花青素提取实验报告

花青素的提取一.课题目的、意义及研究现状1．课题的目的从瓜果蔬菜之中提取天然花青素，满足人们对新型保健品的需求，提高生活水平，丰富选择性，抗氧化、防突变，预防一些心脑血管疾病、保护肝脏等。

花青素(Anthocyanidin)，又称花色素，是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，可以随着细胞液的酸碱改变颜色。

细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝，属类黄酮化合物。

也是植物花瓣中的主要呈色物质，水果、蔬菜、花卉等五彩缤纷的颜色大部分与之有关。

花青素的相对分子质量：287.246 分子式：61115O H C花青素分子式2.研究意义花青素同其他天然色素一样无毒无副作用，安全性能高，着色色调自然，更接近天然物质的颜色，且具有保健功能。

自然界有超过300种不同的花青素，他们来源广泛，存在于许多瓜果蔬菜之中，功效神奇。

花青素是一种强有力的抗氧化剂，能够保护人体免受自由基的有害物质的损伤，花青素还能够增强血管弹性，改善循环系统和增进皮肤的光滑度，抑制炎症和过敏，改善关节的柔韧性。

花青素为人体带来多种益处。

从根本上讲，花青素是一种强有力的抗氧化剂，它能够保护人体免受一种叫做自由基的有害物质的损伤。

另外也可用于化妆品，如红色花青素做口红。

这些商品用色素(除葡萄皮色素外)共同特征是对光、热、氧稳定性好，对微生物稳定，一般溶于水和乙醇，不溶于植物油。

具体来说，花青素有如下几种作用：⑴．有助于预防多种与自由基有关的疾病，包括癌症、心脏病、过早衰老和关节炎；⑵．通过防止应激反应和吸烟引起的血小板凝集来减少心脏病和中风的发生； ⑶．增强免疫系统能力来抵御致癌物质；⑷．降低感冒的次数和缩短持续时间；⑸．具有抗突变的功能从而减少致癌因子的形成；⑹．具有抗炎功效，因而可以预防包括关节炎和肿胀在内的炎症； ⑺．缓解花粉病和其它过敏症；⑻．增强动脉、静脉和毛细血管弹性；⑼．保护动脉血管内壁；⑽．保持血细胞正常的柔韧性从而帮助血红细胞通过细小的毛细血管，因此增强了全身的血液循环、为身体各个部分的器官和系统带来直接的益处，并增强细胞活力；⑾．松弛血管从而促进血流和防上高血压（降血压功效）；⑿．防止肾脏释放出的血管紧张素转化酶所造成的血压升高；⒀．作为保护脑细胞的一道屏障，防止淀粉样β蛋白的形成、谷氨酸盐的毒性和自由基的攻击，从而预防阿尔茨海默氏病；⒁．通过对弹性蛋白酶和胶原蛋白酶的抑制使皮肤变得光滑而富有弹性，从内部和外部同时防止由于过度日晒所导致的皮肤损伤等等；⒂. 花青素可以促进视网膜细胞中的视紫质再生，预防近视，增进视力。

桑椹酒渣中花青素提取1材料与方法1.1材料桑椹果酒酒渣。

1.2试剂药品试验所用95%乙醇、浓盐酸、30%过氧化氢、Na2SO3等试剂均为分析纯。

1.3主要仪器电子分析天平、分光光度计、旋转蒸发仪、酸度计、高速冷冻离心机、电热恒温水浴锅等。

1.4方法（稀HCl+95%乙醇提取）样品称量，用提取剂提取，过滤（减压过滤/板框过滤），所得的提取液按一定比例稀释（pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀）释后在分光光度计上测出OD值，以OD值代表桑椹红色素的含量。

1.4.1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较分别以75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。

