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第二章细胞生物学的研究技术和方法一、选择题：1.在光学显微镜下所观察到的组织或细胞结构一般称为A.显微结构B.超微结构C.亚显微结构D.分子结构2.研究细胞的超微结构一般要利用下列哪种技术A.光学显微镜技术B.电子显微镜技术C.X射线衍射技术D.离心技术3.利用不同性质有机染料可对细胞中不同成分选择性染色，下列哪种结果有误A.碘液可使口腔上皮细胞的细胞质和细胞核呈深浅不同的棕黄色B.吉姆萨染液可使细胞核或染色体呈紫红色或桔红色C.甲基绿可使RNA分子呈蓝绿色D.派洛宁可使RNA分子呈红色4.适于观察无色透明活细胞显微结构的光学显微镜是A.相差显微镜B.暗视野显微镜C.荧光显微镜D.偏振光显微镜5.光学显微镜的分辨率（最小分辨率）可达A. 0.1?mB. 0.2?mC. 0.3?mD. 0.4?m6.关于电子显微镜，下列哪项有误A.组织或细胞在透射电镜观察前均需做超薄切片B.分为透射式和扫描两类C.分辨率最高可达0.2nmD.利用电子束作照明源7.关于透射式电子显微镜，下列哪项叙述是错误的A.适于观察细胞的外表形貌B.以电子束作为光源C.电子透过标本后在荧光屏上成像D.分辨率较高8.关于扫描电子显微镜，下列哪项有误A.20世纪60年代才正式问世B.景深长，成像具有强烈立体感C.电子扫描标本使之产生二次电子，经收集放大后成像D.适于观察细胞的内部构造9.福尔根反应（Feulgen reaction）是一种经典的细胞化学染色方法，常用于细胞内A.蛋白的分布与定位B.脂肪的分布与定位C.酸性磷酸酶的分布与定位D. DNA的分布与定位10.研究组织或细胞显微结构的主要技术是A.光镜技术B.电镜技术C.离心技术D.电泳技术11.研究细胞超微结构的主要技术A.光镜技术B.电镜技术C.离心技术D.电泳技术12.分离细胞内不同细胞器的主要技术是A.光镜技术B.电镜技术C.离心技术D.电泳技术13.利用放射性同位素标记物能使照相乳胶感光的原理来探测细胞内某种物质的含量与分布的方法是A.放射自显影技术B.免疫荧光镜技术C.免疫电镜技术D.原位杂交技术14.用荧光染料标记的抗体处理细胞后在荧光显微镜下对细胞中特殊分子进行定位属于A.放射自显影技术B.免疫荧光镜检术C.免疫电镜技术D.原位杂交技术15.直接取材于机体组织的细胞培养称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆16.当体外培养的细胞增殖到一定密度后以1：2以上的比例转移到几个容器中进行再培养,称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆17.模拟体内的条件使细胞在体外生存、生长和繁殖的过程称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆18.分离出单个细胞在适当的条件下使之增殖成均一的细胞群体称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞克隆19.体细胞杂交又称为A.细胞培养B.原代培养C.传代培养D.细胞融合20.适于观察细胞内超微结构的显微镜是A.透射电镜B.扫描电镜C.荧光显微镜D.倒置显微镜21.从血液中分离收集血细胞一般利用A.流式细胞分析仪B.超速离心机C.高速离心机D.低速离心机22.从破碎的细胞中分离收集线粒体一般所需的仪器是A.流式细胞分析仪B.超速离心机C.高速离心机D.低速离心机23.要观察肝组织中的细胞类型及排列，应先制备该组织的A.切片B.滴片C.涂片D.装片24小鼠骨髓细胞的染色体标本一般制备成细胞的（）来进行观察。
蛋白质的酸碱性质名词解释蛋白质是生物体内最重要的基础物质之一，它在维持生命体的正常功能、参与各种生物过程起着至关重要的作用。
而蛋白质的酸碱性质则是指蛋白质分子中存在的酸性和碱性基团，以及蛋白质在不同pH下的电荷状态和溶解行为。
一、酸性基团蛋白质分子中常见的酸性基团有羧基(-COOH)和磷酸基团(-PO4)。
