JX-06麻疹病毒IgM抗体检测细则
- 格式:doc
- 大小:40.50 KB
- 文档页数:2
麻疹抗体检查这些项目可以检测麻疹抗体大家知道什么是麻疹抗体检查吗?麻疹抗体检查是体检的一个项目,主要的目的就是检查体内是否有麻疹抗体,今天小编就给大家介绍下麻疹抗体检查,告诉大家麻疹抗体检查项目以及麻疹抗体检查注意事项,感兴趣的朋友一起看看吧。
麻疹抗体检查什么是麻疹抗体想要了解麻疹抗体,就需要先了解下麻疹,麻疹是常见的急性呼吸道传染病之一,其传染性很强,在人口密集而未普种疫苗的地区易发生流行,2-3年一次大流行。
麻疹是因为受到麻疹病毒的感染所致。
麻疹病毒属副黏液病毒科,为单股负链RNA病毒,可通过呼吸道分泌物飞沫传播。
如果人体换上麻疹,在临床上会表现为发热、上呼吸道炎症、眼结膜炎及皮肤出现红色斑丘疹和颊黏膜上有麻疹黏膜斑,疹退后遗留色素沉着伴糠麸样脱屑为特征。
常并发呼吸道疾病如中耳炎、喉-气管炎、肺炎等,麻疹脑炎、亚急性硬化性全脑炎等严重并发症。
目前尚无特效药物治疗。
我国自1965年,开始普种麻疹减毒活疫苗后发病显著下降。
如果是已经怀孕了的准妈妈们在孕早期得了麻疹,如果体内没有麻疹抗体,病情严重时会引起腹中胎儿流产或严重畸形,影响胎儿的健康发育。
为了预防麻疹发病,就需要按照需要提前接种麻疹疫苗,如果疫苗接种成功。
就会在体内存在麻疹抗体,对麻疹病毒有免疫作用,预防麻疹病毒对身体的伤害。
一般建议准妈妈在怀孕前三个月应抽血检查体内是否具有麻疹抗体,如果没有,就需要接受疫苗注射,并且建议在接种麻疹疫苗后三个月才受孕。
麻疹抗体检查项目1、细胞学和病毒抗原检查取鼻咽部吸取物或鼻咽拭子或尿液沉渣的脱落细胞涂片,采用Gemsa或HE染色,在普通光镜下可见到多核巨细胞形成和分布于上皮细胞核内和胞浆内的嗜酸性包涵体。
病程第1周检查阳性率可高达90%左右,对麻疹诊断有重要参考价值。
如果对上述涂片标本作特异性抗体标记染色,则可进一步检查麻疹病毒抗原。
2、血清抗体检测血清特异性IgM抗体是新近感染的标志,应用免疫荧光或捕获ELISA法检测麻疹IgM抗体,是目前普遍采用的特异性诊断方法,仅需单份血清标本,在发病后3天左右即可检出(发病后5-20天检出阳性率高),且不受类风湿因子干扰。
麻疹诊断标准麻疹是一种由麻疹病毒引起的急性传染病,主要通过飞沫传播。
麻疹的诊断标准主要包括临床表现和实验室检查两个方面。
下面将详细介绍麻疹的诊断标准。
一、临床表现1. 发热:麻疹患者通常在发病初期出现高热,持续3-5天,热度可达39-40℃。
2. 咳嗽和流涕:麻疹患者常伴有咳嗽和流涕症状,类似于普通感冒。
3. 结膜炎:麻疹患者的眼睛会出现结膜充血和流泪的症状。
4. 麻疹斑:麻疹患者身体上会出现红色斑块,最先出现在耳后,然后逐渐蔓延至全身。
这些斑块会逐渐变成小丘疹,并融合成片。
5. Koplik斑:麻疹患者口腔黏膜上会出现白色结节,称为Koplik 斑,通常先出现在口腔黏膜的颊侧黏膜上,然后蔓延至口腔其他部位。
二、实验室检查1. 血液检查:麻疹患者的白细胞计数通常在发病初期降低,然后在病程中逐渐恢复正常。
此外,麻疹患者的C-反应蛋白、血小板计数和红细胞沉降率也会升高。
2. 麻疹病毒分离:通过鼻咽拭子或尿液等样本进行病毒分离培养,可以检测到麻疹病毒的存在。
3. 血清学检查:麻疹患者的血清中可检测到麻疹病毒的抗体,包括IgM和IgG。
IgM抗体通常在发病后1-2天开始上升,2周内达到峰值,然后逐渐下降。
IgG抗体在麻疹感染后约1周开始上升,数周内达到峰值,并持续终生。
根据以上临床表现和实验室检查,麻疹的诊断标准可总结如下:1. 临床表现:患者出现高热、咳嗽、流涕、结膜炎等症状,伴有红色斑块和口腔黏膜上的白色结节。