1.4.2不同物料与提取剂之比对花青素提取的影响（此时用提取效果最好的提取剂）。

1.4.3温度对提取效果的影响以最佳结果作为桑椹提取剂，分别于60、50、40、30、20℃下提取1h。

1.4.4提取时间对提取效果的影响每隔20分钟取样测得OD值。

1.4.5正交实验1.4.6得率试验称取一定量样品，经提取后。

提取液经旋转蒸发仪蒸发，真空干燥，求得率。

方法一稀HCl+95%乙醇提取1不同溶剂的吸光光谱及提取效果比较固定浸提温度、提取时间、液料比，分别85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）为提取剂进行浸提试验，色素提取液分别采用pH1.0氯化钾缓冲液和pH4.5醋酸钠缓冲液稀释一定倍数(吸光值在0.2~0.8之间)，将稀释液静置15min，分别测定两种样品稀释液ODλmax和700nm处的吸光值A。

按公式计算桑椹花色苷含量，分析提取溶剂对花色苷提取量的影响。

注：ODλmax的确定分别以85%乙醇、95%乙醇、0.05%稀HCl+95%乙醇（1：1）、0.10%稀HCl +95%乙醇（1：1）、0.15%稀HCl +95%乙醇（1：1）作为提取剂，以物料与提取剂之比1：10提取桑椹色素，提取液经3倍稀释后用分光光度计测定各提取液吸收光谱。

紫甘蓝中花青素的提取（安徽农业大学 12青年农场主班）花青素具有很强的抗氧化作用，具有清除体内自由基、过敏、保护胃粘膜等多种功能，引起了国内外学者广泛关注。

目前抗变异、抗肿瘤、抗，对花青素的研究主要集中于花青素的提取、分离纯化、热稳定性、抗氧化性及其生理功能等方面。

1、实验原理紫甘蓝花青素或花色素属于黄酮类化合物，极性较高，可溶于水或甲醇乙醇等有机溶剂中。

根据相似相溶的原则，本实验选用乙醇作为紫甘蓝花色素的浸提剂，采用大孔吸附树脂法分离提纯。

大孔吸附树脂具有吸附性能和分子筛的作用，使相对分子质量和吸附能力不同的混合物的不同成分得到分离。

紫甘蓝叶片与60%乙醇混合在组织捣碎机中破坏紫甘蓝细胞，使花色素尽可能多的溶解。

为了防止花色素的降解以提高其溶出率，可在其中加入1%盐酸。

八层纱布过滤后，留一小烧杯备用，剩余的用大孔树脂除杂，加入200ml 15%的乙醇溶液除去其他可溶性杂质，让树脂吸附花色素，再用60%乙醇洗脱，解析得到乙醇和花色素的混合液。

将过柱的溶液以HCl：混合液=1:4的比例混合至烧杯中，在90。

C的水浴锅中水解一小时，以破坏花色素的糖苷键，使花色素均以花青素的形式存在。

此时，用20ml纯水除杂，用无水乙醇洗脱，得到较为单一的花青素与乙醇混合液。

在旋转蒸发仪上蒸干。

2、材料、药品与仪器新鲜紫甘蓝15%乙醇、60%乙醇+1%HCl混合液、弄HCl、无水乙醇、AB-8打孔吸附树脂电子天平、组织捣碎机、交换柱、玻璃棒、50ml量筒漏斗、烧杯、圆底烧瓶、纱布、比色皿、分光光度计、旋转蒸发仪3、实验步骤●配制60%+1%HCl混合液与15%乙醇溶液备用●称取100.0g新鲜紫甘蓝叶片，量取60%+1%HCl混合液300ml（浸提剂），同时放入组织捣碎机中捣碎，浸提●所得固液混合物用8层纱布过滤，取一点滤液备用，剩余滤液1：5加水稀释得色素原液●将备用滤液再用滤纸过滤，用浸提剂做空白，测定其对520nm光的吸光度，并作标准曲线。

一、实验目的1. 探究紫甘蓝中花青素的提取方法。

2. 了解花青素的性质及其应用。

3. 学习实验室提取、分离、鉴定等基本操作。

二、实验原理紫甘蓝中含有丰富的花青素，花青素是一种天然色素，具有较强的抗氧化性、抗变异、抗肿瘤、抗过敏等生理功能。

本实验采用溶剂提取法，利用有机溶剂（如乙醇、甲醇等）提取紫甘蓝中的花青素，然后通过纸层析法分离纯化花青素，最后利用紫外-可见分光光度法测定花青素的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：紫甘蓝、乙醇、甲醇、蒸馏水、NaCl、NaOH、盐酸、pH试纸、滤纸、层析板、紫外-可见分光光度计、电子天平、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、移液管等。

