上皮组织染色液
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黏液HID-AB染色液使用说明书货号:G2070规格:3×25ml/3×50ml保存:4℃,避光保存,有效期6个月。
产品内容:名称3×25ml3×50ml Storage试剂(A)HID Solution A1:HID溶液A25ml50ml RT避光A2:HID溶液B 1.5ml3ml RT避光临用前,按A1:A2=50:3混合即为HID Solution,不宜提前配制。
试剂(B):Alcian染色液25ml50ml4℃避光试剂(C):核固红染色液25ml50ml RT避光产品说明:黏液HID-AB染色原理在于高铁二胺盐中的二铵盐与硫酸化酸性黏液物质结合,形成复合物而被显色。
在pH值大大低于2.5时,组织内的硫酸根电离,带有一个负电荷,与阿利新蓝中的阳离子形成盐键,使带有硫酸根的组织(如硫酸黏液物质)染色,硫酸化酸性黏液物质等形成棕紫色至棕黑色。
在黏液HID-AB染色液主要用于鉴别硫酸化酸性黏液物质和唾液酸性粘液物质,小肠上皮产生氮乙酰化唾液酸性黏液物质,大肠上皮产生氧乙酰化唾液酸性黏液物质和硫酸化酸性黏液物质。
该法可配合AB-PAS染色,对肠上皮化生的类型进行鉴定,对转移性肿瘤发生黏液的类型进行鉴定。
操作步骤(仅供参考):1、切片脱蜡至蒸馏水。
2、入配制好的HID Solution浸泡12-24h(20~25℃)。
3、流水冲洗5min。
4、入Alcian染色液染色10-20min。
5、稍水洗。
6、入核固红染色液复染10min。
7、流水冲洗1min。
8、梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片。
染色结果:硫酸化酸性黏液物质(如硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)棕紫色至棕黑色羧基化蛋白酸性黏液物质(如蛋白多糖和透明质酸)蓝色细胞核红色注意事项:1、固定液采用10%中性福尔马林。
2、HID Solution不宜提前配制。
用后可存储于4℃,仍可用1~2次,但特异性不佳。
3、HID Solution对人体有一定损害,请小心操作,避免接触人体皮肤。
第一节结缔组织和肌纤维染色Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)用途:VG法用于区分胶原纤维和肌纤维。
原理:酸性复红和苦味酸对这两种纤维都具有较强的亲合力,结果胶原纤维被酸性复红染成红色,肌肉被苦味酸染成黄色。
此方法是一种优良的传统方法。
固定:10%福尔马林切片:4-6微米试剂:Weigert铁苏木精液:A液:苏木精1g,无水酒精100 ml。
一般配制后需要数周或数月自然氧化,成熟后使用。
B液:29%三氯化铁水溶液4 ml,蒸馏水95 ml,盐酸1 ml。
两液分别配制,临用时A、B液等量混合,过滤后使用。
24h后失去染色能力。
Van Gieson液:1%酸性复红水溶液 10 ml苦味酸饱和水溶液 90 ml临用时1:9混合过虑后使用。
Van Gieson苦味酸酸性复红法(VG法)步骤:1.石蜡切片脱蜡至水。
2. Weigert苏木精液5-10 min。
3.充分水洗。
4. Van Gieson液1-5 min。
5. 95%酒精迅速分化数秒。
6.无水酒精脱水、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果:胶原纤维呈红色、肌肉、神经胶质、胞浆、红血球呈黄色、细胞核呈黑色或棕蓝色。
体会与说明:由于酸性复红退色较快,染色结果不能长期保存,一般只能保存3~6个月。
二 Masson三色法试剂:Regaud 氏苏木精:苏木精1g,95%酒精10ml,甘油10ml,蒸馏水80ml。
将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。
Masson丽春红酸性复红液:丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液:冰醋酸0.2 ml,蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml。
苯胺蓝水溶液:苯胺蓝2g,蒸馏水98 ml,冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml。
Masson三色法步骤1.石蜡切片脱蜡至水。