2. 实验室检查:血液检查显示白细胞计数降低,C-反应蛋白、血小板计数和红细胞沉降率升高。
麻疹病毒分离培养或血清学检查可检测到麻疹病毒抗体。
需要注意的是,以上诊断标准是根据临床经验和研究得出的,仍需结合患者的具体情况进行综合判断。
同时,麻疹的早期症状与其他疾病相似,如流感、风疹等,因此需要排除其他可能性,确保准确诊断。
治疗方面,麻疹的主要治疗方法是对症治疗,包括休息、补充水分、控制发热等。
此外,麻疹病毒感染会导致免疫系统的抑制,容易合并细菌感染,因此有时需要使用抗生素治疗。
麻疹病毒(MLs)IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫法)使用说明(96T/48T)[原理]本试剂盒采用亲和素-生物素化麻疹病毒抗原预包被板ELISA 原理,检测人血清/血浆中存在的麻疹病毒IgM 抗体,并配以酶标记抗人IgM单克隆抗体作为标记物。
加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正比。
生物素系统(biotin-avidin system)的稳固级联放大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高。
另外,血清/血浆经预吸收后非特异性因素(如RF因子和变性或聚合的人IgG)的影响被彻底消除,经验证其结果完全等同于capture-ELISA,为本试剂盒之独特点。
[用途]麻疹是是传染性很强的急性呼吸道疾病,其并发症常见为下呼吸道感染、巨细胞间质肺炎及神经系统慢性进行性疾病-亚急性硬化性全脑炎(SSPE)等。
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的麻疹病毒早期IgM型抗体,对早期和原发性感染的诊断具有重要价值。
适应范围:麻疹的早期诊断和筛查。
易感人群和高发地区的监查。
[试剂盒组成]1、生物素化抗原预包被板1块(8X12/4X12)2、阴性对照血清1瓶3、阳性对照血清1瓶4、标本稀释液(含抗干扰因子)1瓶(20 ml/10ml,直接使用)5、酶结合物1瓶(12/5ml,直接使用)6、30X浓缩洗液1瓶(20/10ml,加蒸馏水1:30稀释使用)7、显示剂A、B液各1瓶(5/3ml)8、终止液(2M H2SO4)1瓶(5/3ml)9、说明书1份[操作步骤]将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。
1、样本稀释:用标本稀释液以1:101(5ul—500ul)稀释标本,混匀后置37℃20分钟。
2、加样:小心吸取已稀释待检标本上清液100ul于反应孔中,设阴、阳性对照(各100ul)及空白对照(加100ul标本稀释液)各一孔。
轻拍混匀。
3、37℃温育30分钟。
疑似麻疹病例IgM抗体检测结果分析
苏小宏;单芙香;何建凡
【期刊名称】《中华生物医学工程杂志》
【年(卷),期】2001(007)002
【摘要】目的了解麻疹流行特征,加强麻疹病例监测.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA),对深圳市1998~1999年疑似麻疹病例同时检测麻疹、风疹IgM抗体,进行流行病学分析.结果共检测疑似病例328例, M-IgM阳性率为54.9%,
R-IgM阳性率为9.5%.麻疹发病高峰季节为春夏季.9月龄~6岁以下儿童发病占51.7%, 180例M-IgM抗体阳性病例中,免疫史不详和无免疫史占83.9%,均为流动人口.结论在麻疹监测工作中,应加强流动人口麻疹接种工作,同时加强对风疹的控制.