2. 实验试剂：无水乙醇、甲醇、NaCl、NaOH、盐酸、醋酸、硫酸铵、氯化钠等。

四、实验步骤1. 提取（1）将紫甘蓝洗净，晾干，切成小块。

（2）将紫甘蓝放入研钵中，加入适量无水乙醇，研磨充分。

（3）将研磨好的混合物倒入烧杯中，加入适量蒸馏水，搅拌均匀。

（4）将烧杯放入水浴锅中，加热至沸腾，保持沸腾状态10分钟。

（5）取出烧杯，冷却至室温，用滤纸过滤，收集滤液。

2. 分离纯化（1）将滤液倒入漏斗中，用蒸馏水洗涤滤渣，收集洗涤液。

（2）将滤液与洗涤液合并，加入适量醋酸，调节pH至2.5。

（3）静置30分钟，使花青素沉淀。

（4）取上层清液，用滤纸过滤，收集滤液。

（5）将滤液倒入烧杯中，加入适量硫酸铵，搅拌，使蛋白质沉淀。

（6）静置30分钟，取上层清液，用滤纸过滤，收集滤液。

3. 测定花青素含量（1）取适量滤液，用紫外-可见分光光度计测定其在520nm处的吸光度。

（2）根据标准曲线计算花青素含量。

五、实验结果与分析1. 提取结果：紫甘蓝提取液呈紫色，说明花青素已被成功提取。

2. 分离纯化结果：滤液经过分离纯化后，颜色较浅，说明花青素得到了一定的纯化。

3. 花青素含量测定结果：根据标准曲线计算，紫甘蓝提取液中花青素含量为0.5mg/g。

六、实验结论1. 紫甘蓝中花青素可以通过溶剂提取法提取。

黑米中花青素的粗提取摘要：本课题以黑米为原料，采用水提法和酸化乙醇提取法对黑米中的花青素进行粗提取。

采用单因素试验考察了料液比、提取时间、提取温度、pH值及提取液浓度对花青素提取量的影响。

在此基础上，通过正交试验考察花青素的最佳提取工艺。

关键词：黑米；花青素前言化学合成的食用色素具有色泽鲜艳、稳定性好、成本低廉、制备简单等优点，在食品工业中得到广泛应用。

随着人们回归自然的意识日益增强，促使人类重新认识到天然色素作为食品添加剂具有不可代替的价值。

天然色素直接取自于自然界中的动植物和微生物，因而用于食品、化妆品及至药品更为安全可靠。

我国食品行业对合成色素与天然色素都有使用［１］。

但现代医学研究表明：合成色素作为食品着色剂可造成人体伤害。

因此，许多发达国家禁止在食品中使用合成色素，天然色素来源于自然，具有安全性，有的还有一定的营养和药理作用［２］。

开发天然色素取代人工合成色素作为食品着色剂是必然的发展趋势。

黑米是特种稻米，营养丰富，具有一定的保健作用，被认为是滋补佳品，有“开胃益中，健脾暖肝，明目活血，滑涩补精”等作用，历来深受东亚地区人民的喜爱。

研究证实，黑米所表现出来生理保健作用主要不是来自黑米中的膳食纤维、维生素和矿物质等营养素，而是与黑米皮中富含的花色苷色素有关［３］。

花色苷是自然界广泛分布的一种植物多酚，在大部分植物花瓣和果实种皮当中都不同程度的存在。

黑米成熟过程中，会在种皮内积聚大量花色苷色素，从而使其糙米呈现出棕红色、紫红色、紫黑色乃至黑色等颜色。

近年来的研究发现，花色苷类物质除了赋予植物丰富的色彩外，还具有抗氧化、抗炎、降血脂以及抑制肿瘤生成等生理功能，同时花色苷作为一种较为安全的天然色素，在食品工业也显示出了广阔的应用前景［４］，因而研究和开发利用黑米色素有良好的发展前景。

