ　）含量的影响。研究发现，经过不同剂量辐照处理后，ＡＦＢ　的含量均有所下降，且ＡＦＢ　的降解率随辐射剂　

量的增加而增加，随ＡＦＢ。浓度的增加而增大；辐照后，各组花生油中ＡＦＢ　含量均下降到１０￣ｇ／ｋｇ以下，符合国家　

标准的要求。各组花生油中的过氧化值较辐照前略有升高；辐照后，油酸含量的最高值为４３．２％，最低为４０．３％；　亚油酸的最高含量为３５．４％，最低为３３．３％；棕榈酸的最高含量为１１．８％，最低为１０．３％；而硬脂酸的最高含量为　

５．４％，最低为４．７％。经过统计，各ＡＦＢ。添加组花生油中油酸、亚油酸、棕榈酸、硬脂酸的组成含量没有明显的　

差异。　关键词：辐照；黄曲霉毒素Ｂ　；过氧化值；降解　

中国是世界第一花生主产国，年产量１　５００余万ｔ，　

约占全球花生总产量的４０％，居世界第一位…。花生油　

是中国主要的食用植物油，中国年产花生油４００万ｔ，　约占中国自产植物油的２５％。　花生含有丰富的营养物质和水分，在贮运过程中极　

易造成花生及其制品中黄曲霉毒素等有害物质的超标等　

问题。近年来，欧盟将进口花生原料和花生制品中的黄　

曲霉毒素限量分别由２０ｐｐｂ统一降至４ｐｐｂ　，其它发　达国家和地区也都加大加快了黄曲霉毒素技术性贸易壁　

垒的设置力度，导致中国出口花生产品因黄曲霉毒素超　

标问题频遭预警和通报，黄曲霉毒素成为威胁中国花生　

等农产品安全消费和出口贸易的主要风险因素之一　。　

提高农产品品质，保障食品质量安全也是花生产业所急　需解决的实际问题。　

AFB1限量标准是指对黄曲霉毒素B1（AFB1）的限量标准，它是一种常见的真菌毒素，存在于霉变的食物中，特别是玉米、花生、棉籽等作物及其制品中。AFB1具有致癌性和致突变性，对人体健康危害很大。因此，许多国家和地区都制定了AFB1限量标准，以保护公众健康。

AFB1限量标准因国家和地区而异，但通常是根据食品种类和用途来制定的。一般来说，粮谷类食品的AFB1限量标准比较严格，因为这些食品是人类日常饮食的重要组成部分。对于粮谷类食品，AFB1限量标准通常在每千克几微克到几十微克之间。

除了粮谷类食品，AFB1限量标准还适用于其他食品和饲料。对于不同种类的食品和饲料，AFB1限量标准有所不同。例如，乳制品的AFB1限量标准通常比粮谷类食品宽松一些，而油脂类食品的AFB1限量标准则更加严格。

为了确保食品安全，许多国家和地区都采取了多种措施来控制黄曲霉毒素的污染。首先，政府会定期对食品进行抽检，以检测黄曲霉毒素的含量是否符合标准。其次，生产商也会自行检测食品中的黄曲霉毒素含量，以确保产品质量。此外，消费者也可以通过选择新鲜、无霉变的食物来减少摄入黄曲霉毒素的风险。

总之，AFB1限量标准是保障公众健康的重要措施之一。通过实施严格的限量标准和采取有效的控制措施，可以减少黄曲霉毒素的摄入量，降低对人体健康的危害。同时，政府、生产商和消费者也应该共同努力，加强食品安全监管和宣传教育，提高公众对食品安全的认识和意识。