【总页数】2页(P132-133)
【作者】苏小宏;单芙香;何建凡
【作者单位】广东省深圳市卫生防疫站;广东省深圳市卫生防疫站;广东省深圳市卫生防疫站
【正文语种】中文
【中图分类】R511.1
【相关文献】
1.北京市西城区2014年麻疹疑似病例IgM抗体检测结果分析 [J], 王宵雪;胡三梅;庞晶晶;路燕
2.上海市浦东新区2012年麻疹疑似病例IgM抗体检测结果分析 [J], 叶平
3.2011年天津市南开区麻疹风疹疑似病例IgM抗体检测结果分析 [J], 刘凤;李媛
4.北京地坛医院2008-2016年麻疹疑似病例IgM抗体检测结果分析 [J], 任博;盛琳君;万钢;刘颖;华文浩
5.592例麻疹疑似病例麻疹IgM抗体检测结果分析 [J], 贾文魁;包军安;单宏伟;朱自平;徐海敏
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
ELISA法检测麻疹病毒IgM抗体血清外对照的设置及意义发表时间:2017-01-12T13:34:14.273Z 来源:《心理医生》2016年30期作者:程艳君[导读] 为了严格控制麻疹IgM 抗体ELISA 检测试剂的质量,消除试剂误差产生的检测错误。
(石嘴山市疾病预防控制中心宁夏石嘴山 753000)【摘要】目的:为了严格控制麻疹IgM 抗体ELISA 检测试剂的质量,消除试剂误差产生的检测错误。
方法:根据麻疹IgM 抗体定量测定结果,选择标准曲线线性良好部分血清标本制备外对照血清, 并计算出外对照血清对于海泰公司试剂的参考值范围。
结果:实验测得外对照血清的活性为48.3~60.6Units/ml,对于海泰公司试剂的OD参考值范围是0.631~0.675。
用此外对照血清对海泰公司共4个批号的试剂盒做复核验证,发现海泰公司批号为20151108试剂盒检测结果失控, 而正是此批号试剂对200份血清标本的检测阳性率和符合率明显低于其它试剂盒。
还验证了此外对照血清的有效活性在4℃条件下可至少维持6个月。
结论:对于只有阴/阳性定性指示的ELISA 检测试剂盒, 制备特定OD 值范围的外对照质控血清很有必要。
【关键词】ELISA;麻疹病毒;IgM 抗体;血清外对照【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231(2016)30-0124-02 麻疹是由麻疹病毒引起的一种以发热、呼吸道其他症状和全身斑丘疹为特征的急性病毒性传染病[1],人类是麻疹病毒的自然宿主,麻疹通过呼吸道和直接接触传播。
WHO已把麻疹列为第3类消灭的急性传染病。
我国也提出控制麻疹的根本措施是提高免疫接种率,加强实验室监测工作[2]。
快速准确的实验室诊断对控制麻疹疫情、消除麻疹有着极其重要的意义。
对于麻疹疑似患者实验室一般采用ELISA法检测患者急性期血清IgM 抗体进行诊断[3]。
目前各级疾病预防控制中心的麻疹实验室多数采用珠海海泰生物试剂制药公司生产的两种麻疹病毒IgM 抗体诊断酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂(过夜法和快速法),进行对比和评价用ELISA定性检测麻疹病毒血清IgM抗体时,由于某些试剂盒内提供的阴/阳性对照血清只能定性指示,无OD值参考范围,因此凭借试剂盒内阴/阳性对照血清指示有时会造成检验结果的失控而出现假阴/阳性结果。
麻疹病毒抗体
[项目名称]麻疹病毒抗体
这项化验是判断是否感染了麻疹病毒的一项参考指标。
麻疹病毒的实验室检测是通过抽取静脉血检测体内抗麻疹病毒的IgG和IgM抗体。
[参考值]阴性或IgGAb<1:512
[临床意义]麻疹病毒的IgM抗体可在发病早期出现,10天左右达到高峰,30一60天后消失。
而IgG抗体与lgM抗体同时或较晚出现,6个月内明显下降,以后维持在一定水平并终生存在。
特异性抗体结果判定如下:
1.麻疹病毒的IgG和IgM抗体均为阳性,或者是IgG抗体滴度≥1:512,表明有麻疹病毒近期感染。