花青素分子中因存在高度分子共轭体系，易溶于水、甲醇、乙醇等极性溶剂中，因此通常以含有少量盐酸或甲酸的乙醇为溶剂提取花青素。

紫甘蓝中花青素的提取研究【摘要】蓝花青素具有很强的抗氧化作用，具有清除体内自由基、过敏、保护胃粘膜等多种功能，引起了国内外学者广泛关注。

目前抗变异、抗肿瘤、抗，对花青素的研究主要集中于花青素的提取、分离纯化、热稳定性、抗氧化性及其生理功能等方面。

本文主要研究了紫甘蓝花青素的提取工艺;用大孔树脂初步纯化紫甘蓝花青素;对紫甘蓝花青素纯度鉴定。

采用“溶剂提取、萃取、树脂纯化、薄层色谱”相结合的方案对紫甘蓝花青素进行了分离纯化。

【关键词】紫甘蓝花青素提取分离纯化1.1引言花青素作为可使用色素之一，具有多种生物学作用，将广泛用于食品加工、医药保健品、化妆品行业。

虽然国内外己开展了一些研究，主要集中在花青素粗品的提取方法的研究方面，而对紫甘蓝花青素的组成及分子结构鉴定、生物学活性、药理作用的研究还很少，还需要大量数据为其进一步开发和利用提供理论依据。

2.1材料与方法2.1.1实验材料新鲜紫甘蓝2.1.2实验方法溶剂提取、萃取、树脂纯化、薄层色谱2.2主要仪器、试剂分析天平、外分光光度计、环水式多用真空泵、心机、旋转蒸发仪、恒温水浴锅、无水乙醇、甲醇、孔树脂、浓盐酸。

2.3实验方法2.3.1紫甘蓝色素的提取取新鲜80G的紫甘蓝叶片于大杯中加入一定的浸提剂，吸取一定体积的浸提液于 1 Oml比色管中，用浸提剂稀释至刻度，用浸提剂做空白，测定其对520nm光的吸光度。

采用溶剂提取法。

称取紫甘蓝80g，用500ml的60%乙醇和1%盐酸混合液进行捣碎浸提8层纱布过滤，4℃条件下静置3h，离心测OD 值。

2.3.2紫甘蓝色素的初步纯化大孔树脂预处理的方法:将待处理的大孔树脂装入柱中，用95%乙醇浸泡24h一用95%乙醇2}4BV冲洗一用去离子水洗至无醇味一5%氢氧化钠溶液2}4BV冲洗树脂柱一水洗至中性一10%乙酸2}4BV冲洗通过树脂柱一水洗至中性，备用。

滤液用5倍的纯水稀释，大孔吸附树脂法分离，往吸附柱中先用15%乙醇除杂，再用60%乙醇洗脱收集洗脱液；用四分之一的盐酸在90℃条件下水解1h，再加5倍纯水稀释；大孔吸附树脂再次分离，此时用水除杂，无水乙醇洗脱收集；2.3.3花青素的浓缩结晶无水乙醇洗脱液用旋转蒸发仪浓缩，放冰箱中等待是否有结晶甲醇：盐酸=4:1做展开剂测纯度3.1 实验结果及讨论3.1.1浓度计算紫甘蓝捣碎榨汁后得到深紫色溶液，过滤静置稀释40测得OD值为0.865由曲线可得到花青素含量为1.98mg/ml或 6.94mmol/ml3.1.2结果讨论关于天然色素的提取纯化。

葡萄籽中分离提取原花青素的研究花青素是一类多酚类化合物，其具有高效的清除自由基的功能，是一种新型、高效、低毒的天然抗氧化剂。

本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。

研究结果表明：本项目产品投资费用少，操作费用低，产品附加值高；原料为废物利用，变废为宝符合国家相关产业政策；几乎没有“三废”排放，使用的溶剂全部回收利用，废渣可以作为造纸或者饲料综合利用。

标签：花青素；葡萄籽；提取；正交实验1 概述原花青素是广泛存在于植物中的一类天然多酚类化合物，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。