2.铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。
一、惯例染色技能(HE 染色)之阳早格格创做苏木素-伊黑染色简称HE 染色,是最时常使用的染色要领,苏木素是一种碱性染料,可将细胞核战细胞内核糖体染成蓝紫色,伊黑是一种酸性染料,能将细胞量染成黑色或者浓黑色.HE 染色不妨隐现肾小球的细胞删死、炎细胞浸润.还能很佳的隐现肾小管上皮细胞的益伤战肾间量火肿情况.(一)需要试剂①苏木素染液;② 1% 盐酸乙醇液;③氨火;④ 1% 伊黑液.(两)简直染色步调1.切片惯例脱蜡进火.2.苏木素染细胞核1 ~2 min,火洗.3.进1% 盐酸乙醇瓦解数秒,火洗.4.氨火返蓝数秒.5.流火浑洗,镜下瞅察细胞核成蓝色.6.1% 伊黑染数秒,火洗.7.梯度乙醇脱火,两甲苯透明,树胶启片.染色截止:胞核呈蓝色,胞浆呈黑色,黑细胞呈橘黑色,其余身分呈深浅分歧黑色.(三)注意事项1.构造切片的脱蜡步调应实足,可则构造无法着色,做用瞅察.2.伊黑染色的时间需庄重统造.过少胞浆染色黑色过深.3.染色后的构造切片要将构造四面的传染物痕迹揩掉.两、特殊染色技能(一)过碘酸- 希妇氏染色(PAS 染色)PAS 染色不妨隐现肾小球内的细胞删死、浸润战系膜基量等,并能很佳天隐现基底膜,是隐现糖本战糖蛋黑的基础染色.1.需要试剂① 1% 过碘酸;②schiff氏液染;③苏木素染液;④氨火.(1)切片惯例脱蜡进火.(2)进1% 过碘酸氧化10 ~15 min,火洗.(3)进schiff氏液染10 ~30 min,火洗.(4)苏木素染细胞核1 ~2 min,火洗.(5)进1% 盐酸乙醇瓦解数秒,火洗.(6)氨火返蓝数秒.(7)流火浑洗,镜下瞅察细胞核成蓝色,基底膜染成粉黑色.(8)梯度乙醇脱火、两甲苯透明、树胶启片.3.染色截止PAS 阳性物量(多糖战糖本)呈黑色,核呈蓝色.(1)构造切片的脱蜡步调应实足,可则构造无法着色.(2)Schiff 氏液染色的时间需庄重统造.时间过少标本基底膜着色过深,时间过短标本基底膜着色浓.(3)进1% 盐酸乙醇瓦解时间要短,时间少简单使标本退色.(4)染色后的构造切片要将构造四面的传染物痕迹揩掉.(两)六胺银- 马紧染色(PAM-Masson 染色)PAM-Masson 染色能更浑晰天隐现基底膜、免疫复合物战胶本纤维,免疫复合物的定位更为透彻.① 1% 过碘酸;②六胺银液;③苏木素染液;④氨火;⑤Masson 液;⑥ 1% 明绿液.(1)切片惯例脱蜡进火.(2)进1% 过碘酸氧化10 ~15 min,火洗5 min.(3)进六胺银液72℃染30 ~50 min,以隐微镜下睹基底膜呈乌色即可.(4)加2% 氯化金数滴于构造,5% 硫代硫酸钠洗.(5)苏木素染细胞核1 ~2 min,1% 盐酸乙醇瓦解,氨火返蓝.(6)进Masson 液约10 min,1% 醋酸洗.(7)进1% 明绿5 ~8 min,1% 醋酸洗.(8)梯度乙醇脱火、两甲苯透明、树胶启片.3.染色截止基底膜及系膜基量乌色,免疫复合物黑色.(1)构造切片的脱蜡步调应实足,可则构造无法着色.(2)染色时间取室温战切片薄度有闭,室温矮、切片薄需染色时间少,反则需染色时间短.进六胺银液染色的时间需庄重统造.时间过少基底膜着色过深,时间过短基底膜着色浓.(3)2% 氯化金瓦解时间要短,时间少简单使银染退色.(4)染色后的构造切片要将构造四面的传染物痕迹揩掉.(三)马紧染色(Masson 染色)Masson 染色能隐现各部位的免疫复合物,肾小球软化战肾间量纤维化程度.1.需要试剂①苏木素染液;②氨火;③ Masson 液;④ 1% 明绿液.(1)切片惯例脱蜡进火.(2)媒染剂(10% 沉铬酸钾、10% 三氯醋酸等量混同)染10 ~30 min,火洗.(3)苏木素染细胞核1 ~2 min,火洗.(4)进1% 盐酸乙醇瓦解数秒,火洗,氨火返蓝数秒,火洗.(5)进Masson 液约10 min,火洗,1% 醋酸洗.(6)进2.5% 磷钨酸约30 s,火洗,1% 醋酸洗.(7)进2% 橘黄G 约2 min,火洗,1% 醋酸洗.(8)进1% 明绿5 ~8 min,1% 醋酸洗.(9)进100% 乙醇脱火、两甲苯透明、树胶启片.3.染色截止细胞核黑色,胶本纤维绿色,免疫复合物黑色.(1)构造切片的脱蜡步调应实足,可则构造无法着色.(2)进Masson 液染色的时间需庄重统造.时间过少着色过深,时间过短着色浓.(3)进1% 明绿染色时间需要镜下统造,时间少简单覆盖Masson 液黑色.(4)染色后的构造切片要将构造四面的传染物痕迹揩掉.(四)刚刚果黑染色正在肾净病理染色中,刚刚果黑染色不妨将淀粉样物量染成砖黑色,是诊疗淀粉样变肾病的时常使用染色要领之一.1.