2.麻疹病毒的IgG和lgM抗体均为阴性,表明没有受过麻疹病毒感染。
3.麻疹病毒的IgG抗体滴度<1:512,IgM抗体为阴性,说明有过既往感染史。
4.此外,如果麻疹病毒IgG抗体滴度在双份血清中有4倍以上升高,那么无论IgM抗体是否为阳性,都是麻疹病毒近期感染的指标。
麻疹、病毒IgM检测详细操作步骤:将试剂盒取出,放室温平衡30分钟以上。
1.收到样本后,大致用天平配平,离心,用一次性吸管吸出血清,放入罗口离心管中。
.2.将血清样本从1开始编号。
3.将写好编号的血清样品,依次排列于麻疹血清盒中。
4.将相同数量的白色塑料管,排列于麻疹血清盒中的血清样本后。
5.用1000毫升的加样枪调至990微升,10微升的加样枪调至10微升。
200微升的加样枪调至100微升。
6.用990微升的加样枪,加样品稀释液990微升(绿色液体)于白色塑料管中,一份样品一管。
7.需要5+样本数量的包被孔。
将这些预包被孔板放于96孔板架上。
8.加样:加10微升第一份血清样本于白色塑料管中,混均,用100微升的加样枪加100微升混匀液于包被孔第6孔中;加10微升第二份血清样本于白色塑料管中,混均,用100微升的加样枪加100微升混匀液于包被孔第7孔中;依次类推。
9.第1孔留做空白对照,加100微升阳性对照于包被孔第2孔,加100微升阴性对照于包被孔3、4、5孔。
10.在微型振荡器以最低震速,震荡几秒钟。
11.放于水浴箱中37度60 分钟。
(温浴时间,打开洗板机)12.取出96孔板架,放于洗板机上,按2键,找到Run Procedure, 按4键,找到MVIGM.按5键,出现8列,按4键,到96孔板架上的列数。
按5键,洗板开始。
13.洗板结束后,拍干。
除空白孔外加酶标记物各1滴。
放于水浴箱中37度60 分钟。
14.洗板同12步骤。
15.洗板结束后,拍干。
各孔(包括空白对照孔)加显色液A 、B各1滴。
置37度水浴箱30分钟。
16.取出后,立刻每孔(包括空白对照孔)加终止液1滴。
17.在微型振荡器以最低震速,震荡几秒钟。
18.擦干包被孔底的水珠,放于CODA中,进行读板。
19.选择桌面上酶标仪,双击,出现酶标仪界面。
选择reading, 点击OK, 出现对话框,选择Single, 450 nm 点击start. 开始读数.20.读数结束后,填出结果, 将结果选中复制.粘贴于公式中,打印.。
血清麻疹IgM抗体试验酶免法原理利用包被在固相上的抗人IgM-μ链抗体直接捕获待测血清的IgM,然后在经酶标抗体显色进行特异性抗体检测。
标本采集采集前病人准备:受检者应空腹。
标本种类:血清或血浆。
标本要求:采集病人静脉血2ml,室温放置不超过4小时,分离血清备用。
标本储存:最好使用新鲜标本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冷冻4周。
避免标本反复冻融。
标本运输:密封,室温运输。
标本拒收标准:污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。
试剂6.1试剂名称:麻疹病毒抗体酶免试剂盒6.2试剂生产厂家:深圳市安群生物工程有限公司6.3包装规格:96Test/Kit6.4试剂盒组成:包被反应板,样品稀释液,酶标记抗体,阳性对照血清,阴性对照血清,浓缩洗涤液,底物A,底物B,终止液,封口膜,密封袋。
6.5试剂储存条件及有效期:2-8°C避光保存,有效期6个月。
仪器设备仪器名称:自动酶标仪仪器厂家:Rayto仪器型号:RT-2100C操作步骤平衡:将试剂盒各组分取出,平衡至室温(18-25°C),微孔板开封后,余者及时以自封袋封存。
配制洗涤液:1支浓缩洗涤液加380ml(96T)蒸溜水。
标本稀释:待测血清用标本稀释液按1:50(稀释后每孔加样100ul(或每孔加入200ul样本稀释液后再4ul血清样本,充分混合)。
设空白、阳性、阴性各一孔,阴、阳性对照不做稀释直接各加100ul。
温育(一):充分混匀,加上封板膜,置37℃温育30分钟。