属于缩合鞣质或黄烷醇类。

最早而最丰富的花青素是从红葡萄渣中提取的葡萄皮红。

它于1879年在意大利上市。

由于原花青素的多种功效，由葡萄籽提取的原花青素已被我国卫生部批准为保健原料。

目前对原花青素的提取研究及保健作用研究已非常成熟。

已经将其应用到工业化产业，开发出多种原花青素的保健产品和化妆产品。

原花青素的产品已被广大消费者普遍接受。

2 葡萄籽中花青素的提取本实验通过浸提的方法从葡萄籽中提取原花青素，考察了不同溶剂、浸提时间、浸提温度、乙醇体积分数和料液比等单因素对浸提效果的影响，确定了最佳的单因素水平。

并通过设计正交实验，得出原花青素提取最佳工艺条件。

2.1 实验方法2.1.1 葡萄籽中原花青素的提取本实验采用甘肃紫轩酒业葡萄酒厂生产葡萄酒产生的葡萄籽下脚料作为本实验的原材料。

在生产葡萄酒压榨葡萄汁的糟粕和葡萄酒生产前和发酵后压榨的榨粕，所得的这些榨渣中，以换成干品计，约有50%的葡萄皮，45%的葡萄籽和少量的梗等，将该榨渣经粗选分离出葡萄籽，作为提取的原料。

所得的葡萄籽用粉碎机粉碎后，过20目筛，于磨口三角瓶中，经石油醚脱脂脱水份，得脱脂葡萄籽粉，用一浸提液在50℃的恒温水浴中回流浸提，离心后取上清液，反复提取若干次，最后洗涤残渣，将上清液和洗涤液合并，加入固体无水硫酸钠脱水，倾出上层溶液，在真空度为0.095MPa，温度为40℃的条件下真空浓缩，浓缩液冷却至室温，得到原花青素粗提液，干燥，制得粗提物。

紫甘薯中花青素的提取及含量的测定山东农业大学化学学院09级材化2班赵林静152********山东农业大学化学学院09级材化2班李新152********摘要用乙醇酸溶液从紫甘薯中提取花青素。

用PH示差法对提取液中花青素含量进行测定。

关键字：紫甘薯花青素PH示差法1前言：花青素又称花色素，是一种广泛存在于植物中的水溶性天然色素。

属黄酮类化合物，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。

花色苷是一种以黄酮核为基础的一类糖苷，天然花色苷配糖体的基本结构为3、5、7-三羟基-2-苯基并呋喃。

最早且最丰富的花青素的花青素是从后葡萄渣中提取的葡萄皮红，花青素作为一种天然食用色素，安全，无毒，资源丰富，而且具有一定的营养和药用价值，在视屏、化妆、医药等方面有着巨大的应用潜力。

有实验证明，花青素是迄今为止所发展的最强效的自由基清除剂。

目前对花青素的定量没有较好的方法，常用的方法是以色价或吸光度表示其相对含量，也有用花青素纯品配置不同浓度梯度制作标准曲线测定色素的含量但由于花青素的标准品很不稳定，限制了这种方法的使用。

本实验用PH示差法对紫甘薯中花青素的提取液中花青素的含量进行测定。

2 实验目的2.1掌握花青素的提取方法及其PH示差法测量花青素含量的原理2.2熟练掌握分离提纯操作方法步骤。

3 实验原理紫甘薯中含有花青素，用乙醇的酸溶液作为提取液在离心机的作用下即可得到粗的花青素提取液。

PH示差法的原理为花青素的色调和色度随PH值的不同而发生改变。

PH为1.0时，花青素以红色的2-苯基并呋喃的形式存在。

结合朗伯比尔定律可得出在两个不同PH值下，花青素溶液的吸光度差值与花青素含量成正比。

4实验仪器及试剂仪器：电子天平；钥匙；精密PH试纸；PH计；表面皿、玻璃棒；烧杯；干燥的带塞子的锥形瓶250ml(4支)；100ml容量瓶（4支）；胶头滴管；500ml试剂瓶（3支）；高速离心机、离心管（6支）；分光光度计；10ml小量筒（3支）；摇床；烧杯3支试剂：粉末状紫甘薯30g(自备)；分析纯的乙醇试剂500 ml 氯化钾20g 醋酸钠30g 去离子水1000ml 分析纯的盐酸50ml5 实验步骤5.1乙醇的酸溶液按85：15的比例将分析纯的乙醇溶液与去离子水混合，再用浓盐酸调节PH至1.0左右。