需要试剂①下锰酸钾—硫酸液;②苏木素染液;③氨火;④碱性刚刚果黑液.2.简直染色步调(1)切片惯例脱蜡进火.(2)下锰酸钾- 硫酸混同处理3 min,火洗.(3)5% 草酸处理3 min,火洗.(4)苏木素染核2 min,火洗,蓝化.(5)碱性刚刚果黑液染10 ~30 min.(6)进100% 乙醇脱火、两甲苯透明、树胶启片.3.染色截止细胞核蓝色,淀粉样物量呈砖黑色(图3-12). 4.注意事项(1)构造切片的脱蜡步调应实足,可则构造无法着色.(2)碱性刚刚果黑液染色时间该当镜下统造,染色液现配现用着色佳.(4)染色后的构造切片要将构造四面的传染物痕迹揩掉.。
上皮组织实验小结实验一、上皮组织一、实验目的:⒈了解组织学实验目的,内容和实习规则。
⒉通过复习显微镜的构造和使用规则,进一步正确掌握显微镜的使用。
⒊参观组织切片的制作, 了解一般石蜡切片制作过程, 以及苏木素—伊红(HE) 染色法的过程。
4. 通过看电视录像掌握上皮组织的分类,各类上皮的特点及分布。
在此基础上总结出上皮组织的一般特征;熟悉上皮组织的特殊结构。
二、实验内容:(一)显微镜的构造及使用规则1.显微镜的构造2.显微镜的使用规则:(1)拿显微镜时,必须一手握住镜臂,另一只手托住镜座,避免脱落。
(2)使用前的检查和准备,用前必须检查零件有无缺损,粗细螺旋是否松紧适宜,镜头有无污物,推进器是否灵活,发现问题及时报告,以免影响学习。
(3)对光; 将显微镜放置座位左侧,打开光圈,上升聚光器,转动转换器使低倍(10×)接物镜正对下方。
从侧方目视,调粗螺旋,上升载物台使其与物镜相距约0.5cm,然后移左眼到接目镜(双眼自然睁开),使光线反射入聚光器,达整个视野最明亮。
(4)放置标本低倍镜观察:认出切片正反面,将正面(有盖玻片的一面)朝上放于载物台上用片夹固定好,使用推进器使有组织的部分对准接物镜中心。
左眼回到接目镜,调粗螺旋使载物台下降,动作缓慢,仔细观察直至视野中出现清晰物像为止。
利用推进器前后左右推动标本以全面观察组织器官的一般结构。
(5)转换高倍镜(或油镜):对某个需详细观察其结构的部分须在低倍镜下找到并调清晰后,移至视野中心,转换高倍镜头,调节细螺旋至清晰物象(切记禁用粗螺旋)。
需用油镜观察时,必须在低、高倍镜调清楚后,将高倍物镜转离,加一滴镜油于玻片上,再将油镜头转正,细心地调细螺旋至物象清晰即可。
(6)用完后处理:转动转换器,取走切片(用油镜后,必须用二甲苯擦净镜头及切片),(二)组织切片的制作为了在显微镜下能够看到组织的微细结构,必须把组织切成很薄的薄片,并染色,为此,须将组织器官进行以下处理:1、取材固定,将新鲜动物或尸体的组织器官切下一小块,通常置于10%福尔马林液中固定,以保持原来的结构,一般固定24~40小时。
酶组织化学染色诊断使用方法及判读指导
使用方法
1.先使用小棉签,伸入宫颈管级棉签部分进入旋转1--2圈不宜过多,预防出血;拉出小棉签蘸取上皮组织染色液,浸泡至饱和(2秒左右)立即观察棉签颜色。
2.再使用大棉签,在宫颈口旋转2--3圈,按压5秒取出,蘸取上皮组织染色液,浸泡至饱和(约3秒)立即观察棉签颜色变化。
判读方法
1、棉签未显示色泽差异,或出现淡黄色,提示上皮组织正常
2、棉签显示颜色均一,浅蓝色或浅褐色或浅紫色(每个人对颜色的描述有差异)颜色均一怀疑炎症出现蓝色或绿色色班怀疑炎症
3、底色基础上出现明显色差的斑块状条纹状小圆点状针尖状的黑色或黑褐色色斑怀疑癌前病变需进一步三阶梯检测(阴道镜病例切片)。
使用说明书【产品名称】染色液【产品型号】瑞氏-姬姆萨染色液(Wright Giemsa Stain)【产品规格】瑞氏-姬姆萨染色液中每种染液单瓶(桶)包装规格为:20ml、250ml、5000ml,整组染液包装规格为:6×20ml、3×250ml、4×250ml。
【预期用途】主要用于血细胞涂片、骨髓涂片、阴道分泌物(妇科白带)涂片、脱落细胞涂片染色。
【检验原理】瑞氏-姬姆萨染色液是利用Romanowsky Stain技术原理改良而成的。
细胞的着色过程是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,此过程既有物理吸附作用,又有化学亲和作用。
各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同,对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料(曙红)和碱性染料(亚甲蓝)的亲和力也不一样。