洗涤(一):用洗涤液充分洗涤3次,洗涤完扣干(每次应保持30-60秒的浸泡时间)。
加酶:分别在每孔中加入酶标记抗体2滴,轻拍混匀。
温育(二):充分混匀,加上封板膜,置37℃温育30分钟。
洗涤(二):用洗涤液充分洗涤3次,洗涤完扣干(每次应保持30-60秒的浸泡时间)。
8.10每孔加显色剂A及显色剂B各1滴,置37℃温育10分钟。
8.11目测法不终止,比测法每孔加终止液一滴。
卫生部办公厅关于印发《全国麻疹监测方案》的通知文章属性•【制定机关】卫生部(已撤销)•【公布日期】2009.01.14•【文号】卫办疾控发[2009]9号•【施行日期】2009.01.14•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】失效•【主题分类】免疫规划正文卫生部办公厅关于印发《全国麻疹监测方案》的通知(卫办疾控发[2009]9号)各省、自治区、直辖市卫生厅局,新疆生产建设兵团卫生局,中国疾病预防控制中心:为加强麻疹疫情监测,有效预防和控制麻疹疫情的发生,我部组织专家制定了《全国麻疹监测方案》。
现印发给你们,请参照执行。
附件:全国麻疹监测方案二OO九年一月十四日附件:全国麻疹监测方案加强麻疹监测是消除麻疹的主要策略之一,为配合《2006-2012年全国消除麻疹行动计划》(以下简称《行动计划》)的实施,进一步加强麻疹监测工作,制定本方案。
一、监测目的(一)及时发现麻疹病例,采取针对性措施,预防和控制疫情。
(二)了解麻疹流行病学特征,分析人群免疫状况,确定易感人群,加强预测预警。
(三)了解麻疹病毒学特征,追踪病毒来源、传播轨迹。
(四)评价预防控制效果,为适时调整消除麻疹策略措施提供依据。
二、监测病例定义与分类(一)监测病例定义。
麻疹疑似病例定义为:具备发热、出疹,并伴有咳嗽、卡他性鼻炎或结膜炎症状之一者;或传染病责任疫情报告人怀疑为麻疹的病例。
所有麻疹疑似病例均作为监测对象。
(二)监测病例分类。
对麻疹疑似病例主要按照实验室检测和流行病学调查结果进行分类,分类示意图见附件1。
1.实验室诊断病例(1)麻疹疑似病例血标本检测麻疹IgM抗体阳性者。
(2)从麻疹疑似病例的标本中分离到麻疹病毒或检测到麻疹病毒基因者。
2.临床诊断病例(1)麻疹疑似病例无标本,或出疹后3天内采集的血标本检测麻疹/风疹IgM 抗体均为阴性,且无其他原因可以明确解释者。
(2)麻疹疑似病例出疹后4-28天采集的血标本检测麻疹/风疹IgM抗体均为阴性,但与实验室诊断麻疹病例有明确流行病学联系,且无其他明确诊断者。
麻疹igm操作规程麻疹(病毒性麻疹)是由麻疹病毒引起的一种急性传染病,主要通过空气飞沫传播。
IGM抗体是机体刚感染病毒后产生的特异性抗体,可以用来诊断麻疹病毒感染。
下面是麻疹IGM操作规程的详细内容。
一、实验室准备1. 麻疹IGM试剂盒:包括麻疹IGM抗体试剂、酶标试剂、洗涤缓冲液、色素底物、停止液等。
2. 高速离心机、微量移液器、洗板仪、免疫分析仪等仪器设备。
3. 试剂保存条件符合要求,避光、避热。
二、标本采集及处理1. 采集患者血液标本,一般是静脉全血或血浆。
2. 采用无菌技术操作,避免污染。
3. 血样采集后,立即分离血清或血浆并分装保存在-20℃以下的冰箱中。
三、试剂配置1. 将试剂盒中的酶标试剂A和酶标试剂B分别按照说明书中的要求稀释,制成工作液。
2. 将洗涤缓冲液配制成所需体积。
四、操作步骤1. 取出所需数量的微孔板,并加标本。
2. 加样本前,将微孔板孔底清洗3次,每次用洗涤缓冲液充分清洗孔底,并在吸干。
3. 加标本时,每孔加样150μl,须以洗涤缓冲液作空白对照。
4. 加样本后,将盖板盖上,并在37℃恒温箱中孵育1小时。
5. 孵育完后,将盖板去掉,将孔底液全部倒掉,并在洗涤缓冲液中洗涤板底3次,每次充分洗涤。
6. 在每孔中加入150μl稀释过的酶标试剂A,盖上盖板,在37℃恒温箱中孵育30分钟。
7. 孵育完后,将盖板去掉,将孔底液全部倒掉,并在洗涤缓冲液中洗涤板底3次,每次充分洗涤。