羧基是一种具有弱酸性的官能团，其在水溶液中会释放出H+离子，使环境呈酸性。
蛋白质中的羧基通常存在于氨基酸的侧链上，例如天冬氨酸和谷氨酸。
二、碱性基团蛋白质分子中常见的碱性基团有氨基基团(-NH2)和胺基基团(-NH3+)。
氨基基团是一种具有碱性的官能团，它可以接受H+离子形成氨基离子，使环境呈碱性。
蛋白质中的氨基基团通常存在于氨基酸的侧链上，例如赖氨酸和精氨酸。
三、电荷状态和溶解行为蛋白质的溶解行为受到其电荷状态的影响。
当蛋白质中的酸性基团和碱性基团接近平衡时，蛋白质呈现等电点，即在此pH值时蛋白质净电荷为零。
当溶液的pH值低于等电点时，蛋白质分子带正电荷；当溶液的pH值高于等电点时，蛋白质分子带负电荷。
此外，蛋白质的酸碱性质还影响其溶解性。
在低pH值条件下，蛋白质分子带正电荷，相互之间会产生静电排斥作用，使蛋白质分子离散分散在溶液中。
而在高pH值条件下，蛋白质分子带负电荷，相互之间会发生静电吸引作用，使蛋白质分子聚集在一起形成胶体。
总之，蛋白质的酸碱性质是由其分子中的酸性和碱性基团所决定的。
酸性基团的存在使蛋白质具有酸性性质，而碱性基团则使其具有碱性性质。
蛋白质的电荷状态和酸碱性质的变化，不仅对其溶解性有影响，还对其结构和功能产生重要作用。
虽然蛋白质的酸碱性质对于生物体的正常功能至关重要，但我们在日常生活中也能从中受益。
例如，了解蛋白质的酸碱性质有助于我们正确存储和烹饪食物。
在烹饪过程中，不同食材中的蛋白质会发生酸碱性变化，从而影响食物的质地、口感和营养价值。
因此，了解蛋白质的酸碱性质，我们可以根据需要来控制食物的烹调时间和温度，以确保食物的口感和营养。
姓名 xxxx 班级 xxxxxx 同组人 xxxxxxxx 科目细胞生物学实验题目脂类的化学——苏丹Ш染色组别第2组一．实验目的1.熟悉脂类的显示技术。
2.了解脂类在细胞中的分布。
二．实验原理脂肪是体内储存能量和供给能量的重要物质，根据其性质可以分为中性脂肪、脂肪酸、胆固醇、鞘磷脂等。
很多细胞都含有脂肪，游离状态的脂肪呈小滴状悬浮于细胞质内，比较显著的如肝细胞。
脂肪小滴可以集合，将细胞质及细胞核挤到一旁，如脂肪细胞。
脂肪不溶于水，易溶于浓乙醇、苯、氯仿和乙醚等，因此制作脂类标本一般不用石蜡切片，而用冰冻切片或者铺片法以保存脂类，固定多用甲醛类固定液。
其染色方法有脂溶性染料显示法、化学显示法和特异染色法等。
脂肪染料一般选用有机溶剂做溶剂，丙酮和乙醇对染料和脂肪都是很好的溶剂，这样可以染色大的脂肪积累块，但是小的脂肪滴会溶解。
60%异丙醇当溶剂，可以减轻脂类的溶解。
丙二醇或磷酸三乙酯不会溶解脂类物质，但是能溶解染料，是比较理想的溶剂。
用这些溶剂配的染料溶液要过滤以去掉沉淀，防止蒸发，因蒸发会引起染料在材料中积累。
常用相同溶剂洗掉多余的染料，然后再用水洗，可以防止多余的染料在材料中沉淀。
用锇酸固定的脂肪不溶于无水乙醇、二甲苯等类似的液体，可用于石蜡切片，但是脂肪的标本一般不用石蜡切片或火棉胶包埋，而用如下方法：冰冻切片，明胶包埋冰冻切片，铺片法。
本实验中使用的脂溶性染料显示法利用苏丹染料中的苏丹III、苏丹IV或者苏丹黑等溶于脂类，而使脂类显色的原理显示脂类，使用时，要注意选择溶剂，要求既要溶解苏丹染料，又不溶掉脂肪。
苏丹染料是偶氮染料，它对脂类的显示是一种简单的物理变化。
苏丹染料是一种脂溶性染料，易溶于乙醇但更易溶于脂肪。
当它与含有脂类的标本接触时，苏丹染料即脱离乙醇而溶于该含脂结构中使其显色。
三．实验仪器及试剂1.仪器解剖盘，解剖剪，镊子，盖玻片，载玻片，显微镜，胶头滴管2.试剂苏丹Ш染液，甲醛钙溶液，70%乙醇溶液，蒸馏水3.材料小白鼠一只四．实验步骤1.断头法处死小鼠，置于解剖盘中。
实验七细胞组分的化学反应【实验目的】了解核酸、蛋白质、糖及酶的细胞化学反应原理，掌握Brachet反应及碱性蛋白、酸性蛋白、糖原和过氧化物酶的细胞化学染色方法。
【实验用品】一、材料和标本蟾蜍、小白鼠各一只、肝脏石腊切片、培养的Hela细胞。
二、器材和仪器光学显微镜、解剖器材、蜡盘、载玻片、吸水纸、染色缸、盖玻片、水浴箱。