因此,标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后,相应各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态特征的目的。
【主要组成成份】试剂组成主要成份瑞氏-姬姆萨A液瑞氏染料、姬姆萨染料瑞氏-姬姆萨B液磷酸盐【储存条件及有效期】有效期:原包装未开封染色液的有效期为24个月,在有效期内的已开封染色液应在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
储存条件:本试剂盒应贮存在相对湿度不大于80%,无腐蚀性气体和通风良好的5℃~30℃室温环境。
【样本要求】1、血细胞涂片染色:要求新鲜全血或EDTA(2K)抗凝血。
2、阴道分泌物(妇科白带)涂片染色:新鲜标本离开人体涂片后,需尽快以火焰或酒精固定,以避免细胞变形。
3、骨髓涂片染色:涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,防止细胞皱缩变形或因空气潮湿而溶血,绝对不能用高温或火烤。
4、脱落细胞涂片染色:采取检体并涂片,待检涂片固定可采用自然干燥法或湿片固定液固定法(具体操作可根据不同检体及所采用的固定液所对应的规范操作要求进行)。
一般情况下若采用湿片固定法,标本浸泡时间稍长些,效果会更佳。
上皮组织染色液技术要求皮组织染色液技术是一种用于染色皮肤组织样本的方法,它能够使细胞和组织结构清晰可见。
本文将介绍皮组织染色液技术的要求和步骤。
一、选择合适的染色液皮组织染色液的选择是关键。
根据需要染色的目标结构和染色方法的要求,选择合适的染色液。
常用的染色液有伊红染色液、酸性伊红染色液、苏木精染色液等。
不同的染色液对不同的组织结构有不同的染色效果,因此选择合适的染色液对于获取高质量的染色结果至关重要。
二、调整染色液的浓度和pH值染色液的浓度和pH值也是影响染色效果的重要因素。
一般来说,染色液的浓度过高会导致染色过度,浓度过低则会导致染色不均匀。
因此,在使用染色液之前,需要进行浓度的调整。
此外,pH值的调整也十分重要,不同的染色方法对pH值的要求不同,需要根据具体的染色方法进行调整。
三、适当延长染色时间染色时间的长短也会影响染色效果。
如果染色时间太短,组织结构可能没有被完全染色,导致染色结果不清晰;而染色时间过长,则可能导致组织结构过度染色,影响观察结果的准确性。
因此,在进行染色时,需要根据具体情况适当延长或缩短染色时间,以获得最佳的染色效果。
四、注意染色液的温度染色液的温度也会影响染色效果。
一般来说,温度过高会导致染色液的挥发,使染色结果不均匀;温度过低则会影响染色液的渗透性。
因此,在进行染色时,需要注意控制染色液的温度,一般室温即可。
五、严格控制染色液的接触时间染色液的接触时间也是影响染色效果的重要因素。
接触时间过短会导致染色液不能充分渗透到组织结构中,影响染色效果;接触时间过长则会导致过度染色。
因此,在进行染色时,需要严格控制染色液的接触时间,确保染色液能够充分渗透到组织结构中,同时避免过度染色。
六、注意染色液的保存和使用染色液的保存和使用也需要注意。
染色液一般需要保存在阴凉、干燥的地方,避免阳光直射和高温。
在使用染色液时,需要注意避免染色液的污染,可以使用无菌技术进行操作,以确保染色液的纯净度和有效性。
FRD上皮组织特殊染色液在宫颈病变筛查中的应用黄彩平;李日红;邓惠宜;陈光元;谢家滨;黄平【摘要】Objective To explore the clinical value of the folate receptor-mediated tumor diagnosis (FRD) for the special staining of the epithelial tissue of the cervical. Methods One hundred patients with screening of cervical le-sions, who admitted to Department of Obstetrics and Gynecology of Songgang People's Hospital of Baoan District of Shenzhen from May 2014 to November 2015, were selected as research objects. FRD cervical special staining detection and liquid based cytology test (TCT) detection were