8. 在每孔中加入150μl稀释过的酶标试剂B,盖上盖板,在37℃恒温箱中孵育30分钟。
9. 孵育完后,将盖板去掉,将孔底液全部倒掉,并在洗涤缓冲液中洗涤板底3次,每次充分洗涤。
10. 在每孔中加入150μl色素底物,盖上盖板,暗处在室温下反应15-30分钟,必要时用蓝色滤光片遮光。
11. 反应结束后,在每孔中加入50μl停止液,用洗板仪在450nm波长下立即读取吸光度(OD值)。
12. 符合条件的样品进行结果判读和分析。
麻疹是由麻疹病毒引起的一种以发热、呼吸道卡他和遍及全身斑丘疹为特征的急性病毒性传染病。
麻疹通过呼吸道和直接接触传播,多发于5~15岁儿童,在我国35种法定传染病中位居第六位,是危害少年儿童生命健康极其严重的传染病之一。
根据早发现、早诊断、早报告、早隔离、早治疗的原则,开展麻疹血清学检测工作就显得尤为重要,本文就我中心2005年麻疹血清学检测结果分析报告如下。
1 资料与方法1.1 检测对象54例检测标本均由我市所辖十一个旗县、市(区)疾控中心采集。
年龄最小的为7月龄,最大的32岁,5岁以下6例,5~15岁39例,16~35岁9例。
1.2 试剂广东珠海经济特区海泰生物制药有限公司生产的麻疹IgM抗体酶免检测试剂盒(国家麻疹实验室指定试剂)。
1.3 仪器北京普朗新技术有限公司生产的DNM—9602型酶标分析仪和DNX—9602型电脑洗板机。
1.4 方法采用抗体捕捉ELISA法,按试剂盒说明严格操作。
2 结果54例标本中共检出阳性标本36例,阴性18例,阳性检出率为66.7%。
3 讨论通过对54例标本检测,我们看到麻疹的发病年龄多集中在5~15岁之间(39例),占所检标本的7 2.2%。
流行病调查资料显示,阳性标本之间多为同一学校、同班同学(例如丰镇市新城湾乡二道沟小学送检的8例标本),或者相互之间有比较密切的接触史(例如商都县大拉子乡送检的6例标本均为同一个村),结果表明麻疹的发病年龄、流行特征、传播途径与国家对该病监测相符,该病总体上平稳,局部呈暴发,我市2005年发病数较2004年(32例)略有上升。
从检测结果来看,5岁以下,15岁以上也时有发生,说明接种疫苗后发生的抗体随时间的推移而下降,已不能完全抵御病毒的侵袭,仍有可能患病,只不过症状比较轻,并发症较少。
而从未患过麻疹也未接种过疫苗的人仍为易感患者,不论年龄大小(例如3例1岁左右的儿童和1例32岁的成年患者)。
此外,从流行病调查资料看,有些患者的临床症状已变得不十分规律,例如一过性低热轻度卡他及少量皮疹,给临床诊断带来了一定的困难,因此实验室检测就成为一种非常重要的手段。
麻疹病毒IgM 抗体酶联免疫实验原始记录
受理编号:**()检(20 )号第页/共页
检品来源:收样日期:
检品名称:检验日期:
数量:实验编号:
检验目的:麻疹病毒IgM 抗体测定
方法依据:WS 296-2008 麻疹诊断标准
实验记录:
1.实验方法:ELISA法,血清1:100稀释。
2.试剂厂家:,批号:,有效期:,
3.实验仪器:恒温水浴箱:温度37 度,资产编号F0321 ,
酶标仪:资产编号Z1226,洗板机:资产编号Z1227 ,
5.在酶标仪上检测各孔OD值,以空白孔调零,测量波长: nm:
6.实验有效性判定:阴性对照OD值介于0.0-0.15,阳性对照OD值介于0.30-1.8,说明实验成立。
临界值计算:如阴性对照OD值的平均值<0.07,按0.07计算;如阴性对照OD值平均值≥0.07,则按实际值计算。
S/N值=样品OD值/阴性对照OD值平均值;S/N值≥2.1,则判为阳性;S/N值<2.1, 则判为阴性。
本次实验临界值= 。
阳性结果实验编号:,
阴性结果实验编号:,检验人:复核人:
颁布日期:2020年06月28 日实施日期:2020年11月01日。
巨细胞病毒IgM抗体测定操作规程血清抗巨细胞病毒IgM抗体测定操作规程1、检测目的规范巨细胞病毒IgM抗体的检测实验,以保证检测结果的准确性和重复性。