三、试剂PBS缓冲液(pH7.2)、甲基绿一呱咯宁醋酸缓冲液、纯丙酮、l/2丙酮+1/2二甲苯、纯二甲苯、70％乙醇、5％三氯醋酸、0.1％碱性固绿、0.1％酸性固绿、0.5％硫酸铜、联苯胺混合液、1％番红、无水乙醇、过碘酸酒精液、Schiff 氏酒精液、亚硫酸水、Ehrlieh苏木精、95％乙醇、Carnoy固定液(甲醇：冰醋酸=3:1，体积比)【实验内容】细胞的组织化学方法，是研究细胞成分常用的方法之一。
它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀物，再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。
一、Brachet反应一显示细胞内的DNA和RNA(一)原理细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后，其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应，一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力，且这两种染料的作用有选择性，甲基绿染高聚分子的DNA呈蓝绿色，呱咯宁染低聚分子的RNA呈红色。
由此对细胞中的DNA和RNA进行定位、定性、和定量分析。
(二)方法l．接种Hela细胞于盖片上并培养24～48小时，使长成单层。
2．取出盖片，用PBS(pH7.2)轻轻冲洗盖片表面去除残渣。
3．放入Carnoy固定液中固定l小时。
4．浸入甲基绿一呱咯宁醋酸缓冲液中30分钟染色。
蛋白质的沉淀反应实验报告结果通过掌握蛋白质的沉淀反应，了解蛋白质的性质和结构，并掌握蛋白质的分离和纯化技术。
实验原理：蛋白质是生物体内最重要的基本物质之一，是构成细胞和组织的重要组成部分。
蛋白质的沉淀反应是利用酸、碱、盐等物质对蛋白质的特殊性质进行分离和纯化的一种方法。
蛋白质在不同的pH值下具有不同的电离状态，当pH值达到其等电点时，蛋白质处于等电点电荷中性状态，此时蛋白质的溶解度最小，易于沉淀。
沉淀反应的原理是利用酸、碱、盐等物质使蛋白质达到等电点电荷中性状态，从而使蛋白质沉淀出来。
实验过程：1.制备酸性和碱性蛋白质溶液：取鸡蛋清和牛奶各10ml，分别加入10%的盐酸和氢氧化钠，调节pH值至2和10。
2.沉淀反应：取酸性和碱性蛋白质溶液各1ml，加入等量的10%三氯醋酸，轻轻摇匀，放置1小时，观察沉淀情况。
3.沉淀物的洗涤：将沉淀物用去离子水洗涤3次，使其去除杂质。
4.沉淀物的溶解：将沉淀物加入0.1mol/L NaOH中，搅拌至溶解，调节pH值至7左右。
5.测定蛋白质浓度：采用比色法测定蛋白质浓度。
实验结果：1.酸性蛋白质溶液的沉淀反应：在酸性条件下，鸡蛋清溶液中的蛋白质与三氯醋酸反应，产生大量白色沉淀物，沉淀率高达90%以上。
2.碱性蛋白质溶液的沉淀反应：在碱性条件下，牛奶溶液中的蛋白质与三氯醋酸反应，产生少量白色沉淀物，沉淀率仅为10%左右。
3.沉淀物的洗涤：经过去离子水洗涤后，沉淀物变得干净透明，无杂质。
4.沉淀物的溶解：经过加入0.1mol/L NaOH的溶解，沉淀物完全溶解，呈现出淡黄色透明液体。
5.测定蛋白质浓度：利用比色法测定蛋白质浓度，鸡蛋清溶液中的蛋白质浓度约为0.6g/L，牛奶溶液中的蛋白质浓度约为0.1g/L。
实验结论：1.酸性条件下，鸡蛋清中的蛋白质易于沉淀，沉淀率高达90%以上；而在碱性条件下，牛奶中的蛋白质沉淀率仅为10%左右。
2.经过去离子水洗涤后，沉淀物变得干净透明，无杂质。
《细胞生物学》实验教学大纲（执笔人：张利平审核人：教学院长：）一、课程简介（一）课程代码：（二）课程名称：《细胞生物学》实验( Experiment of Cell Biology )（三）修读对象：生物科学及生物技术专业本科生（四）总学时与学分：27学时/3学分（五）考核方式：随堂测试（六）相关课程：医学细胞生物学、普通生物学、医学遗传学（七）内容提要：这本实验教材是为高等医学院校细胞生物学实验教学编写的，适用于四年制生物科学及生物技术专业学生。