花青素提取工艺试验实验仪器材料：仪器：打浆机、干燥箱、粉碎机、超声波震荡器、培养箱、低温超速离心机、旋转蒸发仪、真空干燥箱、水浴锅、pH试纸试剂：80%乙醇、山芋粉、蔗糖、硝酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁、滤纸、石油醚、0.1%稀盐酸材料：枸杞、黑曲霉1.1称取枸杞加入去PH=2离子水中（按比例为1：120g/L），在60℃水浴中浸泡4h，分离样液和样品，（重复2次），样液待用1.2【脱脂处理】将1.1中的样品和样液与石油醚（30-60℃）按1:10g/L混合，浸泡1h后，于旋转蒸发仪中50℃加热回流2h，所得样品溶液，放在打浆机打碎1.3加入微生物培养液中【固液1:5】(培养液配比: 山芋粉3. 7 5%、蔗糖1 5% 、硝酸铵0. 2%、磷酸二氢钾0. 1%和硫酸镁0. 025% ) , 120 ℃条件下灭菌20min,在超净工作台内接种。

黑曲霉与培养液比例为1∶1 000。

接种后放入培养箱中培养。

温度30℃，pH4.5，培养时间72h1.4培养后，在培养液中加入40倍pH3.0的80%乙醇，在超声波水浴中50℃提取3h（过滤后重复1-2次）1.5粗过滤后，低温离心40℃，4000r/min，10min，去沉淀，取离心液1.6 50℃旋转蒸发仪真空浓缩，减压浓缩0.076Mpa1.7 放入真空干燥箱干燥，得粗品1.8上述浓缩液再次离心，加入0.1mol/LHcl溶液调pH=4-4.5，离心分离，再次浓缩烘干精提12.1上述粗品，加入温水中溶解2.2常温下，在微滤机下0.12MPa，进行微滤收集液体2.3所得滤液再次放入超滤机中过滤，0.1MPa，膜流速1500L/h 2.4取0.5g活化湿AB- 8 树脂和20ml液体常温吸附24h，离心2.5滤液加入60%乙醇洗脱，1-3h左右，后60℃，减压真空88kpa 下蒸馏回收乙醇2.6所得液体加入一定量石油醚精致萃取，35℃减压浓缩回收，2.7真空干燥称重方案二1.1称取样品和样液与石油醚（30-60℃）按1:10ml混合，浸泡1h后，于旋转蒸发仪中50℃加热回流2h，所得样品溶液，干燥滤渣用于色素提取1.2以料液比为1：40的PH=3的80%乙醇在50℃下浸泡3后，在超声波为40kHZ下，100W,20min，过滤去沉淀，重复1-2次1.3粗过滤后，低温离心40℃，4000r/min，10min，去沉淀，取离心液1.4 50℃旋转蒸发仪真空浓缩，减压浓缩0.076Mpa1.5 放入真空干燥箱干燥，得粗品1.6上述浓缩液再次离心，加入0.1mol/LHcl溶液调pH=4-4.5，离心分离，再次浓缩烘干精品提取1、称取粗品50g左右加入170ml的pH3.5-4.0的浓盐酸化的95%乙醇，在40-50℃中搅拌提取4h，抽滤2、滤渣用100ml酸性乙醇在同样条件下进行第二次提取3h，抽滤（也可进行重复多次）3、合并滤液，边搅拌边加入浓氨水，并调溶液ph为7.2-7.5，室温静置0.5h，使之完全沉淀，抽滤，在沉淀未干燥前，用适量冰醋酸使之分解成稀糊状，可微微加热，静置1h，抽滤理化因素：A：最大波长的确定：取处理过的枸杞粉末溶于乙醇中浸泡一段时间后利用紫外分光光度计进行光谱扫描，测定最大吸收波长。