2、检测方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IgM抗体。
3、检测原理采用捕获法原理检测人血清或血浆样品中人类巨细胞病毒IgM抗体(HCMV-IgM),微孔中预包被鼠抗人-IgM(u链),首先加入待检标本的血清或血浆样品后,样品中的IgM抗体都可被捕获,未结合的其他成份(包括特异的IgG抗体)将被洗涤除去;第二步,加入酶标记物,酶标记物是辣根过氧化物酶(HRP)标记的基因重组抗原HCMVrp52-65。
被捕获的IgM中的HCMV-IgM会与辣根过氧化物标记的HCMV重组抗原特异性的结合,洗去其他未结合物,最后用TMB底物显色。
通过酶标仪检测吸光度(A值)从而判定样品中HCMV-IgM抗体的存在与否。
4、实验条件(1)实验室应具有空调、离心机、加样水浴锅,酶标仪等设备。
(2)检验人员应经过操作前培训。
(3)用酶标仪测定。
5、操作程序(1)样本采集。
无抗凝静脉血2ml,当日不做的标本4℃保存,必要时,-20℃冻存。
(2)操作步骤。
参照试剂盒说明书进行操作。
一肌步骤如下:①取出已包被HCMV 抗原的微孔反应条板。
稀释待测血清(血清1ul加稀释液200u1),加至微孔中,每孔100ul。
将强阳性、弱阳性、阴性对照各100ul加至相应孔内。
②37℃温育30分钟;弃去孔内液,每孔加200--300ul洗涤液,共洗5次。
每次弃去孔内液体后均需在滤纸上拍于(下同)。
③每孔加酶标记抗体100ul,37℃,30分钟。
洗板同上。
④加酶底物/色原溶液(OPD/TMB),每孔100ul37℃,15分钟。
⑤加终止液(2mo1/L H2SO4),每孔50ul。
于酶标仪上读取吸光度(A)值。
(3)结果判定:①阴性对照平均A值必须小于0 .2;弱阳性对照平均A值在0 .20~0 .65;弱阳性对照与阴性对照平均A值之比必须大于或等于2。
疑似麻疹病例不同采血时间的IgM抗体检测分析【摘要】目的探讨麻疹患者发病初期的最佳采血时间,提高麻疹IgM抗体检测的准确率。
方法采用ELISA法检测麻疹IgM抗体。
结果出疹第1~3天麻疹IgM抗体的检出率在30.7%~44.7%之间,差异无统计学意义(P>0.05),其合计麻疹IgM抗体检出率为33.6%,与出疹后第4天(51.2%)、第5天(65.7%)、第6天(79.8%)、第7天(82.8%)、第8天(87.1%)的麻疹IgM抗体检出率差异有统计学意义(P<0.01)。
69例疑似麻疹患者第一份血清麻疹IgM抗体检测为阴性,5~28 d内采集第二份血,麻疹IgM抗体阳性检出率为100%。
结论采血时间以患者出疹后4~8 d为宜,若5 d内采集患者第一份血清检测麻疹IgM抗体为阴性,应在1~3周内采集第二份血可提高麻疹IgM抗体检测的准确率。
【关键词】采血时间;麻疹;IgM抗体麻疹IgM抗体检测是早期确诊麻疹最敏感、最具特异性的方法。
但在实际工作中,由于既要考虑到麻疹个案调查的及时性,又要尽可能降低麻疹IgM抗体出现假阴性的概率,所以采血时间往往难以把握。
为观察麻疹患者出疹后不同采血时间所测得的麻疹IgM抗体的差别,正确把握麻疹患者发病初期的最佳采血时间提供科学依据。
我们对送至闵行区疾病预防控制中心的1298例疑似麻疹病例,将其不同时间采血所显示的麻疹IgM抗体进行了比较与分析。
现将结果报告如下:1 材料与方法1.1 资料来源闵行区疾病预防控制中心免疫预防科的个案调查表和微生物检验科的血清学检验报告。
1.2 调查对象闵行区各级医院就诊的并临床诊断为疑似麻疹患者,共计1298例。
1.3 检测方法抽取患者静脉血5 ml,分离血清后于-20℃保存。
利用包被在固相载体上的抗人IgM μ链抗体,捕捉待测血清中的IgM,再用麻疹病毒抗体和已知的酶标麻疹病毒抗体检测血清中的IgM(试剂盒采用珠海经济特区海泰生物制药有限公司生产的麻疹IgM抗体酶免检测试剂盒)。
麻疹IgM抗体检测的室内质量控制方法
朱伟光
【期刊名称】《现代预防医学》
【年(卷),期】2007(34)21
【摘要】[目的]探讨麻疹IgM抗体检测室内质量控制的方法。