细胞生物学实验课的教学目的，主要是通过基本技能训练以及观察分析实验结果，使学生了解并掌握有关的实验技术原理和操作方法，进而培养学生动手实践、观察分析和解决问题的能力。
为达到此目的，实验内容自成体系，着眼于加强学生的基本技能训练，以及观察分析问题和科学思维能力的培养。
大多数实验采用生活细胞材料，由学生自己动手取材和实验，使学生能对细胞获得生动的认识。
选编了一些生物医学常用的细胞生物学基本实验，如细胞的显微观察、细胞计数、细胞组分的分级分离、细胞组分的化学反应、细胞生理活动、细胞培养、细胞融合等，为后续的课程及医学研究打下一定基础。
二、教学目的和教学方法：培养学生基本的细胞生物学实验方法并培养学生的实际动手操作能力，帮助学生形成基础实验研究思路，为后续的学习和实验研究打下基础。
全书内容共5个实验，针对各专业学生教学根据具体情况采用学生动手操作为主，部分操作教师演示示教为辅的方式结合进行。
三、教学学时分配总学时27，各实验学时分配如下：实验一：鸡血细胞的融合实验 6学时实验二：细胞器的分级分离 6学时实验三：微丝染色及形态学观察 5学时实验四：细胞中碱性蛋白的显示 5学时实验五：红细胞膜的通透性 5学时四、选用教材和主要教学参考书教材：《细胞生物学》翟中和主编高等教育出版社出版教学参考书：1.分子细胞生物学韩贻仁科学出版社2.细胞生物学王德耀上海科学技术出版社3.细胞生物学研究方法与技术(第二版) 刘鼎新北医、协和医大联合出版社4.细胞生物学实验(第二版) 杨汉民高等教育出版社1997年07月出版5.Molecular Biology of the Cell 4th Edition, Bruce Alberts et al.6.Molecular Cell Biology 4th Edition, Harvey Lodish et al.目录实验一鸡血细胞的融合实验 (5)实验二细胞器的分级分离 (6)实验三微丝染色及形态学观察 (7)实验四细胞中碱性蛋白的显示 (9)实验五红细胞膜的通透性 (10)实验一鸡血细胞融合实验【教学目的】1.掌握细胞融合的概念及基本原理。
蛋白质在不同酸度环境中的状态【摘要】蛋白质在不同酸度环境中的状态对其结构和功能具有重要影响。
酸度会影响蛋白质的电荷状态，进而影响其空间构象和稳定性。
在酸性环境中，蛋白质可能发生变性，导致功能丧失或失活。
而在碱性环境中，蛋白质的结构也会发生变化，影响其活性。
在中性环境下，蛋白质通常能保持稳定。
调控环境酸度对蛋白质功能至关重要。
未来的研究可以探索如何更精准地调控蛋白质的酸度环境，以实现对蛋白质结构和功能的精准调控，为生物医学领域的发展带来新的可能性。
酸度环境对蛋白质具有重要性，值得进一步研究。
【关键词】蛋白质、酸度环境、结构、电荷、变性、稳定性、碱性环境、调控、功能、未来研究方向1. 引言1.1 蛋白质在不同酸度环境中的状态蛋白质是生物体内非常重要的大分子，它在细胞的结构和功能中扮演着关键的角色。
而蛋白质的结构和功能受到环境条件的影响，其中酸度是一个重要的因素。
不同酸度环境对蛋白质的结构和状态都会产生影响，进而影响其功能。
在酸性环境下，蛋白质可能发生变性或失去原有的结构，导致功能丧失。
而在碱性环境下，蛋白质的结构也会发生变化，影响其稳定性和功能。
而在中性环境下，蛋白质可能保持稳定状态，但仍受到pH值微小变化的影响。
了解蛋白质在不同酸度环境中的状态对于进一步研究其功能和调控具有重要意义。
未来的研究方向可以着重于探究酸度对蛋白质结构和功能的影响机制，以及如何通过调控酸度来调节蛋白质的功能，从而为生物医学和生物工程领域提供更多的理论和实践支持。
2. 正文2.1 影响蛋白质结构的酸度在不同酸度环境中，蛋白质的结构受到酸度的影响而发生变化。
酸度可以通过改变溶液中的氢离子浓度来表示，通常用pH值来衡量，pH值低表示酸性环境，而pH值高表示碱性环境。
蛋白质的结构和功能都高度依赖于其特定的三维构象，而这种结构则容易受到酸度的影响而发生改变。
酸度会影响蛋白质的离子化状态，进而影响其溶解度和稳定性。
在不同pH值下，蛋白质上的极性氨基酸和羧基可能会失去或获得氢离子，导致电荷状态的改变。