performed at the same time. Colposcopy and cervical biopsy was carried out at any abnormality, and the detection results were compared with pathological results. Results Compared with the pathologic diagnosis, the sensitivity, specificity, positive predictive rate, negative predictive rate, the rate of mis-diagnosis and missed diagnosis rate were respectively 80.72%, 84.21%, 75.00%, 90.14%, 26.88%, 20.00% of FRD de-tection, and 83.12%, 83.12%, 73.47%, 87.67%, 25.79%, 19.28%for TCT. There was no significant difference between two detection methods in these aspects (P>0.05). Conclusion FRD epithelial tissue special staining solution and TCT in cervical disease screening have almost the same clinical significance. However, FRD epithelial tissue special staining solution detection has the advantages of simple operation, comprehensive diagnosis, low cost and fast results etc., which is worth for clinical promotion.%目的:探讨叶酸受体介导的宫颈特殊染色法(FRD)上皮组织特殊染色液在宫颈病变检查中的临床价值。
各种组织染色方法大全主要内容:结缔组织多色染色法胶原纤维染色法网状纤维染色法弹力纤维染色法第一节结缔组织多色染色法一、Mallory三色染色法1. 试剂配制(1)重铬酸钾液重铬酸钾2.5g,醋酸5ml,蒸馏水95ml (2)苯胺蓝桔黄G液苯胺蓝0.5g,桔黄G2g,磷钨酸1g,蒸馏水100ml(3)酸性复红液酸性复红0.5g,蒸馏水100ml2.染色步骤(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(2)重铬酸钾液10min。
(3)蒸馏水冲洗2min,蒸馏水2次。
(4)酸性复红液2min,蒸馏稍洗。
(5)苯胺蓝液20min,95%乙醇快速分化。
(6)直接用无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果胶原和网状纤维呈蓝色,软骨、粘液、淀粉样变物质呈淡蓝色,神经胶质纤维、肌纤维和酸性颗粒呈红色,髓鞘和红色呈桔红色。
4.注意事项(1)酸性复红液易溶解于水,肉眼观察切片上保留一定的红色。
(2)苯胺蓝液染色后,用95%乙醇分化时,须用显微镜观察掌握。
(3)对陈旧的固定标本,其染色效果较差,可增加染色时间。
(4)另张切片,可同时作胶原纤维对照染色而进行鉴别组织成分。
二、Masson三色染色法1.试剂配制(1)Masson复合染色液酸性复红1g,丽春红2g,桔黄G2g,0.25%醋酸300ml。
(2)亮绿染色液高绿SF0.1g,0.2%醋酸100ml。
2.染色步骤中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(1)Masson复合染色液5min。
(2)0.2%醋酸水溶液稍洗。
(3)5%磷钨酸5-10min。
(4)0.2%醋酸水溶液浸洗2次。
(5)亮绿染色液5min,0.2%醋酸水洗2次。
(6)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
3.结果胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈桔红色。
4.注意事项(1)Masson复合染色液,经磷钨酸分化时须用显微镜控制肌纤维清晰为止。
(2)亮绿染料可用苯胺蓝替换,可用来作为对比观察染色的效果。