[方法]对宿迁市2006年度麻疹抗体检测采用了加入外对照质控血清,应用了即刻法和质控图法两种室内质控方法。
[结果]2006年度室内质量控制检测结果准确可靠。
[结论]根据各实验室自身的实际情况应用有效的室内质量控制方法是保证检测结果准确性的重要保证措施。
【总页数】2页(P4153-4154)
【关键词】麻疹抗体;检测;质量控制
【作者】朱伟光
【作者单位】江苏省宿迁市疾病预防控制中心
【正文语种】中文
【中图分类】R511.1
【相关文献】
1.麻疹IgM抗体两种检测方法的比较 [J], 陈明春
2.健康人群麻疹抗体水平及麻疹疑似病例IgM 抗体检测 [J], 陈凤仙
3.麻疹疑似病例血清麻疹病毒IgM抗体检测结果的分析与报告 [J], 李海涛;孙静静;谷翠梅
4.捕获酶联免疫法检测麻疹病毒IgM抗体实验方法改进 [J], 贺泽刚;楚涛
5.592例麻疹疑似病例麻疹IgM抗体检测结果分析 [J], 贾文魁;包军安;单宏伟;朱自平;徐海敏
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
规范本中心样品(人血清或血浆)中麻疹病毒IgM抗体的测定。
2.适用范围
适用于血清、血浆中的麻疹病毒IgM抗体测定。
3.职责
3.1 检验人员按照本作业指导书进行操作并登记。
3.2 科室负责人负责检验的质量控制和综合管理。
4.操作步骤
4.1本试验由抗人IgM(μ链)包被的微孔板和酶标记风疹病毒抗原及其它试剂
配套组成,以酶联免疫捕获法原理检测人血清或血浆中的抗风疹IgM抗体,适用于风疹病的早期诊断及流行病学调查。
4.2 将试剂盒打开,在室温平衡30分钟。
浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水10
倍稀释。
4.3样品1:100稀释:将样品稀释液1ml加入一洁净小试管内,加10ul待检样
品,充分混匀。
4.4将板条固定于板架上,剩余的板条用不干胶密封并放入密封袋中保存。
每孔
加入稀释后样品100ul。
阳性对照加1孔、阴性对照孔3孔,100ul/孔。
另留一孔不加任何液体为空白对照,置37℃60分钟。
4.5甩净孔中液体,洗板3次,每次停留1分钟后甩净拍干,除空白对照孔外每
孔加酶标记物50ul(1滴),置37℃60分钟。
4.6甩净孔中液体,同上洗板3次,拍干后各孔滴加显色液A、B各50ul(1滴),
置37℃避光30分钟,每孔立即加入终止液50ul(1滴),混匀后用酶标仪450nm读数判定结果
4.7 样本要求:本试验用血清或血浆进行检测,用量为10ul,血清或血浆勿使用染菌、脂血或溶血样品。
按照标准方法收集血清,室温保存样品不要超过8小时,若在8小时以后进行,需将样品保存在2~10℃,如保存超过1周则保存在-20℃
4.8 结果判定:酶标仪设定波长450nm,先用空白调零,然后测定各孔A值,如
阴性对照A值平均值﹤0.07,按0.07计算;如阴性对照A值平均值≥0.07,则按实际值计算。
计算S/N值,S/N值=样品A值÷阴性对照A值平均值,S/N≥2.1,则判为阳性。
S/N﹤2.1则判为阴性。
4.9 注意事项
4.9.1操作前必须先将试剂盒平衡至室温
4.9.3凡染菌、溶血或高血脂的待检血清可能引起错误结果,应重新采样复试。
4.9.4临床医生应结合病史、体检等全面考虑诊断。
判断临床意义应动态观察,
即对阳性和可疑者要求1~2周后进行复查,观察抗体水平的变化
4.9.5任何临床样本都应作为具有传染性样品对待。
5.相关支持性文件
5.1 珠海海泰生物制药有限公司生产的麻疹病毒IgM抗体诊断试剂盒使用说明书。
5.2 《麻疹诊断标准》WS296-2008
6.相关记录表式
6.1 《疾病控制类样品收样及结果登记表》(YZJK/JL-01-073)
6.2 《临床检验废弃物处理记录》(YZJK/JL-01-049)
6.3 《扬中市疾病预防控制中心检验单》(YZJK/JL-01-074)
编制:审核:批准:日期:。